FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Ing.

Ambiental
PRÁCTICA DE LABORATORIO

CÓDIGO

CURSO Contaminación de Aguas y Control CONAGUPRAC09

LABORATORIO Ingeniería Ambiental

NOMBRE DE LA
Practica 9: Determinación de Demanda Química de Oxigeno.
PRÁCTICA

I. Objetivos Generales:

 Analizar distintas matrices de agua en los parámetros de Demanda Química de

Oxigeno para determinar según su procedencia si cumple o está dentro de los
Instrumentos de Gestión de Calidad utilizados en el territorio Nacional y evaluar
estadísticamente los resultados.

II. Objetivos Específicos:

 Determinar Demanda Química de Oxigeno en las Matrices de Agua recolectadas por

cada grupo.
 Utilizar los ECA o LMP según la procedencia de la muestra y comparar con los
resultados obtenidos en el Laboratorio.

III. Definiciones

Principio
La mayor parte de la materia orgánica resulta oxidada por una mezcla en ebullición de
los ácidos crómico y sulfúrico. Se somete a reflujo la muestra en una solución ácida
fuerte con un exceso conocido de dicromato de potasio. Después de la digestión el
dicromato no reducido que quede se titula con sulfato ferroso amoniacal ((NH4)2 Fe
(SO4)2.6H2O) (usando como indicador de punto final el complejo ferroso de
ortofenantrolina - ferroína) para determinar la cantidad de dicromato consumido y
calcular la materia orgánica oxidable en términos de equivalente de oxígeno.
Precauciones de Seguridad
*Durante el proceso se debe utilizar mascarilla y protegerse las manos del calor
producido cuando se mezclan los reactivos. Mezclar por completo antes de aplicar
calor para evitar el calentamiento local del fondo del tubo y una posible reacción
explosiva.

Toma de Muestras y Conservación

Recoger las muestras en frascos de vidrio borosilicato o plástico (polietileno).
En caso de que el lugar de muestreo esté alejado del laboratorio, se debe conservar la
muestra por acidificación a un pH ≤ 2 utilizando ácido sulfúrico concentrado (1.5mL) y
refrigerar a ≤6°C.

Antes del ensayo se debe homogenizar las muestras que contengan sólidos
suspendidos. Hacer diluciones preliminares de las muestras de aguas residuales que
contengan un DQO alto para reducir el error inherente a la determinación de volúmenes
pequeños de muestra.

Procedimiento de muestreo de los diferentes tipos de agua residual

a.- Agua residual cruda (afluente), entrada a la PTAR
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Se ubicará un punto de monitoreo en el ingreso del agua residual cruda a la PTAR,

después de la combinación de los distintos colectores de agua residual que descargan
a la obra de llegada a la PTAR o, en su defecto, al ingreso a cada módulo de
tratamiento, según sea el diseño del ingreso a la PTAR.
En todos los casos el punto de monitoreo debe ubicarse en un lugar que evite la
interferencia de sólidos de gran tamaño en la toma de muestras, por lo que debe
ubicarse preferentemente después del proceso de filtrado de las aguas residuales.
b.- Agua residual tratada (efluente), dispositivo de salida
Se ubicará un punto de monitoreo en el dispositivo de salida del agua residual tratada
de la PTAR. En el caso de que la PTAR contara con más de un dispositivo de salida se
ubicarán los puntos de monitoreo en cada uno de ellos, asegurando el monitoreo del
total de los efluentes de la PTAR monitoreada. Este dispositivo de salida, puede ser el
medidor de flujo, caja de registro, buzón de inspección u otra estructura apropiada.

Interferencias
*Los haluros (cloruros, bromuros, yoduros) pueden eliminarse, aunque no
completamente, por la formación de un complejo con el Sulfato de Mercurio (HgSO 4)
antes del procedimiento de reflujo (formando un haluro mercúrico muy poco soluble en
medio acuoso). Aunque se recomienda 1 g de HgSO4 para 50mL de muestra, se puede
usar una menor cantidad cuando la concentración de cloruro de la muestra sea menor
de 2000 mg/L, siempre que se mantenga una relación de HgSO4: Cl de 10:1.
*Los compuestos alifáticos de cadena lineal se oxidan con mayor eficacia cuando se
añade sulfato de plata (Ag2SO4) como catalizador. Sin embargo el Ag2SO4 reacciona
con el cloro, el bromo y el yodo para producir precipitados oxidados solo parcialmente.
- –
*El Nitrito (NO2 ) tiene una DQO de 1.1mg de O2/mg de NO2 -N, debido a que las
– –
concentraciones de NO2 en aguas rara vez son mayores de 1 o 2mg NO2 -N/L, esta
interferencia es considerada insignificante y usualmente se ignora. Para eliminar una
–
interferencia significativa debida al NO2 , agregar 10mg de ácido sulfámico por cada
–
mg de NO2 -N presente en el volumen de muestra usado; agregar la misma cantidad
de ácido sulfámico al tubo de reflujo que contenga el blanco de agua destilada.
*Las sustancias inorgánicas reducidas, como hierro ferroso, sulfuro, el manganeso
manganoso, etc., son cuantitativamente oxidadas bajo las condiciones de éste método.

IV. Equipos, Materiales y Insumos

Equipos

A.- Digestor DQO: Cuya temperatura de funcionamiento es 150 ± 2ºC. El modelo del
digestor es H839800 y su serie es 1147595.
B.- Bloque de calentamiento: De aluminio, con agujeros ajustados al tamaño de los
tubos de digestión.
C.- Tubos de Digestión: Tubos de borosilicato con tapa rosca, resistentes al calor y
contratapa de teflón, de 16x100mm, 20x150mm ó 25x150mm.
D.- Microburetas de 10mL, pipetas volumétricas.

Reactivos

A. Solución Patrón de Digestión de dicromato de potasio 0.01667M (0.1002N):

Añadir a 500 mL de agua destilada 4.903g de K2Cr2O7 (estándar primario de grado
reactivo, previamente secado a 150°C por 2 horas), 167mL de H2SO4cc y 33.3g de
HgSO4. Disolver, enfriar a temperatura ambiente y diluir a 1L.
B. Ácido sulfúrico: Añadir Ag2SO4 de grado reactivo, en cristales o polvo, al H2SO4cc
en una proporción de 5.5g Ag2SO4 /kg H2SO4. Deje reposar de 1 a 2 días para disolver
Ag2SO4. Mezclar.
C. Solución indicadora de ferroína: Disolver 1.485g de 1,10- fenantrolina
monohidratada y 695mg de FeSO4.7H2O en agua destilada y diluir hasta 1L. Ésta
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solución indicadora debe ser adquirida ya preparada. Diluir este reactivo por un factor
de 5(1+4).
D. Estándar de titulación: Sulfato de amonio ferroso (SAF), aproximadamente
0.10M: Disolver 39.2g de Fe (NH4)2(SO4)2.6H2O en agua destilada. Añadir 20mL de
H2SO4cc, enfriar y diluir hasta 1L. Esta solución debe estandarizarse por duplicado
cada vez que se use frente a la solución de digestión patrón de K2Cr2O7 como sigue:
Pipetear 5.0 mL de solución de digestión en un beaker pequeño. Añadir 10mL de agua
reactiva para sustituir la muestra. Enfriar a temperatura ambiente. Añadir 1 a 2 gotas de
indicador ferroína y titular con solución de titulación SAF.

Molaridad de Solución de SAF= Volumen de Solución K2Cr2O7 0.01667, mL x 0.1000

Volumen FAS usada en titulación, mL

E. Ácido sulfámico (NH3SO3): Se usa solo si se va a eliminar la interferencia de

nitritos.
F. Patrón de ftalato de hidrógeno de potasio, HOOCC 6H4COOK (FHP): Triturar
ligeramente y luego secar a peso constante a 110°C. Disolver 0.425g en agua destilada
y diluir a 1L. El FHP tiene un DQO teórico de 1.176g O2/g y ésta solución tiene un DQO
teórico de 500mgO2/L. Ésta solución es estable cuando se refrigera, pero puede alterar
si hay desarrollo biológico visible. Preparar y transferir la solución bajo condiciones
estériles.

V. Procedimiento:

Procedimiento analítico: Existen 2 métodos:

MÉTODO TITULOMÉTRICO
a) Lavar los tubos de digestión y las tapas con H2SO4 al 20% antes de su uso para
evitar su contaminación.
b) Consultar la tabla 1 para volúmenes adecuados de muestras y reactivos. Efectuar
mediciones volumétricas tan precisa como sea posible (los volúmenes más críticos
son la muestra y la solución de dicromato de potasio).
c) Colocar 2.5 mL de muestra o una dilución adecuada en el tubo de digestión.
d) Agregar a cada tubo de digestión 1.5 mL de solución de digestión y 3.5mL de
solución de ácido sulfúrico: Verter el ácido sulfúrico corriéndolo lateralmente dentro
del tubo, de manera que se observa una capa del ácido debajo de la capa de la
solución de digestión y de la muestra.
e) Tapar bien los tubos de digestión e invertir cada uno varias veces para mezclar
completamente.
f) Colocar los tubos en el digestor de bloque precalentado a 150ºC y someterse a
reflujo durante 2 horas.
g) Enfriar a temperatura ambiente y colocar los tubos de digestión en una gradilla.
Quitar los tapones de los tubos, verter en un vaso de precipitación y añadir un
magneto con cubierta de TFE.
d) Añadir 0.05 a 0.10 mL de indicador (1 a 2 gotas) de ferroína y agitar rápidamente en
un agitador magnético mientras se titula con SAF 0.10 M. El punto final es un
marcado cambio de color de azul verdoso a marrón rojizo. Aunque el azul verdoso
puede volver a aparecer en pocos minutos.
De la misma forma someter a reflujo y titular un blanco que contenga los reactivos y
un volumen de agua destilada igual al de la muestra.

Tabla 1: Cantidad de muestra y reactivos para distintos tubos de digestión

Solución Ácido Volumen
Vasos de Muestra
de sulfúrico final total
digestión (mL)
digestión (mL) (mL)
16x100 mm 2.5 1.5 3.5 7.5
20x150 mm 5 3 7 15
25x150 mm 10 6 14 30
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MÉTODO COLORIMÉTRICO

Aparatos
a. Espectrofotómetro: Cuya fuente de luz está dada por una lámpara de
tungsteno con filtro de banda estrecha y opera en las regiones comprendidas de
420 a 610 nm. La exactitud del equipo a 25°C es de ±5mg/L o ±5%, ±15mg/L o
±4%, ±150mg/L o ±3% para datos de DQO bajo, medio y alto respectivamente.
Reactivos
a. Solución de digestión, rango alto: Añadir a 500mL de agua destilada 10.216 g
de K2Cr2O7, estándar de grado primario, previamente secado a 150°C por 2 horas,
167 mL de H2SO4cc y 33.3g de HgSO4. Disolver, enfriar a temperatura ambiente y
diluir a 1000mL.
b. Solución de digestión, rango bajo: Añadir a 500mL de agua destilada 1.022 g
de K2Cr2O7, estándar de grado primario, previamente secado a 150°C por 2 horas,
167 mL de H2SO4cc y 33.3g de HgSO4. Disolver, enfriar a temperatura ambiente y
diluir a 1000mL.
c. Ácido Sulfúrico: Añadir Ag2SO4 de grado reactivo, en cristales o polvo, al
H2SO4cc en una proporción de 5.5g Ag2SO4 /kg H2SO4. Deje reposar de 1 a 2 días
para disolver Ag2SO4. Mezclar.
d. Ácido Sulfámico: Se usa solo si se va a eliminar la interferencia de nitritos.
e. Estándar de ftalato hidrógeno de potasio: Triturar ligeramente y luego secar a
peso constante a 110°C. Disolver 0.425g en agua destilada y diluir a 1L. El FHP
tiene un DQO teórico de 1.176g O2/g y ésta solución tiene un DQO teórico de
500mgO2/L. Ésta solución es estable cuando se refrigera, pero puede alterar si hay
desarrollo biológico visible. Preparar y transferir la solución bajo condiciones
estériles.
Procedimiento
a. Tratamiento de las muestras:
Medir el volumen adecuado de muestra y los reactivos en los tubos como se indica
en la Tabla 2. Preparar, digerir y enfriar las muestras, el blanco y uno o más
estándares como se indica en el procedimiento.
b. Medición de muestras
 Escoger una muestra homogénea. Las muestras que contengan sólidos
sedimentables necesitan ser homogenizadas con un agitador.
 Precalentar el reactor Hanna HI 839800 a 150°C (302°C). No usar un horno u
horno microondas, debido a que las muestras pueden dispersarse y generar una
atmósfera corrosiva y posiblemente explosiva.
 Remover la tapa de dos viales.
 Añadir exactamente 2.0 mL de muestra a un vial y 2.0 mL de agua desionizada a
otro vial (blanco)- según sea el rango de DQO-, manteniendo los viales a un ángulo
de 45 grados. Cerrar la tapa fuertemente y mezclar invirtiendo cada vial un par de
veces.

Tabla 2: Cantidad de muestra que se debe añadir a los viales

Niveles de demanda
Rango bajo Rango medio Rango alto
química de oxígeno

Cantidad de muestra y de
agua ultrapura (para 2.0mL 2.0mL 0.2mL
blancos) a procesar

 Insertar los viales en el reactor y calentarlas por 2 horas a 150°C.

 Al final del período de digestión cortar el fluido eléctrico del reactor. Esperar por 20
minutos, para permitir que los viales enfríen a 120°C.
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Invertir cada vial varias veces mientras siga caliente, luego colocarlos en una
gradilla, para que se enfríen a temperatura ambiente. No moverlas o invertirlas, ya
que las muestras pueden volverse turbias. Dejar que la materia en suspensión se
asiente y asegurarse de que la trayectoria óptica es clara.
 Seleccionar el método Demanda Química de Oxígeno, rango bajo, medio o alto:
LR, MR, HR (COD), según sea el caso, siguiendo uno de los métodos
especificados: automático, semiautomático y manual.
 Colocar el vial que contiene el blanco en el equipo e introducirlo completamente.
 Presionar Zero y esperar la identificación del vial. Si eso se hiciese exitosamente,
el instrumento realizará una secuencia de cero y después de algunos segundos se
mostrará en la pantalla "- 0.0 -". Ahora la medida está en cero y listo para las
mediciones.
 Remover el vial que contiene el blanco.
 Colocar el vial que contiene la muestra en el equipo e introducirla completamente.
 Presionar leer y esperar la identificación del vial. Si fue realizado correctamente, el
instrumento realizará la lectura.
 El resultado de las mediciones se da en las unidades de mg/L de demanda de
oxígeno.
c. Preparación de la curva de calibración
Prepare al menos cinco estándares de solución de ftalato de hidrógeno de potasio
con los equivalentes de DQO para cubrir cada intervalo de concentración. Enrasar
con agua reactiva; utilizar los mismos volúmenes de reactivos, tubos o el tamaño de
ampolla y el procedimiento de digestión como para las muestras. Preparar curva de
calibración para cada nuevo lote de tubos o ampollas o cuando los estándares
elaborados como se mencionaron anteriormente difieren en ≥ 5% a partir de la
curva de calibración. Las curvas deben ser lineales. Sin embargo, puede ocurrir un
poco de no linealidad, según el instrumento utilizado.

VI. Cálculos y Resultados:

 Determinación de Demanda Química Oxigeno:

Cálculos de Demanda Química de Oxígeno mediante Método Titulométrico

DQO como mg O2/L= (A-B) x M x 8000

mL de muestra

Donde:
A= mL SAF usado para el blanco
B= mL SAF usado para la muestra
M= Molaridad de SAF
8000= Miliequivalente en peso de oxígeno* 1000mL/L

Analizar muestras en duplicado debido al pequeño tamaño de la muestra. Las

muestras que no son homogéneos pueden requerir múltiples determinaciones para un
análisis preciso. Los resultados deben estar de acuerdo en un ± 5% de su promedio a
menos que el estado de la muestra indique otra cosa.

b.- Cálculos de demanda química de oxígeno mediante método colorimétrico

Si las muestras, estándares y blancos se ejecutan en las mismas condiciones de
volumen y la longitud del camino óptico, el cálculo de DQO es de la siguiente manera:
DQO como mg O2/L= mgO2 en volumen final x 1000
mL muestra

VII. Conclusiones:
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VIII. Discusiones:

IX. Recomendaciones:

X. Referencias Bibliográficas:

ND
 STANDAR METHODS. For the examination of water and wastewater. 22 .
Edition. 2012.

XI. Anexos: