UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA

DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGIA, MICROLOGIA E IMUNOLOGIA

Juliana Alves Resende

 BIOFILMES BACTERIANOS

Nossa percepção de bactérias como organismos unicelulares baseia-se essencialmente

no conceito de culturas, nas quais as células podem ser diluídas e estudadas a partir de
culturas líquidas ou sólidas.

Na realidade, a maioria das bactérias se encontra

na natureza vivendo em comunidades, de maior
ou menor estruturação.
Quando em seus habitats naturais, via de regra as bactérias são encontradas
em comunidades de diferentes graus de complexidade, associadas a superfícies
diversas, geralmente compondo um ecossistema estruturado altamente dinâmico,
que atua de maneira coordenada.

Biofilmes - complexos ecossistemas microbianos, podem ser formados por

populações desenvolvidas a partir de uma única, ou de múltiplas espécies,
podendo ser encontrados em uma variedade de superfícies bióticas e/ou
abióticas.
 Dinâmica de formação de um biofilme:
1. Colonizadores primários - se aderem a uma superfície, geralmente contendo proteínas ou outros
compostos orgânicos;
2. As células aderidas passam a se desenvolver, originando microcolônias que sintetizam uma matriz
exopolissacarídica (EPS), que passam a atuar como substrato para a aderência de microrganismos
denominados colonizadores secundários.
3. Colonizadores secundários podem se aderir diretamente aos primários, ou promoverem a formação de
coagregados com outros microrganismos e então se aderirem aos primários.
Comunidades ou agregados microbianos imobilizados em uma matriz rica
em substâncias extracelulares, conferindo proteção a ambientes hostis e
garantia de acesso a nutrientes necessários a sobrevivência.
 O biofilme corresponde a uma "entidade" dinâmica pois, de acordo com os microrganismos
que o compõem, teremos condições físicas, químicas e biológicas distintas.

 Estas alterações fazem com que cada biofilme seja único, de acordo com os
microrganismos presentes.
• Neste sentido, ao longo do tempo a composição microbiana dos biofilmes
geralmente sofre alterações significativas.
 Comportamento coletivo
.
Há várias décadas, foi proposto que as bactérias poderiam corresponder a organismos
interativos, capazes de atuar coletivamente, facilitando sua adaptação às alterações
ambientais.

 Para que um biofilme de uma ou várias espécies seja formado, é necessário o

estabelecimento de um comportamento multicelular, que se reflete em atividades
coordenadas de interação e comunicação dos vários organismos.

Biofilmes representam sistemas biológicos altamente organizados, onde as bactérias

estabelecem comunidades funcionais estruturadas e coordenadas.

Um dos mecanismos de comunicação interbacteriana que vem se mostrando extremamente

importante na formação e desenvolvimento de biofilmes corresponde ao quorum sensing –
mecanismos de sinalização celular.
Vocabulário: sinalização química – este mecanismo de comunicação
acontece devido ao reconhecimento de concentrações mínimas de
moléculas sinalizadoras ou auto indutores.
 Comunidades associadas às superfícies
.

 Bactérias são onipresentes devido à sua plasticidade fenotípica.

 Um importante aspecto associado a esta ubiqüidade está relacionado à capacidade

destes organismos migrarem para diferentes nichos, onde podem se propagar.

As comunidades bacterianas têm importantes papéis na natureza, seja na produção e

degradação de matéria orgânica, na degradação de poluentes, ou na reciclagem de
nitrogênio, enxofre e vários metais - esforço coletivo de organismos com diferentes
capacidades metabólicas:

• Metabolismo de esgotos e águas contaminadas - biorremediação;

• Separação de metais na natureza – biolixiviação
• Oxidação de tubos, brocas de perfuração, encanamentos, rotores e pás de máquinas...
• Reciclagem de substratos na superfície dentária na cavidade oral de seres humanos e
outros animais.
 Estrutura dos Biofilmes

A maioria dos biofilmes exibe uma certa heterogeneidade, existindo conjuntos de agregados
celulares distribuídos ao longo da matriz exopolissacarídica, que exibem densidades
variáveis, originando aberturas e canais por onde a água pode trafegar.

As microcolônias que compõem um biofilme podem ser de uma ou várias espécies,

dependendo das condições ambientais.

• Ex. - locais de grande stress mecânico, tais como a superfície dental, o biofilme é
bastante compactado e estratificado. Os espaços intersticiais (canais) também são parte
importante dos biofilmes, pois permitem a circulação de nutrientes e a troca de
metabólitos.
 Por que formar um biofilme?

Acredita-se que a formação de biofilmes esteja associada, por exemplo, à proteção

contra o ambiente, ou seja, bactérias em um biofilme encontram-se abrigadas e em
relativa homeostase, graças à presença da matriz exopolissacarídica.

A matriz contém vários componentes: exopolissacarídeo (secretado para o meio

externo), proteínas, ácidos nucléicos, lipídeos, carboidratos, sais minerais entre outros.

O EPS tem diferentes estruturas e funções, dependendo das comunidades e/ou

condições ambientais:
 impedir fisicamente a penetração de agentes antimicrobianos e
desinfetantes;
 sequestrar cátions, metais e toxinas;
 proteção contra radiações UV;
 alterações de pH;
 choques osmóticos
 dessecação.
 Aquisição de novas características genéticas
.

Várias bactérias possuem plasmídeos, conferindo as mais diversas características. Estes

podem ser transferidos horizontalmente por conjugação, para diferentes espécies presentes
em um biofilme.

Estudos realizados com placas dentais artificiais, formadas inicialmente por bactérias
do gênero Streptococcus mostraram a transferência de transposons contendo genes de
resistência a tetraciclina de uma linhagem de Bacillus para células de Streptococcus.

 A transdução pode, teoricamente, ser responsável pela transferência horizontal de genes em

biofilmes

• ambientes aquáticos => foi observado que uma população de cianobactérias foi
praticamente exterminada pelos fagos, e novas espécies capazes de degradar os
compostos orgânicos que surgiram restabeleceram a comunidade.
 Papel dos biofilmes nas doenças

 Estudos atuais mostram que a formação de biofilmes pode ser considerado um

fator de falha da antibioticoterapia no tratamento de doenças infecciosas.

Biofilme: bactérias podem ser 1000 vezes mais resistente a um antibiótico, quando
comparadas às mesmas células planctônicas, embora os mecanismos envolvidos
nesta resistência sejam ainda pouco conhecidos.

• Acredita-se que possa haver a inativação da droga por polímeros ou enzimas

extracelulares, ou a ineficiência da droga em decorrência de baixas taxas de
crescimento nos biofilmes.
 Infecções associadas a biofilmes geralmente são de natureza
recorrente, visto que as terapias antimicrobianas
convencionais eliminam predominantemente as formas
planctônicas, deixando as células sésseis livres para se
reproduzir e propagar no biofilme após o tratamento.

• As bactérias presentes nos biofilmes estão protegidas contra

o sistema imune do hospedeiro.
 Exemplos típicos de doenças associadas a biofilmes incluem as
infecções de implantes tais como válvulas cardíacas, catéteres, sondas,
lentes de contato, etc.

• Os biofilmes podem ainda promover doenças se formados em tecidos,

tais como nas infecções pulmonares provocadas por Pseudomonas
aeruginosa, em pacientes com fibrose cística, que são suscetíveis a
infecções crônicas por esta bactéria.

• A periodontite é outro exemplo de doença provocada por biofilmes.

=> O principal microrganismo associado a esta doença, Porphyromonas

gingivalis, coloniza uma grande variedade de superfícies orais direta ou
indiretamente, sendo então capaz de invadir as células das mucosas e
liberar toxinas.
 Dispersão de biofilmes

 Em determinados momentos, os biofilmes sofrem dispersão, liberando microrganismos que

podem vir a colonizar novos ambientes.
Existem três tipos de processos de dispersão:

• Expansiva

=> parte das células de uma microcolônia sofrem lise e outras

retomam a motilidade, sendo então liberadas da estrutura;

• Fragmentação do biofilme

=> porções de matriz extracelular associadas a microrganismos

são liberadas;

• Superficial

=> ocorre pelo crescimento do próprio biofilme como um todo.