UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA

Instituto de Biologia — Departamento 1 — Biologia Geral

BIO 158 — Biologia Celular e Molecular – Odontologia – 2018.2
DOCENTES: Prof. Ivana de Araujo (Coordenadora) e José Geraldo B. Lima

PRÁTICA – MICROSCOPIA

INTRODUÇÃO:
“Em 1830, Matthias Schleiden e Theodore Schwann sugeriram que as células constituíam a unidade fundamental
da vida. Essa primeira idéia sobre a teoria celular foi baseada em observações realizadas com um microscópio
óptico um tanto primitivo. Os biologistas celulares modernos dispõem de ferramentas mais eficazes para revelar a
arquitetura celular. Por exemplo, variações do microscópio de luz convencional permitem que os cientistas vejam
objetos que eram indetectáveis décadas atrás.” (LODISH, 2005)

OBJETIVOS:
1. Identificar os componentes principais de um microscópio óptico.
2. Realizar o procedimento padrão para a focalização de um objeto.
3. Identificar fatores que interferem na resolução do aparelho.
4. Aplicar procedimentos para a conservação do microscópio.
5. Comparar diferentes tipos de microscópios.
6. Estabelecer relações entre as unidades de medida utilizadas em microscopia.
7. Discutir a relevância da microscopia na biologia celular.

MATERIAL:
 Microscópio  Conta-gotas
 Estilete  Lâmina de barbear
 Papel de filtro  Letra digitada
 Lâminas  Linhas de costura
 Lamínulas  Ramo de Elodea
 Béquer com água  Lâminas permanentes

PROCEDIMENTO:
Leia o capítulo 1 (págs. 20 a 28) do livro: A célula: uma abordagem molecular (Cooper e Hausman,
2007). Siga as orientações do professor para identificar os componentes principais do microscópio óptico e, em
equipe, realize os procedimentos sugeridos.
1. Identificando os componentes principais do microscópio óptico
O microscópio óptico composto é assim chamado porque utiliza dois sistemas de lentes: as objetivas, que
produzem a imagem ampliada e as oculares, que a amplia mais. O aumento total que se obtém é o produto da
ampliação dada pelos dois sistemas.
Os sistemas objetiva e ocular do microscópio composto são combinações elaboradas de partes individuais
adaptadas umas às outras, segundo uma fórmula determinada, cujo propósito é proporcionar a melhor imagem do
objeto examinado. Para saber qual o aumento proporcionado pelo microscópio basta multiplicar o número gravado
na ocular pelo número gravado na objetiva. Esses números indicam quantas vezes aquela lente aumenta a
imagem do objeto observado.
Também integram a parte óptica do microscópio composto a FONTE DE ILUMINAÇAO (espelho ou
lâmpada elétrica), o CONDENSADOR (curto tubo metálico que contém um sistema de lentes convergentes que,
ao ser atravessado pelos raios luminosos, projeta um cone de luz sobre a preparação), o DIAFRAGMA (peça
situada abaixo do condensador que gradua a quantidade de raios luminosos que atingirão a preparação) e
FILTROS.

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BIO 158 — Biologia Celular e Molecular – Odontologia – 2018.2
DOCENTES: Prof. Ivana de Araujo (Coordenadora) e José Geraldo B. Lima

PRÁTICA – MICROSCOPIA

Parte Mecânica Descrição

1. Base ou pé É a peça que sustenta todas as outras.
2. Braço ou coluna Sustenta as partes superiores do microscópio.
Recebe e sustenta a preparação microscópica. No seu centro há uma abertura
3. Mesa ou platina
para a passagem dos raios luminosos.
Conjunto de peças móveis da mesa ou platina. Apresenta uma presilha que
4. Charriot
prende a lâmina.
5. Presilha ou Valete Fixa a lâmina na platina
Parafusos macro e
6. Permitem a focalização do objeto.
micrométricos
Sustenta as lentes objetivas. É uma peça circular dotada de movimento de
7. Revólver
rotação.
É a parte mais superior do microscópio que recebe em sua extremidade as lentes
8. Tubo ou canhão
oculares
Parte Óptica
9. Fonte de luz Normalmente constituída por uma pequena lâmpada.
10. Diafragma Controla o tamanho da área iluminada na preparação.
Fornece uma iluminação uniforme ao preparado. Pode ser levantado e abaixado
11. Condensador
por meio de um parafuso lateral.
12. Objetivas Lentes que fornecem imagem ampliada do objeto.
13. Oculares Lentes que ampliam a imagem real formada pela objetiva.

2. Cuidados com o microscópio óptico

Acompanhe as instruções do professor durante a aula e anote os cuidados mais importantes para com o
microscópio.

3. Observando uma imagem ao microscópio óptico

Siga os procedimentos abaixo, para realizar as observações:

3.1. Coloque o papel com a letra e em posição de leitura, sobre uma lâmina limpa e, sobre ela, uma
gota d’água. A seguir pegue uma lamínula e coloque-a de modo que um dos seus lados encoste
na lâmina formando um ângulo de 45°, aproximadamente. Abaixe-a vagarosamente sobre a letra
(isto evitará que se formem bolhas de ar na preparação).
3.2. Ligue a lâmpada do microscópio.
3.3. Abra o diafragma.
3.4. Gire o revólver com cuidado e encaixe a objetiva de menor aumento.
3.5. Verifique, através da ocular, se o campo está iluminado.
3.6. Coloque a preparação (lâmina) sobre a abertura da platina, prendendo-a com as presilhas ou
encaixando-a no “charriot’.
3.7. Utilize os parafusos macrométricos para aproximar a objetiva da preparação.
3.8. Olhe através da(s) ocular(es) e levante lentamente a objetiva até conseguir focar o material a ser
observado.
3.9. Utilize agora os parafusos micrométricos a fim de conseguir a nitidez ideal.
3.10. Aperfeiçoe a focalização buscando obter a imagem mais nítida e substitua essa objetiva pela de
ampliação imediatamente superior.
3.11. Faça observações com o diafragma aberto e fechado e com o condensador próximo e afastado da
preparação. Anote as diferenças observadas.
3.12. Repita o procedimento de focalização e observação utilizando a lâmina permanente
disponibilizada.
3.13. Repita as orientações dos ítens de 3.1 até 3.10, substituindo o objeto por fragmentos de 1cm de
linha colorida, sobrepostos formando um ‘X’. Focalize a preparação no ponto de cruzamento das
linhas.
3.14. REGISTRE TODAS AS SUAS OBSERVAÇÕES COM DESENHOS E ANOTAÇÕES.

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PRÁTICA – MICROSCOPIA
4. Utilizando unidades de medidas
As principais unidades de medida usadas para mensurar células e seus componentes são o micrômetro (m) e o
nanômetro (nm). Medidas usadas em microscopia:

- milímetro (mm) = 1/1000 m - micrômetro (m) = 1/1000 mm

- nanômetro (nm) = 1/1000 m - ângstrom (Å) = 1/10 nm = 1/10000 m.
1 m = 10 mm = 10 m = 10 nm = 10
3 6 9 10
Å

BIBLIOGRAFIA:
COOPER, G. M.; HAUSMAN, R. E. A Célula: uma abordagem molecular. 3.ed. Porto Alegre: Artmed. 2007.
KARP, G. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 3. ed. Barueri: Manole. 2005. 786 p. il.

PARA A DISCUSSÃO DA AULA DE MICROSCOPIA: Após a leitura do texto indicado no capítulo 1 (págs. 20 a
28) do livro: A célula, uma abordagem molecular (Cooper e Hausman, 2007), considerando técnicas e
instrumentos de microscopia, reponda as seguintes questões:
1. Explique sua observação em relação à letra e.
2. Explique sua observação em relação a lâmina com as linhas cruzadas em X.
3. Conceitue “resolução”, identificando os fatores envolvidos na sua definição.
4. Discuta a utilidade do óleo de imersão na microscopia óptica.
5. Discuta a relação entre ampliação e resolução na microscopia.
6. Faça um breve comentário sobre a aplicação de técnicas de microscopia na odontologia.