UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

INGENÍERIA EN BIOTECNOLOGÍA

VIROLOGÍA

Integrantes: Cajas Katherin, Pumisacho Andrea

Fecha: 27 de julio del 2018 Curso/Paralelo: NRC - 5372

TEMA: Virus con RNA+ que si presentan RNA subgenómico

Composición de la partícula y del genoma viral

 Composición de la partícula

El virión tiene 70 nm de diámetro y está compuesto por unidades repetitivas de las

glicoproteínas transmembrana E1 y E2 (240 heterodímeros de E2 / E1 dispuestos como
espículas triméricas en su superficie), la cápside (C), una bicapa lipídica derivada del huésped, y
una sola molécula de ARN del genoma (Galán et al., 2015).
 Composición del genoma viral

El genoma tiene aproximadamente 11805 nucleótidos de longitud y codifica las proteínas no

estructurales (nsP) en el extremo 5 'y las proteínas estructurales en el extremo 3'. Los nsPs se
traducen del ARN genómico y las proteínas estructurales de un ARN subgenómico (Galán et
al., 2015).
Tiene una estructura de metilguanilina (capuchón) en posición 5’ y una cola de poli-A en su
extremo 3’
Ciclo de replicación
La entrada de CHIKV en la célula huésped se ve facilitada por la interacción de la glicoproteína
de la envoltura E2 (antireceptor) con los receptores como la fosfatidilserina (PtdSer) (PVEER),
los glicosaminoglicanos (GAG) y la integrina alfa V (Bharat et al., 2018). El virus entra a través
de endocitosis mediada por mecanismos dependientes e independientes de clatrina. El pH bajo
al entorno del endosoma permite la fusión entre la glicoproteína de la envoltura E1 y la
membrana endosomal, lo que genera la liberación de la nucleocápside viral (Abdelnabi, Neyts,
& Delang, 2015). Se produce la decapsidación del ARN viral seguido de la traducción de la
poliproteína no estructural que se escinde para producir el precursor nsP123 y la proteína nsP4
libre. Estos productos forman un complejo de replicación inicial (replicasa viral) localizado en
vacuolas citopáticas intracelulares (Thaa et al., 2015), donde sintetizan el ARN de cadena
negativa, que actúa como una plantilla para la generación del ARN de sentido positivo y ARN
subgenómico (26S).
El ARN 26S sirve como el ARNm para la síntesis de un polipéptido que genera la cápside (C) y
el polipéptido pE2-6K-E1. LA cápside se ensamblan con el genoma para producir la
nucleocápside (Bharat et al., 2018) y pE2-6K-E1 se procesa en el retículo endoplásmico (ER)
y genera glicoproteínas pE2 y E1 que forman complejos y migran hacia la membrana celular a
través del complejo de Golgi. En el proceso pE2 se escinde para formar E2 y E3 maduros.
Finalmente, los complejos nucleocápsidos se ensamblan en el citoplasma y brotan a través de la
membrana celular adquiriendo una envoltura de bicapa lipídica que contiene la glicoproteína
E1-E2 (Gould et al., 2010).
El mosquito Aedes aegypti a través de la picadura introduce los viriones que migran hacia los
capilares subcutáneos, donde ocurre una replicación viral local al nivel de células que son
susceptibles como los fibroblastos, las células endoteliales y los macrófagos. Luego entra en los
ganglios linfáticos cercanos, donde acontece otra replicación (Martínez & Torrado, 2015). Se
disemina a la sangre hasta alcanzar los órganos diana: hígado, músculos, articulaciones y
cerebro (Farah et al., 2016).

Expresión
 Función de las proteína codificadas por el genoma del virus en relación al ciclo de
vida del virus

El genoma de CHIKV puede generar varias proteínas con múltiples funciones que garantizan un
ciclo viral altamente efectivo (Bharat et al., 2018).
Proteína Función
nsp1 Necesario para el inicio de síntesis de ARN de cadena negativa. También se
cree que es la enzima, o una componente de la enzima, que encapsula los ARN
genómicos y subgenómicos durante la transcripción.
nsp2 Tiene la actividad de una helicasa involucrada en desenrollarse el dúplex
durante la replicación y transcripción del ARN. También se ha encontrado
específicamente requerido para la síntesis del ARNm subgenómico 26S,
presumiblemente para el inicio de su transcripción.
nsp3 El papel de nsP3 en la replicación de CHIKV no está claro. Sin embargo,
informes recientes mostraron que nsP3 interactúa con la chaperona de estrés del
huésped HSP-90, que promueve la replicación de CHIKV. También se ha
propuesto que nsP3 bloquea el ensamblaje de gránulos de estrés interactuando
con la proteína de unión al dominio Ras3GAP SH3 (G3BP) para promover la
replicación del ARN CHIKV
nsp4 Función de ARN polimerasa dependiente de ARN.

 Cuál es la dinámica con la célula hospedera o como se lleva a cabo la expresión del
genoma
El ARN genómico 49S se ilustra esquemáticamente en el centro, con su ORF traducido. La
terminación en el codón del ópalo produce P123, cuya función principal en la replicación, tiene
actividad de proteasa que actúa en bollos para procesar las poliproteínas en réplicas de ARN
activo; este dominio de proteinasa se encuentra en la región nsP2. La lectura del codón de
parada de ópalo produce P1234, que puede formar una replicasa activa.
El ARNm subgenómico 26S se expande a continuación para mostrar el ORF estructural y sus
productos de traducción. Los polipéptidos presentes en el virión están sombreados. vcRNA es el
complemento menos filamento del ARN genómico (Stratuss, J & Stratuss E, 1994).

Desarrollo de la infección viral.

 Mecanismos de daño celular
La proteína nsP2 de CHIKV tiene la capacidad de inhibir la ruta de señalización JAK/STAT
necesaria para generar la respuesta del IFN I (Goertz, 2018). La proteína nsP2 promueve la
degradación de la subunidad prb1 de la RNA polimerasa inhibiendo la transcripción en la célula
huésped y en consecuencia se reduce la expresión de genes estimulados con interferon (ISG)
que pueden controlar al virus. Por otra parte, la expresión de grandes cantidades de
glicoproteínas virales que se modifican postraduccionalmente en el RE puede provocar estrés en
el RE y desencadenar la respuesta de proteína desplegada (UPR) que puede provocar efectos
antivirales (Fros & Pijlman, 2016). Debido a esto nsP2 inhibe a la UPR.
La apoptosis es un mecanismo de defensa para limitar la propagación de infecciones virales,
interferir con ella puede ser importante para el establecimiento de infecciones persistentes. En
Rubella virus los estímulos apoptóticos pueden inducir un cambio conformacional en Bax
(molécula formadora de poros). La proteína de la cápside RV se une a Bax. Se presenta un
cambio conformacional en Bax, seguido por la formación de heterooligómeros. Los oligómeros
de Bax-cápside no permiten la salida del citocromo c de la mitocondria por lo que se inhibe la
apoptosis (Ilkow, Goping, & Hobma, 2011).

 Tipos de infecciones que ocasionan los virus

Infecciones sintomáticas donde la fiebre de Chikungunya se caracteriza por una enfermedad

febril abrupta, poliartralgia y erupción maculopapular . El período de incubación dura de 2 a 4
días (rabia de 1 a 12 días). Afecta principalmente tobillos, rodillas, manos, muñecas, pies,
hombros y codos. La iridociclitis y la retinitis son las manifestaciones oculares más comunes
asociadas con la infección por CHIKV. Infecciones asintomáticas ocurren en el 5-15% de los
casos. (Galán et al., 2015).

 Interacción del virus con el organismo infectado

El CHIKV es transmitido al humano principalmente por las especies de mosquitos Aedes

aegypti y Aedes albopictus, La transmisibilidad es determinada por la capacidad del virus de
multiplicarse en estos vectores, pudiendo en la naturaleza alternar su replicación entre estos y
mamíferos superiores. La hembra del mosquito de género Aedes adquiere el virus al tomar
sangre de un hospedero vertebrado virémico con el fin de obtener las proteínas necesarias para
el desarrollo de los huevos. El virus infecta y se reproduce en las células epiteliales del
mesenterón, intestino medio del mosquito. Los virus de la progenie son liberados a través de la
membrana basal, para alcanzar la hemolinfa del insecto. Por esta vía se disemina e infecta a
otros tejidos, entre ellos las glándulas salivales. Aquí el virus establece una infección
persistente, alcanzando altos títulos en la saliva. Cuando el mosquito pica nuevamente secreta
saliva, la cual contiene elementos anticoagulantes que evitan el taponamiento de la probóscide,
y transmite el virus al nuevo hospedero (Cervantes & Sanjuán, 2016).
 Respuesta del organismo a la infección viral, síntomas.
La infección aguda por CHIKV conduce a la elevación de IFN de tipo I y numerosas
quimiocinas proinflamatorias, citoquinas (INFα, CXCL9, CXCL10, CCL2, IL6 e INFγ) y
factores de crecimiento (Farah et al., 2016). IFN tipo I controla la replicación viral y la
patogénesis. EL CXCL9 y el CXCL10 regulan la migración de monocitos /macrófagos, células
asesinas naturales y células T de memoria. La infección aguda por CHIKV se caracteriza por
fiebre alta, poliartralgia severa, malestar gastrointestinal, trastornos neurológicos etc. La
infección crónica se caracteriza por la persistencia de síntomas durante más de 3 meses. Puede
generar artropatía crónica destructiva. La infección aguda en humanos conduce a la activación y
proliferación de células T CD8 +, mientras que la respuesta de células T CD4 + es dominante
durante la fase crónica. En la infección se desarrollan anticuerpos IgM e IgG potentes y
neutralizantes que controlan la viremia y confieren protección cruzada contra infecciones
secundarias por CHIKV en modelos animales (Silva & Dermody, 2017).
Se transmite el virus por la picadura de un mosquito infectado Aedes aegypti o Aedes
albopictus. Sin embargo, la transmisión materno-fetal puede ocurrir intraparto (Silva &
Dermody, 2017).

Prevención y/o terapia de la infección viral

Actualmente no se cuenta con vacunas o medicamentos contra el CHIKV autorizados. Se han
investigado varias posibles vacunas que se encuentran en fase de estudios preclínicos y clínicos.
La vacuna TSI-GSD-218 contiene la cepa 181/25 atenuada en donde se producen dos
mutaciones puntuales en la proteína E2. La mutación en el residuo 82 ayuda a la neutralización
del virus por anticuerpos específicos de CHIKV. Sus estudios se detuvieron después de la fase
dos pues se presentó reversión en la mutación del residuo 82. La vacuna CHIKV / IRES
(V1/V2) contiene un virus atenuado en donde el sitio interno de entrada ribosomal (IRES)
reemplazó al promotor subgenómico, provocando una disminución de la expresión de proteínas
estructurales virales (Silva & Dermody, 2017).
La ribavirina es el único medicamento con licencia de la FDA probado en humanos que tuvo un
resultado positivo en pacientes infectados con CHIKV . Sin embargo, solo es efectiva en las
primeras etapas del ciclo de vida de CHIKV (Mishra et al., 2016). La medicina puede inhibir la
replicación del genoma viral e inhibe la inosina monofosfato deshidrogenasa (IMPDH), que
conduce al agotamiento de las reservas de GTP (Bharat et al., 2018).

Bibliografía
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