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SEDE – JUANJUI
BIOTECNOLOGIA AGROINDUSTRIAL
TRABAJO ENCARGADO
INFORME DE PRÁCTICAS
I. INTRODUCCION
II. OBJETIVO
- Caldo peptonado
- Agar OGY
- YED
- Bypo
- Tubos de ensayo
- Pipetas
- Matraces Erlenmeyer
- Placas Petri.
- Mecheros
- Autoclave
- Etc.
3.2. Métodos
Muestras.
Las muestras serán tratadas de la siguiente manera:
Liquido y sólido, se tomará 1 ml. o 1 g. de muestra y se diluirá con
caldo peptonado (10 ml.) en tubos estériles de 15 ml.
Diluciones
Se realizarán diluciones secuenciales.
Discriminación de microorganismos.
Se aislará colonias de las placas y se purificará por resiembra.
Conservación de microorganismos
Las cepas se mantendrán en solución de glicerol a 20 % (v/v) y a
temperatura de congelación (Crueger, 1993 y Cárdenas F., 1999)
COMPOSICIÓN
MEDIO TAXON
(para 1 lt)
COMPONENTE
MEDIO SELECCIONA
(para 1 L)
a) Sólido:
- BYPO sin
inductor Colonias puras - Peptona, 10 g.
(aceite) - Extracto de carne, 8 g.
- NaCl, 5 g.
- K2 HPO4, 7 g.
- Agar, 15 g.
- MINIMO - Na NO3, 7 g
con Hongos productores - KH2PO4. 1 g.
inductor de lipasas - K2HPO4 2 g.
- KCl, 0.1 g
- Mg SO4 . 7 H2O, 0.5 g.
- CaCl2, 0.01 g
- FeSO4 . 7 H2O, 0.012 g.
- Extracto de levadura 1g.
- Aceite, 20 ml.
IV RESULTADOS
V. CUESTIONARIO
V. BIBLIOGRAFIA
PRACTICA Nº02
I. INTRODUCCION.
Los métodos directos de cuantificación de microorganismos permiten
II. OBJETIVO.
- Determinar curva de crecimiento a levadura en estudio y de la levadura
Saccharomyces mediante método de tubidimetría con inóculo de 10%.
- Observar la acción fermentativa de la saccharomyces en masa de pan.
a los mohos que son multicelulares. Las levaduras pueden ser diferenciadas de las
bacterias por el mayor tamaño de sus células y por la forma ovalada, alargada, elíptica o
(HERNANDEZ, 1997).
son unicelulares y con un tamaño de unos cuantos micrómetros, características que les
metodología no es adecuada.
IV. MATERIALES Y METODOS
4.1. Microorganismo.
Levadura en estudio
4.2. Reactivos
- Medio BYPO liquido
- Medio caldo nutritivo
- Alcohol 96º
4.3. Materiales y equipos.
- Asa de siembra. - Espátula.
- Matraces de 250 mL. - Cocina.
- Tubo de ensayo de 10 mL. - Mecheros.
- Pipetas de 1 mL. - Autoclave
- Algodón. - Incubadora.
- Piola. - Bandeja agitadora.
- Espectrofotómetro.
- Un recipiente de diámetro y alto 7 x 14 cm
- 1 regla.
- 4 cucharadas (tamaño te) de harina de trigo
- 2 cucharadas (tamaño café) de azúcar
- 6 cucharadas (tamaño té) de agua.
4.4. Metodología.
4.4.1. Para determinar el crecimiento de la levadura en estudio se realiza
los siguientes pasos:
Primero: Acondicionamiento de la levadura al medio de cultivo.
La levadura aislada en placa se siembra con asa de siembra en 50 mL de
medio BYPO liquido en un matraz y se pone a agitación a 150 rpm durante 24 horas
a temperatura 28 ºC; con la finalidad de habituar al microorganismo al medio.
b. Inocular con 1ml del cultivo del matraz los tubos con caldo nutritivo
e incubar a 28 °C. Cada dos horas se sacará un tubo y se le medirá su
turbidez a 600nm, se harán diluciones de aquellas muestras en que la
densidad óptica sea mayor a 1
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
- Hacer la discusión de lo observado comparando con datos bibliográficos.
Lectura de Absorbancia para Curva de Crecimiento
-24 0
1 26 26
1 26 26
-24 0.00
1 3.25
1 4.35
VI. CONCLUSION
Se llegó a la conclusión de que el crecimiento de la levadura Saccharomyces
cerevisiae se verá influenciado por el medio en el que se le coloca y las
condiciones de pH, y temperatura a los cuales se le expone, en esta primera
practica se obtuvieron buenos resultados ya que al proveer a la levadura de
todas las condiciones óptimas de crecimiento se pudieron medir los
parámetros de interés (UFC, pH, azucares, acidez).
VII. BIBLIOGRAFIA
I. INTRODUCCION
Los bioplásticos son fabricados a partir de recursos renovables de origen natural,
como el almidón o la celulosa (caña de azúcar, maíz, yuca, remolacha, papa).
Para crear un bioplástico, se buscan estructuras químicas que permitan la
degradación del material por microorganismos, como hongos y bacterias, a
diferencia del polipropileno y poliestireno expandido, cuya producción se basa de
los derivados del petroleo (recurso que es no renovable). No obstante, hay que
precisar que los plasticos biodegradables pueden proceder del petroleo y no deben
confundirse con los bioplasticos. Los plasticos biodegradables procedentes del
petroleo tienen aditivos que mejoran su capacidad de degradacion, pero no
satisfacen las normas internacionales de biodegradabilidad.
Los productos desechables bioplásticos se degradan en un periodo menor a un
año, donde el residuo final del proceso es la generación de CO2, agua y biomasa.
Al contrario de los productos desechables plásticos y de poliestireno expandido
(durapax) que pueden tomar hasta 1,200 años en degradarse, generando una
contaminación acumulativa al ecosistema.
II. OBJETIVO
Elaborar un polímero biodegradable a partir del almidón de la papa.
EQUIPOS
Baño maría a 100°C
Estufa
Espátula
Bandeja de Telgopor
IV. METODOS
El estudio se realizará mediante dos métodos
Método 1.
Colocar en un vaso precipitado 5 g. de almidón de papa. Agregar,
mezclando bien, 40 ml. de agua destilada, 4 ml de glicerina 50%(v/v), 6
ml de HCl 0.1 N, y unas gotas de colorante de alimentos.
Mantener por 10 minutos en baño maría, en hervor, agitando, hasta que
la mezcla quede viscosa. Adicionar de 2 a 8 ml. de NaOH 0.1 N, para
disminuir la viscosidad.
Verter la mezcla en una bandeja de telgopor y plato de losa.
Secar a estufa a 100° C por 1 hora, y a temperatura ambiente.
Desprender cuidadosamente para evitar un desgarre del plástico.
Método 2.
V. RESULTADOS DISCUSIONES.
VI. CONCLUSIONES
VII. CUESTIONARIO
Composición química de la papa.
Tabla de composición química.
PRACTICA Nº05
I. INTRODUCCION
Las enzimas son Biocatalizadores proteicos con un alto grado de
especificidad y eficiencia, intervienen en todas las reacciones bioquímicas
que ocurren en los organismos vivos (animales-vegetales y
microorganismos), también pueden actuar fuera de la estructura celular
independientemente cuando han sido extraídos y purificados.
Las enzimas son muy vulnerables a la influencia de la T y el pH, por ello en
su manejo en el laboratorio se debe tener en cuenta lo siguiente:
c. Evitar su desnaturalización e inactivación.
d. No someterlas a T superiores a 40°C pues son fatales.
Las reacciones enzimáticas pueden ser observadas y/o medidas por diversos
métodos teniendo en cuenta las condiciones óptimas para su actividad (pH, T°,
[S], [Enz], etc) de tal manera se puede evaluar:
En la piña fresca congelada la ENZ. Se halla activa, pero la reacción es muy lenta,
o nula ni ha sufrido desnaturalización.
II. OBJETIVO.
1. Verificar la actividad catalítica de las enzimas observando los cambios de
coloración y/o solubilidad en los tubos de ensayo.
2. SOLUCION DE SUSTRATOS.
- Almidón 1%
- Gelatina (disolver 2g. en 10 ml de agua caliente)
3. SOLUCION PARA PRUEBAS.
- Lugol
4. NaCl 1%
5. HCl 1%
b. MATERIALES
- Baño maría 37°C.
- Gradillas y pinzas
- Tubos de prueba
- Matraces de 125 ml.
- Vasos de precipitado
- Probeta de 50 ml.
- Pipetas.
c. PROCEDIMIENTO
Armar un sistema de tubos de ensayo en una gradilla y etiquetarlos para
cada experimento, luego adoptar un sistema de pipeteo con cuidado.
EXPERIMENTO 1. DIGESTION DEL ALMIDON (METODO 1)
REACTIVOS T1 T2 T3 T4
Saliva x 2ml 2ml 2ml
SOL. NaCl X 1 gota 1 gota x
SOL. Almidón 4ml 2ml 2ml 8 ml
SOL. HCl x x x 1ml
Agitar tubos y llevar a baño maría 10 minutos.
Luego sacar tubos.
SOL. Lugol 2 gotas 1 gota 1 gota 1 gota
Agitar tubos y observar
V. CONCLUSION
En esta práctica hemos concluido que las enzimas son moléculas de
naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones químicas,
siempre que sean termodinámicamente posibles: una enzima hace
que una reacción química que es energéticamente posible, pero que
transcurre a una velocidad muy baja sea cinéticamente favorable es
decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la
enzima. En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas
moléculas denominadas sustratos. Casi todos los procesos en las
células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas
significativas.
Con la práctica también nos dimos cuenta lo que ocurría cuando se
le agregaban diferentes sustancias en algunos no pasaba nada y en
otros sí, es decir la mayoría cambiaba de color casi
instantáneamente, de la cual se identificó la reacción enzimática con
el sustrato.
VI. CUESTIONARIO
1. Que es el LUGOL y para que sirve?
VII. BIBLIOGRAFIA
Kimball, John. (1986). Biologia. Editorial: Addision – Wesley Iberoamericana, S.A.
Cuarta Edicion.
Baker, J. y Allen, G (1979) Materia, Energia y Vida. Editorial: Fondo Educativo
Iberoamericano S.A.
Muños, E. (1979) Biologia Celular y Molecular. Editorial: H. Blume. Ediciones-
Rosario, 17.
http://www.terra.com/salud/articulo/html/sal4417.htm
http://www.salud180.com/sustancias/papain
http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=3247