Biodiesel

 Ésteres de ácidos grasos de cadena larga

derivados de aceites de origen vegetal, grasas de
origen animal o ambos.
Cosechas de biodiesel
 Aceite de palma
 Aceite de salvado de arroz
Aceite de semillas de Karanja (Pongamia pinnata)
 Aceite de semillas de Jatropha (Jatropha curcas)
 Aceite de mahua (Madhuca indica)
 Cosechas de biodiesel
Frutos de Frutos de semillas de karanja
Madhuca indica Jatropha curcas

Semillas de palma Salvado de arroz

Acidos grasos comunes en plantas: saturados

saturados
Ac.laurico (12:0) COOH

Ac.mirístico (14:0)
COOH

Ac.palmítico (16:0)
COOH

Ac.esteárico (18:0)
Tc=56ºC
COOH
Estructura de los lípidos
Biosíntesis de ácidos grasos en plantas
plantas: reacciones
llevadas a cabo por
plastidial
enzimas individuales
Terminación de la cadena

hidrólisis por una acil-ACP tioesterasa

lauril-ACP tioesterasa

incremento en Ac. laurico (12:0)

ruta procariota ruta eucariota
Cooperación plastidial-citosólica
Modificaciones post-síntesis
Algunas plantas pueden elongar hasta
C20

18:0-CoA

20:0-CoA
Acidos grasos poli-insaturados de cadena larga

plantas

en general no son capaces de elongar y desaturar las

cadenas de ácidos grasos por encima de C18

ácido erúcico (22:1)

amplio rango de organismos: hongos, briófitos, algas,

bacterias, peces, etc…

AA: ac. araquidónico (20:4 ∆5, 8, 11, 14)

EPA: ac. eicosapentanoico (20:5 ∆5, 8, 11, 14, 17)

DHA: ac. docosahesanoico (22:6 ∆4, 7, 10, 13, 16, 19)

aceites industriales
biodiesel

aceites alimentarios
ω3 & ω6
Producción de ac. grasos de interés industrial

modificación en posiciones concretas

familia de genes divergentes de la desaturasa ∆12

(FAD2)

∆12 epoxigenasas

∆12 hidroxilasas

∆12 acetilenasas

Dimorphotheca sinuata

ac dimorfecólico (9-OH-18:2∆10trans, 12 trans)

60% del aceite de sus semillas

Producción de biocombustibles por
microalgas
Acidos grasos en algas
C14-C20
C16:1, C16:0 y C18:1
Estrategias
 Aumentar síntesis de ácidos grasos
 Aumentar síntesis de TGA
 Disminuir catabolismo
 Modificación de las características de los lipidos
producidos
 Losácidos grasos mas adecuados para biodiesel son
12:0 y 14:0
 Ingeniería genética de microalgas
• Secuenciación el genoma nuclear, plastidial y
mitocondrial
– Chlamydomonas reinhardtii
– Un número cada vez mayor de genomas
secuenciados de microalgas
• Métodos de transformación genética
– Abrasión, electroporación, biolística,
Agrobacterium
Estrategias para aumentar la producción de
lípidos: biosíntesis de ácidos grasos

La sobre-expresión de las
enzimas de la biosíntesis
de ácidos grasos no
produce incrementos
importantes en el
contenido en lípidos. Los
mejores resultados se han
obtenido en tejidos pobres
en lípidos donde parece
que la ACCasa podría ser
limitante (patata X5).

≈
Estrategias para aumentar la producción de
lípidos: biosíntesis de triglicéridos

En general la sobre-
expresión de los genes
involucrados en el
ensamblaje de los
triglicéridos incrementa
significativamente el
contenido en lípidos
Estrategias para aumentar la producción de lípidos:
reducción de la síntesis de otros compuestos de
reserva

Mutantes (sta6 y sta7) de

Chalmydomonas
deficientes en ADP-glucosa

X
pirofosforilasa presentan
un mayor contenido en
lípidos cuando son crecidos
en un medio limitante en N
Estrategias para aumentar el contenido en
lípidos: reducción de su catabolismo

X
Knockout de Acil-oxidasa o varias
Acil.sintasas aumentan los niveles
de lípidos en Saccharomyces
cerevisiae
Modificación del tipo de lípidos

Características adecuadas para

el biodiesel
Cadenas saturadas de 12-
14 C (12:0, 14:0)

Expresión de Acil-tioesterasas
específicas
Reducción de las desaturasas
Producción directa de ácidos grasos
esterificados
Sobre-expresión de los genes
de la síntesis de alcohol (Et-OH)
y de la éster sintasa
correspondiente Et-OH

Ester sintasa

Biodiesel
Transesterificación

R=CH3
- -
R=CH3 CH2
O
CH2OCR1 -
3R OH CH2OH R1COOCH3
O
CHOCR2
CHO + R2COOCH3
O Catalizador

CH2OCR3 R3COOCH3
CH2OH
Esterificación de ácidos grasos

COOH

- -
R= CH3 CH2 -
R OH
-
R= CH3

O
C O R
Trans-esterificación en Met-OH supercritico

20 MPa

Temp. critica Presión crit.

Met-OH 239ºC 8.1 MPa
Et-OH 243ºC 6.38MPa
Uso de lipasas

Ácido libre
Metil-éster
MetOH 3 g
lipasa inmobilizada
EtOH 5 g

lipasa libre
MetOH 3 g

EtOH 5 g
Localización del metabolismo lipidico
X

X
Biosíntesis de ácidos grasos en
plantas
plastidial
plantas: reacciones
llevadas a cabo por
enzimas individuales
Biodiesel de microalgas
 Metodología disponible
 Genoma secuenciado: Chlamydomonas reinhardtii,
Phaeodactilum tricornutum
 Métodos eficientes de transformación de algas verdes,
rojas y pardas
 electroporación, biolística y Agrobacterium
 Biosíntesis directa de ácidos grasos en algas
 incorporación de las vías metabólicas necesarias
 problemas
 drenaje del metabolismo
 toxicidad?
 Producción directa de etil éster de ácidos grasos
 sobre-expresión de la producción de Et-OH
 sobre-expresión de DGAT de Acinetobacter baylyi
 Secreción de lipidos al medio
 facilita la purificación de los ácidos grasos
 identificación de transportadores de levaduras
 transportadores ABC capaces de transportar ceras?