UNIVERSIDAD MARIA AUXILIADORA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

“AÑO DEL DIÁLOGO Y LA RECONCILIACIÓN NACIONAL”

CURSO: BIOQUIMICA II

PRACTICA Nº 01

TRIGLICERIDO (GPO- PAP)

REACTIVO LIQUIDO PARA LA DETERMINACION FOTOMETRICA
DE TRIGLICERIDOS EN SUERO O PLASMA.
DOCENTE: Mg. Q.F. GIRALDO BALDERRAMA, Leonardo Jesús

INTEGRANTES:
- CASTAÑEDA TORRES, Wilmer
- ESPINOZA CAPCHA, Mariela
- FLORES ANGELES, Juan
- ÑAVINCOPA RIVEROS, Betsabe
- ROJAS FLORES, Rosaura

CICLO: VI
TURNO: NOCHE

Lima, 15 de febrero del 2018.

 TRIGLICERIDOS 2018

introduccion

El aumento de los triglicéridos en la sangre o hipertrigliceridemia, es una entidad

compleja y heterogénea, en donde participan diferentes tipos de lipoproteínas
como quilomicrones y lipoproteínas de muy baja densidad, las cuales sufren un
rápido y extenso metabolismo para formar partículas más pequeñas o
"remanentes", que invaden el plasma y los tejidos. Estas partículas pequeñas o
remanentes tienen una importante participación en la aterogénesis.

Hace 30 años, se publicó el primer estudio que daba a conocer la estrecha

relación entre la hipertrigliceridemia y la enfermedad de las arterias coronarias.
Este concepto fue ampliamente debatido, existiendo muchas controversias, si su
papel en la enfermedad de las arterias coronarias se debia más, al descenso de
las lipoproteinas de alta densidad (HDL) que al incremento en los niveles de
triglicéridos en la sangre Posteriormente, aparecen nuevas publicaciones
reafirmando a la hipertrigliceridemia como un factor de riesgo independiente para
la enfermedad coronaria.

Los niveles elevados de triglicéridos no solo estan vinculados a la mayor

incidencia de enfermedad coronaria, sino que influyen en la progresión de la
misma.

En esta práctica aprenderemos a calcular e identificar los valores normales de

triglicéridos en una muestra problema recolectada de un compañero del equipo,
realizando los procedimientos sabremos si su nivel de triglicéridos está dentro del
rango establecido o se encuentra elevado.

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 TRIGLICERIDOS 2018

PARTE TEORICA

TRIGLICERIDOS:
1. DEFINICION:
Los triglicéridos son lípidos (grasas), al igual que el colesterol y los
fosfolípidos. Los triglicéridos son la forma ideal para el almacenamiento de
energía en nuestro organismo. Un hombre adulto y delgado tiene unos 15
kg de triglicéridos, lo que
representa un depósito de
energía suficiente como para
vivir tres meses sin comer. El
lugar donde se almacenan se
llama tejido adiposo y, además
de servir como depósito, tiene
otras funciones importantes. Por
ejemplo, debido a que los
triglicéridos son líquidos a
temperatura ambiente, las
capas de grasa alrededor de
algunos órganos, como los
riñones, actúan como una
especie de almohadón líquido
que proporciona una importante
protección; también el tejido
adiposo subcutáneo determina que el aspecto físico de una mujer y el de un
hombre sean diferentes, y actúa como una capa aislante térmica. 1

2. FUENTES:
Existen dos fuentes importantes de producción. Una de ellas es la fuente
externa, es decir, los triglicéridos que ingerimos con los alimentos, y otra es
la fuente interna, que consiste en los triglicéridos que produce el hígado.
Los triglicéridos de ambas fuentes van a circular por la sangre para llegar a
todo el organismo en un medio de transporte que recibe el nombre de
lipoproteínas; las que transportan a los triglicéridos procedentes de la dieta
se llaman quilomicrones y las otras, VLDL. No debemos de olvidar que

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 TRIGLICERIDOS 2018

estos medios de transporte no son exclusivos de los triglicéridos, sino que

también transportan a otros lípidos como el colesterol. 1

3. VALORES NORMALES:
Los triglicéridos son una forma de grasa que se encuentra circulando por
nuestra sangre, poseen una gran importancia porque aportan energía a
cada célula de nuestro cuerpo, pero su exceso, cuando supera el valor
normal de triglicéridos, se acumula en el tejido adiposo en forma de grasa,
favoreciendo el aumento de peso y la obesidad, además de representar un
factor de riesgo cardiovascular, ya que puede llegar a obstruir las arterias,
entre ellas las coronarias, pudiendo el paciente llegar a sufrir un posible
infarto o Accidente Cerebrovascular (ACV).
Cuando nos realizamos un estudio de triglicéridos, los resultados obtenidos
nos indican (triglicéridos valores normales) cuánta cantidad de esta grasa
está circulando por nuestra sangre. Si los valores de Triglicéridos están
elevados, podemos entender que existe riesgo de que se depositen en
nuestras arterias y las obstaculicen a tal punto que se interrumpa la
circulación y, por consiguiente, se genere daño en el tejido que no es capaz
de recibir oxígeno y nutrientes, generando posibles síntomas y
consecuencias por triglicéridos altos.2

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 TRIGLICERIDOS 2018

Por eso consideremos que:

NORMAL Menor de 150 mg/dL.

LIMITE ALTO Entre 150 y 199 mg/dL.

ALTO Entre 200 y 499 mg/dL.

MUY ALTO Mayor de 500 mg/dL

Su evaluación es importante para el diagnóstico y seguimiento de las

hiperlipidemias ya sean de origen genético o secundario a otras
enfermedades. Los valores elevados aumentan el riesgo de arteriosclerosis
y de enfermedad coronaria.

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 TRIGLICERIDOS 2018

PARTE experimental

A. FUNDAMENTOS DEL METODO:

Los triglicéridos son hidrolizados por una lipasa específica liberando

ácidos grasos y glicerol. El glicerol es fosforilado por la enzima
gliceroquinasa y posteriormente, el glicerol-1-fosfato es oxidado a
dihidroxiacetona fosfato por la enzima glicerol-fosfato oxidasa,
generándose peróxido de hidrógeno. Posteriormente, en una
reacción del tipo Trinder, el peróxido de hidrógeno reacciona con 4-
Aminoantipirina y el ácido 3,5-Dicloro-2-Hidroxi-bencensulfónico para
producir por medio de la enzima peroxidasa un compuesto coloreado
en cantidad proporcional a la concentración de triglicéridos presente
en la muestra, midiéndose la absorbancia a 510 nm. 3

Triglicéridos Lipasa Glicerol + ácidos grasos

Glicerol + ATP GK Glicerol-3-fosfato + ADP

Glicerol-3-fosfato+O2 GPO Dihidroxiacetonafosfato+H2O2

2H2O2+4-AAP+DCBS PAP Comp. Coloreado + 4H2O

B. MATERIALES Y METODOS:

 Reactivo enzimático
Conservados entre 2° y 8°C. y protegidos de la
luz, estables hasta la fecha de caducidad indicada
en la etiqueta

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 TRIGLICERIDOS 2018

 Calibrador o estándar

En la calibración se recomienda utilizar

calibrador sérico VALTROL- C (código
210-130), proceder de igual forma que
con las muestras

 Muestra de suero o plasma

- Aguja n° 21
- Ligadura
- Tubo con anticoagulante
- Algodón
- Alcohol
- Utilizar de preferencia suero o
plasma (Heparina o EDTA) libre
de hemólisis. La muestra debe
tomarse con el paciente en
ayunas. Los tubos y material de
vidrio deben estar limpios y
libres de residuos de detergentes. Los triglicéridos son estables algunos
días entre 2° y 8°C.

 Centrifuga

 Pipetas

 Micropipetas

 Gradillas

 Tubo de ensayo

 Espectrofotómetro

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 TRIGLICERIDOS 2018

C. PROCEDIMIENTO:

Extraer la sangre ( 3mL) del paciente y

luego centrifugarlo.

Colocar tres tubos de ensayo en la gradilla y luego marcarlo

en la parte superior con marcador.

Tubo N° 01: BLANCO

Colocar solo reactivo con una micropipeta de 1000 uL.

1 mL de reactivo
enzimatico

Tubo N° 02: ESTÁNDAR O CALIBRADOR

Colocar 1000 uL. de reactivo enzimático, luego agregar 10

uL. De calibrador o estándar. Debe dar como resultado un
color rosado.
1000 uL de reactivo
enzimático
+
10 uL. de calibrador

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 TRIGLICERIDOS 2018

Tubo N° 03: MUESTRA PROBLEMA

Colocar 1000 uL. de reactivo enzimático, luego agregar 10

uL. De 10 uL. Debe dar como resultado un color rosado
tenue.

1000 uL de reactivo
enzimático
+
10 uL. de suero o plasma.

Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C. o temperatura ambiente (20° a

25°C.). Leer las absorbancias llevando a cero el espectrofotómetro
con el blanco de reactivo. El color resultante es estable por a lo
menos treinta minutos.

medir en el espectrofotómetro: a 510 nm. Y anotar las

absorbancias.

BLANCO 0.301

ESTÁNDAR 1.583

MUESTRA 0.520
PROBLEMA

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 TRIGLICERIDOS 2018

D. RESULTADOS:
Realizar los cálculos necesarios.

RANGO DE REFERENCIAS: 25- 160 mg/ dL

CALCULOS:

a) determinar el factor:

concentración
FACTOR = del calibrador

abs. calibrador

FACTOR = [ ] calibrador
1. 583

FACTOR = 126. 34

b) Determinar el valor de triglicéridos:

TRIGLICERIDOS ( mg/ dL) = FACTOR X Abs. MUESTRA

TRIGLICERIDOS: 126.34 X O.520

TRIGLICERIDOS: 65.69 mg/ dL

RESULTADO: Normal porque está dentro del rango.

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 TRIGLICERIDOS 2018

CONCLUSIONES

 La práctica fue interesante porque nos permitió conocer el método

para saber los valores normales de triglicéridos en nuestra sangre.

 Reforzamos nuevamente los conocimientos sobre la manipulación de

equipos de laboratorio.

 Reforzamos nuevamente los conocimientos sobre la extracción de

fluido sanguíneo y la centrifugación para obtener el plasma.

 La cantidad sangre extraída de nuestro compañero de equipo fue

adecuada para la centrifugación.

 Los resultados obtenidos realizando los cálculos, según la fórmula

es que el nivel de triglicéridos esta normal por que dio como
resultado (65.69 mg/ dL) valor que está dentro del rango
especificado (25- 160 mg/ dL).

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 TRIGLICERIDOS 2018

Recomendaciones

 Tener todo el material de protección personal, que incluyen: gorro,

mandil, guantes, mascarillas.

 Contar con todos los materiales y reactivos del laboratorio.

 Manipular correctamente los instrumentos para evitar su

descalibración.

 Saber la técnica adecuada para la recolección de muestras

sanguíneas, siguiendo el protocolo establecido.

 Manipular correctamente el espectrofotómetro, colocar las muestras

en las diferentes celditas para leer las absorbancias.

 Realizar los cálculos siguiendo el protocolo establecido.

 Lavar todos los materiales y dejar limpio el laboratorio.

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 TRIGLICERIDOS 2018

BIBLIOGRAFIA

1. Fabiani Romero T. Unidad de lípidos. Hospital universitario virgen de la

macarena- Sevilla. (internet). Disponible en: http://www.se-
arteriosclerosis.org/assets/54.pdf

2. Díaz Liendo M. valores normales de colesterol y triglicéridos. (internet).

Disponible en: https://tuchequeo.com/valores-normales-de-colesterol-y-
trigliceridos/

3. VATEK DIAGNOSTIC. Reactivo líquido para la determinación fotométrica

de Triglicéridos en suero o plasma. (internet). Disponible en:
http://andinamedica.com.pe/wp-content/uploads/2016/08/VTK-
trigliceridos.pdf

4. Antonio J. Rodríguez. Triglicéridos, “ el Enemigo Olvidado. Revista

Costarricense de Cardiología Rev. costarric. cardiol vol.4 n.1 San
José Apr. 2002. (internet). Disponible en:
http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1409-
41422002000100006

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