Tecnológico de Monterrey Campus Puebla

Departamento de Biotecnología Laboratorio de Microbiología

PRÁCTICA 1. Técnicas de Esterilización y preparación de medios de

cultivo_Parte 2
Objetivo
Al término de la práctica el alumno asociará el tiempo y la temperatura adecuada
necesaria para lograr un excelente proceso de esterilización, manejará las técnicas
de esterilización, empleando la más adecuada de acuerdo al tipo de material. De igual
forma, fundamentará la importancia del lavado de material de laboratorio para llevar a
cabo las Buenas Prácticas de Laboratorio que repercutirán en los resultados
obtenidos en las prácticas, preparación de medios de cultivo y en su desarrollo
profesional.

Material
1 Autoclave para material limpio
1 Incubadora estática a 37°C
1 Parrilla
1 Gradilla para tubos
3 Matraces Erlenmeyer de 50 ml
2 Probetas (100 ml y 10 ml), una de cada una
4 Tubos Falcon de 13 ml estériles
1 Vaso de precipitado
1 Varilla magnética
Agitadores magnéticos
1 Caja Petri
Cajas para pesar
Espátula
Mechero Bunsen
Encendedor
Medios de cultivo: agar SS, agar TSI, agar Citrato Simmons
2 Adaptadores de tomacorriente

Procedimiento

1. Preparación de Medios de cultivo. Preparar 25 ml de agar SS, 10 ml de Agar Hierro Triple

azúcar, 10 ml de citrato de Simmons,

2. Esterilización. El material se debe esterilizar por 15 minutos, a 121˚C (15 libras de presión).
Operar la autoclave como lo indica el instructivo y manual.

Cuestionario
1. ¿Qué son las Buenas Prácticas de Laboratorio?
2. Explica la importancia del control de calidad en el laboratorio de Microbiología y
menciona los aspectos más importantes que abarca. ¿Cuál es la importancia de la
“prueba de esterilidad de medios de cultivo”?
3. ¿Qué tipo de material se puede esterilizar por calor seco y calor húmedo? Explica ¿por
qué?
4. ¿Cuáles son las condiciones de temperatura y presión a las que se destruyen todas
las formas vegetativas y las esporas?
5. ¿Cómo actúa la esterilización por calor húmedo en los microorganismos?
6. ¿Qué tipo de esterilización es más recomendable para esterilizar solventes y
soluciones que contienen proteínas o vitaminas? Justifica tu respuesta.

OBSERVACIONES:
Realiza esquemas y dibujos correspondientes a la esterilización por calor húmedo que
realizaste en la práctica y anotar en el reporte de la práctica los cálculos realizados en la
preparación de los medios de cultivo.

1 cmgz