Técnica del número más probable (NMP); Técnica de los tubos múltiples; Técnica de la

fermentación

Detección del grupo Coliforme: Formado por Bacterias Gram Negativas Aerobias y anaerobias
facultativas, no forman esporas, tienen forma de bastón.

Característica: Fermentan la lactosa, producen ácido y gas en 24 a 48 Horas a 35 +- 0.2 °C.

Método probabilístico (indica q probablemente exista una determinada cantidad de conliformes

en cierto volumen de muestra).

La precisión y exactitud del método depende de la cantidad de tubos utilizados en la prueba y se

obtiene un mejor resultado cuando el mayor volumen inoculado estudiado muestra gas en alguno
o en todos los tubos y el menor volumen de muestra inoculado muestra gas en la mayoría o en
ninguno de los tubos inoculados. La muestra tiene que estar bien homogenizada.

La densidad bacteriana se calcula atraves de una formula o por medio de tablas que utiliza el
número de tubos positivos en las diluciones múltiples estas tablas de número más probable se
basa en la hipótesis de una distribución de PISÓN que es una dispersión aleatoria, pero si la
muestra no ha sido agitada adecuadamente antes de hacer las inoculaciones el valor de número
más probable podrá resultar menor que la densidad bacteriana.

Se caracteriza por 3 pruebas

Prueba Presuntiva

Prueba Confirmativa

Prueba Completa o complementaria

Prueba presuntiva: utilizamos 15 tubos de ensayo con medio de cultivo Caldo Lactosado o caldo
Lauryl Triptosa en un volumen de 10 ml, cada tubo de ensayo tiene en su interior una campana de
fermentación (Campana Durham), volúmenes de muestra que se inoculan son múltiplos o sub
múltiplos de uno, cuando el volumen de muestra inoculado es 10ml o más el caldo lactosado es de
doble concentración, si el volumen de muestra a se inoculado es 1ml o menos el caldo lactosado
es el simple concentración.

Se identifica con el volumen de muestra a inocular: 5 tubos (con pipeta estéril deposito 10ml de
muestra a cada tubo, se gasta 50ml de muestra), 5 tubos (con otra pipeta estéril distribuyo 1ml de
muestra a cada tubo, se gasta 55ml de muestra), 5 tubos ( con otra pipeta estéril deposito 0,1ml
de muestra en una gradilla se lleva a la estufa a 35 +- 0.2°C por 24 horas, en caso tubo presuntivo
positivo se observa desprendimiento de gas y enturbiamiento del liquido