FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA

Informe n°4:
TÉCNICAS PARA LA EVALUACIÓN SEMINAL

CURSO : Teriogeniología

PROFESOR : MV. Nathalie Zirena Arana

ALUMNOS : Ascencio Claro, Cristina Ximena

Días Garay, Cristian
Dreyfus Angulo, Alex Daniel
Garcia Ramos, Renato Santiago
Zapana Adriano, Paola Madeleyne

HORARIO : JUEVES 8:30 – 11:50pm

LIMA – PERÚ

2018
 CUESTIONARIO

1. Complete el cuadro.
Volumen
del
Concentración del
eyaculado
eyaculado (109/ml) Bibliografía
(ml)
(promedio y rango)
(promedio
y rango)
Aspectos básicos de la reproducción: mamíferos
TORO 5 (1-12) 1.2 (0.5 – 2.5) de interés zootécnico. 2016. Santolaria y Pérez.
2da Ed. España.
web.uchile.cl/vignette
/monografiasveterinaria
/monografiasveterinaria.uchile.cl/
0,8 y 1,2 1,5 x 109
CARNERO CDA/mon_vet_simple/
mL espermatozoides/mL
0,1420,SCID%253D18373%
2526ISID%253D452%
2526PRT%253D18371,00.html
https://www.researchgate.net/
publication/
26425408_Caracteristicas
227; 4,791 x 106 ±
MACHO 378; 0,859 _seminales_del_macho_cabrio
1,694
CABRÍO ± 0,337 ml _Serrano_Transmontano_Semen
espermatozóides/ml)
_characteristics_of_the_Serrano
_Transmontano_buck

http://mundo-pecuario.com/tema170
150 - 200
VERRACO 200 - 300 /copula_animales/eyaculado_animales-897.html
ml
http://mundo-pecuario.com/tema170
40 - 100
CABALLO 200 - 500 /copula_animales/eyaculado_animales-897.html
ml
http://www.vetpunta.com/spain/equipo
0,04 y
GATO 1-1,5•109 /personal/faustoandres/articulos/fisiopat_rep.shtml
0,08 ml
http://mundo-pecuario.com/tema170/
PERRO 3 - 30 ml 200 - 600 copula_animales/eyaculado_animales-897.html

CUY
MACHO
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_
CONEJO 1.19 mL 773.63X106 arttext&pid=S0253-570X2008000100007
2. Complete el cuadro
Lugar de
Lugar de
deposición de
deposición
semen con Bibliografía
del semen en
Inseminación
monta natural
Artificial
Extremo
Reproducción e inseminación
craneal de la
en animales. 2000. Hafez y
TORO vagina y Cuerpo uterino
Hafez. 7ma edición. McGraw-
entrada del
Hill Interamericana. México.
cuello uterino
Reproducción e inseminación
Fondo de en animales. 2000. Hafez y
CARNERO Cuello uterino
vagina Hafez. 7ma edición. McGraw-
Hill Interamericana. México.
Reproducción e inseminación
en animales. 2000. Hafez y
MACHO Fondo de
Cuello uterino Hafez. 7ma edición. McGraw-
CABRÍO vagina
Hill Interamericana. México.

https://www.3tres3.com
Cuello uterino
/articulos/monta-
VERRACO y cuerpo de Cuerpo uterino
natural_1733/
utero

Reproducción e inseminación
orificio cervical
en animales. 2000. Hafez y
externo de la Cuerpo uterino
CABALLO Hafez. 7ma edición. McGraw-
yegua y utero
Hill Interamericana. México.
http://www.todosobremigato
orificio cervical .com
GATO externo de la Cuerpo uterino /2013/06/la-reproduccion-en-
yegua y utero los-gatos-fisiologia.html

orificio cervical https://www.dogking.es/blog

PERRO externo de la Cuerpo uterino /articulo/cmo-es-la-monta-de-
yegua y utero nuestros-perros
orificio cervical http://www.fao.org/docrep
CUY
externo de la Cuerpo uterino /w6562s/w6562s02.htm
MACHO
yegua y utero
orificio cervical http://alojamientos.us.es
CONEJO externo de la Cuerpo uterino /gprodanim/PCA/cubricion.pdf
yegua y utero
3. Aparte del conteo de espermatozoides con la cámara de Neubauer,
¿qué equipos nos pueden ayudar a hacerlo? ¿Cómo lo hacen
(fundamento)?
No solo es el uso de cámaras hemocitómetro de 100 μm de profundidad para
conteo de espermatozoides también hay otras cámara que pueden ser
utilizadas, como la cámara Makler, cámaras desechables por ejemplo Cell Vu,
pero tendrán diferentes volúmenes, profundidad y patrones de rejilla, por lo que
requerirán diferentes factores para el cálculo.
La cámara de CELL – VU SLIDE
 Esta cámara permite el conteo de espermatozoides en dos áreas
separadas, incluye dos cubreobjetos con grilla.
 No posee cubreobjetos y se debe usar con el DRM 610 para uso con
sistemas CASA.
 Cada cámara permite crear un espacio para un volumen adecuado de
semen no diluido. La profundidad de la cámara es de 20 μm lo que
permite una superficie ideal para el conteo.
 Una vez usada se descarta.
 Los productos Cell-VU son ideales para el laboratorio de avanzada que
prefiere ahorrar tiempo ganando calidad.
Se realiza el conteo en 10 cuadros bajo microscopio óptico de luz con el
objetivo de 40X de aumento; el resultado se divide por 2 y luego se multiplicó
por los factores de las diluciones iniciales con el diluyente Talp-Hepes y la
formalina al 10%. El resultado se expresa en millones de espermatozoides por
microlitro (µL).

La cámara de recuento Makler Sefi

Es un dispositivo simple de usar para el recuento rápido y preciso de
espermatozoides, la motilidad y la evaluación de la morfología, de la muestra
diluida. Cuando el análisis de espermatozoide está completo, mantenga el
agarre y deslice la Cámara a cabo. Deslice la Cámara de nuevo en la
empuñadura de un nuevo análisis de esperma.
Conteo de espermatozoides.
Si los espermatozoides son demasiado densos y colores vivos, deben ser
inmovilizados en primer lugar. Esto se lleva a cabo fácilmente mediante la
transferencia de una parte de la muestra en otro tubo de ensayo. El tubo de
ensayo se inserta en el agua caliente a 50°C- 60°C, durante unos 5 minutos.
Una gota bien mezclada del espécimen precalentado se coloca en la cámara y
se cubre con la cubierta de vidrio. Las cabezas de los espermatozoides dentro
de los cuadrados de la cuadrícula se cuentan en la misma celda, igual como
se cuenta la sangre en el hemocitómetro.
En el caso de que el número de espermatozoides es sustancial, contar su
número en una franja de 10 plazas. Este número representa su concentración
en millones por ml. Repita este conteo en otra tira o dos, para determinar el
promedio. Alternativamente u opcionalmente, se recomienda que el recuento
debe hacerse a partir de 2 o 3 otras gotas de la muestra para aumentar la
fiabilidad de determinación de recuento. En el caso de la muestra
oligospérmicos, se sugiere contar con esperma en todo el área de la
cuadrícula. Cinco ceros se añaden entonces al número contado y el resultado
es la concentración en millones por m

Después de que el esperma se coloca sobre la mesa, mueva la platina del

microscopio y localizar la rejilla en el centro del área de visualización. A
continuación, ajuste la Cámara para que las líneas de la cuadrícula aparecerá
en la posición vertical y horizontal.
Durante esta búsqueda usted tendrá la oportunidad de observar las siguientes:
a) ¿Los espermatozoides son distribuidos uniformemente? Si no es así, la
muestra no fue lo suficientemente bien mezclado.
b) ¿Están todos los espermatozoides en un plano focal sin confusión? Si no es
así, quizás las superficies no estaban limpias y las partículas grandes han
intervenido entre las dos superficies de la cámara en cualquier caso, repita este
procedimiento breve desde el principio.
4. Describa 2 técnicas para la evaluación seminal aparte de las que se
vieron en clase (motilidad, vitalidad, morfología)
Evaluación macroscópica
Volumen: para su medición se utilizan recipientes graduados, en los cuales es
depositado el semen desde el momento de su extracción, y dependiendo de la
especie será el tamaño del recipiente.
Aspecto: se observa si la mezcla seminal es homogénea o si contiene
agregados que forman grumos, lo último sería indicativo de aglutinación
espermática o posible contaminación de la muestra, ya sea con células
inflamatorias o que el recipiente colector estuviera sucio.
Color: normalmente se espera que sea dentro del tono del blanco, entre más
concentrada está una muestra seminal el color se observa más opaco,
acercándose a colores cremosos, mientras que por el contrario, entre más claro
se observe un eyaculado es indicativo de una pobre concentración
espermática. El observar colores atípicos como el rojo o rosáceo es indicativo
de que existe contaminación con células sanguíneas, probablemente debidas a
alguna lesión en el tracto reproductor del macho. Mientras que colores
amarillentos o verdosos son indicativos de algún tipo de infección bacteriana a
lo largo del tracto genital. El color amarillento claro, que además dé la
impresión de que el eyaculado está diluido, es indicativo de contaminación por
orina.
PH: Cuando se sospecha de que exista algún problema de tipo infeccioso, el
cual está afectando la calidad seminal, se realiza la medición del pH de la
muestra, para lo cual se utilizan tiras reactivas en las que se colocan una gota
de semen y se observa el cambio de color de la tira.
Viscosidad: en algunas especies se observa la viscosidad al colocar un poco
de la muestra seminal entre los dedos índice y pulgar, lo cual indicaría la
cantidad de componentes seminales contenidos en el eyaculado.

Evaluación Microscópica
Motilidad: Dependiendo de cada especie se observa el tipo de movimiento
masal del eyaculado. Se observa la muestra bajo el cubreobjetos para
determinar el tipo de movimiento, es decir, si tienen un movimiento progresivo o
hacia delante, en línea recta o si solo es vibratorio y no les permite un
desplazamiento frontal o si el tipo de movimiento es giratorio.
Viabilidad: Se analizan las células clasificándolas como vivas o muertas
dependiendo si se observan teñidas o no con el colorante eosina-negrosina
previamente aplicado.
Concentración: Se determina contando la cantidad de espermatozoides con
ayuda de la cámara de Neubauer.
Morfoanomalías: utilizando la misma muestra colocada en la cámara de
Neubauer se observa la estructura espermática y se clasifican como normales
cuando la cabeza y flagelo son regulares, como anormales los que presentan
alguna malformación.

5. Explique en qué consiste el sistema CASA para la evaluación seminal

El sistema CASA (Computerized Assisted Sperm Analysis) es una técnica
analítica para obtener un valor preciso y objetivo de la motilidad espermática y
de la calidad del movimiento de los espermatozoides presentes en la muestra,
La incorporación de estos métodos informáticos atenúa en gran parte el factor
subjetivo del análisis seminal, y garantiza una mejor correlación con la
capacidad fecundante del espermatozoide.
Este sistema ha provisto de interesantes resultados sobre los porcentajes
medios de motilidad y las diferentes subpoblaciones de espermatozoides que
coexisten en una misma muestra. Esta técnica es posible utilizarla tanto en
semen fresco como en el congelado o refrigerado,
Valoración de la motilidad espermática mediante el sistema informatizado
casa
El análisis computarizado de la motilidad fue propuesto por primera vez por
Dott y Foster (1979). Desde que se introdujo en el mercado al principio de los
años 80, originalmente para la evaluación del semen humano, este tipo de
análisis se ha ido perfeccionando y modernizando, a la vez que fue haciéndose
más accesible y; por consiguiente, comenzó a utilizarse en el campo de la
ciencia animal, especialmente en centros de inseminación e investigación.
Valoración seminal
El análisis se hace al capturar las imágenes de espermatozoides en
movimiento, previamente diluidos en un medio adecuado y en el microscopio a
100-200 aumentos. Tras la captura, la información es guardada hasta su
análisis. Una vez realizado el análisis, la información obtenida es transferida a
un procesador matemático que fragmenta la motilidad espermática en diversos
descriptores de la motilidad individual que caracterizan la linealidad, la
angularidad del movimiento espermático y el desplazamiento de la cabeza del
espermatozoide.
De manera general, estos sistemas constan de tres componentes principales:
 un microscopio con contraste de fase conectado a una pletina
atemperada que permite mantener las muestras a 37°C,
 una cámara de vídeo de alta resolución conectada a una pantalla de
televisión
 un software de análisis de imágenes por ordenador.