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Cátedra de ~ o t á n i c aFacultad
, de Ciencias Exactas,
Universidad Nacional de La Plata, calles 4 7 y 1 1 5 , La Plata, Argentina.
Tradicionalmente se ha aceptado
que las enzimas proteolíticas de los dos
grupos anteriores son endopeptidasas, (E-OH) (R-C0.X)
en tanto que las metaloproteinasas del (E -SH)
tercer grupo incluirían Únicamente exo-
peptidasas, ya sea aminopeptidasas o A continuación sobreviene un
carb~xi~eptidasas.Hay, sin embargo, proceso de acilación representado por
carboxipeptidasas serínicas vegetales la ruptura del enlace susceptible (R-
que no requieren iones metálicos para -CO . X) y la subsiguiente formación
poner de manifiesto su actividad, así de un compuesto covalente intermedio
como aminopeptidasas sulfhidrílicas acil-enzima (ES'), en el que la unión
que tampoco los necesitan. del grupo R-CO. del sustrato y la en-
zima .se efectúa por un enlace éster
El último grupo es probable- (R-CO . O-E) en las proteasas serí-
mente el menos nutrido, donde pepsina nicas*o tioéster (R -CO . S -E) en las
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Acta ~arrnac&utica
sentantes más conocidos son la &ia- mente de tipo serínico5 s . Una de las
dina del trigo, la hordeína de la cebada tres aminopeptidasas también fue puri-
y la zeína del maíz. El contenido en ficadas 9 , demostrándose que se trata
proteínas de reserva disminuye rápi- de una enzima sulfhidrílica de peso
damente durante la germinación del molecular 65.000.
grano, proceso en el cual están obvia-
mente involucradas proteasas específi- Las semillas de "centeno" (Se-
cas. cale cereale L.) contienen una enzima
proteolítica con actividad amidásica
Recientemente se ha separado que aparentemente pertenece al grupo
una proteasa sulfliidrílica de una de las proteasas serínicas6 O .
, variedad cultígena de "arroz" (Oriza
sativa L. cv. Ratna), cuyas condicio- La degradación de la zeína
nes óptimas de acción se manifiestan durante la germinación del grano de
a pH 7 y 4 0 OCS4. Por otra parte, "maíz" (Zea mays L.) 1ia recibido es-
a partir de semillas y plántulas de otra pecial atención6 ' , : por medio de
variedad (O. sativa L. cv. Nihombare) precipitación fraccionada, cromatogra-
se ha conseguido
- aislar tres carboxi- fía de intercambio iónico, gel-filtra-
peptidasasSs con óptimos de activi- ción y electroforesis en gel de ~ o l i a -
dad a pH 4,5 - 5,s y 7 de las cuales la crilamida ha podido purificarse una
carboxipeptidasa
- de semillas seria una proteasa de peso molecular 21.000 y
proteasa serínica de peso molecular pI 2,3 ó menor. La ubicación de esta
110.000 y aparentemente conformada enzima dentro de la clasificación pro-
por dos unidades diferentes. puesta plantea un verdadero dilema,
ya que si bien se trata de una proteasa
De hojas senescentes de "avena" ácida y su especificidad de sustrato
(Avena sativa L. cv. Victory) se han es semejante a la de pepsina6 3 , el com-
obtenido dos proteasas: una de ellas portamiento frente a distintos activa-
neutra y aparentemente de tipo sul- dores e inhibidores la ubica decidida-
fhidrílico y la otra ácida y de tipo mente como una tiol-proteasa, hecho
serínico, siendo la primera de ellas una confirmado con el ulterior aislamiento
endopeptidasa y la segunda una de sustancias inhibidoras de enzimas
exopeptidasa5 . sulfhidrilicas presentes en los granos6 ,
cuyo contenido decrece rápidamente
Los granos germinados de "ce- con la germinación, conjuntamente con
bada" (Hordeum vuigare L.) contienen la degradación de la zeína.
una variedad de peptidasas, consignán-
dose la presencia de al menos ocho de De los cotiledones de "sorgo"
ellas5' : tres carb~xi~eptidasas,otras (Sorghum vuigare Pers.) se ha aislado
tantas aminopeptidasas y dos pepti- una proteasa ácida de peso molecular
dasas que hidrolizan uniones especi- 80.000, que hidroliza específicamente
ficas (Ala - Gli y Leu - Tir). Dos de las los enlaces peptídicos en los que el
carboxipeptidasas han sido objeto de grupo carboxilo es aportado por los
mayor análisis y una de ellas es segura- ticidos aspártico o glutámico, por lo
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cuales solamente una tiene actividad En las raíces existe una enzima de ca-
carboxipeptidásica comprobada, la de racterísticas similares, pero de natu-
peso niolecular 120.000, a la que se raleza sulfhidrílica, junto con una ter-
denomina "faseolina" y que pertenece cera proteasa de peso molecular mucho
al ':tipo ~ e r í n i c o " ~De
~ . las semillas mayor (150.000 a 200.000) y pI más
de otra variedad cultígena (Ph. vul- alto, que es inhibida por agentes re-
garis L. cv. Perlicka) se ha separado una ductores8 .
proteasa sulfhidrílica de bajo peso mo-
lecular (26.000 a 31.500)8 l . A partir de hojas senescentes de
"tabaco" (Nicotiana tabacum L.) se ha
En los granos de "soja" (Gly- aislado una endopeptidasa de bajo
cine max (L.) Mcrrill) existe un comple- peso molecular (9.000 a 10.000) que
jo protcico de difícil extracción con hidroliza uniones peptídicas entre resi-
agua y dcl que por cromatogafía de duos aminoácidos hidrófobos, con una
intercambio se separan seis fraccio- actividad máxima a pH 5 y 4 0 OC8 7 .
nes activas8 2 , aparentemente de natu-
raleza sulfliidrílica, de actividad ca- También de las hojas de "toma-
seinolítica óptima a pH 5 a 5,5 pero de te" (Lycopersicum esculen tum Mill.)
diferente coiriportaiilicnto frente a por precipitación con sulfato de anio-
algunos sustratos sintético^^^. Poco nio, cromatogafía de afinidad y gel-
después y a partir de un extracto filtración se ha conseguido aislar una
acetónico se obtiene una "fracción proteasa serínica de pI 5,2 y peso mo-
proteica soluble de pH 4,5", con ac- lecular 105.000, con actividad pepti-
tividad amidásica y p1 4,8, que cs li- dásica, esterásica y carboxipeptidási-
geramente activada por iones calcio y ca8 8 .
magnesio8 .
En los frutos de Solanum elaeag-
De los cotiledones de la "arve- nifolium Cav. está presente una protea-
jilla" o "veza común" (Vicia sativa sa sulfliidrílica que se extrae por ma-
L.) se ha separado y purificado una ceración con una solución fosfatada de
peptidasa de tipo sulfhidrílico, de pe- pH 7,5 y se purifica posteriormente por
so molecular 70.000, que tiene es- precipitación con sulfato de amonio
tructura cuaternaria y está compuesta y acetona. La enzima alcanza su máxi-
de cuatro subunidades de igual peso ma actividad a pH 8,5 y es estable du-
molecular8 . rante una hora a 75 OC8'.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS