INSTRUCCIÓN TÉCNICA IT-75-HEM-1M

Revisión: A
Investigación de crioaglutininas Página 1 de 5

DISTRIBUCIÓN:
DEPARTAMENTO RESPONSABLE

Dirección Jefe de la Unidad de Calidad

Hematología Jefe de la Unidad de Hematología

Enfermería Coordinadora de Enfermería

SUMARIO DE MODIFICACIONES
REVISIÓN FECHA DESCRIPCIÓN
A 29/01/07 Primera edición

PREPARADO REVISADO Y APROBADO

Nombre: Marga Alcover Nombre: Joan Bargay

Cargo: Coordinadora de Enfermería Cargo: Jefe de Unidad de Hematología
Fecha: 29/01/07 Fecha: 29/01/07
La documentación del Sistema de Gestión de la Calidad se encuentra en la Intranet de Hospital Son Llàtzer. Existe una única copia papel
autorizada y controlada en poder del Coordinador de Calidad, por lo que cualquier otro documento papel se considerará copia no
controlada.

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1 Técnica en gel:

MATERIAL: pipeta automática de 50, 25 y 10 lambdas (pipeta DiaMed)

Tubos de hemólisis (12 x 75 mm)
Pipetas Pasteur
Nevera a 4ºC (puede utilizarse la destinada a conservar bolsas de
sangre)
Centrífuga para tarjetas DiaMed

MUESTRA: suero o plasma

Hematíes del propio paciente al 0,8% en Diluyente 2 para el
autocontrol
(10 lambdas de sangre homogenizada + 0,5 ml de Diluyente 2)

REACTIVOS:Tarjetas DiaMed neutras (“NaCl/test enzimático/aglutininas frias”)

Viales I a III del panel eritrocitario Diacell
Diluyente DiaMed 2.
Opcional: hematíes de sangre de cordón umbilical compatibles ABO
con la muestra al 0,8% en Diluyente 2 (10 µl sangre cordón +
0,5 ml Diluyente 2)

TANTO LAS MUESTRAS COMO LOS REACTIVOS DEBEN ESTAR ENFRIADOS

PREVIAMENTE A 4 ºC AL IR A SER UTILIZADOS

PROCEDIMIENTO:

1.- Rotular una tarjeta DiaMed neutra (“NaCl/test enzimático/aglutininas

frías”) con los datos del paciente y :
- los 3 primeros pocillos con los los números I, II, III.
- el 4º pocillo con “ac” de autocontrol
- el 5º pocillo con “hc” de hematíes de cordón, si se utilizan
Destapar los pocillos.

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2.- Depositar en cada pocillo 50 lambdas (1 gota) de la suspensión de

hematíes correspondiente.
3.- Añadir a cada pocillo 25 lambdas del suero o plasma.
4.- Incubar en nevera a 4 ºC durante 15 minutos.
5.- Centrifugar durante 10 minutos.
6.- Leer los resultados (ver ficha de lectura de resultados en tarjetas
DiaMed)

INTERPRETACIÓN
1.- En casi todos los sueros existe una pequeña cantidad de aglutininas frias
que son inocas.

2.- La gran mayoría de crioaglutininas tienen especificidad anti-I, antígeno

presente en prácticamente todos los adultos, pero ausente en los hematíes de
cordón. Por ello es aconsejable introducir una prueba con este tipo de
hematíes al efectuar la investigación.

3.- Por lo expuesto en el punto anterior casi todas las aglutininas frias
actúan como autoanticuerpos.

4.- Para evaluar la importancia clínica de las aglutininas frias es necesario

proceder a: - su titulación (ver ficha correspondiente)
- determinación de su amplitud térmica (ver mas adelante)

5.- Un título elevado de crioaglutininas puede presentarse tras una infección por
Mycoplasma pneumonie (neumonía atípica) o Mononucleosis infecciosa.

50 µl de hematies 50 µl de hematíes del 50 µl d e hematíes de

Diacell paciente al 0,8 % cordón al 0,8 %
(I a III) (autocontrol) (¿especificidad I?)

I II III ac hc
TARJETA NEUTRA

25 ul de suero

incubar 15 min. a 4 ºC

centrifugar y leer

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2 Determinación de la amplitud térmica de las crioalutininas

Procedimiento en gel:

MATERIAL: pipeta automática de 50, 25 y 10 lambdas (pipeta DiaMed)

Tubos de hemólisis (12 x 75 mm)
Pipetas Pasteur
Baño maría o estufa de temperatura regulable
Incubador para tarjetas DiaMed
Centrífuga para tarjetas DiaMed

MUESTRA: suero del paciente obtenido a 37ºC:

Jeringa y tubo de recogida precalentados a 37ºC
Dejar coagular e incubar dos o tres horas a 37ºC antes de
centrifugar

REACTIVOS: tarjetas DiaMed con antiglobulina (Liss/Coombs)

Hematíes O al 0,8% (cualquiera de los 3 viales del panel Diacell)

PROCEDIMIENTO

1.- Rotular una tarjeta DiaMed Liss/Coombs con los datos del paciente.
Destapar un pocillo y señalarlo con la temperatura de incubación. Inic. 37ºC
2.- Añadir al pocillo 50 lambdas (1 gota) de suspensión de hematíes
3.- Incubar la tarjeta, ya con los hematíes en el pocillo, durante 5’ a 37ºC
4.- Añadir al pocillo 25 lambdas del suero (obtenido y mantenido a 37ºC)
5.- Dejar incubar 15 minutos a 37ºC
6.- Centrifugar inmediatamente (sin dejar enfriar) durante 10 minutos
7.- Leer el resultado
8.- Si el resultado ha sido negativo repetir el test completo, incubando en el
paso 5 a 34ºC, de mantenerse la negatividad ir repetiendo a 32º, 30º, 28º,
26º, etc

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INTERPRETACIÓN
La primera incubación que de resultado positivo indica la temperatura a la que
la crioaglutinina comienza a fijar complemento.

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