¿Se puede aislar caseína de la leche por precipitación?

Guillén Basto Wendy Diana

Hernández De Los Santos Víctor Manuel
Equipo 3
Rodríguez Carpinteyro Jesús
Sanchez Perez Saydi Magali

INTRODUCCIÓN
¿Qué es la leche?
La leche es el fluido biológico que segregan las hembras de los mamíferos y cu-
yo papel es aportar los nutrientes y la energía necesarios para el crecimiento y el
desarrollo de las crías durante los primeros meses de vida. Con la denominación
“leche” se entiende, en general, “leche de vaca”; para designar la leche de otras
especies también consumida por humanos se suele especificar el nombre de di-
cha especie, es decir, leche de oveja, de cabra, etcétera.
¿Qué son las proteínas?
Son biomacromoléculas formadas por cadenas de aminoácidos unidos por enlaces peptídicos y con un peso molecular mayor o igual a 5000g/mol. Descubiertas
en 1838 y hoy se sabe que son componentes principales de las células y suponen mas del 50% del peso seco de los animales. El termino proteína proviene del
griego proteios, que significa primero.
¿Cómo se clasifican las proteínas?
Las proteínas se han clasificado en diferentes aspectos como lo son:
 Por su composición:
I Simples.– son aquellas que al hidrolizarse solo liberan aminoácidos.
II compuestas.– son aquellas que al hidrolizarse liberan aminoácidos y otros
compuestos que reciben el nombre de grupo prostético (átomo o molécula)
estos a su ves se subclasifican de acuerdo a su grupo prostético.
Composición
CONCLUSIÓN
Se aprendió que es posible la purificación parcial y el aislamiento de la caseína de la leche, mediante reacciones simples , utilizando la poca solubilidad que esta pro
La leche de vaca es uno de los alimentos más económicos para el ser humano,
teína cuando le lleva hasta su punto isoeléctrico, esto lo logramos al agregar acido acético a la leche a una temperatura de 38 °C como dato curioso se conoce que la
yaqué suministra proteínas con un alto valor nutritivo y es mucho más barata que
los huevos y el pescado. La importancia alimentaria de la leche recibe principal- caseína no precipita al calentarse pero sin embargo se es posible que precipite al agregar el acido, esto también lo podemos ver cuando decimos que la leche esta
mente en las proteínas, el calcio y las vitaminas A, B1 y B2.La leche es agria; no obstante de las proteínas de la leche se pueden desnaturalizar por diferentes métodos como la temperatura y el efecto sobre estas al agregar sales neutras
una mezcla desustancias definidas como lactosa, glicéridos de ácidos gra- como lo es el sulfato de amonio que al estar en solución este se encuentra en forma iónica y este será solvatado por las moléculas de agua que rodeaban a las proteí
sos, caseína, albumina y sales minerales. La leche es la base principal de
todos los productos lácteos.
nas, esto lo vimos en el tubo 1, para el tubo 3 con sobrenadante que fueron el calentado, logramos ver que se pueden separar proteínas por calentado teniendo un
MATERIALES REACTIVOS baño maría a ebullición ya que las altas temperaturas del baño rompen los puentes de hidrogeno que tienen unidas a las proteínas de las moléculas de agua que
existen en solución, mostrando la presencia de las proteínas con un precipitado blanquecino.
1 matraz Erlenmeyer Acido acético 2N Concluimos que es posible la separación de proteínas pero es necesario saber cual es la proteína que se desea separar así como algunas de sus características , para
elegir alguna de las técnicas que permitan la separación de esta proteína.
1 agitador Éter etílico
Papel filtro Alcohol etílico DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Las proteínas presentan cambios en su estructura al someterse a diferentes estímulos externos tales como el tratamiento térmico, en este caso al someter a baño
2 tubos de ensaye Solución saturada de sulfato de amonio maría la leche a una temperatura de 38 ºC; los cambios en el pH por adición de ácidos o bases que de manera similar esto se logró al adicionar ácido acético a la le
1 baño maría a 38°C y a ebullición Agua destilada che y cuando el pH de la leche disminuye hasta 4.6 se induce una coagulación de las caseínas. En el caso de las pruebas con el sobrenadante, se llevaron a cabo mas
1 pipeta Hidróxido de sodio 50% experimentos sometiéndolo a otros agentes externos que afectan a las proteínas. En el caso de lo tubos de ensaye se lograron cambios en dos de ellos, al separarla
de la solución en la que se encontraban, en el caso del tubo 1 al que se le agregó sulfato de amonio, dándonos un precipitado blanquecino que se formó por la solva
1 embudo 125 ml de leche descremada tación del sulfato de amonio dejando al descubierto a las proteínas y estas precipitando, en el caso del tubo 3 igualmente se logró un precipitado pero esta vez por
2 vasos de precipitado calentamiento, ya que al aumentar la temperatura se rompieron puentes de hidrógeno que mantenían a las proteínas solvatadas dentro de la solución. En el caso del
tubo dos este fue nuestro blanco para comparar los tubos, corroborando que efectivamente ocurrió un cambio al notar que el precipitado no existía al comienzo.
Por su forma: Sustancia Cuidados especiales. Efectos
A) fibrosas.– son aquellas que parecen enrollarse a lo largo de un eje común ge- CUESTIONARIO
neralmente estas proteínas efectúan funciones de sostén, por ejemplo: colágeno
presente en tejido conjuntivo. Acido acético ‐Inhalación: Trasladar a la persona al aire li ‐Inhalación: Irritaciones en vías respiratorias. Sus
bre. En caso de que persista el malestar, pedir tancia muy corrosiva. Puede provocar bronconeu
1.- ¿Cómo es la solubilidad de las proteínas en su pl?
El cambio de pH de la solución en que se encuentra la proteína promueve cambio en las cargas de los residuos y por lo tanto un cambio de carga total de la proteína. Cuando el número de cargas posi-
B) globulares.– son aquellas que presentan plegamientos que les dan apariencia
tivas se iguala con el número de cargas negativas se dice que la proteína se encuentra en su pH isoeléctrico (punto isoeléctrico) y presenta el mínimo de solubilidad ya que no hay repulsión electroestá-
esférica . Generalmente estas proteínas están asociadas a funciones dinámicas, atención médica monía, edemas en el tracto respiratorio. ‐Piel: Pro tica entre las moléculas.
por ejemplo hemoglobina, enzimas, inmunoglobulinas.
‐Ingestión: Beber agua abundante. Evitar el vocar quemaduras. ‐Ojos: quemaduras, trastornos

Por su función:
vómito (existe riesgo de perforación). Pedir in de visión, ceguera (lesión irreversible del nervio
Por su solubilidad: óptico). Quemaduras en mucosas ‐Ingestión: Que
a) estructurales.– por ejemplo las que forman parte de la membrana. mediatamente atención médica. No neutrali
B) reserva.– por ejemplo gliadina en el trigo, albumina en el huevo. (el hombre no tiene zar maduras en esófago y estómago. espasmos, vómi
Nombre Soluble en:
proteínas de reserva) tos, dificultades respiratorias. Riesgo de perfora El valor del pH isoeléctrico de una proteína determinada, puede variar dependiendo de la cantidad de iones presentes en la solución (aniones o cationes). Cuando se eliminan todos los iones diferentes
Albuminas Agua y soluciones salinas ‐Contacto con la piel: Lavar abundantemente a H+ o –OH se determina el llamado pH isoiónico y este no varía en la proteína específica.
c) hormonas.– por ejemplo la insulina.
globulinas Soluciones salinas isotónicas
ción intestinal y de esófago. Riesgo de aspiración Se pueden separar proteínas usando precipitación por su punto isoeléctrico ya que cada proteína tiene un valor específico. Además las proteínas presentan su conformación nativa y es posible solubili-
D) catalizadoras-. Son aquellas que aceleran reacciones y reciben el nombre genérico de con agua. Quitarse las ropas contaminadas. zarlas en una solución con el pH adecuado.
histonas Solución salina enzimas. al vomitar. No se descarta: shock, paro cardiovas La solubilidad se incrementa cuando el pH se aleja del pI.
Extraer el producto con un algodón impregna
Prolaminas Etanol 70 u 80% E) toxinas.– por ejemplo la ricina o algunos venenos de serpientes. cular, acidosis, problemas renales
f) inmunoglobulinas.– son las encargadas de proteger al organismo de agentes extraños.
do en polietilenglicol 400 2.- ¿Cuál es la explicación física de la precipitación por salado?
Glutelinas Ácidos y bases diluidos
En conjunto confiere la llamada inmunidad humoral; ejemplos son lgG, lgM lgE. ‐Contacto con ojos: Lavar los ojos con abun Los iones son capaces de eliminar la capa de hidratación de las proteínas, lo que favorece su interacción y por ello precipitan.
Escleroproteínas Insolubles en agua g) transportadoras.– son aquellas que transportan moléculas, iones o electrones.
dante agua por lo menos durante 20 minutos,
Niveles estructurales manteniendo los párpados separados. Conse
Las proteínas presentan diferentes estados en su plegamiento hasta alcanzar el de mayor complejidad determinado genéticamente y en este son capaces de reali-
zar su función biológica.
Nivel presenta Enlaces característicos Éter etílico Tinhalacion: Trasladar a la persona al aire libre. En
caso de asfixia proceder a la respiración artificial.
Inhalación: Dolor de cabeza, somnolen
primario Tipo, cantidad y secuencia de aminoácido s en la proteína Enlace peptídico
Aflojar las prendas de vestir para liberar las vías res
cia, vómitos, narcosis, pérdida del cono
Secundario Orientación geométrica (parcial) de la cadena Puentes de hidrogeno establecidos entre los integrantes del enlace peptídico piratorias. cimiento.
3.- ¿Cómo afecta la temperatura a las proteínas?
Terciarios Orientación espacial de la cadena para algunas proteínas este es su ni Enlaces no covalentes como: iónicos y puentes de hidrogeno entre radicales, efecto hidró Contacto con la piel: Lavar abundantemente con Puede afectar al SNC con algunos trastor La mayoría de las proteínas a temperaturas mayores de 45 ºC – 60 ºC sufren desnaturalización debido a la ruptura de puentes de hidrógeno y fuerzas de Van Der Waals. Algunas proteínas recobran su
vel mas complejo por lo tanto presenta su actividad biológica fobico agua. Quitarse las ropas contaminadas. conformación al bajar lentamente la temperatura, a esto se le llama renaturalización.
nos tales como: somnolencia, perdida de
Covalentes lábiles como el puente disulfuro
Ojos: Lavar con agua abundante (mínimo durante reflejos
Cuaternario Resulta de la asociación de varias cadenas que se encuentran en su ni Enlaces no covalentes como: iónicos y puentes de hidrogeno entre radicales.
15 minutos), manteniendo los párpados abiertos.
vel terciario. Para algunas proteínas este es su nivel mas complejo y por Covalente lábiles como el puente disulfuro
lo tanto presenta su actividad biológica
Pedir atención médica. Ingestión: Vértigo, somnolencia, vómitos.
Ingestión: Evitar el vómito. Pedir atención médica.
Fundamento: Administrar aceite de vaselina como laxante (3 ml/
kg).
La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína que se separa de la leche por acidificación y forma una masa blanca. La propiedad característica de la caseína es su
baja solubilidad a pH 4,6. El pH de la leche es 6,6 aproximadamente, estando a ese pH la casei ́na cargada negativamente y solubilizada como sal cálcica. Si se añ ade ácido a la leche, la carga
negativa de la superficie de la micela se neutraliza ( los grupos fosfato se protonan) y la protei ́na neutra precipita. Las protei ́nas que aparecerán en el sobrenadante cuando precipitemos la
Alcohol etílico Usar siempre protección personal asi ́ sea
corta la exposición o la actividad que
Inhalación: Altas concentraciones del vapor
pueden causar somnolencia, tos, irritación
casei ́na en medio ácido son protei ́nas globulares, hidrofilicas y fácilmente solubles en agua asi ́ como susceptibles de desnaturalización por calor.
realice con el producto. Mantener estric de los ojos y el tracto respiratorio, dolor de
Precipitado por salado
tas normas de higiene, no fumar, ni co cabeza y si ́ntomas similares a la ingestión.
Los iones son capaces de eliminar la capa de hidratación de las proteínas, lo que favorece su interacción y por ello precipitan.
mer en el sitio de trabajo. Ingestión: Sensación de quemadura. Actúa al
principio como estimulante seguido de de
presión, dolor de cabeza, visión borrosa,
somnolencia e inconsciencia.

Punto isoeléctrico
El cambio de pH de la solución en que se encuentra la proteína promueve cambio en las cargas de los residuos y por lo tanto un cambio de carga total de la proteína. Sulfato de amonio No está clasificado como mer Inhalación: Ardor de garganta, tos. Causa irritación
en las vi ́as respiratorias
Cuando el número de cargas positivas se iguala con el número de cargas negativas se dice que la proteína se encuentra en su pH isoeléctrico (punto isoeléctrico) y pre-
senta el mínimo de solubilidad ya que no hay repulsión electroestática entre las moléculas. canci ́a peligrosa. Ingestión: Ardor de garganta, dolor estomacal
nausea.Causa vómito y diarrea.

Hidróxido de sodio No respirar los gases / humos / vapores / ae

rosoles. No añ adir agua a este producto. Evite Inhalación: Irritante Severo: Efectos de la inhala
el contacto con la piel y los ojos. Mantener ción de polvo o niebla varían desde una irritación
El valor del pH isoeléctrico de una proteína determinada, puede variar dependiendo de la cantidad de iones presentes en la solución (aniones o cationes). Cuando se elimi- alejado de sustancias incompatibles tales co leve de dañ o grave del tracto respiratorio superior,
nan todos los iones diferentes a H+ o –OH se determina el llamado pH isoiónico y este no varía en la proteína específica.
mo agentes oxidantes, agentes reductores, dependiendo de la severidad de la exposición.
Se pueden separar proteínas usando precipitación por su punto isoeléctrico ya que cada proteína tiene un valor específico. Además las proteínas presentan su conforma-
ción nativa y es posible solubilizarlas en una solución con el pH adecuado. metales, ácidos, álcalis, humedad Corrosivo! La ingestión puede causar quemaduras
La solubilidad se incrementa cuando el pH se aleja del pI.
severas de la boca, garganta y estómago.