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Bioterios

y
Laboratorios de Experimentación Animal(LEA)

Patricia Genovese
CHEA-CSIC
Universidad de la Republica
“Se debe disponer de instalaciones bien diseñadas, equipadas,
mantenidas y bien utilizadas para obtener resultados válidos y
reproducibles”

Definición de Bioterio: bíos, “vida” y terio "lugar".

Lugar donde se alojan animales que cuentan con una calidad genética y
microbiológica definida donde se realiza la cría, mantenimiento y
experimentación. Se controla la calidad y cantidad de luz, las
renovaciones de aire por hora, la temperatura y la humedad entre otros
factores, acordes a las necesidades de la especie que allí se aloje.

Fines: investigación, producción y docentes


Definición de LEA:

Lugar donde se alojan animales que cuentan con una calidad genética y
microbiológica definida donde se realiza experimentación. Se controla la
calidad y cantidad de luz, las renovaciones de aire por hora, la
temperatura y la humedad entre otros factores, acordes a las necesidades
de la especie que allí se aloje. Podrá o no estar físicamente incluido
dentro del bioterio.

Fines: investigación y docencia.


Factores de mantenimiento de la calidad microbiológica y sanitaria:

Infraestructura edilicia

Equipamiento

Barreras Sanitarias

Funcionarios e Investigadores (principal factor)


Macroambiente: ambiente físico del encierro secundario, temperatura,
humedad, ventilación, luz, sonidos.

Infraestructura Edilicia:

1. módulos con animales estabulados:


- Aislamiento y cuarentena.
- Producción.
-Mantenimiento: racks y jaulas.
-Experimentales: equipamiento para toma de muestras.

2. Servicios:
- Vestuarios.
- Almacenes.
- Lavado y autoclave.
- Eliminación de residuos.
- Administrativa.
- Pasillos.
Estructura Física:
Pisos y paredes: materiales lavables,
resistentes a desinfectantes,
lisos, uniformes y con ángulo sanitario.

Techos: similares a pisos y paredes con ángulo sanitario y con leve


inclinación o abovedados.
Puertas: con cierres herméticos, lisas y de fácil limpieza, con ventanas
de vista y con trampas de escape.
NO deben existir ventanas al exterior
Temperatura
• adecuada a las necesidades de la especie que se esté utilizando, y del
modelo experimental.
• 21-23 ± 2 °C.
• alimentos y productos perecederos de 15 a 20 ºC

Humedad Relativa
• 50 - 70% donde están los animales
• en almacenes debe ser menor
Ventilación
• sin ventilación natural
• con sistemas forzados de impulsión y extracción para:
- suministro de oxígeno
- eliminar calor producido por respiración,iluminación y equipos
- diluir gases contaminantes y partículas
- ajustar humedad
• Aire filtrado (filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air) evitan propagación de
bacterias y virus. Suelen incorporar luz ultravioleta de alta energía para eliminar
cualquier bacteria viva y virus atrapado por el filtro físico, llegando al 99.995% de
eficiencia.)

Renovación:
• suministrar aire fresco
• bajo nivel de olores, gases nocivos, polvo, etc.
• zonas de mantenimiento al menos 20 renovaciones/hs.
• zonas de lavado de 15 a 20 renovaciones/hs
• zonas de almacenamiento y laboratorios.
• Velocidad 0,5 mts/seg
Impulsión y Extracción:
• no directo sobre animales o personas
• extracción en zonas bajas
• presión diferencial en zonas contiguas
Recordar: extracción en zonas bajas

Modificado de: CCAC Lab animal facilities (2003)


Sectores de producción
Sectores de experimentación
TIPOS DE BIOTERIO

INSTALACIONES CONVENCIONALES: Cuartos para animales tienen un soló


acceso por el que entran y salen artículos limpios y sucios.

Existe riesgo de contaminación cruzada entre los cuartos.

Dentro del cuarto debe haber presión negativa y afuera positiva.


TIPOS DE BIOTERIO

CORREDORES LIMPIO y SUCIO: Flujo de tráfico en una sola dirección, la


entrada conduce desde el corredor limpio al cuarto y la salida del cuarto conduce
al pasillo sucio.

El flujo de aire tiene diferentes presiones.


TIPOS DE BIOTERIO

BIOTERIO DE BARRERA Y CONTENCIÓN: mantiene la contaminación fuera


de un área y de contención mantiene la contaminación dentro de un área.
Iluminación
Espectro:
•Sensibles a los verdes y azules, el resto son matices de gris.

Importante para la rata no es el color sino el brillo. Tiene 1/30 la agudeza


visual del humano. Poca visión binocular es “presa” con poca percepción
de profundidad. Ven muy mal con luz brillante o tenue.

Cómo iluminamos?

• ideal la luz fluorescente “luz de día”


• constante para disminuir variaciones fisiológicas (ej.: ciclo estral)
• 12 hs luz / 12 hs oscuridad con encendido y apagado automático
• uniforme en todas las zonas adecuada a la sp.
•mayor o igual a 325 lux
Ruido:

Rango audible de las ratas 200hZ-80kHz (humanos 16hZ-20kHz)


Se denomina ultrasonido por encima de 20kHz y por debajo infrasonido.

Sonido indeseable, importante la intensidad, frecuencia y duración.


El control del ruido se debe considerar en el diseño y operación de las
instalaciones

No usar: radares, alarmas etc.

Actividades ruidosas en áreas separadas del alojamiento de animales


Microambiente: ambiente físico que rodea al animal, es el encierro
primario. Jaula y sus dimensiones, alimento, agua y “cama”.
Debe permitir:

-Necesidades comportamentales, fisiológicas, temperatura, posturas,


Interacción social coespecífica y desarrollo de jerarquías

-Limpio y seco

-Ambiente seguro, sin escapes ni accidentes.

-Poder observar con mínimo disturbio


Factores Ambientales que Afectan a los Animales

Climáticos: temperatura, humedad, ventilación, etc..

Fisicoquímicos: iluminación, ruido, contaminantes, desinfectantes, etc..

Habitacionales: forma, tamaño, tipo,población de las jaulas, etc..

Nutricionales: dietas, agua, esquema de administración, etc..

Situación experimental
Nutricionales

Ración:
• no contaminada y nutircionalmente adecuada.

• administrada diariamente o de acuerdo a los requerimientos de la


especie.

• transportada y almacenada en condiciones adecuadas.

• comederos deben permitir fácil acceso y reducir contaminación con


orina y heces y competencia por acceso a comida.

Importante: temperatura mayor a 21 ºC y


humedad elevada aceleran su deterioro
Agua:

• administrada diariamente o según necesidades


• tratada
• pipetas de bebederos y válvulas automáticas en buen estado
• cambiarlos en lugar de rellenar las mamaderas
CAMA :

LIBRE DE POLVO

AUTOCLAVABLE

LIBRE DE PIGMENTOS

LIBRE DE SUSTANCIAS TOXICAS

Limpieza
Macro y microambiente: Afectan a la salud, el comportamiento y el
bienestar de los animales, que además influyen en los resultados de
la investigación o pruebas experimentales.
Barreras Sanitarias

Conjunto de medidas técnicas, mecánicas, teóricas y sanitarias para


evitar las contaminaciones en cualquier sentido, dentro de un área
de producción, mantenimiento, experimentación o sistema
mixto.(ILAR)
Tipos de Barreras

Barreras Técnicas: instalaciones que permiten tener al animal en el


estado sanitario exigido (Arquitectos e Ingenieros expertos)

Barreras Mecánicas: necesidades de funcionamiento, ventilación,


iluminación, limpieza, esterilización, aislamiento acústico.
(Ingenieros expertos)

Barreras Teóricas: protocolos de trabajo, mantenimientos de


aparatos y equipos, cuarentenas, etc. (Técnicos e Investigadores)

Barreras Sanitarias: crear ambiente eficaz y seguro para evitar


zoonosis y contaminaciones indeseadas (expertos en seguridad
biológica, veterinarios)
Ejemplos de Barreras

• Sistemas de filtración
• Presión diferencial
• Sistemas de esterilización
• Limpieza por aspiración
• Doble puerta
• Pasillos y Accesos
• Zonas de seguridad biológica
• Tratamiento del agua
• Tanque de inmersión
• Barreras anti-roedores e insectos (drenajes con tapas seguras)
• Ropa específica
Tanque de inmersión
Barreras Para el Ingreso de Animales (Cuarentena):

Certificado de procedencia

Transporte adecuado

Permanencia en sala especial antes del ingreso para repetir los


análisis que se considere necesario

Observación clínica mínima 15 días

Derivación por histerectomía


AIRE Estaciones de cambio

Microaislador

Aisladores
Agua

Acidificación con HCl a pH 2.5 – 3


Hipercloración de 3 a 6 ppm
Filtración de agua

Esterilización de botellas y picos: Autoclave


Procedimiento para cajas y jaulas

LAVADO y DESINFECCION mínimo

ESTERILIZACION máximo
Personal Funcionarios e Investigadores (principal factor)

capacitado en el mantenimiento de buenas condiciones de higiene y en la


aplicación de todas las medidas necesarias para prevenir la contaminación.

Vestimenta:

ropa estéril
cubrezapatos
gorro
guantes y mascarilla

Además:
Acreditación en categoría correspondiente.
Certificado sanitario (vacunas especificas)
Detección de sensibilidad a alérgenos.
Actualización de sus conocimientos.
LEA Fac. de Química

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