CADENA RESPIRATORIA Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVA.

HARPER 28 ED. (CAP 13 PAG. 103-112)

1.- IMPORTANCIA BIOMÉDICA:

a.- La mayor parte de este proceso se realiza dentro de las mitocondrias y las denominan “centrales
de energía de las células”.

b.- Diversos fármacos como el amobarbital y venenos como el cianuro, monóxido de carbono inhiben
la fosforilación oxidativa.

2.- ENZIMAS ESPECÍFICAS ACTUAN COMO MARCADORES DE COMPARTIMIENTOS

SEPARADOS POR LAS MEMBRANAS MITOCONDRIALES

a.- Las mitocondrias (M) tienen una membrana externa (M.E.) permeable casi a todos los metabolitos
y una membrana interna (M.I.) selectivamente permeable que encierra una matriz.

b.- La M.E. se caracteriza porque tiene diversas enzimas por ejemplo la ACIL CoA sintetasa y
GLICEROLFOSFATO ACILTRANSFERASA.

c.- La adenililcinasa y la creatina cinasa se encuentra en el espacio intermembrana.

d.- El fosfolípido CARDIOLIPINA se encuentra en la M.I.(también en la bacteria) al igual que las

enzimas de la Cadena Respiratoria(C.R.) ATP sintasa y diversos transportadores de membrana.

3- LA CADENA RESPIRATORIA OXIDA EQUIVALENTES REDUCTORES Y ACTÚA COMO UNA

BOMBA DE PROTONES

a.- Las enzimas del Ciclo del Ácido Cítrico (CAC ó CAT) y de la beta oxidación de Ácidos Grasos
se encuentran en las mitocondrias junto con la CADENA RESPIRTORIA que reúne y transporta
equivalentes reductores y los dirige hacia su reacción final con oxígeno para formar agua y toda la
maquinaria para la fosforilación oxidativa, el proceso mediante el cual la energía libre liberada se
atrapa como fosfato de alta energía.

4.- LOS COMPONENTES DE LA CADENA RESPIRATORIA ESTAN CONTENIDOS EN GRANDES

INSEROS EN LA M.I.

a.- Los electrones fluyen por la C.R. ATRAVES DE UN INTERVALO REDOX y pasan por tres
complejos proteínicos grandes:

 NADH-Q OXIDORREDUCTOSA (Complejo I) donde se transfieren electrones desde NADH

hacia la coenzima Q (también llamado ubiquinona).
 Q-CITOCROMO C OXIDORREDUCTASA (Complejo III) que pasa los electrones hacia el
citocromo c y
 CITOCROMO C OXIDASA (Complejo IV) que completa la cadena.
 Algunas sustancias con potenciales redox más positivos que NAD+/NADH (ej. succinato)
pasan electrones hacia Q por medio de un cuarto complejo, LA SUCCINATO Q-
REDUCTASA (COMPLEJO II)

b.- Los cuatro complejos se encuentran en la MMI pero Q Y CITOCROMO C SON MÓVILES
 c.- Q se difunde con rapidez dentro de la membrana mientras que el citocromo c es una proteína
soluble.

d.- El flujo de electrones a través de los complejos I, III y IV da como resultado el bombeo de protones
desde la matriz a través de la MMI hacia el espacio intermembrana.

5.- LAS FLAVOPROTEÍNAS Y LAS PROTEÍNAS HIERRO-AZUFRE (FE-S) SON COMPONENTES

DE LOS COMPLEJOS DE LA C.R.

a.- Las flavoproteínas son componentes de importancia de los complejos I y II.

b.- El nucleótido flavina oxidado (FMN ó FAD) puede reducirse en reacciones que involucran la
transferencia de dos electrones ( para formar FADH y FMNH) –

Las proteínas hierro azufre Fe-S (proteínas hierro no HEM.Fe-S) se encuentran en el complejo I,II y
III, los cuales pueden contener uno, dos ó cuatro átomos de hierro enlazados en átomos de azufre
inorgánico

6.- Q - ACEPTA ELECTRONES ELECTRONES MEDIANTE EL COMPLEJO I Y II

a.- La NADH-Q OXIDORREDUCTASA (Complejo I) es una proteína grande en forma de L, de

multiple subunidades que cataliza la transferencia de electrones desde NADH hacia Q junto con la
transferencia de H a través de la membrana.

b.- En un inicio los electrones se transfieren desde NADH hacia FMN después hacia una serie de
centros de Fe-S y por último hacia Q.

c.- En el Complejo II (Sucinato Q reductasa) se forma FADH durante la conversión de succinato en

fumarato en el CAT.

d.- El glicerol-3-fosfato (generado en la desintegración de los Triglicéridos ó partir de la glucólisis)

y la Acil CoA también pasan electrones hacia Q mediante vías diferentes en que participan
flavoproteínas.

7.- EL OXÍGENO MOLECULAR SE REDUCE HACIA AGUA POR MEDIO DEL COMPLEJO IV

a.- El complejo IV (citocromo c oxidasa) oxida el citocromo c reducido con la reducción concomitante
de O2 hacia dos moléculas de agua.

b.- Por cada par de electrones que pasa por la cadena desde NADH ó FADH2 el complejo IV bombea
2H a través de la membrana.

c.-El O2 permanece estrechamente unido al complejo IV hasta que se reduce por completo.

8.- EL TRANSPORTE DE ELECTRONES MEDIANTE LA CADENA RESPIRATORIA CREA UN

GRADIENTE DE PROTON QUE IMPULSA LA SINTESIS DE ATP.

a.– El flujo de electrones por la cadena respiratoria genera ATP por medio del proceso de la
FOSFORILACION OXIDATIVA .

b.- La fuerza motriz del protón causada por la diferencia del potencial electroquímico (negativa en el
lado de la matriz) impulsa el mecanismo de síntesis del ATP.
c.- Los complejos I,III y IV actúan como bombas de protones. Dado que la membrana mitocondrial
interna es impermeable a iones en general y en especial a protones, estos se acumulan en el espacio
intermembrana.

9.- UNA ATP SINTASA UBICADA EN LA MEMBRANA FUNCIONA COMO UN MOTOR

ROTATORIO PARA FORMAR ATP.

a.- La fuerza motriz de protón impulsa un ATP sintasa ubicada en la membrana que en presencia de
Pi+ADP forma ATP.

b.- La ATP SINTASA esta embebida en la M.I. junto con los complejos de la cadena respiratoria.

c.- Varias subunidades de la proteína forma una estructura parecida a una bola alrededor de un eje
conocido como F1 que se proyecta hacia la matriz y contiene el mecanismo de la fosforilación.

d.- F1 esta fijo a un complejo de proteína de membrana conocido como Fo que también consta de
varias subunidades proteínicas.

e.- Fo abarca la membrana y forma un canal de protones. El flujo de estos protones a través de Fo
Hace que rote, lo que impulsa la producción de ATP en el complejo F1.

f.- Existe una estimación que por cada NADH oxidado los complejos I y III translocan cuatro protones
cada uno y el complejo IV transloca dos.

10.- LA CADENA RESPIRATORIA PROPORCIONA LA MAYOR PARTE DE LA ENERGÍA

CAPTADA DURANTE EL CATABOLISMO.

a.- El ADP capta en forma de fosfato de alta energía una proporción importante de la energía libre
derivada de los procesos catabólicos.

b.- Hay una captación directa neta de dos grupos fosfatos de alta energía en las reacciones
glucolíticas .

b.- En CAT ó CAC se captan dos fosfatos de alta energía más por mol de glucosa durante la
conversión de Succinil CoA en Succinato.

c.- Por cada mol de sustrato oxidado mediante los complejos I, III y IV en la Cadena Respiratoria
(es decir por medio del NADH) se forma 2.5 de mol de ATP por cada 0.5 mol de O2 consumido. Por
otra parte cuando un mol de sustrato (succinato, 3-fosfoglicerato) se oxida por medio de los
complejos II, III y IV sólo se forman 1.5 mol de ATP. Estas reacciones se conocen como fosforilación
oxidativa en el ámbito de la cadena respiratoria.

11.- MUCHOS VENENOS INHIBEN LA CADENA RESPIRATORIA

a.- Se habla de inhibidores de la CR, inhibidores de la F.O. y desacopladores de F.O.

b.- Los barbitúricos como el amobarbital inhiben el transporte de electrones mediante el Complejo I
al bloquear la transferencia desde Fe-S hacia Q.

c.- La Antimicina A y el dimercaprol inhiben la CR en el complejo III.

d.- Los venenos clásicos H2S, monóxido de carbono y cianuro inhiben el complejo IV y en
consecuencia pueden suspender por completo la respiración.
e.- El malonato es un inhibidor competitivo del complejo II.

f.- El antibiótico oligomicina bloquea por completo la oxidación y fosforilación al bloquear el flujo de
protones por medio de ATP sintasa.

g.- los desacopladores disocian la oxidación en la CR de la fosforilación

h.- El desacoplador que se ha usado con mayor frecuencia es el 2,4 dinitrofenol, pero otros
compuestos actúan de manera similar.

i.- La termogenina ( proteína desacopladora) es un desacoplador fisiológico que se encuentra en el

tejido adiposo pardo que funciona para generar calor corporal en particular para el recién nacido y
durante la hibernación de los animales.

12.- LA TEORÍA QUIMIOSMÓTICA PUEDE EXPLICAR EL CONTROL RSPIRATORIO Y LA

ACCION DESACOPLADORA

a.- Los desacopladores (por ejemplo dinitrofenol son anfipáticos y aumentan la permeabilidad de la
MMI lipoide a protones lo que reduce el potencial electroquímico y suscita cortocircuito de la ATP
SINTASA.

13.- LA IMPERMEABILIDAD RELATIVA DE LA MMI REQUIERE DE TRNSPORTADORES DE

INTERCAMBIO.

a.- la MMI es libremente permeable a moléculas pequeñas no cargadas como oxigeno agua CO2 ,
NH3 y ácidos monocarboxilicos como 3-hidroxibutírico, acetoacetico y acético.

b.- Los AG de cadena larga se transportan hacia la mitocondria por medio del sistema de la
CARNITINA y hay también un acarreador especial para el piruvato que comprende un simporte que
utiliza el gradiente de H+ desde afuera hacia adentro de la mitocondria .

c.- los ácidos monocarboxílicos penetran con mayor facilidad en su forma no disociada y más
liposoluble.

d.- La captación neta de citrato , isocitrato por el transportador tricarboxilato requiere malato a
cambio. El transporte de alfacetoglutarato también exige un intercambio con malato.

14.- LO IONÓFOROS PERMITEN QUE CATIONES ESPECÍFICOS PENETREN EN LAS

MEMBRANAS.

a.- Los ionóforos son moléculas lipofílicas que forman complejos con cationes específicos y facilitan
su transporte a través de la membranas biológicas, por ejemplo valinomicina.

b.- Los desacopladores clásicos como el dinitrofenol son ionóforos de protón.

15.- LA OXIDACIÓN DE NADH EXTRAMITOCONDRIAL ESTA MEDIADA POR

TRANSBORDADORES DE SUSTRATO.

a.- El NADH no puede penetrar en la MM sino que se produce de manera continua en el citosol por
el 3. Fosfogliceraldehido deshidrogenasa una enzima en la secuencia dela glucólisis.
b.- En condiciones aeróbicas el NADH extramitocondrial no se acumula y se cree que la CR lo oxida
en las mitocondrias. La transferencia de equivalentes reductores a través de la MM requiere pares
de sustrato, enlazados por DESHIDROGENASAS idóneas a cada lado de la MM .

c.- Existe el mecanismo de transferencia usando el TRANSBORDADOR DE GLICEROFOSFATO.

Este transbordador esta presente en los tejidos como cerebro musculo blanco) en músculo cardíaco
es deficiente. El otro transbordador es el TRANSBORDADOR MALATO que es de utilidad más
universal.

c.- La complejidad del transbordador Malato se debe a la impermeabilidad de de la MM al

oxaloacetato que debe reaccionar con el glutamato para formar aspartato y alfacetoglutarato
mediante la TRANSAMINACION.

16.- EL TRANSPORTE DE ION EN LAS MITOCONDRIAS ESTÁ ENLAZADO CON ENERGÍA.

a.- Las mitocondrias mantienen o acumulan cationes como K Na Ca Mg y P

17.- EL TRANSBORDADOR DE CREATINA FOSFATO FACILITA EL TRANSPORTE DE FOSFATO

DE ALTA ENERGÍA DESDE LAS MITOCONDRIAS.

a.- Una isoenzima de la creatina cinasa (CK) se encuentra en el espacio intermembrana mitocondrial,
catalizando la transferencia de fosfato de alta energía hacia creatina desde ATP que surge a partir
del trasportador de nucleótido adenina.

b.- La creatina fosfato se transporta hacia el citosol por medio de poros de proteína en la MME y
queda disponible para la generación de ATP extramitocondrial.

APECTOS CLÍNICOS.

a.- La enfermedad conocida como miopatía mitocondrial mortal infantil con disfunción renal
comprende disminución grave o falta de casi todas las oxidorreductasas de la CR .

b.- En el síndrome de MELAS (Encefalopatía acidosis láctica apoplejía mitocondrial) es una

enfermedad hereditaria debida a deficiencia de NADH –Q OXIDORREDUCTASA(complejo I ) o
citocromo oxidasa (complejo IV).

c.- Se produce por una mutación del DNA mitocondrial y se cree que esta involucrada en la
enfermedad de ALZHEIMER y diabetes mellitus.

d.- Son ejemplos de equivalentes reductores: electrones e hidrógenos.

e.- Los acarreadores redox están agrupados en cuatro complejos de CR en la MMI. 3 DE LOS 4
complejos tienen la capacidad para usar la energía liberada en el gradiente redox para bombear
protones hacia el exterior de la membrana , lo que crea un potencial electroquímico entre la matriz y
el espacio de la MMI.