Laboratorio de Análisis Bromatológicos

5º. Sem. QFB

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Práctica No. 12

Determinación de Carbohidratos
Método: Fenol/ácido sulfúrico

Objetivo:
Determinar azucares en soluciones acuosas: valoración colorimétrica de los
hidratos de carbono por el método de fenol/ácido sulfúrico usando una disolución
de glucosa/sacarosa como patrón. Los resultados se expresan como g de
equivalentes de glucosa/sacarosa en 100 mL.

Reactivos:
Acido sulfúrico concentrado.
Fenol al 5%.
Sacarosa, 0.06 M.

Curva de calibración y medición azúcar en las muestras.

 Se toman 6 tubos de ensayo.

 Se numeran los tubos en dos series del 1 al 6.

 En los tubos agregue los reactivos en el orden que se señala en el siguiente

Cuadro:

Agua Azúcar Problema Fenol Ác.

Sulfúrico
Tubo Volumen (mL)
1 1.00 0.00 --- 1.0 5.0
2 0.75 0.25 --- 1.0 5.0
3 0.50 0.50 --- 1.0 5.0
4 0.25 0.75 --- 1.0 5.0
5 0.00 1.00 --- 1.0 5.0
6 0.00 0.00 1.00 1.0 5.0

 Se agitan los tubos vigorosamente.

 Se dejan reposar 10 minutos a temperatura ambiente.

 Se agitan nuevamente y se dejan reposar 20 minutos a 30°C.

 Medir en el espectrofotómetro la absorbancia a 490 nm.

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Cálculos

Grafique la curva de calibración de A490 nm vs [azúcar] M.

Calcule la concentración de azúcar medida en cada muestra problema.

Cuestionario:
¿Cómo se clasifican los carbohidratos?
¿Cuál es la importancia de la determinación de carbohidratos en los alimentos?
¿Cuáles son las reacciones químicas que se llevan al cabo en esta determinaión?

Bibliografía
 Kirk, R. S., Sawyer R. Egán H. 2002. Composición y análisis de alimentos
de Pearson. CECSA. 4ª. Reimpresión, México.
 Plumer, D.T. 1981. Introducción a la Bioquímica Práctica. Mc Graw Hill.
 Tanford, C. 1961. Physical Chemistry of Macromolecules. John Wiley &
Sons, New York, N.Y.
 The Merk Catalogue. Merk KgaA, Darmstadt, BRD. 1996.
 The Merk Index. 12th ed. Merk KgaA, Darmstadt, BRD. 1996.