Proyecto Curricular Hematología 1

Guías de Laboratorio

REPASO SERIES LEUCOCITARIAS1

Esta guía de laboratorio tiene como propósito presentar una breve descripción morfológica de
las diferentes líneas leucocitarias y sus estados de maduración, así como los cambios
antigénicos que sufren y la positividad de las coloraciones citoquímicas que ayudan a la
diferenciación de los blastos.

SERIE GRANULOCÍTICA

Incluye polimorfonucleares neutrófilos, basófilos, eosinófilos y sus precursores. Se caracterizan

por la presencia de abundantes gránulos y un núcleo lobulado en las formas maduras.
La célula Progenitora Hematopoyética o Stem Cell (HSC), bajo estímulos de algunas citoquinas
y factores de crecimiento (IL-3, IL-4, GM-CSF, SCF, FLT3-L y otros), se diferencia en Progenitor
Mieloide Común (CMP), del que se deriva el Progenitor Megacariocítico - Eritroide (MEP) y el
Progenitor Granulocítico Monocítico (GMP); de este último se deriva la Unidad Formadora de
Colonias Eosinófila (CFU-Eos), Basófila (CFU-Bas) y Granulocítica-Monocítica (CFU-GM), la cual
se diferencia en Unidad Formadora de Colonias Granulocítica (CFU-G) y Monocítica (CFU-M).

CLP

CFU Meg

MEP

HSC
CFU Ery

CFU M Monoblasto Promonocito Monocito

CMP
CFU GM

CFU G Mieloblasto Promielocito Mielocito Metamielocito Banda Polimorfo

Neutrófilo Neutrófilo Neutrófila Neutrófilo

GMP
CFU Bas Mieloblasto Promielocito Mielocito Metamielocito Banda Polimorfo
Basófilo Basófilo Basófila Basófilo

CFU Eos Mieloblasto Promielocito Mielocito Metamielocito Banda Polimorfo

Eosinófilo Eosinófilo Eosinófila Eosinófilo

CLP: Progenitor Linfoide Común, CFU-Meg: Unidad Formadora de Colonias Megacaricítica CFU-Ery:
Unidad formadora de Colonias Eritroide. Adaptado de: Bain B. The Normal Bone Marrow. En: Jaffe E, et
al. Hematopathology. 2011

1
Natalia María Guevara Arismendy, Microbióloga y Bioanalista, estudiante Maestría en Microbiología y
Bioanálisis con énfasis en Hematología. Servicio Social Obligatorio en Hematología.

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Mieloblasto:
Es el primer precursor granulocítico que puede diferenciarse en médula ósea.
Morfológicamente no puede distinguirse entre los mieloblastos que darán origen a eosinófilos,
basófilos o neutrófilos.

Morfología: Mide entre 10 y 20µm de diámetro, el núcleo es de forma

redonda u oval, puede ser ligeramente excéntrico y la relación núcleo
citoplasma es aumentada (5:1); la cromatina es laxa y generalmente se
observan entre 2 y 5 nucléolos. El citoplasma es escaso y de tonalidad
basófila variable, en ocasiones pueden observarse gránulos primarios o
azurófilos y según su cantidad, se clasifican en mieloblastos tipo I, tipo
II y tipo III.

Coloraciones Citoquímicas: Los mieloblastos son positivos para la coloración de

Mieloperoxidasa (MPO) y Sudán Negro B, mientras que son negativos para Ácido Peryódico
de Schff (PAS), lo cual permite su diferenciación con los linfoblastos. La positividad para
MPO se define por la tinción café-marrón del citoplasma celular y en el caso del SBB se tiñe
negro; este patrón de tinción también lo adoptan las células granulocíticas más maduras
como los polimorfonucleares neutrófilos. Una tinción positiva con
MPO o con Sudán Negro B confirma el linaje mieloide de los blastos,
pero un resultado negativo no lo descarta, por lo cual deben
adelantarse pruebas adicionales como la citometría de flujo. En la
imagen se observa un mieloblasto positivo para Sudán Negro B.
Marcadores de Membrana: Expresan marcadores mieloides como CD13 y CD33 débil,
como también marcadores que indican inmadurez (CD34, HLA-DR y CD117).

Promielocito:

Morfología: Es de mayor tamaño que el mieloblasto, mide entre 20-

25µm de diámetro, el núcleo es redondo y ligeramente excéntrico, la
relación núcleo citoplasma es de 5:1; pueden observarse varios
nucléolos y la cromatina presenta escasas zonas de condensación,
especialmente alrededor de los nucléolos. El citoplasma es basófilo y
posee gran número de gránulos azurófilos, en especial adyacentes al
núcleo.

Marcadores de Membrana: Los promielocitos expresan con intensidad CD13 y CD33, la

expresión de CD15 es variable y son positivos para MPO citoplasmática. Pierde la expresión
de moléculas de inmadurez como CD34 y HLA-DR, pero conservan la expresión de CD117.

Mielocito:
Es la última célula granulocítica con capacidad mitótica, hace parte de los pools de
proliferación y maduración en médula ósea. A partir de este estado celular, es aparente la
producción de gránulos específicos, por lo cual pueden diferenciarse morfológicamente en tre

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mielocitos neutrófilos, mielocitos eosinófilos y mielocitos basófilos. Fisiológicamente se

caracterizan porque son móviles pero incapaces de fagocitar.

Morfología: Miden entre 12 y 20µm de diámetro, su núcleo es oval, ligeramente indentado

y de localización excéntrica, la relación núcleo-citoplasma disminuye (2:1); se evidencia
condensación de la cromatina y en condiciones normales no hay
nucléolos. El citoplasma es de tonalidad gris-rosáceo con gránulos
específicos, los cuales generalmente cubren el citoplasma. En el caso
del mielocito basófilo, los gránulos pueden superponerse sobre el
núcleo e impiden su caracterización. La imagen corresponde a un
mielocito neutrófilo.

Marcadores de Membrana: La intensidad de expresión de CD13 y CD33 disminuye con

respecto al promielocito. También expresan CD15 y el CD11b es variable; son positivos para
MPO citoplasmática.

Metamielocito:
Hacen parte del pool de maduración en médula ósea, tienen capacidad de destrucción
intracelular pero aun no fagocitan ni responden a quimiotaxis.

Morfología: Miden entre 10 y 18µm de diámetro, su núcleo es ligeramente oval, con mayor
indentación que el mielocito y su localización es excéntrica; la relación núcleo-citoplasma
disminuye (1,5:1) y la cromatina presenta mayor condensación en grumos. El citoplasma es
de tonalidad gris-rosácea y se observan gránulos específicos, los cuales generalmente
cubren el citoplasma. En el caso del mielocito basófilo, los gránulos pueden superponerse
sobre el núcleo y dificultan su caracterización.
Metamielo cito neutrófilo (izquierda) y mielocito neutrófilo
(derecha).

Marcadores de Membrana: Expresan en su membrana CD13, CD33, CD11b, CD15 y CD16,

como también son positivos para MPO citoplasmática.

Banda:
Hacen parte del pool de maduración y de almacenamiento en médula ósea. Son móviles, con
capacidad de adhesión y cierta capacidad fagocítica. Aumentan en procesos infecciosos que
cursan con desviación a la izquierda.

Morfología: Miden entre 10 y 15µm de diámetro, su núcleo tiene forma de herradura o

cinta, la relación núcleo-citoplasma disminuye (1:2) y la cromatina presenta mayor
condensación, en grumos. El citoplasma es abundante y está cubierto de gránulos
específicos.

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a. Banda Neutrófila
b. Banda Eosinófila

Marcadores de Membrana: Al igual que los metamielocitos, las bandas expresan en su

membrana CD13, CD33débil, CD11b, CD15 y CD16, como también son positivos para MPO
citoplasmática.

Polimorfonuclear neutrófilo:
Hace parte del pool de almacenamiento en médula ósea. En sangre periférica puede
permanecer entre 6 y 7 horas y se encuentra en dos pools: circulante y marginal, cada uno con
cantidades similares de polimorfonucleares neutrófilos.
Morfología: Miden entre 10 y 15µm de diámetro, el núcleo está
compuesto por dos a cuatro lóbulos unidos por filamentos y en
ocasiones pueden observarse algunas células con cinco lóbulos; la
cromatina está totalmente condensada. La relación núcleo-citoplasma
es 1:3, el citoplasma es abundante y se encuentra cubierto de gránulos
neutrófilos finos que dan apariencia rosada al citoplasma.
Marcadores de Membrana: Expresan en su membrana CD10, CD13, CD33, CD11b, CD15 y
CD16, son positivos para MPO citoplasmática.

Polimorfonuclear eosinófilo:

Morfología: Miden entre 10 y 15µm de diámetro, el núcleo está

compuesto por 2 a 3 lóbulos unidos por filamentos, la cromatina se
observa totalmente condensada, la relación núcleo-citoplasma es 1:3.
El citoplasma es abundante y no se observa, ya que está cubierto de
gránulos eosinófilos grandes, redondos, refringentes y de color
naranja.

Polimorfonuclear basófilo:

Morfología: Miden entre 10 y 15µm de diámetro, el núcleo está

compuesto por 2 a 3 lóbulos unidos por filamentos, la cromatina se
encuentra totalmente condensada, la relación núcleo-citoplasma es
1:3. El citoplasma es abundante y no se observa, ya que está cubierto
de gránulos basófilos grandes, redondos, y de color negro, los cuales
también se disponen encima del núcleo e impiden su apreciación.

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SERIE MONOCÍTICA

Hace parte del sistema mononuclear, se caracteriza por su gran capacidad fagocítica y de
presentación antigénica, funciones esenciales para la posterior ejecución de la respuesta
inmune adquirida. Provienen del Progenitor Mieloide Común (CMP), de la cual se deriva las
Unidad Formadora de Colonia Granulocítica - Monocítica (CFU-GM) y ésta se diferencia en la
CFU-Monocítica y Granulocítica para la producción de monocitos y polimorfonucleares
neutrófilos, respectivamente.

Monoblasto:
Es el más inmaduro de esta línea celular; al igual que el promonocito, hace parte del
compartimiento mitótico en médula ósea.
Morfología: Mide entre 12 y 20µm de diámetro, el núcleo es de forma
redonda u oval, la cromatina es laxa, fina y de color púrpura claro,
característicamente presenta de 1 a 3 nucléolos. La relación núcleo
citoplasma está aumentada (2:1), el citoplasma es más abundante que
en el mieloblasto, es de color azul claro y puede presentar
protrusiones; no presenta granulación.

Coloraciones Citoquímicas: Los monoblastos pueden ser débilmente positivos para la

coloración de Mieloperoxidasa (MPO). Las coloraciones que se emplean son las esterasas
específicas e inespecíficas. En el caso de las esterasas inespecíficas (alfa naftil acetato -ANA
y alfa naftil butirato -ANB), muestran una actividad citoplasmática difusa en monoblastos y
promonocitos y al agregar fluoruro de sodio la reacción se inhibe. Por su parte, las
esterasas específicas (naftol-ASD-cloroacetato esterasa -CAE) son útiles para distinguir
células granulocíticas de monocíticas ya que sólo tiñe las células granulocíticas y sus
precursores.
Polimorfonuclear neutrófilo MPO positivo (izquierda) y monoblasto
MPO negativo (derecha).

Marcadores de Membrana: Expresan fuertemente marcadores mieloides como CD13 y

CD33, además expresan marcadores monocíticos como CD4 y en ocasiones CD14 débil;
también expresan marcadores que indican inmadurez (CD34 Y CD117). Toda la serie
monocítica es negativa para MPO citoplasmática y positiva para HLA-DR.

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Promonocito:

Morfología: Mide entre 12 y 18 µm, el núcleo es de forma redonda o

irregular, con pliegues o indentaciones, la cromatina es fina y reticular,
comienza a condesarse, puede observarse un nucléolo. La relación
núcleo citoplasma es 2:1, el citoplasma es menos basófilo y contiene
gránulos finos de color lila o azul rojizo.

Marcadores de Membrana: Es positivo para CD11b, CD13, CD15 débil y CD33, es positivo
para los marcadores monocíticos CD4, CD14, CD36 y CD64 y conserva la expresión de HLA-
DR.

Monocito:
Puede estar en circulación entre 8 y 70 horas, tiende a marginarse hacia las paredes
vasculares. Cuando pasa a tejido, se transforma en macrófago, en donde puede vivir de días a
meses dependiendo de la localización anatómica y de las funciones que desempeñe.

Morfología: Mide entre 12 y 16µm de diámetro, el núcleo es

pleomórfico y la cromatina se dispone en franjas finas de color
púrpura claro. La relación núcleo-citoplasma es de 2.5:1, el citoplasma
es abundante, de color azul grisáceo y puede presentar bordes
irregulares. La granulación es fina, color azul rojizo o lila en cantidad
variable.

Marcadores de Membrana: Los monocitos son positivos para CD11b, CD13, CD15 débil,
CD33, CD4, CD14, CD36, CD64 y HLA-DR.

SERIE LINFOIDE

Los linfocitos son las células efectoras de la respuesta inmune adquirida y hacen parte del
sistema mononuclear. Se originan en médula ósea a partir de la diferenciación de la célula
madre progenitora hematopoyética la cual se diferencia en la Unidad Formadora de Colonias
Linfoide (CFU-L), el proceso de maduración finaliza en timo para los linfocitos T y en médula
ósea para los linfocitos B.

Linfoblasto:

Morfología: Mide entre 10 y 18µm de diámetro, el núcleo es de forma redonda u oval sin
hendiduras y la relación núcleo citoplasma se encuentra aumentada (8:1); la cromatina es
laxa y fina, pueden observarse 1 a 2 nucléolos pequeños. El citoplasma es escaso y de
tonalidad basófila, normalmente sin gránulos. En los blastos linfoides pequeños se dificulta
la observación de los nucléolos, la cromatina parece más compacta, pero no se evidencia
condensación.
Coloraciones Citoquímicas: Los linfoblastos son negativos para MPO y sudán negro B,
mientras que son positivos para PAS, con un patrón en bloques de color fucsia en el

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citoplasma. Los polimorfonucleares neutrófilos adoptan esta misma coloración e n todo su

citoplasma y sirven como control positivo del procedimiento.
Una tinción positiva con PAS en bloques confirma el linaje linfoide de los blastos, pero un
resultado negativo no lo descarta, por lo cual deben adelantarse pruebas adicionales como
la citometría de flujo. Además, esta última es imprescindible para diferenciar si los
linfoblastos son de linaje T o de linaje B.

a. Linfoblastos de tamaño heterogéneo

b. Linfoblasto PAS positivo

Marcadores de Membrana: Los linfoblastos expresan marcadores de inmadurez como

CD34, HLA-DR y TdT. En caso que sean de linaje T son positivos para CD2 y CD7 en
membrana y positivos para CD3 citoplasmático. Los linfoblastos B expresan CD79a
citoplasmático y en su membrana expresan CD19, la expresión de CD20 es variable.

Prolinfocito:

Morfología: Mide entre 10 y 18µm o puede ser más pequeño que el

linfoblasto, el núcleo es de forma redonda u oval y en ocasiones está
ligeramente indentado; la cromatina presenta condensación en algunas
regiones y es característica la presencia de un nucléolo central muy
definido. La relación núcleo citoplasma es 6:1; el citoplasma es
moderadamente basófilo y en ocasiones pueden observarse escasos
gránulos azurófilos.

Marcadores de Membrana: En caso que sean de linaje T expresan en su membrana CD2,

CD7 y también CD3 débil, son positivos para CD3 citoplasmático. Los prolinfocitos de linaje
B son positivos para CD79a citoplasmático y en membrana expresan CD19, CD20 y CD22.

Linfocitos:
Son la célula más madura de la serie linfoide. En sangre periférica se encuentran tres
subpoblaciones inmunológicas:
Linfocitos T: Corresponden a aproximadamente el 70% de los linfocitos circulantes.
Expresan en membrana CD2, CD3, CD5 y CD7.
Linfocitos B: Representan entre el 10 y 20% de los linfocitos circulantes. Expresan CD19,
CD20 y CD22, como también CD79a citoplasmático.
Linfocitos NK: Son menos del 10% de los linfocitos circulantes. Expresan CD16, CD56 y
CD57.
Dependiendo del tamaño, se pueden agrupar en linfocitos pequeños, medianos y grades.

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Linfocito Pequeño:

Morfología: Mide entre 7 y 9µm de diámetro, el núcleo es de forma

redonda u oval y en ocasiones tiene hendiduras, su cromatina es densa
y no tiene nucléolos; la relación núcleo citoplasma es 4:1. El citoplasma
es escaso y azul celeste sin gránulos.

Linfocito Mediano:

Morfología: Mide entre 10 y 12µm de diámetro, el núcleo es de forma

redonda u oval y en ocasiones posee hendidura, su cromatina es
menos densa en comparación con el linfocito pequeño, no tiene
nucléolos; la relación núcleo citoplasma es 1:2. El citoplasma es más
abundante que en el linfocito pequeño y es de color azul pálido, en
ocasiones presenta gránulos azurófilos.

Linfocito Grande:

Morfología: Mide entre 12 y 16µm de diámetro, el núcleo es de forma

redonda u oval, puede estar ligeramente indentado y excéntrico, su
cromatina es menos densa en comparación con el linfocito pequeño y
no tiene nucléolos. El citoplasma es abundante y de tonalidad basófila
variable, posee gránulos azurófilos.

SERIE PLASMÁTICA

Se origina a partir de la estimulación antigénica de los linfocitos B en un proceso conocido

como linfoblastotransformación o inmunoblastotranformación.

Plasmoblasto:
Morfología: Mide entre 12 y 24µm de diámetro, el núcleo es de forma
redonda u oval y de localización excéntrica, la relación núcleo
citoplasma es 4:1; la cromatina es laxa, reticulada y se observan entre
1 y 3 nucléolos. El citoplasma es azul y posee un halo perinuclear.

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Proplasmocito:

Morfología: Mide entre 20 y 25µm de diámetro, el núcleo es de forma

redonda u oval y de localización excéntrica, la relación núcleo
citoplasma es 2:1; la cromatina es moderadamente burda con algunas
zonas de condensación y se observan entre 1 y 2 nucléolos. El
citoplasma es abundante, de tonalidad basófila, posee halo perinuclear
y en ocasiones puede tener pequeñas vacuolas.

Plasmocito:
Es la célula funcional de la serie plasmática, produce y secreta anticuerpos. En citoplasma
puede detectarse IgM, IgG, IgA, o IgE.

Morfología: Mide entre 8 y 18µm de diámetro, el núcleo es ovoide y de

localización excéntrica, la relación núcleo citoplasma es 1:2; la
cromatina es densa con un patrón similar a los radios de bicicleta y no
posee nucléolos. El citoplasma es abundante, de tonalidad basófila,
posee halo perinuclear y en ocasiones puede tener pequeñas vacuolas.
Marcadores de Membrana: Las células plasmáticas expresan CD19, CD38, CD138 y CD79a
citoplasmático.

BIBLIOGRAFÍA

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