Bromatologia Aplicada - Artica

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERU
FACULTAD DE INGENIERIA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

TALLER DE EXTENSIÓN DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS(T.E.I.A.)
BROMATOLOGÍA APLICADA
Fundamentos, Métodos, Aplicaciones
luis_Fabri@Yahoo.com
3ª Edición
Edición Experimental
Huancayo - Perú
2003
BROMATOLOGÍA APLICADA VOL. I 2
LUIS ARTICA MALLQUI UNCP.
Título Original:
Bromatología Aplicada.
Fundamentos, Métodos, Aplicaciones
@ Libros y editoriales, TEIA., 2003.
Impreso y Hecho en Perú.
Printed and made in Perú.
Reservados Todos Los derechos.

Ninguna parte de ésta publicación puede ser
reproducida; sin previo y Expreso permiso del
propietario del COPYRIGHT.
Del Autor:
LUIS ARTICA MALLQUI
Ingeniero en Industrias Alimentarias
Miembro
T.E.I.A.
ESTUDIOS:
Post Grado EN BROMATOLOGIA - U.N.M.S.M.
Post Grado De Tecnología de Alimentos- UNA. La Molina
Docente: Universidad Peruana Unión - Lima Perú.

Universidad Nacional Del Centro Del Perú - Huancayo Perú.
Universidad Peruana Los Andes.
PREFACIO
En estas últimas décadas estamos convencidos del inmenso poder didáctico que
tiene el área del análisis químico y físico de los alimentos en la formación de los
Ingenieros en Alimentos, Químico-Farmacéuticos, Bromatólogos y Nutricionistas, al
proporcionarles simultáneamente la oportunidad de aplicar los fundamentos de la
Bioquímica, Físico-química, Química analítica y Química de Alimentos en la
evaluación de la Calidad de la sistemas alimenticios frescos y procesados y culminar
su práctica contrastando los resultados a la luz de las Normas Oficiales.
En la obra se busca sistematizar parte de la experiencia acumulada y esta dirigido a

satisfacer las necesidades prioritariamente del personal profesional responsable del
análisis Químico-Físico de los alimentos en el Departamento de Control de Calidad
de las pequeñas y medianas Plantas industriales de alimentos y así mismo de los
estudiantes de Ingeniería en Industrias Alimentarías, Farmacia y Bioquímica,
Bromatología-Nutrición y demás personas que están involucradas con Laboratorios
del Análisis Químico y Físico de Alimentos.
Existen diversos métodos establecidos para el análisis químico-físico de los

alimentos y están al alcance en numerosas obras, como ésta, protocolos del
procedimiento analítico. Empero, en esta se ha querido presentar solo los métodos
en nuestra opinión personal más usados a nivel de laboratorios de análisis de
alimentos, para la evaluación Química y Físico de los alimentos. Los métodos
recomendados originales son los establecidos por la A.O.A.C.(Association of Official
Analytical Chemists) (1998) , el IDF y el Codex Alimentarius, sin embargo en esta, se
recomienda los métodos más aplicables en nuestro medio.
Los temas considerados en la presente obra, básicamente corresponden a los

principios básicos del análisis cuantitativo y cualitativo en el análisis de los alimentos,
sistemas de muestreo, los principios inmediatos de los sistemas alimenticios,
protocolos bromatológicos generales en los alimentos, acidez en sistemas
Alimenticios, pH ó acidez real de sistemas alimenticios y finalmente las misceláneas
bromatológicas.
Por otro lado es oportuno hacer público nuestro agradecimiento a los profesores de
nuestra Alma Mater Universidad Nacional Mayor de San Marcos, nuestros maestros
y colaboradores durante el desarrollo del texto, quienes con sus experiencias están
contribuyendo en la formación de numerosas generaciones de Químico-
Farmacéuticos, tecnólogos en alimentos, y Bromatólogos.
LUIS ARTICA MALLQUI

INTRODUCCIÓN
ANALISIS BROMATOLOGICO DE ALIMENTOS
1.1. Análisis Cuantitativo

Trata de la identificación de substancias. Esta interesado en que
elementos o compuestos están presentes en una muestra.
El análisis cuantitativo, se orienta a la determinación de que

cantidad de una sustancia en particular está presente en una
muestra. La substancia determinada, se llama componente
Deseado ó ANALITA; y puede constituir una pequeña o gran parte
de la muestra analizada.
Si la Analita es más del :

1% de la muestra = Componente principal
0,01% al 1% = Componente menor.
< al 0,01% = Componente vestigial
Una clasificación del análisis cuantitativo es:
Análisis macro = peso de muestra > de 0,1 g

Análisis Semi-micro = Peso de muestra de 10 a 100 mg.
Análisis Micro = peso de muestra de 1 a 10 mg.
Análisis ultramicro = peso de muestra en microgramos
(1 µg = 10 –6 g).
1.2. Análisis Cualitativo

Es el primer encuentro que tiene el estudiante, que trata de
identificar o separar cualitativamente, por precipitación, cambios de
color, sedimentación, etc., pueden emplearse técnicas
instrumentales como la espectroscopia de infrarrojo y resonancia
magnética Nuclear.
1.3. Etapas En El Análisis Químico y Físico De

Alimentos.
a. Muestreo.
Seleccionar una muestra representativa del material que va a
ser analizado, según la naturaleza del sistema alimenticio:
Sólido :Molienda o triturar(reducción de tamaño),

tamizar.
Líquidos:Si el líquido que va a ser analizado es
homogéneo, el procedimiento de muestreo
es fácil; pero si es heterogéneo es más
difícil; líquido que circula en un sistema de
tuberías, se toma en diferentes puntos del
sistema.
Gas : Volumen, velocidad, duración del muestreo.
b. Preparación ó transformación de la Analita

En Una Forma Mensurable.
Conversión de la analita a una forma mensurable.
Antes de hacer la determinación física o química para medir

la cantidad de analito en una muestra, por lo general es
necesario resolver el problema de las “Interferencias”. Las
interferencias deben ser inmovilizados o eliminados mediante
la alteración de su naturaleza química o física.
c. Medición
-El análisis se realizará con la brevedad posible.
-Se realizará con medios químicos, físicos ó biológicos.
La técnica que se utiliza en el laboratorio ha llevado a la

clasificación de los métodos cuantitativos en las
subdivisiones:
a. Análisis Volumétrico:
Requiere la medición del volumen de una solución de
concentración conocida, que se necesita en la reacción
con la analita.
b. Análisis Gravimetrico.
Medición del peso o masa de la analita.
c. Análisis Instrumental.
Uso de instrumento especial en la etapa de medición.
En realidad, los instrumentos se pueden emplear en
cualquier de los pasos del análisis, y en forma de rigor,
las buretas y las balanzas analíticas son instrumentos.
Otros métodos instrumentales: espectroscopia de

absorción y de emisión; potenciometría, polarografía,
culombimetría, conductimetría, polarimetría,
refractometría, Espectrometría de masa, etc.,.
Los análisis se realizan en laboratorios oficiales, sobre

la base de métodos oficiales.
d. Cálculo e Interpretación de las Mediciones.

El proceso final en un análisis es el cálculo del porcentaje de
la analita en la muestra. La interpretación de los resultados
obtenidos de los métodos analíticos no siempre es sencilla,
debido a que se pueden cometer errores con cualquier
medición; el ingeniero en alimentos debe considerar esta
posibilidad al interpretar sus resultados.
Los métodos estadísticos se emplean comúnmente y son

muy útiles para expresar el significado de los datos
analíticos.
- Presentación de resultados
- Un informe técnico.
1.4. Los Errores y El Tratamiento de Datos

La estadística y la teoría de la probabilidad poseen una estructura
lógica y rigurosa para el tratamiento de datos.
a. Errores
Se refiere a la diferencia numérica entre el valor medido y el
valor real.
El valor real de cualquier cantidad es en realidad una

abstracción filosófica, algo que el hombre no está destinado a
conocer.
1.5. Muestreo En El Análisis de Alimentos.

Es la toma de una alicuota o porción de muestra del material
problema a evaluar, bajo ciertas normas establecidas. La toma de
muestras debe realizarse mediante un acta formalizada, por
triplicado ante el titular de la empresa o establecimiento sujeto a
inspección(Madrid, 1996).
Una muestra puede definirse como “una porción o artículo que

indica la calidad de todo lo que ha sido tomado”. Como quiera que
la mayoría de alimentos que hay que muestrear no son
homogéneos en su confección o en una presunta adulteración, no
suele ser posible tomar una muestra perfecta.
El objetivo del muestreo es seleccionar una porción o un número

de recipientes o de unidades de un producto que sea altamente
representativo de una partida o lote de alimentos del que se ha
tomado.
Un lote puede ser una porción de una partida de alimentos

enviados o almacenados que lleve la misma codificación, sea un
producto distinto del resto de la partida o sea diferente en cualquier
otra forma. El tamaño de la muestra debe ser suficiente para
permitir su análisis de laboratorio, o su repetición su fuera
necesaria. Es importante sincronizar las prioridades de inspección
y de laboratorio con el fin de garantizar que las muestras de una
inspección se analicen con prontitud.
A. CLASES DE TOMA DE MUESTRAS
a.1. Toma de muestras selectiva

Por lo general, las muestras se toman para ilustrar o
documentar condiciones insatisfactorias observadas
por el inspector, o para permitir el análisis en
laboratorio de un alimento posiblemente adulterado.
La tomo de muestras se puede realizar en cualquier

punto de la cadena de producción, durante una
inspección, en el almacén, en el establecimiento
mayorista o en el mercado o establecimiento minorista.
Las muestras que se toman como consecuencia de
reclamaciones de clientes, observaciones de la
inspección o cualquier otro motivo, se suelen
“seleccionar”, es decir, se eligen de forma que ofrezcan
la mejor oportunidad de confirmar determinados
hechos conocidos.
a.2. Toma de muestras objetiva
La toma de muestras objetiva es bastante directa, ya

que suele haber indicios u otra información que
conduzca a las unidades de alimentos seleccionados
para la muestra.
Por su parte, la toma de muestras objetiva puede

resultar complicada, ya que es difícil proceder con
objetividad cuando se trata de determinar la auténtica
calidad de un lote determinado de alimentos no
homogéneos. El inspector se preguntará siempre si la
muestra recogida fue demasiado pequeña, o
excesivamente grande, y si la selección se hizo
realmente al azar.
1.5.1. Características de Muestreo
La toma de muestra debe realizarse por triplicado

homogéneamente bajo las siguientes recomendaciones:
1. Acondicionados
2. Precintados
3. Lacrados
4. Etiquetados
Además, debe indicarse los siguientes datos:
5. Identidad de la muestra
6. Contenido
7. Código
8. Fecha de muestreo.
1.5.2. Deposito de la Muestra

El depósito de las unidades Muestreadas se hará de la
siguiente forma:
a. Fabricantes (Empresa).
01 muestra quedará en poder del fabricante bajo deposito,

en unión de una copia del acta con la obligación de
conservarla en perfecto estado para su posterior
utilización en prueba contradictoria si es necesario. Las
otras dos muestras quedarán en poder de la inspección.
b. Distribuidores del Producto.
Sólo quedará en su poder una copia del acta de

muestreo.
Las tres muestras serán retiradas por la inspección, y

luego una de las muestras se podrán a disposición del
fabricante, envasador o interesado autorizado.
CAPITULO I
LOS PRINCIPIOS INMEDIATOS COMO

NUTRIENTES EN LOS SISTEMAS
ALIMENTICIOS
1.1. PROTEÍNAS
Las proteínas son compuestos altamente polimerizados, que están
formados por α-aminoácidos de configuración L. También se unen
a componentes no proteícos: estas proteínas complejas se
denominan proteidos.
La clasificación de las proteínas, se puede apreciar en la figura 1.

Las proteínas se encuentran entre los nutrientes más importantes,
Junto con los lípidos y los carbohidratos. Estos es así no por su
función energética(1 g proteína = 4,1 Kcal =17,2 KJ), sino porque
son necesarios, por su naturaleza nitrogenada, para la síntesis de
compuestos propios del organismo implicados en la estructura de
las membranas junto con los lipoides, como glicoproteidos en
funciones de lubricación y como nucleidos que posibilitan la
síntesis de las proteínas propias del organismo, así como la
formación de los cromosomas y la división celular.
El valor nutritivo de las numerosas proteínas alimentarias

existentes dependen de su digestibilidad, que depende a su vez de
la estructura, es decir, de su composición aminoacídica. El
contenido de aminoácidos esenciales( de los aproximadamente 30
aminoácidos 8(+2) son esenciales) determina el valor biológico, es
decir, el mayor aprovechamiento fisiológico de una proteína por
parte del organismo. Rige la ley del mínimo: si la oferta de
aminoácidos esenciales es demasiado limitada, el conjunto del
rendimiento de las reacciones de síntesis dependerá del
aminoácido que esté presente en menor cantidad(= aminoácido
limitante). Los aminoácidos limitantes más importantes son la
lisina(en cereales y papas) y la metionina(en carnes y leche).
Las proteínas se encuentran entre los nutrientes más importantes,

Junto con los lípidos y los carbohidratos. Estos es así no por su
función energética(1 g proteína = 4,1 Kcal =17,2 KJ), sino porque
son necesarios, por su naturaleza nitrogenada, para la síntesis de
compuestos propios del organismo implicados en la estructura de
las membranas junto con los lipoides, como glicoproteidos en
funciones de lubricación y como nucleidos que posibilitan la
síntesis de las proteínas propias del organismo, así como la
formación de los cromosomas y la división celular.
Figura. 1. Clasificación de las proteínas

Elastina
Colágeno
Escleroproteínas Fibrinógeno
(proteínas fibrilares) Fibroína de
la seda.
Miosina
Queratina
Proteínas
Sencillas
Albúminas
Globulinas
Proteínas sencillas Prolaminas
PROTEINAS (proteínas globulares) Histonas
Protaminas
Gluteninas
Nucleoproteidos
Lipoproteidos
Fosfoproteidos
Proteidos Glicoproteídos, Cromoproteidos, metaloproteidos
El valor nutritivo de las numerosas proteínas alimentarias

existentes dependen de su digestibilidad, que depende a su vez de
la estructura, es decir, de su composición aminoacídica. El
contenido de aminoácidos esenciales( de los aproximadamente 30
aminoácidos 8(+2) son esenciales) determina el valor biológico, es
decir, el mayor aprovechamiento fisiológico de una proteína por
parte del organismo. Rige la ley del mínimo: si la oferta de
aminoácidos esenciales es demasiado limitada, el conjunto del
rendimiento de las reacciones de síntesis dependerá del
aminoácido que esté presente en menor cantidad(= aminoácido
limitante).
Los aminoácidos limitantes más importantes son la lisina(en

cereales y papas) y la metionina(en carnes y leche).
En la siguiente tabla se recoge el contenido proteíco y valor

nutritivo de los alimentos más importantes que aportan proteínas.
El valor nutritivo se expresa en unidades NPU(net protein

utilization): un valor de NPU de 100 equivale al valor nutritivo de
proteína ideal.
Alimento Valor NPU Contenido Proteico
Huevos 94 13
Legumbres 30 21-26
Harina de trigo 35 10-12
Papas 67 2
Carne magra de vacuno 76 19
Pescado 80 18 aprox.
Leche 86 3-4
Fuente: Matissek, 1998
1.1.1. Caracterización de Proteínas

Las proteínas tienen una estructura molecular
extraordinariamente compleja. La analítica de los
compuestos de este tipo es como consecuencia también
extraordinariamente complicada. Por ello, en este texto
sólo se darán las indicaciones acerca de cómo determinar
las proteínas y de cómo caracterizarlas con más detalle.
1.1.2. Reacciones Generales de detección

Las siguientes pruebas se realizan directamente en el
material a investigar.
a. Reacción de Biuret
Los polipéptidos(la mínima unidad de reacción es el
tripéptido) reacción con una disolución diluida de
sulfato cúprico en medio fuertemente alcalino,
mostrando una coloración azul caracteristica:
O R
║ 
R C  CH
  
— CO  CH  NI NH  CO  CH  NH 
II
Cu
—HN — CH —CO — HN IN — CH — CO —
│ | | |
R HC — C R
R O
b. Reacción con la Ninhidrina

Un caso especial de degradación de Strecker es la
reacción de la Ninhidrina, que es de gran importancia
para la determinación fotométrica cuantitativa de los
aminoácidos. La sustancia azul violeta formada
absorbe a 570 nm. Con prolina se forma una sustancia
amarilla con una longitud de onda de 440 nm.
c. Reacción de las Xantoproteínas

Al añadir ácido nítrico concentrado en presencia de
aminoácidos aromáticos se forman nitroderivados de
color amarillo.
d. Reacción con sulfuro de plomo
Al añadir una disolución de acetato de plomo en medio

fuertemente alcalino se observa una coloración negra
( presencia de compuestos proteicos azufrados).
Las Proteínas estructuralmente son polímeros cuyas unidades

básicas son aminoácidos unidos por un enlace característico que
recibe el nombre de enlace peptídico. La secuencia de grupos
aminoácidos caracteriza a una proteína y las propiedades físicas,
químicas y nutricionales dependen de la composición en
aminoácidos de la molécula protéica y de la forma como se
enlazan para conformar su estructura. El nitrógeno representa en
la mayoría de las sustancias proteicas un porcentaje relativamente
constante, alrededor del 16%, su determinación sirve como medida
del contenido proteico en los alimentos.
1.2. Dosificación De Las Proteínas En los

Alimentos
En la alimentación la dosificación de las proteínas constituye uno
de los controles analíticos fundamentales, a causa de las
repercusiones nutricionales que conllevan a una insuficiencia o a
un desequilibrio en aminoácidos.
La dosificación analítica del nitrógeno se puede:
a. Determinación del contenido en

nitrógeno(método Kjeldahl)
a.1. Activación neutrónica
b. La dosificación de Funciones o radicales:

b.1. Reacción química del enlace peptídico o dosificación
de las uniones peptídicas y posterior medida
fotométrica(por ej., Método de Biuret; concentraciones
entre 200 a 1000 mg de proteína)
b.2. Reacción química de determinados aminoácidos de la
proteína y posterior medida fotométrica(por ej.,
determinación con el reactivo Folin-Ciocalteu;
reacciona fundamentalmente la tirosina).
b.3. Método Lowry(concentraciones entre 20 y 200 mg de
proteínas)
b.4. Absorción de las proteínas en el
ultravioleta(determinación de los aminoácidos
aromáticos triftófano, tirosina y fenilalanina; los
máximos de absorción se encuentran en torno a los
280 nm)
b.5. Absorción en el cercano al infra-rojo
b.6. Medida de la turbidez por floculación de la proteína
disuelta mediante un precipitante de proteínas.
La aplicación de éstos análisis en la industria alimentaria son:
Detección y dosificación de las enzimas en los alimentos:

Análisis del cuajo comercial, actividades amilásicas de la cebada.
Detección de la adulteración de leche y los productos

lecheros.
Estudio de la desnaturalización de las proteínas de leche, por calor.

Detección de fraudes en los productos cárnicos: presencia de

carne de vaca, caballo, aves, en los productos dichos "puro cerdo":
Adición de proteínas de leche o de proteínas de soya.
La identificación de cereales: harina de trigo blando o de trigo

duro, proteína de soya, maní etc.
En 1883, Johan Kjeldahl, Científico danés (1840-1900) publico

en la Z. Anal. Chem. El método que hoy lleva su nombre,
destinado a determinar el nitrógeno en muestras orgánicas, de
origen animal y vegetal.
La digestión Kjeldahl transforma proteínas, aminas y otros

compuestos orgánicos nitrogenados en derivados amónicos. Al
añadir a éstos una solución fuertemente alcalina, se libera
amoniaco que es entonces eliminado por destilación y valorado.
El método de Kjeldhal, consiste en :

1. Oxidación de la muestra con H2SO4 y catalizadores, durante
la cual la materia orgánica se destruye y el nitrógeno se
convierte en sulfato ácido de amonio según la reacción:
H2SO4
N2 Orgánico -------------------→ CO2 + NH4 HSO4 + H2O
Catalizador
2. Descomposición del sulfato ácido de amonio por medio de

un exceso de álcali fuerte para liberar el amoníaco, el cual se
recoge por destilación sobre ácido bórico. Las reacciones
que suceden son:
NH 4 HSO4 + 2 NaOH NH3 + Na2 SO 4 +

2H2O
NH4 OH + H3 BO3 NH4 H2 BO3 + H2 O
3. Titulación del borato de amonio formado con solución patrón

de ácido clorhídrico o ácido sulfúrico, usando como
indicadores de punto final una mezcla de rojo de metilo y
azul de metileno o una mezcla de rojo de metilo y verde de
bromocresol. La reacción de titulación se muestra de la
siguiente forma:
NH4 H2 BO3 + Hcl NH4 Cl + H3 BO3
La cantidad de proteína bruta se obtiene multiplicando el

porcentaje de nitrógeno determinado, por el factor 6,25
generalmente; para la proteína de cereales se multiplica por el
factor 5,7 y para la proteína de leche el factor utilizado es 6,38.
Este método así como otros como el colorimétrico en el cual se

mide el derivado amoniacal formado con el fenol o con hipoclorito
sódico, se basa en la medición del amoniaco formado por todo el
nitrógeno presente en la muestra, por lo cual el valor obtenido no

es el real a no ser que de alguna manera se elimine el nitrógeno
no proteico en la preparación de la muestra.
Además estos métodos dan una apreciación cuantitativa de la

proteína presente mas no orientan sobre la calidad de la misma, su
riqueza en aminoácidos y capacidad de asimilación, factores que
determinan el valor nutricional de la proteína.
1.3. CARBOHIDRATOS Y FIBRA BRUTA
Mediante un procedimiento analítico sencillo no se puede

determinar el gran grupo de carbohidratos puesto que está
integrado por numerosas entidades químicas que carecen de una
característica analítica común. Henneberg y stohman, citados por
Becker, dividierón por tanto, toda esta fracción en dos grupos: Una
parte insoluble en ácidos y bases a la que llamarón “Fibra bruta” y
una fracción soluble a la que denominarón “Extracto no
nitrogenado”(ENN). En la fracción fibra bruta se encuentran
comúnmente: Celulosa, pentosanas, lignina, suberina, cutina,
alginatos y pectinas.
La celulosa es un polimero lineal de unidades de anhidroglucosa

unidas entre ellas por junturas glicosídicas de tipo β-1,4. El grado
de polimerización es del orden de 1 0000 unidades por molécula.
Las hemicelulosas son heteropolisacáridos cortos, ramificados,

fácilmente hidrolizables enzimáticamente. Por ejemplo las de caña
de maíz contiene 70% de xilosa, 9% de arabinosa, 14,5% de
glucosa y 5,9% de otros. Los azúcares C5 (xilosa y arabinosa) son
mayoritarios, la glucosa siempre está presente y los otros están
constituidos por los ácidos urónicos y otros azúcares en menor
proporción. La hidrólisis enzimática de las hemicelulosas
proporciona esencialmente pentosas no muy útiles para fermentar
hasta alcohol pero útiles para la fermentación aceto-butílica.
Las ligninas son polímeros tridimensionales de origen fenólico,

sintetizados por la deshidrogenasa radical de tres alcoholes fenil-
propenóicos: El alcohol cumarílico, el alcohol coniferilico y el
alcohol sinapílico; las uniones entre moléculas basales son de
diferentes tipos, muchas de las cuales no son hidrolizables.
Los productos de degradación de las ligninas no son

prácticamente fermentables. La celulosa, la hemicelulosa y las
ligninas en su estado natural son prácticamente insolubles en
agua.
Los carbohidratos se trata por lo general de compuestos

polihidroxicarbonílicos y de compuestos estructuralmente
relacionados derivados de ellos. Debido a su abundancia, los
carbohidratos forman parte de las sustancias naturales más
importantes, presentándose como componentes dulces de los
frutos y como sustancias de reserva importante en el reino
vegetal(almidón) y animal(glucógeno). Un 1 g de carbohidrato=
4,1Kcal=17,2 KJ.
Figura 2. Clasificación de los Carbohidratos (Sacáridos)
Pentosas, hexosas, heptosas
MONOSACÁRIDOS
Desoxi-,anhidro-,aminoazúcares
Cetosas
Acidos ónicos,ácidos urónicos
Azúcares-éster,-alcohol,-éter
OLIGOSACARIDOS Di-, Tri-, Tetra- --------- Heptasacáridos
Almidón,glucógeno
Celulosa
Homopolisacáridos Dextrinas, Dextranos
Sacaridos INulina
Pectina
POLISACÁRIDOS
Hemicelulosa
Heteropolisacáridos Gomas vegetales

Agar agar
GLUCÓSIDOS
Fuente: Matissek, Schnepel y Steiner ; 1998

1.3.1. Determinación de Mono y Oligosacáridos

Existe una gran variedad de
métodos para su determinación que se basan en distintos
principios. La sensibilidad de cada método depende, entre
otras cosas, de la composición de la muestra o de su
matriz y es muy variable:
a. Métodos cromatográficos
b. Medida de la capacidad rotatoria óptica(polarimetría).
c. Oxidación del grupo Aldehído/ceto en disolución salina
d. Métodos enzimáticos
e. Métodos fotométricos tras su conversión en compuestos
coloreados(Matissek y Et. al; 1998).
1.4. Determinación de FIBRA BRUTA.

El método empleado para la determinación de la Fibra bruta,
consiste en efectuar dos digestiones. La primera con ácido
sulfúrico y la segunda con hidróxido de sodio. La finalidad del
método es la de eliminar las proteínas, carbohidratos solubles,
residuos de grasas, vitaminas y otros compuestos diferentes que
interfieren en su determinación.
El fundamento del método es asemejar este proceso al que

desempeña el organismo en su función digestiva.
En años recientes se han propuesto otros métodos que utilizan
diferentes mezclas de ácidos como el de White House (acético +
nítrico + tricloroacético) o el de Van Soest que utiliza una sal de
amonio cuaternario (bromo de cetil trimetil amonio) en medio
sulfúrico, para producir la hidrólisis. A continuación se especifican
las reacciones involucradas en el análisis de fibra cruda por
diferentes métodos:
FIGURA 3. REACCIONES INVOLUCRADAS EN EL ANALISIS DE

FIBRA CRUDA POR EL METODO DE WEENDE- OFICIAL
AOAC.
1. Hidrólisis ácida :
a. Carbohidratos
(Cn H2n On )m --------------------→ m Cn H2n On
n=5-6
b. Proteínas
O R2 H O=C-OH
  | | H+
R - CH - C - N - C - C - N - C - R3
   
NH2 H H O
n
R1 - CH - C = O + nR - CH - C = O + R3 - CH -C=O
  
NH2 NH2 NH2
R1 ≠ R2 ≠ R3 = Radical
2. Hidrólisis de Proteína
O R2 H O=C-OH
 | | | H+
R - CH - C - N - C - C - N - C - R3
  
H H O n
NH 2
ONa ONa ONa

  
R1 - CH - C = O + nR - CH - C = O + R3 - CH -C=O
  
NH2 NH2 NH2
FIGURA 4. REACCIONES INVOLUCRADAS EN EL ANALISIS DE

FIBRA CRUDA POR EL METODO DE VAN SOEST.
Carbohidratos :
H+
(Cn H2n On )m --------------------→ m Cn H2n On
n=5-6
Proteínas
O R2 H O=C-OH
 | | | H+
R - CH - C - N - C - C - N - C - R3
   
NH2 H H O (S)
n
OH R2 OH O= C - OH
 | | 
R1 — CH — C — N — C — C — N — C — R3
   ║  |
NH2 H H O H H (L)
n
1.5. Fibra Dietaria.

En la década de los ochenta los investigadores en alimentos han
enfocado su interés sobre la fracción de la fibra bruta que puede
ser útil para los procesos digestivos en el tracto humano. A esta
fracción se le ha dado el nombre de fibra dietaria.
En esta fracción se incluyen compuestos tales como el almidón,

los polisacáridos no celulósicos, la celulosa, la lignina, la
hemicelulosa y sustancias pécticas. Se han ideado numerosos
métodos de determinación de las diversas fracciones que la
constituyen, sin embargo hasta el momento no ha sido adoptado
como oficial ninguno de ellos. Por ejemplo Anderson en 1988,
propuso que la fibra dietaria total puede calcularse conociendo las
fracciones determinadas como polisacáridos no almidones totales,
polisacáridos no almidones solubles, polisacáridos no celulósicos
insolubles, celulosa y lignina.. Algunos de los métodos propuestos
combinan la acción de enzimas amilasas para digerir la fracción
almidón con métodos químicos de hidrólisis ácida.
1.6. EXTRACTO NO NITROGENADO(E.N.N.)

En esta fracción se agrupan mono y disacáridos, la parte soluble
de la celulosa, pentosanas y lignina, las hemicelulosas, el almidón,
la inulina y toda clase de azúcares, materias pécticas, ácidos
orgánicos y otras materias solubles libres de nitrogeno,
constituyendo así la fracción más valiosa del alimento.
El porcentaje de extractivos no nitrogenados se determina por

cálculo como ya se explicó, restando de 100 los porcentajes de
humedad, grasa, fibra, cenizas y proteína o también, si se ha
calculado el porcentaje de materia seca, se resta de este las
cantidades correspondientes a los contenidos de grasa, fibra,
ceniza y proteínas expresados todos como porcentajes. Este
procedimiento está afectado por las inexactitudes propias de la
determinación analítica de los otros componentes, por eso sus
resultados son relativamente aproximados.
1.7. CENIZAS O MATERIAL MINERAL

La naturaleza y calidad de las variadas combinaciones minerales
se encuentran en las plantas alimentarias, son difíciles de
determinar aún cuando el resultado de la incineración del material
permite una orientación sobre su cantidad aproximada, puesto que
en el proceso cambia la naturaleza de las combinaciones
originales debido a la destrucción de la materia orgánica.
En general las cenizas se componen de carbohidratos originados

en la materia orgánica y no propiamente de la muestra. La
determinación debe hacerse aumentando progresivamente la
temperatura del horno, hasta alcanzar el rojo oscuro (± 500°C). No
se debe dejar pasar de esta temperatura pues se podría
descomponer los carbonatos presentes y se volatilizarían otras
sustancias como los compuestos de fósforo, produciendo así
resultados erróneos. Otra forma de destruir la materia orgánica es
por oxidación húmeda, con ácido nítrico o sulfúrico concentrados..
El análisis de las cenizas debe estar enfocado a la determinación

de calcio, fósforo, potasio, manganeso y hierro y demás elementos
que tienen significado en alimentación humana. Los elementos
presentes pueden determinarse por numerosos métodos. El
método propuesto en esta revisión comprende la Incineración de la
muestra y la solubilización de las cenizas con ácido clorhídrico
para formar los cloruros respectivos, los cuales pueden valorarse
finalmente, por métodos volumétricos, colorimétricos o por
absorción atómica.
1.8. Extracto Etéreo o Grasa Bruta

Las grasas verdaderas o triglicéridos son compuestos orgánicos
carentes de nitrogeno, que se forman en el metabolismo vegetal y
animal y que poseen desde un punto de vista fisiológico un
elevado valor calorífico.
Son nutrientes con mayor poder energético(1 g de grasa = 9,3 Kcal

=38,KJ). Las grasas, por lo general , se encuentran asociadas con
numerosas sustancias acompañantes(lipoides), estrechamente
relacionadas bioenergéticamente unas con otras. Las grasas y sus
sustancias acompañantes, que en conjunto se denominan también
lípidos, se diferencian entre sí básicamente por su estructura
química, aunque presentan en su totalidad propiedades químico-
físicas similares, como por ejemplo la solubilidad en disolventes
orgánicos(Matissek, et. al; 1998)
Este comportamiento químico-físico se emplea en analítica, por lo

que la extracción con disolventes orgánicos es un procedimiento
para la determinación del contenido total de grasa. Esta medida
tiene importancia para evaluar el valor nutritivo, en los controles de
calidad y para el reconocimiento de falsificaciones.
El término “Lípidos” hace referencia” a un grupo de sustancias

cuya definición es aún menos precisa que la de los hidratos de
carbono. Generalmente, hace referencia a un grupo heterogéneo
de sustancias relacionadas con los sistemas biológicos, que tienen
en común su insolubilidad en el agua y su solubilidad en
disolventes no polares, como los hidrocarburos, o en los alcoholes.
En este grupo, se incluyen los aceites y las grasas( No existe

distinción formal entre grasas y aceite. Los aceites son líquidos y
las grasas sólidos a la temperatura ambiente) de la dieta, junto con
los llamados fosfolípidos, asociados a las membranas
celulares(Coultate, 1998).
Los lípidos de todos los sistemas alimenticios son ésteres de

ácidos grasos de cadena larga, pero existen muchos otros lípidos
que no responden a estas características estructurales. Entre ellos,
se incluyen los esteroides y los terpenos pero, con la excepción del
colesterol(y sus ésteres de ácidos grasos de cadena larga), Las
únicas sustancias de este tipo que adquieren cierta relevancia en
los alimentos son las vitaminas, pigmentos o compuestos
aromatizantes(Coultate, 1998).
Figura 5. Clasificación de Lípidos

GLICÉRIDOS
LIPIDOS
SENCILLOS
CERAS
ACIDOS GRASOS
ALCOHOLES
DERIVADOS
LIPIDOS LIPIDICOS
LIPOVITAMINAS
HIDROCARBUROS
Ác. Fosfátidos
(lecitina)
Fosfátidos de
GLICEROFOSFÁTIDOS inositol
PLASMALÓGENOS
CEFALINAS
LIPIDOS LIPIDOS COMPELJOS

COMPLEJOS
Esfingomielina
ESFINGOLÍPIDOS Cerebrósidos
(sulfátidos)
Gangliósidos
Fuente: Matissek, Schnepel y Steiner ; 1998

CAPITULO II
LABORATORIO DE ENSAYO DE
BROMATOLOGÍA
Es importante remarcar que en una planta Industrial de Alimentos, el

laboratorio de Bromatología juega un papel fundamental en la
evaluación de la calidad permanente que deben cumplir la materia prima
así como los derivados elaborados.
Es conocido por todos que el Laboratorio puede definirse como el lugar

donde los investigadores y los técnicos obtienen datos experimentales
reproducibles y que permitan sustentar una investigación, una
evaluación, o fundamentar el diagnóstico del estado de las materias
primas así como de los derivados procesados.
El proceso de implementación, tanto del diseño como de su

equipamiento, debe ser realizado con todas las especificaciones que
requiere el caso y con el concurso de personal especializado. Por otro
lado las normas básicas que deben conocer el personal especializado
que trabajan en el laboratorio de una industria de leche deben ser
establecidos a nivel del departamento de Control de calidad y el analista
de Alimentos y derivados debe tener presente las siguientes
Mandamientos fundamentales:
2.1. LOS DIEZ MANDAMIENTOS COMO NORMA

GENERAL DEL LABORATORIO DE
BROMATOLOGIA
1. Establecer y optimizar los Protocolos de análisis de los sistemas

alimenticios, en relación a las normas establecidas,
considerando a los analistas responsables; Disponibilidad de
materiales, y equipos.
2. Previo al inicio del desarrollo de cualquier protocolo de análisis
de sistemas alimenticios; es necesario que el material de vidrio,
equipos, deben estar correctamente preparados, limpios,
estériles, y correctamente calibrados.
3. La práctica del orden, limpieza, puntualidad deben ser normas
establecidas en el analista responsable, y de esta forma
mantener una sistema de trabajo muy eficiente y confiable.
4. Debe conocer sobre normas de seguridad en el uso y manipuleo

de los materiales y los reactivos que se usan, y siempre debe
ser escrupuloso en la limpieza de los materiales y exigir que los
reactivos deben presentar una pureza requerida, para evitar
cualquier error en el análisis y posibles contaminaciones. Todo
reactivo preparado, debe ser valorado a la concentración
requerida y conservado en frascos de reactivos debidamente
limpios y etiquetados, anotando su fecha de preparación.
5. Las evaluaciones químicas, físicas, deben realizarse con
bastante cuidado; para tal efecto, una vez obtenido los datos,
debe contarse con un libro adecuado de registros y anotase con
mucho cuidado y responsabilidad.
6. El analista, debe contar con un uniforme de trabajo y que
básicamente consiste en un mandil de color blanco, Calzados
deben ser de tacón bajo y cerrados de color blanco o zapatos
de goma, delantal de goma, una gorra, y para análisis
específicos debe usar gafas y guantes de goma.
7. El analista debe cumplir con normas muy rígidas, el cabello
debe mantener corto o estar sujetado (si es de cabello largo
debe retirarse y atarse) y siempre debe mantener una higiene
personal escrupulosa.
8. El sistema de codificado de muestras debe ser establecido con
un patrón adecuado, para evitar cualquier confusión y/o
permutación; en cada muestra como mínimo debe indicarse, su
código, la fecha, etc.,.
9. El analista debe elaborar un adecuado sistema de reporte de

diario de trabajo de laboratorio, en donde se considera los
análisis rutinarios, número de muestras por línea, frecuencia de
análisis, fecha de evaluación, analista responsable; además
estos reportes deben ser elaborados cotidianamente con mucha
claridad y responsabilidad.
10. Como medida de seguridad, y con el objeto de que la empresa
permanentemente eleve la calidad de los productos lácteos
procesados, el personal profesional y técnico,
permanentemente debe someterse a una capacitación,
orientación rigurosa, con el objeto de renovar y estar
actualizado sobre las innovaciones en el análisis de leche y en
el uso y manipuleo de materiales y equipos.
2.2.OPERACIONES FUNDAMENTALES EN EL
LABORATORIO DE ENSAYO DE
BROMATOLOGIA
Los principios fundamentales de actuación a nivel de laboratorio

en una Planta de Alimentos, requiere de una conducta profesional
eficiente y de excelencia; Todos los que son responsables del
laboratorio deben practicar los principios de una buena
organización con el objetivo de lograr una máxima eficacia y por
ende una calidad total.
El Personal Profesional y técnico, deben ser conocedores de las

especificaciones, uso de todos los materiales y equipos que se
utilizan para el análisis de los sistemas alimenticios y comestibles,
así como de su mantenimiento y limpieza; considerando estos
aspectos a continuación se establece que las operaciones
fundamentales a nivel del laboratorio de Ensayo de Bromatología

son:
a. Limpieza.
El objetivo fundamental de ésta operación, es para obtener
resultados fiables y reproducibles sin la inducción de cualquier
error debido al efecto de un lavado deficiente y/o material
extraño presente en el material de análisis.
Para realizar la operación de lavado o limpieza, generalmente

se combina la limpieza mecánica que implica el arrastre de
sustancias extrañas con la limpieza química que consiste en
disolver o destruir cualquier materia orgánica adherida en el
material de vidrio o equipo. El agente para la limpieza mecánica
es el agua, coadyuvado por un cepillo arrastra cualquier residuo
presente en el material, pero esta limpieza es insuficiente por lo
que es necesario realizar una limpieza química.
La limpieza química, se realiza con agentes químicos

inorgánicos, para este fin utilizamos una mezcla sulfocrómica de
ácido sulfúrico y dicromato de potasio y se lava en caliente, esta
mezcla oxida y degrada a la materia orgánica; también se
utiliza ácido clorhídrico o nítrico que fundamentalmente
disuelven precipitados adheridos a las paredes del material de
vidrio así como de accesorios y equipos; el uso de los jabones y
detergentes son los responsables de la solubilización de la
masa lipídica adherida al material.
Una vez terminado la operación de lavado o limpieza del

material o equipo, es necesario realizar por lo menos un
enjuague con agua corriente de grifo unas tres veces y otras
tres con agua destilada estéril; concluido cada enjuague se
debe escurrir y luego someter a un secado en una estufa con
aire seco o esterilizarlos dependiendo del tipo de material y su
uso.
b. Enmasado o Pesado
Es un punto crítico del proceso del desarrollo del protocolo de

análisis, la cual se utiliza para determinar la masa de todos los
tamaños de muestras a analizar, así como de los reactivos tanto
en su dosificación como durante su preparación.
El equipo principal para estos casos es la balanza analítica de
una sensibilidad establecida; las balanzas pueden ser de
sistemas de pesas, como las digitales. Las balanzas analíticas
más usadas a nivel de laboratorio de Bromatología son con
capacidades hasta 100 gramos con una precisión de 0,0001
gramos.
c. Pipeteo y Aforado
Es necesario que la medición de líquidos volumétricamente sean
con bastante precisión y cuando se trata de volúmenes muy
pequeños se debe realizarse con pipetas específicas; Las
pipetas son tubos capilares abiertos en ambos extremos y
presentan una graduación volumétrica y otras son aforadas.
La mayoría de las pipetas graduadas utilizadas en el análisis de

Alimentos, corresponde al líquido que cae espontáneamente al
destapar el extremo superior (sin soplar), y otras pipetas
requieren para expulsar la totalidad del líquido por un soplado
(tipo "Blow out").
La medición de volúmenes muy pequeños se realiza con

micropipetas y microjerinjas; para el caso de mediciones de 0,1
a 10 mL. se usan pipetas con diámetros anchos en donde se
observa la formación de menisco líquido. En estos casos la
lectura se debe realizar cuando el menisco es tangente a la
línea que señala la graduación o aforo. Cuando se quiere medir
volúmenes de 10 a 1 000 mL. se utilizan fiolas o pipetas
debidamente aforados a la temperatura de trabajo de la fiola o
pipeta.
d. Ajuste de Soluciones y Diluciones

Es necesario que la preparación y ajuste de soluciones y
disoluciones a nivel de laboratorio deben ser evaluados y
correctamente valorados previo al inicio de la ejecución del
protocolo de análisis. Es muy importante recordar, que una
forma más común de diluir una solución patrón es aplicando un
elemental cálculo de dilución a nivel cuantitativo según la
siguiente relación de Diluciones:
Relación I:
V1 . c1 = V2 . c2
Donde : V1 y c1 son volumen y Concentración inicial.

V2 y c2 son volumen y concentración final
Relación II:
V1 . N1 = V2 . N2
Donde : V1 y N1 son volumen y Normalidad inicial.

V2 y N2 son volumen y Normalidad final.
Se recomienda que cuando se transfiere cuantitativamente los
solutos al matraz aforado se utiliza una varilla de vidrio y se
arrastra el soluto con una pequeña porción del disolvente, y así
paulatinamente se va añadiendo a la fiola hasta aforar; se debe
disolver totalmente los solutos solidos antes de completar el
aforado.
e. Valoración o Factorización
Todo análisis a nivel de laboratorio presenta un principio
químico fundamental la de realizarse en base a reacciones
químicas cuantitativas y cualitativas; esto explica que la
transformación de la sustancia inicial íntegramente en los
productos finales se realiza estequiométricamente cuando las
proporciones de las sustancias reaccionantes están
perfectamente definidas y son constantes.
Una forma clásica de presentar a una reacción estequiométrica

cuantitativa, es cuando se valora una solución de NaOH con
una solución de HCl bajo las mismas concentraciones y cuya
reacción es de la siguiente forma:
NaOH + HCl NaCl + H2O

BROMATOLOGIA APLICADA: Fundamentos, métodos y aplicaciones 51
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De la reacción podemos mencionar que una Mol de NaOH

reacciona con una Mol de HCl, formándose una Mol de NaCl y
una Mol de H2O respectivamente. Este principio se emplea para
realizar las valoraciones o factorizaciones de todos las
soluciones o reactivos que se utilizan para el análisis de
alimentos y derivados.
Ott (1992), y Macarulla (1984) definen que una Valoración es

una operación la cual determina la concentración de una
solución problema en base a la medición del volumen de una
solución patrón que reacciona estequiométricamente con un
volumen conocido de la solución problema.
Es necesario recordarles que un equivalente de cualquier

sustancia reacciona siempre con un equivalente de otra. Por lo
tanto el punto de equivalencia es aquél en el que están
presentes cantidades iguales de los cuerpos reaccionantes,
mientras que el punto final es aquél en que se sabe que la
reacción ha concluido.
En lo referente a Indicadores podemos indicar que son

sustancias químicas que en el punto final de la reacción
experimentan un cambio brusco, manifestándose en el cambio
de coloración de la solución que se esta valorando.
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Para realizar una óptima valoración siempre se debe recordar

por norma el concepto de Equivalente químico, ya que en las
reacciones de neutralización (Valoración) y de óxido-reducción
se utiliza una cantidad de sustancia llamada Equivalente
Químico, que viene a ser la cantidad de sustancia que puede
liberar, adicionar, sustituir, o desplazar un átomo- gramo de
hidrógeno; como ejemplo citaremos lo siguiente:
Ejemplo 1: Una Mol de H2 SO4 puede liberar 2 átomos-gramo de H+, por

lo tanto contiene dos equivalentes:
1 Mol H2SO4 = 2 equivalentes

1 Equivalente de H2SO4= M / 2 = 98/2 = 49 g.
Ejemplo 2 : Una Mol de NaOH puede captar 1 átomo-gramo de

H+, por lo tanto contiene un equivalente:
1 Mol NaOH = 1 equivalente.

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1 Equivalente NaOH = M/1 = 40/1 = 40 g.
2.3. PROPIEDAD FUNDAMENTAL DE LOS

EQUIPOS DE MEDICIÓN
Considerando que los datos reproducibles que se obtienen deben

ser significativos, es necesario adoptar ciertas especificaciones que
presentan como propiedad fundamental los equipos y instrumentos
de medición en el laboratorio.
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Estas propiedades, están directamente relacionado con factores

extrínsecos (como es la temperatura, humedad, etc.,) e intrínsecos
(calibración, sensibilidad, precisión, etc.,) los cuales influyen sobre
los resultados, por lo que nace un término bastante conocido
denominado Error de medición, que viene a ser la diferencia entre
la medida aparente obtenida y la medida real.
Además se puede reconocer dos tipos de errores; el error absoluto,

que es la diferencia propiamente dicha, y el error relativo, que es el
cociente entre el error absoluto y la medida. Los errores se deben a
diferentes causas o factores, considerando estos factores, los
errores pueden ser Sistemáticos y accidentales (estadísticos); los
sistemáticos se deben a un instrumento de medida inadecuado o
mal uso del instrumento, estos errores no se detectan por repetición
de la medida, es inherente a la medición (constante).
Los errores accidentales o estadísticos, se deben a causas no

previsibles, y se pueden detectar y corregir repitiendo la medición.
Para evitar cualquier error de medición es necesario familiarizarnos
con las propiedades fundamentales de los equipos e instrumentos y
diferenciar la:
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a. La Sensibilidad
Es la magnitud más pequeña que es capaz de medir el
instrumento. Si consideramos a nivel práctico, que una balanza
analítica tiene una sensibilidad de 0,1 miligramos, es decir, no
puede detectar variaciones de masa inferiores a 0,1 miligramos.
b. La Fiabilidad
Es la propiedad que hace que las medidas sea reproducibles,
es decir, que varias mediciones de una misma magnitud arrojen
el mismo resultado. Ahora a nivel práctico podemos indicar que
una balanza es fiable cuando en ella se pesa tres veces
consecutivas una misma masa debe dar en los tres casos el
mismo resultado.
c.La Precisión
Consiste en realizar las medidas con un error relativo
suficientemente pequeño. En la práctica, se observa que si una
balanza pesa 100 gramos con un error relativo de 1/1 000 es
más preciso que una balanza que pesa 10 miligramos con un
error relativo de 1/100.
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2.4. Análisis Cuantitativo
Trata de la identificación de substancias. Esta interesado en que

elementos o compuestos están presentes en una muestra.
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El análisis cuantitativo, se orienta a la determinación de que

cantidad de una sustancia en particular está presente en una
muestra. La substancia determinada, se llama componente
Deseado ó ANALITA; y puede constituir una pequeña o gran parte
de la muestra analizada.
Si la Analita es más del :
1% de la muestra = Componente principal

0,01% al 1% = Componente menor.
< al 0,01% = Componente vestigial
Una clasificación del análisis cuantitativo es:
Análisis macro = peso de muestra > de 0,1 g

Análisis Semi-micro = Peso de muestra de 10 a 100 mg.
Análisis Micro = peso de muestra de 1 a 10 mg.
Análisis ultramicro = peso de muestra en microgramos
(1 µg = 10 –6 g).
2.5. Análisis Cualitativo
Es el primer encuentro que tiene el estudiante, que trata de

identificar o separar cualitativamente, por precipitación, cambios de
color, sedimentación, etc., pueden emplearse técnicas
instrumentales como la espectroscopia de infrarrojo y resonancia
magnética Nuclear.
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2.6.Etapas En El Análisis Químico y Físico De

Alimentos.
a. Muestreo.
Seleccionar una muestra representativa del material que va a
ser analizado.
b. Preparación ó transformación de la
Analita En Una Forma Mensurable.
Conversión de la analita a una forma mensurable.
c. Medición
d. Cálculo e Interpretación de las

Mediciones.
La descripción de las etapas se indican a continuación:
Muestreo:deben ser muestras representativas según la naturaleza

del sistema alimenticio.
Sólido :Molienda o triturar(reducción de tamaño),

tamizar.
Líquidos:Si el líquido que va a ser analizado es

homogéneo, el procedimiento de muestreo es fácil; pero
si es heterogéneo es más difícil; líquido que circula en
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un sistema de tuberías, se toma en diferentes puntos del
sistema.
Gas:Volumen, velocidad, duración del muestreo.
Transformación de la Analita En Una Forma Mensurable:

Antes de hacer la determinación física o química para medir la
cantidad de analita en una muestra, por lo general es necesario
resolver el problema de las “Interferencias”. Las interferencias
deben ser inmovilizados o eliminados mediante la alteración de su
naturaleza química o física.
Medición:
- El análisis se realizará con la brevedad posible.
- Se realizará con medios químicos, físicos ó biológicos.
La técnica que se utiliza en el laboratorio ha llevado a la
clasificación de los métodos cuantitativos en las
subdivisiones:
a. Análisis Volumétrico:
Requiere la medición del volumen de una solución de
concentración conocida, que se necesita en la reacción
con la analita.
b. Análisis Gravimetrico.
Medición del peso o masa de la analita.
c. Análisis Instrumental.
Uso de instrumento especial en la etapa de medición. En
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realidad, los instrumentos se pueden emplear en cualquier
de los pasos del análisis, y en forma de rigor, las buretas y
las balanzas analíticas son instrumentos.
Otros métodos instrumentales: espectroscopía de

absorción y de emisión; potenciometría, polarografía,
culombimetría, conductimetría, polarimetría,
refractometría, Espectrometría de masa, etc.,.
Los análisis se realizan en laboratorios oficiales, sobre la
base de métodos oficiales.
Cálculo e Interpretación de las Mediciones

El proceso final en un análisis es el cálculo del porcentaje de la
analita en la muestra.
La interpretación de los resultados obtenidos de los métodos
analíticos no siempre es sencilla, debido a que se pueden cometer
errores con cualquier medición; el ingeniero en alimentos debe
considerar esta posibilidad al interpretar sus resultados.
Los métodos estadísticos se emplean comúnmente y son muy

útiles para expresar el significado de los datos analíticos.
- Presentación de resultados
- Un informe técnico.
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2.7. Los Errores y El Tratamiento de Datos

La estadística y la teoría de la probabilidad poseen una estructura
lógica y rigurosa para el tratamiento de datos.
a. Errores
Se refiere a la diferencia numérica entre el valor medido y el

valor real. El valor real de cualquier cantidad es en realidad una
abstracción filosófica, algo que el hombre no está destinado a
conocer.
2.8.Muestreo En El Análisis de Alimentos.

Es la toma de una alicuota o porción de muestra del material
problema a evaluar, bajo ciertas normas establecidas. La toma de
muestras debe realizarse mediante un acta formalizada, por
triplicado ante el titular de la empresa o establecimiento sujeto a
inspección(Madrid, 1996). Una muestra puede definirse como “una
porción o artículo que indica la calidad de todo lo que ha sido
tomado”. Como quiera que la mayoría de alimentos que hay que
muestrear no son homogéneos en su confección o en una
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presunta adulteración, no suele ser posible tomar una muestra
perfecta.
El objetivo del muestreo es seleccionar una porción o un número

de recipientes o de unidades de un producto que sea altamente
representativo de una partida o lote de alimentos del que se ha
tomado.
Un lote puede ser una porción de una partida de alimentos

enviados o almacenados que lleve la misma codificación, sea un
producto distinto del resto de la partida o sea diferente en cualquier
otra forma. El tamaño de la muestra debe ser suficiente para
permitir su análisis de laboratorio, o su repetición su fuera
necesaria.
Es importante sincronizar las prioridades de inspección y de

laboratorio con el fin de garantizar que las muestras de una
inspección se analicen con prontitud.
A. CLASES DE TOMA DE MUESTRAS
Toma de muestras selectiva

Por lo general, las muestras se toman para ilustrar o
documentar condiciones insatisfactorias observadas por el
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inspector, o para permitir el análisis en laboratorio de un
alimento posiblemente adulterado. La tomo de muestras se
puede realizar en cualquier punto de la cadena de producción,
durante una inspección, en el almacén, en el establecimiento
mayorista o en el mercado o establecimiento minorista.
Las muestras que se toman como consecuencia de

reclamaciones de clientes, observaciones de la inspección o
cualquier otro motivo, se suelen “seleccionar”, es decir, se
eligen de forma que ofrezcan la mejor oportunidad de
confirmar determinados hechos conocidos.
Toma de muestras objetiva
La toma de muestras objetiva es bastante directa, ya que

suele haber indicios u otra información que conduzca a las
unidades de alimentos seleccionados para la muestra.
Por su parte, la toma de muestras objetiva puede resultar

complicada, ya que es difícil proceder con objetividad cuando
se trata de determinar la auténtica calidad de un lote
determinado de alimentos no homogéneos. El inspector se
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preguntará siempre si la muestra recogida fue demasiado
pequeña, o excesivamente grande, y si la selección se hizo
realmente al azar.
2.8.1. Características de Muestreo
La toma de muestra debe realizarse por triplicado

homogéneamente bajo las siguientes recomendaciones:
a. Acondicionados
b. Precintados
c. Lacrados
d. Etiquetados
Además, debe indicarse los siguientes datos:
e. Su identidad de la muestra
f. Su contenido
g. Su código
h. Su fecha de muestreo.
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2.8.2.Deposito de la Muestra
El depósito de las unidades Muestreadas se hará de la
siguiente forma:
c. Fabricantes (Empresa).
01 muestra quedará en poder del fabricante bajo deposito,

en unión de una copia del acta con la obligación de
conservarla en perfecto estado para su posterior
utilización en prueba contradictoria si es necesario.
Las otras dos muestras quedarán en poder de la

inspección.
d.Distribuidores del Producto.

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CAPITULO III
3.1.PROTOCOLOS BROMATOLÓGICOS
GENERALES EN LOS ALIMENTOS
La evaluaciuón básica de los sistemas alimenticios como materias

primas o Productos Alimentarios Intermediarios(PAI), no sólo
comprende la determinación de sus principales analitas o
principios inmediatos(proteínas, grasas, carbohidratos, cenizas),
sino también se tiene que evaluar la determinación de magnitudes
físicas generales. Los métodos aplicables son los químicos y los
físico-químicos, electrométricos, gravimétricos, volumétricos,
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instrumentales.
Dentro de las evaluaciones generales de los sistemas alimenticios

se encuentran parámetros reproducibles como la determinación de
la densidad o gravedad específica, contenido de agua, materia
seca, ceniza, fibra bruta y fibra dietária.
3.2.Densidad
La densidad o masa específica de una sustancia se define como

la masa de su unidad de volumen(g/mL) y se determina por
pesada. La magnitud de la densidad depende de la temperatura
y de la presión. Aunque la temperatura debe especificarse junto
con la densidad, la presión no es necesaria en el caso de
líquidos y sólidos porque son prácticamente incompresibles.
para que la determinación sea precisa habrá de corregirse el
error debido a la presión del aire o en caso contrario la pesada
deberá realizarse en condiciones de vacío(Matissek, etal, 1998).
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3.3. Protocolo para la determinación Picnométrica de la

Densidad Relativa en Sistemas Alimentos
Aplicaciones
Bebidas
Zumos de frutas
Vino, cerveza, bebidas alcohólicas, analcohólicas
Procedimiento
Aparatos y materiales
- Baño maría con termostato
- Picnómetro de 50 mL con su tapón correspondiente
- Embudo picnométrico
- Capilares de vidrio
- Rollos de papel de filtro
Reactivos
- Agua destilada desgasificada
- Acido cromosulfúrico(para limpiar el picnómetro)
Preparación de la Muestra
Los zumos turbios debe agitarse enérgicamente, de forma que el
sedimento existente se reparta de manera homogenea. En el caso
de bebidas carbonatadas, como por ejemplo la cerveza, se añaden
300 a 500 mL de muestra a un matraz de fondo plano de 1 000mL
que se cierra y se agita durante el tiempo necesario para eliminar
la sobrepresión, lo que se realiza abriéndolo de vez en cuando. A
continuación, la muestra se pasa por un filtro de pliegues
Determinación.
a. Masa del Picnómetro Vacío
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El picnómetro limpiado con ácido cromosulfúrico se lava varias
veces con agua destilada y se seca cuidadosamente a
temperatura ambiente(Si se calienta mucho, el volumen del
picnómetro se verá alterado, lo que debe evitarse a toda
costa).
b. Después de poner el tapón marcado se deja reposar durante
15 minutos en la caja de la balanza y después se pesa con
cuatro cifras decimales. Hay que realizar la medida de tres
determinaciones.
c. Masa del picnómetro lleno de agua

c.1. Se llena el mismo picnómetro un poco por encima del
enrrase con agua destilada recién hervida, se tapa y se
deja durante 30 minutos en un baño maría de agua a
20°C.
c.2. Con ayuda de un capilar se enrasa exactamente, es

decir, se hace coincidir el borde inferior del menisco o
superficie curvada del líquido con el enrase.
c.3. A continuación, la parte vacía del picnómetro se seca de
cualquier resto de agua con papel filtro, se coloca el
tapón y después de sacarlo del baño maría se seca bien
con un paño suave que no deje pelusas, se coloca en la
caja de la balanza durante 30 minutos y se pesa con una
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precisión de cuatro cifras decimales. Debe realizarse la

medida de tres determinaciones.
d. Masa del picnómetro lleno de la muestra
d.1. El picnómetro lleno(ver c) se vacía y se lava
cuidadosamente varias veces con pequeñas fracciones
de la muestra problema(de 5 a 10 mL). Después de
llenarlo con la sustancia problema ligeramente por
encima del enrase, se sigue lo indicado en c.
Cálculos
La densidad relativa d 20/20 de la muestra se calcula en base a la
siguiente relación:
d 20/20 = m3 - m1 / m2 - m1
Donde: m1 Masa en g de picnómetro vacío

m2 Masa en g del picnómetro lleno de agua a 20 1C
m3 Masa en g del picnómetro lleno de la muestra
problema a 20ºC.
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3.4. Determinación de la Materia Seca

(Sustancia Seca)
Se entiende por materia seca o sustancia seca de un sistema
alimenticio a la suma de todos ls componentes no volátiles del
mismo. Se incluye aquí fundamentalmente lípidos, carbohidratos,
proteínas y cenizas. La materia seca o sustancia seca se
determina generalmente por secado de la muestra y pesada del
residuo o por medida de la refracción o de la densidad.
La diferencia entre el contenido en sustancia seca y el 100% se

denomina, no muy correctamente, contenido en agua. La
determinación de la pérdida de humedad por medio de la elevación
de la temperatura, eventualmente con utilización complementaria
de vacío, es el método más antiguo para obtener el contenido en
sustancia seca o el "contenido en agua" de un alimento(Matissek,
Schnepel y Steiner; 1998).
No obstante, antes de utilizar este proce dimiento deben estimarse

las posibilidades de error y tener en cuenta los casos en que se
puede aplicar. Por ejemplo, las sustancias volátiles como el ácido
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carbónico, los alcoholes, los aceites etéreos conducen a valores

de contenido en agua más elevados. Ademas más, el agua se
forma también a través de reacciones químicas(por ej.., las
reacciones de Maillard), que se determinará a la vez y que
conducirá a un contenido acuoso mayor.. Este método sólo será
aplicable poor tanto en el caso de alimentos que no sufran ninguna
transformación duarnte el secado térmico. Por ello, es más exacto
hablar de "residuo seco", "Sustancia seca" , "peso seco" o "Materia
seca"(Steiner, etal., 1998).
3.5. Protocolo para la determinación

Gravimétrica de la Materia Seca o Sustancia
Seca.
Aplicaciones
- Alimentos en General
Fundamento
La muestra se seca directamente, o tras triturarla con arena de mar,

en una estufa desecadora normalmente a 103 " 2 1C de
temperatura(si se utiliza vacío basta con unos 70 1C) hasta pesada
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constante, calculándose el residuo poor diferencia de peso.
Procedimiento
Aparatos y Materiales
- Estufa desecadora (con vacío)
- Pesasustancias hasta de 30 mm de altura, 50 mm de diámetro,
con tapa
- Cápsulas de vidrio/porcelana/aluminio de 60-80 mm de diámetro
- Arena de mar lavada y calcinada(si es necesario)
Determinación
a. Secado directo
a.1. La desecación variará dependiendo del tipo de material
alimenticio y del tamaño de los fragmentos(entre 3 a 6
horas), aunque en cualquier caso debe continuarse
hasta pesada constante.
a.2. Por lo general, dependiendo de la pérdida de peso

esperada(o del contenido en agua) y de la
homogeneidad del material, se pesan exactamente de 1
a 10 g de muestra en un vidrio de pesada y se secan
durante 3 horas en la estufa a 103º ± 2ºC.
En el caso de los cereales y productos de molienda(por

ej., harinas) se pesan exactamente unos 5 g de muestra
y se desecan durante 1,5 horas a 130 1C. Se dejan
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enfriar en una campana desecadora y se determina por

pesada la pérdida por desecación.
b. Pesada a vacío(Desecación al vacío)
Los alimentos ricos en azúcares y grasa(por ej., queso, miel)
para evitar reacciones secundarias causadas por el
calentamiento por encima de 100 1C, se secan a presión
reducida(al vacío) y a temperaturas más bajas(inferiores 70
1C) en una estufa a la que se aplica vacío. Para que la muestra
no se compacte se mezcla con arena de mar.
c. Secado tras trituración con arena de mar(Método de la arena
de mar) En el caso de muestras difíciles de secar, en cuya
superficie se formauna costra(ej., productos cárnicos, jarabes,
productos lácteos, quesoo y similares), es necesario triturar el
material con arena de mar para descompactarlo.
Para ello, se llena el vidrio de pesada con unos 10 a 30 g de

arena de mar y una pequeña varilla de vidrio, se seca en una
estufa a 103 " 2 1C y finalmente se enfría en un desecador y se
pesa(peso en vacío). Después de pesar exactamente 1-10 g de
muestra, ésta se mezcla homogeneamente con ayuda de la
varilla de vidrio. Hay que tener cuidado de que no salte ningún
gránulo. Tras su secado hasta pesada constante(unas 2 a 3
horas), se enfría en la campana desecadora y se pesa.
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Cálculos
La expresión del contenido de sustancia seca o materia seca(SS)
expresado como porcentaje se calcula en base a la siguiente
ecuación:
% SS = ( m3 - m1 / m2 - m1 ) . 100
Donde: m1 Peso en vacío del vidrio o pesasustancias(en

caso necesario con arena de mar seca y varilla
de vidrio)
m2 Peso de la cápsula o pesasustancias(en caso
necesario con arena de mar seca y varilla de
vidrio) más la muestra antes del secado en g.
m3 Masa de la cápsula o pesasustancias(en caso
necesario con arena de mar seca y varilla de
vidrio) en g más la muestra después del secado.
(m2 - m1 ) = Peso de la muestra
El "contenido de agua", expresado como porcentaje, H2O de la

muestra se calcula según la ecuación siguiente:
% H2O = 100% - % SS
3.5.1. Protocolo para Determinación

Refractométrica de la Sustancia seca o
Materia Seca.
Aplicaciones
- Miel
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- Crema de azúcar invertido("miel artificial")
El índice de refracción n se puede utilizar para la

identificación de sustancias líquidas puras y para la
caracterización de muestras alimenticias. Se determina por
medio de un refractómetro.
Fundamento
El índice de refracción de una muestra alimenticia líquida o
en su caso fundida se mide a 40 ºC y a partir de allí se
calcula el porcentaje de sustancia seca o materia seca.
Procedimiento
- Refractómetro de Abbé con termostato
- Pesasustancias
- Varilla de vidrio
Preparación de la Muestra
La miel candi debe fluidificarse antes de la medida. Para ello
se coloca en un pesasustancias cerrado dentro de una
estufa a 50ºC y se enfría antes de abrir.
Determinación
Se coloca cuidadosamente una gota de muestra, fluidificada
en su caso, con la varilla de vidrio formando una fina capa en
el par de prismas abatible del refractómetro calentando a
40ºC y se cierra éste rápidamente para disminuir la
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evaporación del agua. Al cabo de un minuto a 40 ºC se mide

el ángulo límite y se lee el ángulo de refracción n. (Nota: La
calibración del refractómetro se lleva a cabo con agua
destilada a 40 ºC( n40D = 1,3307).
Calculos
Para calcular la sustancia seca SS o materia seca resultan
válidas las siguientes fórmulas empíricas:
a) Para la Miel pura de abeja
% SS = 78,0 + 390,7 . (n - 1,4768)

b) Para la "Miel Artificial", más exactamente "crema de
azúcar invertido"
% SS = 78,0 + 378,0 . (n - 1,4756)
3.6. Determinación de Cenizas

El concepto de residuo de incineración o de cenizas se refiere al
residuo que queda tras la combustión(incineración) completa de
los componentes orgánicos de un alimento en unas condiciones
determinadas.. Una vez que se eliminan otras posibles impurezas
y partículas de carbono procedentes de una combustión
incompleta, este residuo se corresponde con el contenido en
minerales del sistema alimenticio(Matissek, Schnepel, y Steiner;
1998).
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La determinación de las cenizas proporciona un índice que se
utiliza junto con otros para caracterizar y evaluar la calidad del
sistema alimenticio. Así pr ejemplo, permite distinguir, entre otros,
los distintos tipos de harina de cereales según su contenido en
cenizas. Otra aplicación es el análisis de loos zumos de frutas a
través de la determinación de la alcalinidad de las cenizas, en la
que se determinan por separado los componentes alcalinos de las
cenizas, tales como carbonatos y óxidos.
Se diferencia la incineración seca(combustión) de la

húmeda(mineralización).. Para la determinación de metales
volátiles(por ej., mercurio) o de determinados no metales la más
adecuada es la incineración seca. La incineración húmeda se lleva
a cabo con una mezcla ácida o se realiza la mineralización por
fusión con álcali.
En la Incineración seca la temperatura debe ser de unos 550 ºC,

porque al sobrepasarse loos 600 ºC se producen pérdidas de
cloruros alcalinos(como cloruro de sodio). Excepción, las ceniz<as
de harinas se obtienen a temperaturas superiores(900 ºC).
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3.6.1. DETERMINACIÓN E INVESTIGACIÓN DEL RESIDUO DE

INCINERACIÓN POR INCINERACIÓN DIRECTA(Contenido
de Cenizas)
Aplicaciones
- Alimentos en general
Introducción
El residuo por incineración directa de una muestra de
alimento puede contener, además de las sustancias
minerales del alimento, partículas de carbón procedentes de
una combustión incompleta, o también impurezas del
alimento(arena, arcilla); por ello este residuo se denomina
también « ceniza bruta», o mejor «residuo de incineración».
La «ceniza límpia» es la diferencia entre la ceniza bruta y el
contenido en carbón e impurezas.
Fundamento
Se calcina/incinera la muestra(en caso necesario tras su
desecación) a 550ºC en la mufla y se calcula el residuo de
incineración por diferencia de peso.
Procedimiento
- Horno Mufla
- Evaporador de superficie(lámpara infrarroja)
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- Crisol de platino o de cuarzo

- Varilla de vidrio
- Papel de filtro libre de cenizas
Reactivos
- Disolución de peróxido de hidrógeno al 30%.
Determinación
a. Se calcina el crisol vacío y limpio en el mechero Bunsen,
se enfría al aire, se coloca en un desecador y finalmente
se pesa.
b. La pesada de la muestra se realiza de acuerdo con la
cantidad de ceniza esperada: ésta deberá ser al menos
de 0,5g.
Las muestras sólidas se utilizan directamente, pero las

muestras líquidas y pastosas deben secarse antes en el
evaporador de superficie. Debe tenerse cuidado de que la
formación de gas o de vapor de agua no arrastre ninguna
partícula del crisol. Para disgregar las costras se emplea una
varilla de vidrio, que se limpiará a continuación de las
posibles partículas que hayan quedado adheridas con
trocitos de papel de filtro libre de cenizas. Estos trocitos de
papel se añaden al crisol y se incineran junto con la muestra.
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La muestra(desecada en su caso) se calienta moviendo el

crisol cuidadosamente sobre la llama opaca del mechero
Bunsen hasta que ya no se produzca hinchamiento. A
continuación, se coloca el crisol en el horno mufla a 550 ±
25ºC y se incinera durante 1-3 h hasta pesada constante, es
decir, hasta que la ceniza aparezca blanca.
Si la ceniza no se vuelve blanca, se enfría el crisol y se

humedece con unas gotas de agua destilada o de disolución
de peróxido de hidrógeno y las porciones carbonizadas se
aplastan con la varilla de vidrio. Esta se limpia como se
explicó más arriba.
A continuación se repiten la desecación y la incineración.

Finalmente se deja enfriar el crisol colocándolo sobre una
superficie refractária y se pesa después de un enfriamiento
en el desecador.
Cálculos
El Porcentaje de residuo de incineración(contenido de
cenizas)C se calcula como sigue:
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% C = ( m2 - m1 / P ) . 100
En donde m1 Masa en g del crisol vacío

m2 Masa en g del crisol con la muestra tras la
incineración.
P Peso de la muestra en g.
3.7.Determinación del Tipo de Harina de Cereal

Aplicaciones
- Harinas de cereal, cereales
Introducción
En los cereales, la mayor parte de los minerales se encuentran en
la cubierta del grano(un 50% frente al 0,4% del endospermo).
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Como el residuo de incineración(contenido en cenizas) representa

una medida del contenido en cáscara de la harina y en virtud de
ello de su grado de extracción, se utilizan para tipificar las harinas
de cereales. Cuanto mayor sea la extracción, mayor será la
cantidad de cáscara que se encuentre en la harina. El tipo de
harina se obtiene a partir del porcentaje de residuo de incineración
referido a sustancia seca multiplicado por un factor de
1.000(Matissek, Schnepel y Steiner, 1998).
Fundamento
La harina se carboniza primero en el mechero de Bunsen y a
continuación se incinera a 900ºC. El residuo de incineración se
obtiene por diferencia de pesada y se refiere a sustancia
seca(obtenida según 3.5).
Procedimiento
- Ver 3.6.1.
Reactivos
- Etanol 95(vol)
- Nitrato amónico
Determinación
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a. El crisol vacío y limpio se calcina a la llama del mechero
Bunsen, se enfría al aire y se coloca en un desacador para su
enfriamiento definitivo, pesándose a continuación con cuatro
cifras decimales.
b. Se pesan hasta la cuarta cifra decimal unos 5 g de
harina(molienda) cuidadosamente mezclada, se humedecen
con 1-2 mL de etanol(para evitar que se levante polvo, con la
consiguiente pérdida de sustancias) y se coloca en la boca del
horno mufla calentando a 900±10ºC. Una vez que la harina se
ha quemado o carbonizado con una llama viva, el matraz se
empuja dentro de la mufla y se calcina durante 60-90min.
c. La incineración se considera terminada cuando el residuo
aparezca completamente blanco. Si todavía se pueden
apreciar partículas negras de sustancias sin incinerar, el
residuo se humedece y se procede como se describe en en
3.6.1. En lugar de ello, se puede añadir al residuo una vez
enfriado un poco de nitrato amónico(que se descompone
térmicamente) y se sigue incinerando.
d. Una vez terminada la incineración, se deja enfriar el crisol

colocádolo en una superficie que no se queme y, tras su
enfriamiento definitivo en el desecador, se pesa hasta la cuarta
cifra decimal. La pesada debe realizarse lo más rápidamente
posible debido a la higroscopisidad del residuo.
Cálculos
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CALCULOS
El residuo de incineración(contenido en cenizas) de la harina

secada al aire se calcula con la ecuación que se indica bajo el
epígrafe 3.6.1.
El tipo de harina H se calcula a partir del residuo de incineración C

de acuerdo con la siguiente igualdad y se refiere a sustancia seca:
C . 100
H = ________________. 1.000
( 100 - A)
Siendo C % de residuo de incineración

A % en agua de la muestra
3.8. CONTENIDO EN FIBRA BRUTA Y

DIETÉTICA
Se denomina fibra dietética a aquellos componentes de hojas,

frutos o raices dificiles o imposibles de utilizar por el organismo
humano. Se trata sobre todo de compuestos vegetales, es decir,
compuestos poliméricos fibrosos(celulosas, hemicelulosas,
pectinas) y ligninas(polimeros de fenilpropano), y también
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lípidos(ceras, cutina) y en parte elementos traza en compuestos no

absorbibles(Matissek, et al., 1998).
Puesto que el organismo humano carece de un sistema enzimático

que degrade estos polímeros, la fibra dietética aparece inalterada
en el intestino grueso(colon) y ejerce una acción reguladora del
peristaltismo y por lo tanto de reabsorción de otros nutrientes que
sí son absorbibles.
Gracias a sus propiedades, la fibra dietética afecta también

favorablemente al metabolismo de los ácidos biliares porque se
une a las sales biliares aumentando así su eliminación. Al contrario
que la fibra dietética, la fibra bruta es un término que describe
exclusivamente una magnitud analítica.
3.8.1. Determinación de la Fibra Bruta Según

Scharrer - Kürschner
Aplicaciones
- Alimentos de origen vegetal
Introducción
El término de «fibra bruta»se aplica al residuo libre de
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cenizas que queda tras un determinado tratamiento de un

producto vegetal. En dicho tratamiento se utilizan lejías y
ácidos o también mezclas de estos últimos. La
composición de la fibra bruta depende sobre todo de la
capacidad del compuesto utilizado en el tratamiento para
disolver cada componente de la pared celular(celulosa,
pentosanos, pectinas, lignina). En el procedimiento de
Scharrer y Krschner que describimos aquí, la lignina se
solubiliza por oxidación o nitración, de manera que se
obtiene por lo general una fibra bruta sin lignina y con
pentosanos. Si se utilizara un tratamiento diferente, la
composición del residuo sería distinto. Por lo general, el
contenido de fibra bruta no constituye un índice absoluto;
sirve más bien como indicación de la cantidad de
compuestos no aprovechables por el organismo que
existe en un alimento, por ejemplo comprobar el
porcentaje de cáscaras en derivados de cereales y en el
cacao.
En la práctica el contenido de fibra bruta se utiliza por

tanto fundamentalmente para evaluaciones de la
calidad(Matissek, Schnepel y Steiner; 1998).
Fundamento
El material a investigar una vez triturado y en su caso
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desengrasado, se trata con una mezcla ácida, se filtra, el

residuo se lava con etanol y éter, se seca y se pesa.
Después de incinerado, se resta el contenido en cenizas
del peso que se había obtenido.
Procedimiento
- ver 3.6.1.; además:
- Refrigerante a reflujo con esmerilado.
- Probeta de 100 mL
- Matraz de fondo plano de 250 mL con esmerilado
- Embudo de vidrio y papel de filtro libre de cenizas o
crisol fritado(placa filtrante de vidrio o de cuarzo de
50mL), kitasato y bomba de vacío.
- Pesasustancias
- Papel indicador de pH
Reactivos
- Mezcla ácida: Disolver 25 g de ácido
tricloroacético en 500 mL de ácido acético 70%,
mezclar con 124 mL de ácido nítrico 65% y
completar hasta 1 L con ácido acético 70%
- Etanol 96%(vol)
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Eter etílico(intervalo de ebullición 34-35ºC)

Eter de petróleo(intervalo de ebullición 30-60ºC)
Determinación
a. Tratamiento Previo
Si la muestra tiene mucha grasa deberá
desengrasarse antes de pesarla lavándola 2-3
veces con éter de petróleo, que se elimina
decantando; el resto del disolvente se deja
evaporar.
b. Tratamiento
Pesada: depende del contenido de fibra bruta (3-
20g). La muestra se pesa exactamente, se pesa
al matraz de fondo plano y se mezcla con 80 mL
de mezcla ácida(primero se añaden sólo 60 mL,
se agita enérgicamente el matraz y se lava la
pared interior con los 20 mL restantes).
Se calienta a reflujo durante 30 min y a

continuación se enfría al aire primero después
bajo el agua corriente.
El papel libre de cenizas se seca durante 1 h a

103±2ºC, se enfría en el desecador y se pesa
exactamente. Dependiendo de la muestra, el
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contenido del matraz se pasa por el papel de

filtro previamente pesado o por un crisol filtrante
con ayuda de un kitasato y de vacío.
El matraz se enjuaga con agua caliente, con la

que deberá lavarse el papel de filtro libre de
ácidos(Control con papel pH); el Kitasato se
vacía varias veces, porque si no el ácido acético
muy volátil reduce el vacío y retarda el lavado.
A continuación, se lava el residuo tres veces con

10 mL de etanol y dos veces con 10 mL de éter
etílico. El papel de filtro con el residuo se pasa a
un crisol previamente pesado y se seca durante
1 h a 103± 2ºC, se enfría en el desecador y se
pesa exactamente.
c. Incineración
Después de una incineración preliminar, el papel
de filtro junto con el residuo se incinera durante 1
aprox. A 700ºC; finalmente se pesan las
cenizas(ver. 3.6.1.)
Cálculos
El porcentaje de fibra bruta F se calcula en
función a la siguiente relación:
( m1 - mf ) - m2
%F = ------------------------ . 100
M
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Donde:
m1 Peso tras el tratamiento, es decir, residuo + papel de
filtro en g.
mf Peso del papel de filtro seco en g(si se lleva a cabo en
ensayo en blanco de la nota, se utiliza como mf el
peso del papel de filtro tratado con los reactivos).
m2 Peso después de la incineración, es decir, peso de las
cenizas en g.
M Peso de la muestra en g.
El peso de fibra bruta(m1 - mf) debe estar entre 60 - 200 mg; en

caso contrario la determinación deberá repetirse con una cantidad
de muestra distinta más adecuada.
3.8.2. Determinación de la Fibra Dietética

Orgánica Insoluble
Aplicaciones
- Alimentos a base de Cereales.
Introducción
La fibra dietética orgánica insoluble corresponde al
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residuo libre de cenizas que queda después de un

tratamiento con una disolución detergente neutra y α-
amilasa. En cuanto el procedimiento, es análogo a la
determinación descrita en 3.8.1. para la fibra bruta. No
obstante, como las condiciones de trabajo son otras, el
residuo no tendrá la misma composición. En el
procedimiento que indicamos aquí no se obtiene fibra
dietética soluble como pectina, etc., sino sobre todo
celulosa, hemicelulosa insolubles y lignina.
Fundamento
La muestra se desmenuza, se desengrasa si es
necesario, se trata con disolución detergente neutra y
α-amilasa y se filtra. El residuo se seca y se incinera a
500 - 520ºC. El contenido en fibras dietética insoluble
se obtiene por diferencia de pesada antes y después
de la incineración.
Procedimiento
Aparatos y materiales
- Ver 3.8.1.
- Probeta de 1000 mL.
- Pipeta aforada de 10 mL.
Reactivos
- Disolución detergente Neutra
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- Disolución parcial A: se disuelven 6,8g de

tetraborato disódico 10-hidratado y 4,6g de
hidrógenofosfato disódico(anhidro) con 222mL de
agua destilada caliente y se mezcla con 19,7 g de
EDTA(sal disódica dihidratada del ácido
etilendiamino tetraacético).
- Disolución Parcial B: se disuelven 30,0g de
dodecilhidrogenosulfato sódico en 778 mL de agua
destilada.
Las disoluciones A y B se mezclan cuidadosamente
con 10 mL de monoetiléter. Al cabo de 24 h se
controla el pH y en caso necesario se ajusta a 6,9 -
7,1. (si se conservan a temperatura inferior a 20ºC,
el detergente precipita; se redisuelve calentando a
60ºC aprox.).
- Disolución de amilasa.
Se disuelven 2 g de α-amilasa(de Bacillus subtilis, de
50 a 100 U/mg) en 90 mL de agua destilada, se filtra
por un papel de filtro y se mezcla con 10 mL de
monoetiléter del etilenglicol(se conserva unas 4
semanas a 4ºC).
- Disolución de Yodo 0,05 mol/L
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- Acetona
- Eter de petróleo(intervalo de ebullición
Determinación
a) Tratamiento Previo
Ver 3.8.1.
b) Tratamiento
Se colocan en el matraz de fondo plano 0,5 g de
la muestra triturada y se mezclan con 50 mL de
disolución detergente, calentándose a reflujo
durante 30 min. A continuación, las paredes del
matraz se lavan con otros 50 mL de detergente
neutro para limpiar los posibles fragmentos de
fibra, utilizándose si es necesario una varilla
provista de una goma, y después de añadir 2 mL
de la disolución de amilasa se calienta a reflujo
durante 60 min.
Dependiendo del tipo de muestra, el contenido

del matraz se pasa por un papel de filtro libre de
cenizas previamente desecado y pesado o a
través de un crisol fritado desecado y
exactamente pesado.
El residuo se lava con agua destilada caliente

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hasta que el filtrado ya no haga espuma.

Después se deja reposar el residuo con 30 mL
de agua destilada a 80ºC y 2 mL de disolución
de amilasa(el tubo de salida del embudo se
cierra con un tapón) y finalmente se deja salir el
líquido. Si al añadir 1-2 gotas de la disolución de
yodo aparece sobre el residuo una coloración
azul violeta, la degradación del almidón todavía
no será completa: en este caso habrá que repetir
el experimento. El residuo se lava dos veces con
30 mL. de agua destilada hirviendo y tres con 15
mL de acetona. El crisol fritado o el papel de
filtro con el residuo se secan durante la noche a
103± 2ºC en un crisol previamente pesado, se
enfrían en un desecador hasta temperatura
ambiente y finalmente se pesan.
c. Incineración.
Después de una incineración preliminar del
residuo seco se lleva a cabo la incineración a
500 - 520ºC; a continuación se pesan las
cenizas(3.6.1.).
Calculos
El porcentaje de fibra dietética orgánica insoluble F se
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calcula con la siguiente relación:
( m1 - m2 )
%F = ----------------- . 100
M
Donde:
m1 Peso tras el tratamiento, es decir del residuo en el
papel de filtro o crisol fritado tras el secado.
m2 Peso después de la incineración, es decir, del residuo
en g
M Peso de la muestra en g
3.9. Métodos de Determinación del Contenido de

Grasa de los Alimentos.
La determinación cuantitativa del contenido graso de un alimento

se realiza por lo general por extracción con un disolvente lipófilo.
La grasa libre se determina por extracción directa, mientras que la
denominada grasa total incluye tanto la «grasa libre» como la
ligada y las sustancias acompañantes solubles en disolventes
orgánicos debido al tratamiento ácido empleado.
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3.9.1. Extracción Directa: Método Soxhlet
Aplicaciones
-Alimentos en general, aunque conexcepción de
aquéllos en los que la grasa está cubierta(por ej. En
los productos lácteos)
- Obtención de la fracción de grasa libre de la muestra
para su posterior caracterización
Fundamento
La muestra anhidra se extrae con éter dietílico y con
éter de petróleo y después se determina
gravimétricamente el extracto seco, del que se habrán
eliminado los disolventes.
Procedimiento
- Baño de agua(hasta punto de ebullición)
- Dispositivo de extracción de Soxhlet Con matraz de
250 mL y refrigerante de reflujo
- Cartuchos de extracción
- Guata(libre de grasa)
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- Perlas de vidrio
Reactivos
- Éter dietílico: intervalo de ebullición 34-35 ºC, libre de
peróxidos
- Éter de petróleo : Intervalo de ebullición 40-60 ºC
- Sulfato sódico anhidro
Determinación
a. Se pesan unos 5-10 g de muestra homogeneizada
con una precisión ± 1 mg, y en su caso desecada,
en un cartucho de extracción libre de grasa y se
coloca éste, tras ser cerrado con guata, en la pieza
media del dispositivo de extracción de Soxhlet.
El matraz de fondo plano secado a 103 ± 2 ºC,

exactamente pesado, provisto de las perlas de
vidrio se llena con una cantidad suficiente de
disolvente y se acopla al dispositivo. Durante la
extracción, que tiene lugar al baño maría y dura 4-6
horas, debe vaciarse regularmente el espacio de
extracción, es decir, la pieza media del dispositivo,
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a través del conducto ascendente(unos 20-30

vaciados).
b. Al finalizar la extracción se sigue destilando el

disolvente. Para ello puede utilizarse
directamente el dispositivo de Soxhlet: El
disolvente que se va condensando debe
recogerse en el recinto de extracción de tal
manera que la superficie del líquido no rebose el
nivel del conducto ascendente y desemboque en
parte en un recipiente de recogida. A
continuación el matraz se coloca durante una
hora en una estufa a 103 ± 2 ºC, con lo que se
eliminan del residuo los últimos restos de
disolvente. El matraz se pesa tras enfriarse en
un desecador.
Cálculos:
El porcentaje de grasa G se calcula de acuerdo con la
siguiente relación matemática:
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m2 - m1
%G = ----------------------------------- . 100
M
Donde:
m1 Masa en g del matraz redondo/de fondo plano(con
perlas de vidrio)
m2 Masa en g del matraz con grasa tras el secado
M peso de la muestra en g
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CAPITULO IV
Acidez en Sistemas Alimenticios
La acidez titulable indica el contenido total de ácidos presentes en la

muestra alimenticia y se expresa en porcentajes, generalmente en
función del ácido orgánico que predomina en el sistema, pro ej. En la
leche, se tiene el ácido láctico, en las naranjas el ácido cítrico, en las
manzanas el ácido málico, en las uvas el ácido tartárico.
4.1. Origen de los Ácidos Orgánicos en los Sistemas

Alimenticios
El primer paso para predecir la acidez en un sistema alimenticio
fresco o procesado consiste en identificar cuales son sus
principales constituyentes y sus proporciones relativas respecto al
agua contenida en dicho sistema alimenticio.
Tal como se muestra en la figura 6 podemos considerar que un

sistema alimenticio es una "mezcla" acuosa más o menos
homogénea(o heterogénea) de varios
Constituyentes(biopolímeros, azúcares, sales orgánicas e
inorgánicas, etc.) que pueden variar en cantidad y calidad en
función de factores tales como clima, suelo, variedad, condiciones
de procesamiento, etc.
LUIS ARTICA MALLQUI UNCP
El agua es por lejos el principal constituyente de los sistemas

alimenticios frescos constituyendo entre el 75-95% del peso de los
mismos. La acidez de los sistemas alimenticios está determinada
por la naturaleza y concentración de las especies químicas o
principios inmediatos.
Los sistemas alimenticios vegetales, como son las verduras y las

frutas, contienen cierto número de ácidos orgánicos, productos
metabólicos de las células. A continuación se presentan las
fórmulas para los ácidos orgánicos más importantes que
predominan en las mismas:
H — C — OH
Acido Fórmico(Metanoico)
PM = 46
BROMATOLOGÍA APLICADA 104
H
|
H — C — COOH
|
HO — C — COOH
|
H — C — COOH
|
H
ACIDO CÍTRICO
PM = 192 L(+)
(Frutas)
H
|
H — C — COOH
|
HO — C — COOH
|
H
Acido Málico (Hidroxisuccinico)
PM = 134 L(+)
(Manzana)
H
|
H — C — COOH
|
HO— C — COOH
|
OH
Ácido Tartárico(2,3-dihidroxisuccinico)
PM = 150 L(+)
(Uvas)
(butanodioldioco)
H
|
H — C — COOH
|
H — C — COOH
|
H
Acido Succínico(butandioico)
PM = 118
(Lechuga)
H
|
C — COOH
║
C — COOH
|
H
Acido Fumárico(butendioico)
PM = 116
(alomaleico, bolético)
H
|
H — C — COOH
|
C — COOH
║
C — COOH
|
H
Acido Aconítico(aquileico,citrídico)
PM = 174
(Vegetales)
COOH
|
H—C—H
|
H
Acido Acético (etanoico)
PM = 60
(Vinagre)
COOH
|
COOH
Acido Oxálico (etandioico)
PM = 90
(Espinaca, remolacha)
COOH
|
HO — C — H
|
H—C—H
|
H
Acido Láctico(2-hidroxi-propiónico)
PM = 90
La mayoría de los sistemas alimenticios contienen ácidos
orgánicos, los que pueden ser el producto de:
a. Presencia natural, inherente a la composición química del
sistema alimenticio.
b. Metabolismo de los microorganismos, los que pueden ser
agregados intencionalmente para producir ciertos efectos
deseables, como en la fermentación láctica, acética.
c. Adición Voluntaria, ya sea con fines de protección contra los

microorganismos indeseables durante el transporte, almacenaje
o procesamiento, como el ácido sórbico, benzoíco; para inhibir
reacciones bioquímicas como el empardeamiento enzimático;
para ajustar el alimento a los parámetros requeridos para su
procesamiento(mermeladas, néctares, etc.).
4.2. Métodos de Determinación

4.2.1. Por Titulación Con Alcalis
Con NaOH(0,1N) ó 0,5N en presencia de fenolftaleína
como indicador(8,3 - 10) o azul de bromotimol(6,0 -
7,6). El contenido de acidez en el sistema alimenticio
se expresa generalmente en función al ácido
predominante:
- mL de álcali 0,1N / 10 g de muestra
- % de Acidez
El procedimiento que se sigue para determinar la

acidez titulable en sistemas alimenticios, esta en
función a la naturaleza reológica del mismo. Alimentos
líquidos en alicuota; alimentos viscosos en dilución y
Alimentos sólidos, previa extracción de los ácidos
mediante la molienda, trituración, centrifugación y
filtración.
4.2.2. Etapas de la Determinación de la Acidez

Titulable.
a) Preparación de la Muestra
Acondicionar la Muestra, si es sólida, TRITURAR.
b) Extracción de los Acidos

Cuando son materiales alimenticios bajos en
lípidos, los ácidos se extraen con agua destilada
libre de CO2
Cuando son materiales alimenticios altos en

lípidos, se extrae con una solución de etanol 90°
neutralizada con NaOH, la muestra se filtra luego
centrifuga.
c) Titulación
Luego de centrifugar la muestra, se toma una
alicuota a la que se agrega 2 a 3 gotas de
fenolftaleína y se titula con NaOH 0,1N.
c) Cálculos:
G . N . Meq
%Acidez = ------------------------ x 100
M
Donde: G = Gasto del álcali en la titulación de la muestra.

N = Normalidad del álcali M = g o mL en la Alicuota
Meq = Mili equivalente en gramos del ácido predominante
4.2.3. Titulación Potenciométrica

El principio se basa que durante la titulación se alcanza el
pH de 8,2 - 8,3 y a este pH se determina con el proceso de
titulación, anotándose el gasto de la titulación.
4.3. Factores que Afectan La Determinación de la

Acidez Titulable
a. Presencia de CO2
- Altera los resultados de la titulación
- NaOH + CO2 = CO3Na2
- Se recomienda usar agua destilada libre de CO2 .
b. Presencia de Compuestos Oscuros

Dificulta apreciar el cambio de color a rosado. Se
recomienda en estos casos diluir la muestra hasta obtener
un color menos oscuro o decolorar con carbón activado al
1%. Si es muy difícil aclarar la muestra, es mejor determinar
con etanol 90°, neutralizando con NaOH.
C. Presencia de Grasa
Los Lípidos dificulta, Extraer con alcohol o neutralizar con NaOH
d. Reacciones de Oscurecimiento Enzimático.

Naturaleza de la muestra. Tratar la muestra con bisulfito de sodio.
e. Pureza del Álcali.

Valorar el álcali con un patrón conocido.
CAPITULO V
pH ó ACIDEZ REAL DE SISTEMAS

ALIMENTICIOS
El Término pH fue introducido en 1909 por Sorensen, quién definió como

el logaritmo(Log) negativo de la concentración de iones hidrógeno:
pH = - log [H+]
pH = log (Actividad H+)
Los Ácidos son : Donadores de Protones
Las Bases son : Aceptores de protones
Las Diferencias entre:
Ácido Fuerte : HCl, H2SO4 ; que disocian completamente aún en soluciones

muy ácidas(pH bajo).
Ácido Débil : Que se disocian sólo de manera parcial en soluciones
ácidas.
Bases Fuerte : KOH, NaOH; se disocian a pH alto.
Bases débiles : Ca(OH)2

Oxidación : Se define como la pérdida de electrones.
Reducción : Se define como la ganancia de electrones.
Ejercicio de Aplicación:
1). Cual es el pH de una solución cuya concentración de ion
Hidrógeno es de 3,2 x 10-4 mol/L.
pH = - log(H+)
= - log (3,2 x 10-4 )
= - log (3,2) – log(10-4)
= - 0,5 + 4
pH = 3,5
2). Cual es el pH de una solución cuya concentración de ión oxidrilo
es 4,0 x 10-4 mol/L.
Para abordar este problema que define, una cantidad pOH, hay
que recordar que este es igual a – log(OH-) y que puede desviarse
de la definición de Kw.
Disociación del H2O

H2 O H+ + OH-
Las moléculas de agua tienen tendencia limitada a la

disociación(ionización) en iones de H+ y OH- , ya que los iones se
recombinan de manera continua para formar moléculas de agua.
En un instante están como ION; un momento después como parte de

una molécula.
1 gramo de agua contiene 3,46 x 1022 ,moléculas, su ionización
puede describirse por estadística.
La probabilidad de que un Hidrógeno exista como ION es de 0,01

significa que un átomo de hidrógeno tiene una oportunidad en 100 de
estar como ION y 99 posibilidades en 100 de estar como parte de una
molécula de agua.
La probabilidad real de que un átomo de hidrógeno en agua pura exista

como ION hidrógeno es alrededor de:
0,0000000018 ó 1,8 x 10-9 .
En Consecuencia, la probabilidad de estar como parte de una molécula

es casi la unidad.
Definido de otra manera, por cada ION hidrógeno y cada ION Oxidrilo en
agua pura hay:
1,8 billones ó 1,8 x 10-9 moléculas de agua.

La tendencia del agua a disociarse se expresa como sigue:
[ H +][OH -]
K = --------------------------
[H2O]
Donde: [ H +][OH -]; = Concentraciones molares de iones hidrógeno

y oxidrilo .
[H2O] = Concentración molar de agua sin disociación.

K = Constante de disociación.
Para calcular la constante de disociación del agua, se sabe que:
1mol de agua pesa = 18 g
Por lo tanto:
1 litro de agua = 1000g

Entonces : 1 Litro de agua contiene:
1000 ÷ 18 = 55,56 moles.
Por lo tanto: el agua pura es 55,56 molar.

Por otro lado, ya que la probabilidad de que un hidrógeno en agua pura

exista como ION H + es de 1,8 x 10-9, la concentración molar de iones H
ó OH en agua pura, se calcula multiplicando la probabilidad por la
concentración molar:
Por lo tanto:
[ H +] = 1,8 x 10 –9 x 55,56 mol/L
[ H +] = 1 x 10 -7
[OH -]= 1,8 x 10 –9 x 55,56 mol/L
[OH -]= 1 x 10 –7
Ahora puede calcularse la K para el agua:
[ H +][OH -]
K = --------------------------
[H2O]
[ 10 -7] [10 -7]

K = --------------------------
[55,56]
Entonces la constante de disociación del agua pura, ó constante de

autoprotólisis es:
K = 0,018 x 10 14 = 1,8 x 10 –16 mol/L

Una vez calculado la constante K de disociación del agua pura, se crea

una nueva constante de Kw que se denomina PRODUCTO IONICO DEL
AGUA, y la relación es la siguiente:
[ H +][OH -]
K = ------------------ = 1,8 x 10 –16 mol/L ....(1)
[H2O]
de (1) se tiene:
K x [H2O] = [ H +][OH -]
Kw = K x [H2O] = [ H +][OH -]
Kw = (1,8 x 10 –16 mol/L) (55,56mol/L)
El Producto IONICO del agua será:
Kw = 1 x 10 –14 (mol/L)2
Nótese que las dimensiones de K son Moles / litro y de Kw moles / litro.

Como su nombre sugiere, el producto iónico, Kw , es en cifras igual al
producto de las concentraciones molares de H+ y OH-
Kw = [ H +] [OH -]
A 25°C, Kw = (10 –7)2 = 10 –14 (moles / litro)2. A temperaturas menores a

25°C, Kw es menor de 10 –14 y a temperaturas superiores a 25°C, Kw es
mayor de 10 –14 .
La Solución del ejercicio 2:
Kw = [ H +][OH -] = 10 –14
Log [H +] + Log[OH -] = 10 –14
Entonces : pH + + pOH- = 14
Luego resolviendo el problema bajo este enfoque:

[OH -] = 4,0 x 10 – 4
pOH - = - log (OH –)
p[OH -] = - log(4,0 x 10 – 4)
p[OH -] = - log(4,0) – log(10 – 4)

p[OH -] = - 0,60 + 4
p[OH -] = 3,4
Ahora : pH = 14 – pOH = 14 – 3,40
pH = 10,6
5.1. PRINCIPIO DE LA DETERMINACIÓN DEL pH
"DIFERENCIA DE POTENCIAL ELÉCTRICO QUE SE

ESTABLECE ENTRE EL INTERIOR DE LA SOLUCIÓN EN
ESTUDIO Y DEL ELECTRODO, COMO CONSECUENCIA DE LA
POLARIZACIÓN O EL INTERCAMBIO QUÍMICO"
" El pH-metro mide en realidad una diferencia de potencial entre el

llamado "ELECTRODO DE REFERENCIA" y un "ELECTRODO
DE VIDRIO".
El electrodo de vidrio consiste en esencia en una membrana

SELECTIVAMENTE PERMEABLE a los hidrogeniones.
La diferencia de potencial que se establece entre dos electrodos

corresponde a la conocida fórmula de Nernst:
2,3 RT
∆V ≈ - -------------- ∆ pH
F
ó
[ H +]1
E = 2,3 RT/ F . Log ------------ ..............(1)
[ H +]2
Donde:
∆V = Diferencia de Potencial
(Electrodo - Disolución)
R = Constante Universal de gases
(8,3 J/K x mol
T = Temperatura (K)
F = Constante de Faraday(86 500 Cul/mol)
∆ pH = Diferencia de pH(electrodo-Disolución)
En condiciones Normales:
2,3 RT/ F ~ - 0,06 ,
cuando ∆V viene dado en voltios, y por lo tanto,
∆V ~ - 0,06 . ∆ pH
Esta proporcionalidad permite que la escala del voltímetro esté

calibrada directamente en UNIDADES DE PH. Sin embargo, se
debe tomar en cuenta que existen por lo menos otros TRES
potenciales presentes en el circuito:
a) El potencial de asimetría de la membrana
b) Los potenciales de unión de cada electrodo de referencia y
la solución analítica.
c) El potencial del electrodo Ag – AgCl presente dentro del electrodo de
vidrio.
Estos potenciales y los del electrodo de calomel son relativamente

independientes del pH y de la fuerza Iónica(dentro del rango
normalmente usado) y allí pueden considerarse como constante.
Por lo tanto cuando se mide el voltaje puede considerarse como la
diferencia entre los potenciales fijos y los del electrodo de vidrio.
[ H +]1
E = Efijo - 2,3 RT/ F . Log ------------ ..............(2)
[ H +]2
Debido a que el electrodo de vidrio esta normalmente con 0,1M de

HCl, luego [ H +]1 = 10 –1 y teniendo en cuenta que:
PH = - Log [ H +]
Se tiene:
V = Efijo - 2,3 RT/ F - 2,3 RT/F. pH
V= Constante - 2,3 RT/F. pH ..........(3)
Por consiguiente el voltaje que se genera está relacionado de

forma lineal con el pH de la disolución.
PHo = pH del Electrodo de referencia

PHd = pH de la Disolución Problema
ESQUEMA DE UN ELECTRODO COMBINADO

Tapón
(KCl)
Electrodo Solución
De Referencia Electrolito del
(Hilo de Ag) Electrodo de
Referencia
Diafragma
AgCl
Membrana de Electrodo
Vidrio Interno
5.2. FACTORES QUE INFLUYEN
a) Temperatura
a‹ Tº › pH (frío)
a› Tº ‹ pH (Caliente)
b) Concentración del KCl (3M)
c) Solución Buffer de Calibración
5.3. USOS Y APLICACIONES

Medición del pH
1. Control Durante el Procesamiento
2. El tipo de tratamiento térmico a aplicar(pasteurización ó

esterilización).
3. Detectar Corrosión en Envases

4. Estabilidad del Alimento.
5. Fraude o Adulteración.
CAPITULO VI
6.1. PREPARACIÓN DE SOLUCIONES

En el laboratorio de control de calidad a nivel de planta es necesario contar con
soluciones normales, molares, molales, porcentuales, partes por millón y partes por
billón adecuadamente valoradas con el objeto de que una determinada evaluación
química o física cuantitativo sea lo más preciso y se aproxime a los valores reales
establecidos.
Considerando que el sistema alimenticio es una materia prima altamente perecible,

los factores controlables como son la acidez total, % de grasa, % ST., SNG, azúcares
etc., debe ser estrictamente determinados a nivel de laboratorio por lo que es muy
importante contar con soluciones cuidadosamente valoradas o factoradas, para que
de esta forma la calidad final del producto lácteo presente "cero defectos" y la calidad
en el mercado permanezca constante.
En mérito a lo indicado, presentamos el procedimiento de la preparación de algunas

soluciones principales que se emplean en el análisis de los alimentos y a la vez el
proceso de valoración de las mismos:
1. Solución de NaOH para la Determinación de la acidez en Soxhlet (°SH ) de

leche y derivados.
Considerando que:
1 N ────> 1 equivalente ──────> 1 Litro de solución
1 N ────> 40 g ────── > 1 Litro de solución
1/4N ─── > X ────── > 1 Litro de solución
X = 10 gramos de NaOH / 1 Litro .
Por lo tanto para preparar un litro de solución 1/4N de NaOH, es necesario pesar
10 gramos de Hidróxido de sodio; el pesado debe efectuarse cuidadosamente,
evitando de que el tiempo de pesado sea lo más rápidamente ya que la soda es
altamente higroscópica; se recomienda pesar en un beaker de 10 mL. para que
inmediatamente se le agregue agua en la misma y luego introducir a la fiola para
su aforo.
2. Solución de NaOH al 0,1N.

De la misma forma se plantea la ecuación y se efectúa el calculo:
1N ────> 40 g ────> 1 litro de solución

0.1N ────> X ────> 1 litro de solución
X = 4,0 gramos / 1 Litro.
3. Solución de NaOH al 1/9 Normal para Acidez Dornic.

1N ─────> 40 g ────> 1 Litro de solución
1/9N────> X ────> 1 Litro de solución
X = 4,444 gramos/1Litro
4. Solución de NaOH 1/7N Para Determinar el Índice Proteico

1N ────> 40 g ────> 1 Litro de solución
1/7N ───> X ────> 1 Litro de solución
X = 5,714 gramos/ 1 Litro.

Una vez preparada la solución de soda para cada normalidad se realiza la
normalización de las mismas; por ejemplo vamos factorar la solución de NaOH
1/4N; para tal efecto utilizaremos Una solución patrón de HCl al 0,1N:
Primeramente calculamos el gasto teórico, mediante la ecuación estequiométrica:
NaOH + HCl NaCl + H2 0
Esta reacción estequiométrica de neutralización se produce según:
1 Mol NaOH(0.1N) debe ser neutralizado con 1 mol HCl al 0.1N; por lo tanto
según la ecuación:
V1 N1 = V2 N2
Para valorar se toma arbitrariamente 10 mL de NaOH al 1/4N, y será valorado con
V2 de HCl al 0.1N : 10 mL x 1/4N = V2 x 0.1N
V2 = 25 mL. (Gasto teórico).
Por lo que decimos que para neutralizar 10 mL de NaOH al 1/4N se debe utilizar
25 mL de HCl al 0.1N. Ahora en la titulación propiamente dicho determinamos el
gasto práctico:
Como ejemplo hemos obtenido un gasto de 25,6 mL.. Concluida la titulación
recurrimos a la expresión del Factor de Valoración:
GASTO PRACTICO
F = -----------------------------------
GASTO TEÓRICO
F = 25,6 / 25,0 = 1,024
Por lo tanto podemos indicar que considerando el factor 1,024; implica que es
necesario agregar 24 mL. de agua destilada por cada 1000 mL. de disolución de
NaOH 1/4N, luego nuevamente se valora hasta que el gasto práctico sea igual a
25 mL. Generalmente la valoración se debe realizar con 3 repeticiones.
5. Solución De Electrodo del pH-metro; 3M de Cloruro de potasio

Conociendo la masa molecular del KCl que es igual a 74,555 g/mol, por lo que se
tiene la siguiente relación:
1 M ─────> 1 PM ────> 1 Litro de solución
3 M ─────> x ────> 1 Litro de solución
x = 223,665 gramos/1 litro.
6. Solución de Fenolftaleína en alcohol al 1% para grados Dornic:

1 Sol. Porcentual = Es el número de % en gramos ──> 100 mL.
Pesar 1 gramo de fenolftaleína, el cual se diluye a 100 mL en alcohol etílico al
96°.
7. Solución de Fenolftaleína en alcohol al 2% para Soxhlet-Henkel (°SH). Pesar

2 gramos de fenolftaleína, luego llevar a una fiola de 100 mL. con alcohol etílico
de 96°o 95°.
8. Solución de Oxalato de Potasio al 28% para determinar el Índice Proteico.

Considerando que ésta es una sal, se pesa 140 gramos de oxalato de potasio,
luego aforar en una fiola a 500 mL. con agua destilada.
9. Solución Standard de KCl al 10% para sumergirlos y conservar electrodos

del pH-Metro.
Pesar 50 gramos de KCL , y luego llevar a una fiola, aforar con agua destilada a
500 mL.
10. Solución de Sulfato de Cobalto Para Solución Patrón de Titulación

Esta solución patrón de color rosado pálido Standard se prepara pesando 12,5
gramos de CoSO4 .7H2 O, el cual se afora en una fiola a 250 mL. con agua
destilada.
11. Solución Fisiológica.

Esta solución consiste en preparar una disolución de NaCl QP. al 0,85%, lo que
implica que se debe pesar 8,5 gramos de NaCl, el cual se lleva a una fiola y se
afora con agua destilada a 1000 mL.
12. Solución de Anaranjado de Metilo.

Esta solución al 1% , para la cual se pesa 0,1 gramos, luego se lleva a una fiola
y se afora a 100 mL. con agua destilada.
13. Solución de H2 SO4 Para la Determinación de Grasa según Gerber.

Este tipo de soluciones son las denominadas, soluciones diluidas, para la cual es
necesario conocer ciertas características de pureza de la sustancia, como es el
porcentaje de pureza, densidad y utilizando el principio del cuadrado de Pearson se
calcula las cantidades a utilizar. Por ejemplo el ácido sulfúrico químicamente
puro, presenta una densidad de 1,84 lo que corresponde a un QP de pureza de
97%; ahora para la determinación de grasa según Gerber en leche, se necesita
ácido sulfúrico con una densidad de 1,82 lo que corresponde a una pureza de
91%; bajo estas condiciones pasamos a preparar la solución.
Solución Inicial QP. Partes De la solución

H2 SO4 al 97% de H2 SO4 al 97%
( P) que se usará ( P1 ).
Solución Requerida
A un % de Pureza
Determinado.( R)
Solución diluyente Partes de la so-

% de Pureza lución diluyente
H2O al 0% que se usará
( D) ( D1)
Por lo tanto según el cuadrado de Pearson se tiene que la cantidad de ácido

sulfúrico que se desea preparar para determinar grasa es al 91% y se requiere
de 2 litros:
97 % 91%(P1 )
91%(R)
0% 6%(D1 )
97 97 (D)
Por lo tanto la Cantidad de Ácido sulfúrico al 97% que se utilizará será:
Para preparar 97 mL. se requiere 91 mL de Ácido sulfúrico al 97%

Ahora para 2000 mL. se requiere X mL. de Ácido sulfúrico al 97%:
X = 91 x 2000 = 1876 mL. de Ácido sulfúrico

97 al 97% que se requiere.
Luego para calcular la cantidad de agua se determina por diferencia:
mL H2 O = 2000 - 1876 = 124 mL de agua destilada para

obtener una solución final.
14. Solución de Ácido Sulfúrico para Determinar Grasa Según Van Gulik.
Se procede de con la misma metodología, y se diluye al ácido sulfúrico hasta
una concentración de 62% con un densidad de 1.52; Haciendo los cálculos se
tiene:
Medir 681 mL de ácido sulfúrico al 91% , Densidad 1,82.

Medir 319 mL de agua destilada y mezclar, para obtener 1000 mL de
ácido sulfúrico al 62% y una densidad de 1,52.
¡ADVERTENCIA!
La forma de mezclar el ácido sulfúrico con el agua es de la siguiente manera:
Nunca se debe verter el agua hacia el ácido por que la reacción es muy violenta
(exotérmica); siempre primero se añade el agua al recipiente de mezcla y luego
se añade el ácido muy lentamente y con mucha precaución (puede realizarse en
baño maría de agua fría). El recipiente de mezcla más recomendable puede
usarse de un material de PVC resistente.
También la finalidad de ésta forma de mezclar el ácido hacia el agua, se debe a

que la concentración del ácido sulfúrico debe aumentar gradualmente a partir de
cero, y no bajar bruscamente desde el 97%. Por otro lado se conoce que la
liberación de calor al mezclar agua y ácido puede provocar la expulsión de la
mezcla fuera del recipiente y quemar al operador o a las personas de su
alrededor.
15. Preparar Una solución De alcohol etílico al 68%

El alcohol químicamente puro presenta una pureza de 95% en volumen de
alcohol etílico con una densidad relativa de 0,81; bajo estas condiciones si se
quiere preparar 1000 mL. de solución al 68%, haciendo los cálculos según el
cuadrado de Pearson se tiene:
Medir 716 mL. de alcohol etílico al 95%
Medir 284 mL. de agua destilada y mezclar en una fiola.
16. Solución Básica Roja

Para preparar esta solución se parte de una solución de NaOH al 0,25 N y
fenolftaleína al 1% y se afora a 500 mL. Medir 36 mL de NaOH al 0,25N y luego
se agrega 20 mL. de fenolftaleína al 1% y se afora a 500 mL. con agua
destilada.
17. Solución de Azul de Metileno para la Prueba de Reductasa

Esta solución se prepara pesando 1 gramo de azul de metileno o en todo caso
una pastilla de la misma, el cual se diluye con 200 mL. de agua destilada y
hervida. El tiempo de preparado no debe exceder los seis días al momento de
ser usado.
18. Solución de azul de Metileno para Coloración de preparaciones

Microscópicas.
Es necesario, para preparar esta solución para uso en microscopía la mezcla
debe contener: 0,3 gramos de azul de metileno, 30 mL de alcohol etílico de 95%
y luego aforar en una fiola con agua destilada a 100 mL. Su preparación debe
ser reciente.
19. Preparación De Catalizador Para Determinar proteína Según Método

Kjeldahl.
Los catalizadores más activos y utilizados para la digestión ácida de proteínas son la
mezcla de sulfatos con selenio activo, una de las formas de preparar dicha mezcla
catalítica es de la siguiente manera:
Pesar 18,77 gramos de CuSO4 . 5H2O
pesar 90,00 gramos de K2 SO4
Pesar 0,40 gramos de Selenio Finamente pulverizados.

Una vez pesados, se mezcla hasta que presente una mezcla homogénea en un mortero
y se tiene el catalizador.
20. Preparación del Ácido Bórico al 4%.

Se pesan 40 gramos de H3BO3 , si es necesario en agua caliente. Enfriar y
aforar a 1000 mL. Y luego agregar unas gotas del indicador de Tashiro.
21. Preparación del Indicador de TASHIRO.

Para la preparación, es necesario medir 25 mL. de una solución alcohólica de
azul de metileno al 0,05%, luego medir 25 mL. de solución de rojo de metilo al
0,1%; mezclar y agitar hasta que se tenga una solución homogénea.
22. Valoración De Las Soluciones de Limpieza de Tuberías y Otros.

Generalmente las soluciones que se emplean para la limpieza "CLEANING-IN-
PLACE", son el Hexametafosfato de sodio, poderoso secuestrante, NaOH al 2%
y Ácido nítrico al 2%. La valoración de estas soluciones se realiza de la siguiente
manera:
Evaluación de La Concentración de Soda

Cáustica
Valorar tomando 10 mL. de solución de soda, añadir 2 a 3 gotas de fenolftaleína

y luego titular con HCl 0,1N; y en base a la siguiente tabla se determina la
concentración real de la solución alcalina de limpieza:
mL de HCl al 0,1N Concentración en % de Soda
3,00 mL. 1,20
3,50 1,40
4,00 1,60
4,50 1,80
5,00 2,00
5,50 2,20
6,00 2,40
6,50 2,60
7,00 2,80
Evaluación De La Concentración De Ácido Nítrico

La valoración de la solución ácida se realiza utilizando una solución de NaOH al
0,1N ; se toma 10 mL de muestra ácida se añade 2 a 3 gotas de methylorange,
luego titular con NaOH al 0,1N; luego se efectúa el calculo mediante la siguiente
Tabla:
mL. De NaOH al 0,1N Concentración de Ácido Nítrico %

2,00 1,20
2,20 1,30
2,40 1,40
2,60 1,50
2,80 1,70
3,00 1,90
3,20 2,00
3,40 2,15
3,60 2,25
3,80 2,35
4,00 2,50
23. Preparación Del REACTIVO de ROSS.

Para la preparación del reactivo de ROSS es necesario seguir los siguientes
pasos para obtener un adecuado sistema en disolución; para tal efecto es
necesario preparar dos soluciones de la siguiente manera tal como recomienda
Lees (1982).
1. Solución A.
En esta primera disolución, se pesan 7.145 gramos de 2,4 Dinitrofenol la
cual se disuelve en 230 mL. de una disolución de NAOH al 5%, dicha mezcla
se realiza en baño maría o también puede realizarse en agua a una
temperatura de 100°C, hasta que el 2,4 Dinitrofenol se disuelva totalmente;
Una vez que se tenga una solución homogénea, se le adiciona 2.5 gramos de
Fenol y si es que la solución una vez mezclado con el fenol no se aclara, se
recomienda calentar toda la mezclar hasta que se aclare totalmente.
2. Solución B
Para este caso se pesa 100 gramos de Tartrato de Sodio Y Potasio y se
disuelve en 500 mL. de agua destilada, se agita bien y se obtiene una
solución homogénea.
Ahora, para obtener la solución o reactivo de ROSS. se mezclan las

soluciones preparadas A y B, llevar a una fiola y se afora a 1000 mL. con agua
Destilada.
24. Preparación Del Reactivo de ROSS en base al 2,4 Dinitrofenolato de Sodio.

La preparación es idéntica a la realizada anteriormente, esto se procede
siempre y cuando que no se cuenta en el laboratorio con el 2,4 Dinitrofenol. Por
lo que se procede tal como se indica a continuación:
1. Solución A
Pesar 8 gramos de 2,4 Dinitrofenolato de Sodio y 2.5 gramos de Fenol y se
disuelve en 200 mL. de hidróxido de sodio al 5%.
2. Solución B
Pesar 100 gramos de Tartrato de Sodio y Potasio y diluirlo en 500 mL. de
agua destilada. Luego se mezcla ambas soluciones en una fiola y se aforan a
un volumen de 1000 mL. con agua destilada.
25. Preparación De Una Solución Para Usar Como Revelador De Azucares En

La Determinación Por Cromatografía En Capa Fina.
Para La determinación De azúcares, ya sea de leche u otros alimentos; es
necesario contar con un revelador para identificar los azúcares en los Cromato
placas. Para tal efecto se usa los siguientes reactivos: o también denominado
solución de Anilina - Di fenilamina, que se prepara como sigue:
a. Primeramente se enmasa 0.5 gramos de Anilina y luego se pasa a diluir en 50
mL. de agua destilada, se agita y se mezcla totalmente.
b. Por otro lado se enmasa 0.5 gramos de Di fenilamina, se disuelve en 50 mL.

de Acetona, agitar hasta diluir totalmente.
Luego Una vez preparada ambas soluciones, se pasa a Mezclar ambas

soluciones, se agita hasta homogeneidad y luego añadir 10 mL. de una
disolución de Ácido Fosfórico con bastante precaución, y finalmente se obtiene
el revelador. La preparación de cada uno de estos reactivos deben tener una
preparación reciente.
26. Preparación De La Solución Que Se Utiliza Como Revelador De

Aminoácidos En La Determinación Por Cromatografía En Capa Fina.
Como es ampliamente conocido, en la determinación por cromatografía en capa
Fina de los aminoácidos, el revelador más usado es la Ninhidrina en solución;
para tal efecto se prepara de la siguiente Manera:
a. Enmasar 0.2 gramos de Ninhidrina y luego mezclar con 100 mL. de acetona
QP. y agitar hasta homogeneidad, luego llevar a un frasco hermético.
27. Reactivos Usuales En Laboratorio de Análisis de los Alimentos
Nombre Fórmula Masa % Pureza Densidad Molaridad Normalidad

Molecular
Ácido Acético Glacial C2H4O2 60,0 99,5 1,05 17,4 17,4
Ácido clorhídrico HCl 36,5 36,0 1,17-1,18 12,0 12,0
Ácido Nítrico HNO3 63,0 65,0 1,40 14,0 14,0
Ácido Perclórico HClO4 100,5 60,0 1,54 9,20 9,20
Ácido Sulfúrico H2SO4 98,1 97,0 1,84 18,0 36,0
Agua Oxigenada H2O2 34,0 3,0 ----- 0,9 (10 vol.)
Alcohol de 96° C2H6O 46,0 94,0 0,81 16,7 --------
Amoníaco NH3 17,0 15,0 0,94 8,3 8,3
6.2. EQUIVALENCIA DE LA EXPRESIÓN DE LA ACIDEZ

TITULABLE EN LECHE Y DERIVADOS EN BASE % DE
ÁCIDO LACTICO
% De Ácido láctico Soxhlet-Henkel (°SH) Thorner (°T) Dornic (°D)
0,0000 0 0,0 0,00

0,0225 1 2,5 2,25
0,0450 2 5,0 4,50
0,0675 3 7,5 6,75
0,0900 4 10,0 9,00
0,1125 5 12,5 11,25
0,1350 6 15,0 13,50
0,1575 7 17,5 15,75
0,1800 8 20,0 18,00
0,2025 9 22,5 20,25
0,2250 10 25,0 22,50
0,2475 11 27,5 24,75
0,2700 12 30,0 27,00
0,2925 13 32,5 29,25
0,3150 14 35,0 31,50
0,3375 15 37,5 33,75
0,3600 16 40,0 36,00
0,3825 17 42,5 38,25
0,4050 18 45,0 40,50
0,4275 19 47,5 42,75
0,4500 20 50,0 45,00
0,4725 21 52,5 47,25
0,4950 22 55,0 49,50
0,5175 23 57,5 51,75
0,5400 24 60,0 54,00
0,5625 25 62,5 56,25
0,5850 26 65,0 58,50
BROMATOLOGIA APLICADA VOL. I 144
0,6075 27 67,5 60,75
0,6300 28 70,0 63,00
0,6525 29 72,5 65,25
0,6750 30 75,0 67,50
0,6975 31 77,5 69,75
0,7200 32 80,0 72,00
0,7425 33 82,5 74,25
0,7650 34 85,0 76,50
0,7875 35 87,5 78,79
0,8100 36 90,0 81,00
0,8325 37 92,5 83,25
0,8550 38 95,0 85,50
0,8775 39 97,5 87,75
0,9000 40 100,0 90,00
0,9225 41 102,5 92,25
0,9450 42 105,0 94,50
0,9675 43 107,5 96,75
0,9900 44 110,0 99,00
1,0125 45 112,5 101,25
1,0350 46 115,0 103,50
1,0575 47 117,5 105,75
1,0800 48 120,0 108,00
1,1025 49 122,5 110,25
1,1250 50 125,0 112,50
1,1475 51 127,5 114,75
1,1700 52 130,0 117,00
1,1925 53 132,5 119,25
1,2150 54 135,0 121,50
1,2375 55 137,5 123,75
BROMATOLOGIA APLICADA VOL. I 145

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERU

FACULTAD DE INGENIERIA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

Reservados Todos Los derechos.

Docente: Universidad Peruana Unión - Lima Perú.

En la obra se busca sistematizar parte de la experiencia acumulada y esta dirigido a

Existen diversos métodos establecidos para el análisis químico-físico de los

Los temas considerados en la presente obra, básicamente corresponden a los

LUIS ARTICA MALLQUI

ANALISIS BROMATOLOGICO DE ALIMENTOS

1.1. Análisis Cuantitativo

El análisis cuantitativo, se orienta a la determinación de que

Si la Analita es más del :

Una clasificación del análisis cuantitativo es:

Análisis macro = peso de muestra > de 0,1 g

1.2. Análisis Cualitativo

1.3. Etapas En El Análisis Químico y Físico De

Sólido :Molienda o triturar(reducción de tamaño),

b. Preparación ó transformación de la Analita

Antes de hacer la determinación física o química para medir

-El análisis se realizará con la brevedad posible.

-Se realizará con medios químicos, físicos ó biológicos.

La técnica que se utiliza en el laboratorio ha llevado a la

Otros métodos instrumentales: espectroscopia de

Los análisis se realizan en laboratorios oficiales, sobre

d. Cálculo e Interpretación de las Mediciones.

Los métodos estadísticos se emplean comúnmente y son

1.4. Los Errores y El Tratamiento de Datos

El valor real de cualquier cantidad es en realidad una

1.5. Muestreo En El Análisis de Alimentos.

Una muestra puede definirse como “una porción o artículo que

El objetivo del muestreo es seleccionar una porción o un número

Un lote puede ser una porción de una partida de alimentos

A. CLASES DE TOMA DE MUESTRAS

a.1. Toma de muestras selectiva

La tomo de muestras se puede realizar en cualquier

a.2. Toma de muestras objetiva

La toma de muestras objetiva es bastante directa, ya

Por su parte, la toma de muestras objetiva puede

1.5.1. Características de Muestreo

La toma de muestra debe realizarse por triplicado

Además, debe indicarse los siguientes datos:

1.5.2. Deposito de la Muestra

01 muestra quedará en poder del fabricante bajo deposito,

b. Distribuidores del Producto.

Sólo quedará en su poder una copia del acta de

Las tres muestras serán retiradas por la inspección, y

LOS PRINCIPIOS INMEDIATOS COMO

La clasificación de las proteínas, se puede apreciar en la figura 1.

El valor nutritivo de las numerosas proteínas alimentarias

Las proteínas se encuentran entre los nutrientes más importantes,

Figura. 1. Clasificación de las proteínas

El valor nutritivo de las numerosas proteínas alimentarias

Los aminoácidos limitantes más importantes son la lisina(en

En la siguiente tabla se recoge el contenido proteíco y valor

El valor nutritivo se expresa en unidades NPU(net protein

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1.1.1. Caracterización de Proteínas

1.1.2. Reacciones Generales de detección

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d. Reacción con sulfuro de plomo

Al añadir una disolución de acetato de plomo en medio

Las Proteínas estructuralmente son polímeros cuyas unidades