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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CUYO FACULTAD DE CIENCIAS APLICADAS A LA INDUSTRIA.
CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
DETERMINACIONES EN MANTECA 44
1. TOMA DE MUESTRA 45
2 . PREPARACIÓN DE LA MUESTRA 45
3. EVALUACIÓN SENSORIAL 46
4. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN AGUA 47
5. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN GRASA 47
6 . SOLIDOS NO GRASOS DE LA LECHE 48
7. DETERMINACIÓN DE ACIDEZ DE LA FASE GRASA 48
8 . INDICE DE PERÓXIDOS 49
9. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN SAL 50
10. DETERMINACIÓN DEL ÍNDICE DE REICHERT MEISSL 50
11. ÍNDICE DE POLENSKE 53
12. ÍNDICE DE KIRCHNER 54
13. OTRAS DETERMINACIONES DE GRASAS EXTRAÑAS EN MANTECA: 54
DETERMINACIONES EN QUESOS 54
1. EVALUACIÓN SENSORIAL 55
2. MUESTREO 56
3. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA 56
4. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE AGUA 56
5. DETERMINACIÓN DE LA GRASA DEL QUESO 57
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
Objetivo de análisis:
Consideraciones generales
La leche sin calificativo alguno, es el producto obtenido por el ordeñe total e
ininterrumpido, en condiciones de higiene, de la vaca lechera en buen estado de salud y
alimentación (C.A.A. art. 554).
La leche proveniente de otros animales, se denomina con el nombre de la especie
productora. Las leches segregadas por las distintas especies de mamíferos ofrecen una
composición similar, aunque difieren en las proporciones relativas de sus componentes
mayoritarios y en su contenido en cenizas.
El constituyente característico que la distingue de cualquier otro alimento es la lactosa (D-
glucopiranosil-4-B-galactopiranósido). Otro de los constituyentes únicos es la caseína que
es un complejo de fosfoproteínas.
El contenido en grasa de la leche varía con la raza. La grasa es una mezcla de glicéridos de
16 ácidos grasos, de los cuales el 43% del total de ácidos grasos están provistos de dobles
enlaces y aproximadamente la mitad de ellos son líquidos a temperatura ambiente.
El 5% del nitrógeno total de la leche está representado por sustancias nitrogenadas no
proteicas y el 95% restante por proteínas.
El análisis completo de la leche incluye diversos ensayos físicos, químicos y
microbiológicos.
La leche destinada al procesamiento llega a la planta a granel o en recipientes, y como
análisis de rutina se inspeccionan parámetros como su olor, temperatura de recepción,
densidad, contenido graso, acidez y ensayo de la resarzurina. Las muestras con niveles
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
bajos de extracto seco magro se someten a determinaciones que permitan distinguir el
aguado.
Una vez pasteurizada la leche se la somete al ensayo de las fosfatasas para verificar su
correcto procesamiento y al ensayo del azul de metileno como indicador de su capacidad
de conservación. En leches esterilizadas se realiza el ensayo de turbidez. Además todos
estos productos son sometidos a control de grasa y extracto seco magro.
También se puede realizar el control de restos de pesticidas, antibióticos y contaminación
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con elementos radioactivos como el Sr.
1. MUESTREO
El tamaño de la muestra varía de acuerdo con el análisis a efectuar. Si se van a realizar los
análisis de rutina se deben recoger 250-500 ml, para la determinación de grasas se
necesitan entre 50 y 60 ml de muestra. Si se trata de leche envasada, se retiran uno o dos
recipientes tal cual están expuestos a la venta.
Mezclar bien la leche trasvasándola de una vasija limpia a otra tres o cuatro veces, agitar
30” con varilla de vidrio que llegue al fondo.
Si se formo crema, separarla bien de las paredes del recipiente y agitar hasta que el líquido
esté convenientemente emulsionado o utilizar un homogeneizador para minimizar la
formación de espuma.
Conservar la muestra en un recipiente hermético no absorbente y mantenerlas frías, pero a
una temperatura por encima del punto de congelación hasta su examen. Llenar
completamente los recipientes para su transporte. Taparlos herméticamente y etiquetarlos.
2. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Conservar a 5ºC e inmediatamente antes del análisis llevar la muestra a una temperatura de
20-25ºC, mezclar por inversiones repetidas cuidando de no formar espuma. Si quedara
grasa separada calentar la leche a 38ºC en baño maría, homogeneizar y luego enfriar a
20ºC.
3. CARACTERES ORGANOLÉPTICOS
Aspecto
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Por observación visual directa, no debe presentar grumos, copos, coágulos, flóculos,
mucosidad. Introducir una varilla de vidrio en la capa de crema y retirarla lentamente. No
debe ser filante.
Color, sabor y olor
La definición de olor y sabor de un producto tan complejo como la leche es muy difícil, ya
se trate de olores y sabores normales o anormales.
Entre los principales componentes de la leche la lactosa y el cloruro son los que tienen
sabores característicos: dulce y salado. Pero hay otros componentes menores de sabor
fuerte como la lecitina.
Si bien las proteínas son insípidas, forman una masa que atenúa y equilibra los sabores.
La leche recién ordeñada tiene un olor especial que desaparece rápidamente durante las
manipulaciones.
Defectos del sabor: aparecen en el ordeño y tanto más fuertemente cuanto más reciente se
haya alimentado el animal.
También hay ciertos alimentos que consume el ganado que en bajas proporciones no
afectan el sabor de la leche pero sí lo hacen a partir de ciertos límites.
La leche entera tiene una gran capacidad de absorción de olores.
Sabor a rancio: aparece por hidrólisis de la grasa por acción de las lipasas que liberan
ácidos grasos de fuerte olor y sabor amargo.
El sabor a jabón tiene el mismo origen.
Sabor a oxidado: se debe a la oxidación de las grasas y a ciertas transformaciones en los
componentes nitrogenados.
Técnica
Transferir 50-80 cm3 de erlermeyer de 150-200 cm3. Observar el color que no debe ser
marcadamente amarillo ni rosado.
Calentar sobre baño maría hasta aproximadamente 75ºC, mezclar por rotación y percibir el
olor. No debe ser aromático, pútrido, agrio, rancio o acre.
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4. ENSAYO DE COAGULACIÓN
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El poder reductor normal de la leche se ve incrementado con la actividad bacteriana, dado
que el oxígeno disuelto va disminuyendo por la acción de las bacterias, y las bacterias le
adicionan además su propio sistema reductor.
La actividad reductora depende del número de bacterias y especies presentes. Algunas
como las coliformes son muy activas, mientras que otras como las bacterias
termorresistentes y esporuladas influyen poco.
El método consiste en agregar a cierta cantidad de leche una solución standard de azul de
metileno. Se mantiene luego a temperatura constante y se controla el tiempo en que se
produce la decoloración del mismo.
El período de tiempo para lograr la decoloración es inversamente proporcional al del
número y actividad de las bacterias que contiene. O sea que verifica en forma indirecta el
grado de desarrollo microbiano de la leche.
Materiales y equipos necesarios:
- Pipetas aforadas de 10 cm3.
- Tubos de vidrio de 180 mm x 18 mm debidamente esterilizados.
- Baño de agua o estufa a 37 + 0,5 ºC.
- Tapones de goma.
- Pipetas graduadas de 1 cm3.
Reactivos necesarios:
- Solución de azul de metileno: pesar 0,200 g de azul de metileno (clorhidrato de
tetrametiltionina) y disolver en 200 cm 3 de agua destilada hervida o esterilizada. Tomar 5
cm3 y llevar a 100 cm3. Guardar en envase de vidrio color caramelo.
Técnica
Se colocan 10 cm3 de la muestra en un tubo. Agregar 1 cm3 de la solución de azul de
metileno. Tapar el tubo, invertirlo hasta homogenizar y colocar en baño de agua o estufa
(37ºC).
Observar cada media hora, previa homogeneización. Anotar el tiempo transcurrido hasta la
decoloración. Un anillo azul en la superficie y en el fondo carece de significado.
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20` < t < 40 ` -------- leche regular
40` < t < 2 horas -------- leche buena
t > 2 horas -------- leche en buen estado
La interpretación desde el punto de vista químico del presente ensayo responde al hecho
de que en los organismos vivos ocurre, aún en ausencia de oxígeno, una oxidación
mediante el transporte de hidrógeno, desde la sustancia que se oxida hasta la sustancia
aceptora que se reduce.
Estas reacciones de oxidación están catalizadas por enzimas, las deshidrogenasas que
favorecen la deshidrogenación del sustrato. En este ensayo como aceptor de hidrógeno se
utiliza el indicador azul de metileno que posee color y al hidrogenarse pasa como
leucobase incolora del estado reducido.
7. DETERMINACIÓN DE LA DENSIDAD
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- Vaso de precipitado de 400 cm3.
- Baño de agua.
Técnica
Llevar la leche a 40ºC en baño de agua, homogeneizar y dejar enfriar aproximadamente a
20ºC.
Verter la leche en la probeta de 250 cm3 evitando formar espuma y controlar la
temperatura Llenar hasta el borde. Sumergir el lactodensímetro, lo que provocará el
desborde de la leche excedente.
Efectuar la lectura en el borde superior del menisco.
Convertir la lectura en el valor de la densidad mediante la siguiente fórmula:
Cálculo
d 15ºC = n + 1,0
1000
Donde: n = grados del lactodensímetro a 15ºC. Como el lactodensímetro indica la
segunda y tercera cifra decimal de la densidad, siendo las dos primeras cifras 1,0
constantes, es suficiente agregar la lectura de la escala a continuación de la cifra 1,0 para
obtener el valor de la densidad.
Si la determinación no se realiza a 15ºC efectuar la corrección según la tabla:
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Repetibilidad: la diferencia entre dos determinaciones efectuadas por el mismo analista
sobre la misma muestra y simultáneamente no debe ser superior a las 0,5 unidades
lactodensimétricas.
A. Método de Gerber
Fundamento del método: la leche es tratada con ácido sulfúrico para desagregar las
proteínas. Se extrae con alcohol amílico y por centrifugación se reúne la materia grasa en
una capa clara que se evalúa cuantitativamente mediante una escala convencional.
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Materiales y equipos necesarios:
- Butirómetro de Gerber, correctamente calibrado y con escala de 0,0 a 7,0 graduada a la
décima.
- Tapones de goma de forma adecuada para asegurar el cierre de los butirómetros.
- Pipeta o distribuidor automático para 10 cm 3 de ácido sulfúrico.
- Pipeta aforada de 11 cm3 y escurrimiento total para medir la leche.
- Pipeta o distribuidor automático para 1 cm 3 de alcohol amílico.
- Centrífuga especial para butirómetros con o sin calentamiento.
- Baño de agua a 65+ 2ºC (si la centrífuga no posee sistema de calentamiento).
- Soporte de butirómetro.
Reactivos necesarios :
- Ácido sulfúrico, d= 1,820 - 1,825 a 15ºC. Para su preparación a 5,8 cm3 de agua destilada
se agregan 94,2 cm3 de ácido sulfúrico concentrado p.a. (d= 1,84).
- Alcohol amílico con indicación “para dosaje de materia grasa de leche según Gerber”
d=0,815 a 15ºC, rango de ebullición: 128-130ºC.
Técnica
1. Colocar en un butirómetro 10 cm3 de ácido sulfúrico de Gerber.
2. Agregar con precaución para evitar la mezcla, 11 cm 3 de la muestra de la leche
(previamente calentada a 40ºC, homogeneizada y enfriada a 20ºC ).
3. Introducir 1 cm3 de alcohol amílico. En todos los casos cuidar de no mojar la pared
interior del cuello del butirómetro.
4. Tapar firmemente el butirómetro y agitar con precaución sosteniéndolo
horizontalmente, hasta desaparición de flóculos por disolución total. (¡Ojo!, en este paso se
eleva la temperatura, cuidado,.. no quemarse).
5. Llevar dos veces a la posición vertical para que el ácido sulfúrico que se encuentra en la
parte graduada se mezcle bien con el resto del contenido.
6. Colocar el butirómetro caliente en la centrífuga con el ápice hacia el centro y
centrifugar durante 8-10 minutos a 800-1000 r.p.m. (Si se procesan varias muestras
colocarlas simultáneamente en el baño a 65ºC durante 5 minutos antes de centrifugar).
Para leches homogeneizadas efectuar el calentamiento y la centrifugación durante 5` cada
vez y repetir 2 veces seguidas estas operaciones.
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7. Terminada la centrifugación volver a colocar él o los butirómetros en baño maría a 65ºC
durante 5 minutos manteniendo sumergida por lo menos 2 / 3 de la longitud de la escala.
8. Retirar y ajustar el tapón con movimientos de vaivén hasta que la capa de grasa se
encuentre dentro de la parte graduada del butirómetro.
9. La línea de separación entre la capa grasa y la solución acuosa oscura debe coincidir con
el cero o al menos con una graduación de la escala.
Cálculos
Expresar los resultados con un decimal.
Materia grasa g / 100 cm3 = divisiones leídas en la escala
Repetibilidad: La diferencia entre dos determinaciones efectuadas por el mismo analista
sobre la misma muestra y simultáneamente no debe ser superior a 0,2 g / 100 cm 3.
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- Plancha calefactora o baño de agua.
- Estufa a 103 + 2ºC o estufa de vacío a 70 - 75 ºC y presión inferior a 50 mm de mercurio.
- Pipeta aforada de 10 cm3.
- Pipeta graduada de 2,10 y 25 cm3.
- Probeta de 25 cm3.
- Vaso de precipitado de 150 cm3.
Reactivos necesarios
- Hidróxido de amonio ( d= 0,9 ) p.a.
- Etanol 96 % v / v.
- Éter dietílico exento de peróxidos p.a..
- Éter de petróleo ( 30 - 60 ºC ) p.a.
Técnica
Colocar 10 cm3 de leche en un tubo o ampolla de extracción. Agregar 1,25 cm 3 de
hidróxido de amonio o 2 cm3 si la leche es ácida y agitar. Agregar 10 cm 3 de etanol y
mezclar bien. Añadir 25 cm3 de éter dietílico, tapar con tapón de plástico o goma sintética
y agitar vigorosamente durante 1 minuto. Enfriar si es necesario y agregar 25 cm 3 de éter
de petróleo y repetir vigorosamente la operación. Dejar separar dos horas hasta que la capa
superior se presente limpia o centrifugar 5 minutos, la capa de solventes a 600 r.p.m.
Decantar la solución etérea a un vaso previamente tarado. Repetir dos veces la extracción
del líquido remanente con la mezcla de 15 cm 3 de éter dietílico y 15 cm3 de éter de
petróleo agregando algunos cm3 de agua, si fuera necesario, para facilitar la separación de
los dos fases. (En caso de leche desengrasada no es necesaria la tercera extracción).
Evaporar sobre baño de agua la mayor parte de los solventes evitando proyecciones (puede
agregarse un regulador de ebullición). Desecar el recipiente que contiene la grasa durante
dos horas en estufa a 103 + 2 ºC o en estufa de vacío a 70 - 75 ºC bajo presión inferior a 50
mm de mercurio.
Repetir ésta operación hasta que el peso sea constante o acuse un ligero aumento. En éste
caso utilizar para el cálculo el último valor obtenido antes del aumento de peso.
Efectuar un blanco de reactivo. Si el blanco es mayor de 0,5 mg purificar o descartar los
reactivos.
Cálculo: Expresar los resultados con un decimal.
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Materia grasa g / 100 g = ( a-b ) . 10
d
Siendo: a = peso de la materia grasa aislada, en gramos.
b= peso del blanco de reactivo, en gramos .
d= densidad de la leche.
Repetibilidad: La diferencia entre dos determinaciones efectuadas por el mismo analista
sobre la misma muestra y simultáneamente no debe ser superior a 0,05 g / 100 cm 3.
Es un valor más constante que el extracto seco total, por haberse eliminado el componente
más variable.
Extracto seco no graso g / 100 g = A - B
Siendo: A = extracto seco en g / 100 g
B = materia grasa en g / 100 g
Expresar los resultados con dos decimales.
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El pH no es un valor constante y puede variar durante el ciclo de lactancia y por la
alimentación.
Se consideran anormales los valores de pH < 6,5 o superiores a 6,9.
Lo que habitualmente se conoce como acidez de la leche es el resultado de una valoración
de la leche utilizando como indicador fenolftaleína que vira a pH 8,3.
La acidez de la leche es el resultado de la sumatoria de cuatro reacciones:
a. Acidez debida a la caseína, por sus grupos ésteres fosfóricos, que es alrededor de 2/5 de
la acidez total en leches recién ordeñadas.
b. Acidez debida a sustancias minerales y a indicios de ácidos orgánicos, que representan
2/5 de la acidez total.
c. Reacciones secundarias debidas a fosfatos, 1/5 de la acidez total.
d. Acidez desarrollada debido al ácido láctico y a otros ácidos procedentes de la
degradación microbiana de la lactosa en las leches en vías de alteración. La acidez
desarrollada por la fermentación láctica hace bajar el pH entre 4 y 5.
La valoración acidimétrica de la leche fresca recién ordeñada es una medida indirecta de
su riqueza en caseína y fosfatos.
Fundamento del método
Se basa en la determinación mediante un potenciómetro para medida de pH provisto de
un electrodo indicador y uno de referencia, habitualmente formando un solo elemento.
Materiales y equipos necesarios
- Vasos de precipitación de 50 cm3.
- Potenciómetro para medidas de pH con escala de 0 a 14 unidades subdivididas en
décimas
Reactivos necesarios:
- Solución reguladora de pH = 7,0 o próxima.
Técnica
Calibrar el peachímetro manteniendo sumergido el electrodo en la solución reguladora, de
pH estándar, normalmente 7, llevada a temperatura conocida. Luego lavar el electrodo con
agua destilada, secarlo con papel de filtro y sumergirlo en un volumen de leche a la misma
temperatura que la de la solución reguladora.
Expresión de los resultados: en unidades de pH con un decimal.
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Observaciones: En las leches frescas el pH se sitúa alrededor de 6,6.
13. CENIZAS
Fundamento: se determina por incineración de la muestra a 475ºC.
Técnica
1. Tarar la cápsula (P).
2. Colocar 25 cm3 de leche en una cápsula previamente tarada. Pesar (M).
3. Mezclar con unas gotas de alcohol el contenido de la cápsula (para evitar la formación
de una película en la superficie) y evaporar sobre baño de agua.
4. Secar en estufa a 105 ºC. La leche tomará un color que va del amarillo al marrón oscuro.
5. Carbonizar sobre tela metálica evitando proyecciones.
6. Incinerar a 400ºC aproximadamente durante media hora.
7. Enfriar, humedecer con gotas de agua y triturar la masa carbonosa.
8. Colocar sobre baño maría y luego estufa hasta evaporación total.
9. Incinerar a 475ºC durante 1 hora aproximadamente.
10. Enfriar en desecador y pesar (H).
Cálculo
Cenizas (g/100 g) = (H - P) . 100 / (M - P)
Para determinar cenizas en LECHE EN POLVO, pesar 2 g de muestra y continuar como
en leche fluida desde secar en estufa.
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14. DETERMINACIÓN DE CLORUROS: Método de Volhard (método de
referencia)
Fundamento del método: eliminación de la materia orgánica por calcinación y valoración
de cloruros por el método de Volhard.
Reactivos necesarios:
- Solución de nitrato de plata 0,1 N.
- Solución de tiocianato de potasio o amonio 0,1 N.
- Indicador: solución acuosa saturada de sulfato de Fe (III) y amonio, dodecahidrato p.a.
(aproximadamente 40 % p / v ) .
- Ácido nítrico diluido: Diluir un volumen de ácido nítrico p.a. ( d = 1,40 ) con 4
volúmenes de agua destilada.
Técnica
La determinación de cloruros se realiza sobre la muestra tratada previamente para la
determinación de cenizas.
Disolución: agregar a las cenizas 10 cm 3 de la solución de ácido nítrico (1+4), calentar 2 o
3 minutos sobre baño de agua hirviente, filtrar, lavar 4 veces con porciones de 10 cm3 de la
misma solución caliente, cápsula y filtro.
Reunir los filtrados en matraz de 50 cm 3, enfriar y diluir con agua destilada hasta
completar el volumen.
Valoración: pasar 25 cm3 de la solución obtenida a un erlermeyer de 250 cm 3 con tapa
esmerilada. Agregar 25 cm3 de agua destilada y 10 cm3 de la solución de nitrato de plata .
Agitar hasta que flocule. A continuación hay dos posibilidades:
- Filtrar por papel de filtro y lavar 10 veces con porciones de 5 cm 3 de agua destilada
ligeramente acidulada con ácido nítrico. Lavar el papel desde el borde superior y
comprobar que en el filtrado correspondiente al último lavado, la reacción del ion cloruro
frente al nitrato de plata sea negativa.
- Agregar 1 cm3 de nitrobenceno y agitar hasta que el precipitado quede perfectamente
separado (un minuto).
Luego agregar 1 cm3 de indicador. Titular el exceso ion plata con la solución de tiocianato
hasta un color rojizo permanente. Hacer simultáneamente un blanco.
Cálculo
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Cloruros g / 100 g = VAgNO3. N AgNO3 - ( a-b ) . 0,00355 . 2 . 100
p
Siendo:
a = volumen de la solución de tiocianato 0,1 N usado en la titulación del blanco en cm3.
p= peso de la muestra en gramos.
b= volumen de la solución de tiocinato 0,1 N usado en la titulación de la muestra en cm3.
Expresión de los resultados con tres decimales.
Determinación de peroxidasas
Las lactoperoxidasas fueron las primeras enzimas descubiertas en la leche. Son enzimas de
oxidación indirecta porque liberan oxígeno de los peróxidos como el agua oxigenada, pero
se trata de oxígeno atómico, que es aceptado por una sustancia presente en el medio.
Por efecto del calor van perdiendo la actividad, de forma tal que este ensayo permite
establecer si se trata de leche cruda, pasteurizada o hervida.
Fundamento del método: las peroxidasas en presencia de agua oxigenada producen la
oxidación de ciertos reactivos orgánicos (bencidina, parafenilendiamina o tintura de
guayacol) que son fácilmente oxidables y su reacción se manifiesta por un cambio de
color.
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Técnica
Colocar 10 cm3 de leche en un tubo de ensayo. Agregar 2 cm 3 de la solución de bencidina
y de 2 a 3 gotas de ácido acético (cantidad suficiente para coagular las proteínas).
Agitar y añadir por las paredes del tubo 2 cm3 de la solución de agua oxigenada.
Interpretación de los resultados:
- Desarrollo de color azul intenso: se trata de leche cruda o calentada a inferior a 78 ºC.
- No hay desarrollo de color: la leche ha sido calentada a 80 ºC o a mayor temperatura.
Determinación de fosfatasas
La leche contiene dos enzimas que hidrolizan a los ésteres fosfóricos, la fosfatasa alcalina
y la fosfatasa ácida que tienen su máxima actividad a pH 8 y 4 respectivamente.
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Las enzimas fosfatasas de la leche están invariablemente presentes en la leche cruda y son
destruidas o inactivadas por los procesos térmicos de pasteurización de la leche, sobre todo
la fosfatasa alcalina que es más sensible al calor.
Se ha demostrado que esta enzima es más difícil de destruir que los microorganismos
patógenos más resistentes al calor que pudieran estar presentes. (Bacilo de la tuberculosis,
Coxiella burnetti).
El test involucra la incubación de la muestra con un sustrato en condiciones de tempeatura
y pH convenientes para la acción enzimática.
De estar presente la fosfatasa ésta catalizará la liberación del fenol del fenilfosfato
disódico, y por reacción con un reactivo adecuado se producirá una coloración que
resultará proporcional a la cantidad de fosfatasa presente.
Fundamento del método: la muestra incubada con fenil fosfato disódico permite valorar de
forma indirecta la fosfatasa, mediante la coloración desarrollada por la reacción entre el
fenol liberado y la 2-6 dibromoquinoncloroimida.
Materiales y equipos necesarios
- Vidrios de reloj de 3 cm de diámetro.
- Matraces aforados de 10, 500 y 1000 cm3.
- Pipetas graduadas de 1, 2, y 5 cm3.
- Probetas de 25 cm3.
- Tubos de ensayo de 10 cm3 con tapa esmerilada.
- Baño de agua.
- Termómetro de 0 - 50 ºC.
Reactivos necesarios:
- n- butanol (P.E. 116 - 118 ºC). Neutralizado con solución de NaOH, aproximadamente
0,1 N utilizando azul de Bromotimol como indicador.
- Solución de NaOH aproximadamente 0,1 N: disolver en agua destilada, 4 g de la droga
p.a. y diluir a 100 cm3 .
- Azul de bromotimol al 0,1 % en solución acuosa - etanólica (1+1).
- Zona de viraje: pH 6 (amarillo) a pH 7,6 (azul).
- Etanol puro de 96 % V / V.
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- Solución de 2 -6 dibromoquinoncloroimida al 0,3 % p / V mantener la solución envasada
en frasco color caramelo a 5 ºC. Usar como máximo una semana después de preparada.
Desechar antes si la solución toma color pardo.
- Solución reguladora: disolver 100 g de sesquicarbonato de Na dihidratado (NaHCO 3,
Na2CO3. 2 H2 O) en agua destilada y diluir a 1000cm3.
- Solución sustrato reguladora de fenilfosfato disódico: disolver en agua destilada 0,5 g de
cristales del reactivo libres de fenol. Agregar 25 cm 3 de la solución reguladora y diluir a
500 cm3 con agua destilada. Guardar la solución a 5 ºC. Si es posible preparar antes de
usar.
Técnica.
Trasvasar 0,5 cm3 de la muestra a un tubo de ensayo, agregar 5 cm 3 de la solución sustrato
reguladora de fenilfosfato disódico y mezclar invirtiendo el tubo varias veces, durante un
minuto. Incubar en baño de agua a 37 + 1ºC durante 15 minutos.
Retirar el tubo del agua, agregar 6 gotas de la solución de dibromoquinoncloroimina, tapar,
agitar, e incubar 5 minutos a la temperatura indicada.
Enfriar el tubo con agua corriente, agregar 3 cm 3 de N- butanol y mezclar invirtiendo 10
veces. Observar la coloración de la capa butanolica. Realizar un ensayo en paralelo sobre
leche previamente hervida.
Interpretación de los resultados:
- Color azul intenso: leche cruda.
- Incolora o azul menos intenso que un testigo preparado con leche previamente hervida:
leche pasteurizada.
- Color intermedio: leche mal pasteurizada o con el agregado de leche cruda.
Interpretación química
O
- O-P-ONa fosfatasa -OH + Na2HPO4
ONa agua
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Br Br
-HCl
Cl-N= =O + -OH HO- -N= =O
Br
2-6-dibromoquinonclorimida indofenol (azul)
Observaciones: - Evitar el uso de tapones de goma o de plásticos que contengan resinas
fenólicas.
- Las drogas deben mantenerse en heladera y al abrigo de la humedad.
Interpretación de resultados:
Si hay floculación después del calentamiento, se trata de leche pasteurizada. No debe
observarse turbidez en la leche que ha sido esterilizada después de envasada.
La leche esterilizada UTA puede dar leve turbidez.
DETERMINACIÓN DE FORMALDEHIDO:
Materiales y equipos necesarios:
- Tubos de ensayo de 30 cm3.
- Pipetas graduadas de 5 y 10 cm3.
Reactivos necesarios:
- Ácido clorhídrico al 25 % p / p: mezclar 94 cm3 de ácido clorhídrico p.a. 36 % p / p con
46 cm3 de agua destilada.
- Solución de cloruro férrico al 10 % p / V.
- Reactivo: agregar 0,2 cm3 de la solución de cloruro férrico a 100 cm 3 de la solución de
ácido clorhídrico. Homogeneizar.
Técnica
Colocar 2 cm3 de leche en un tubo de ensayo. Adicionar 10 cm 3 del reactivo. Calentar a
ebullición y mantener durante 1 minuto a ebullición suave.
Interpretación de los resultados:
Se observa color violeta en leches que contengan más de 0,01 g de formaldehído 100 cm3.
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Interpretación química
En una primera instancia mediante el calentamiento del ácido sulfúrico con el dióxido de
titanio, reaccionan en forma lenta para formar el sulfato de titanilo.
TiO2 + H2SO4 TiOSO4 + H2O
El agua oxigenada se reconoce en presencia de ión titanilo (TiO22+) mediante una reacción
de color amarillo naranja.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
DETECCIÓN DE HIPOCLORITOS Y CLORAMINAS
Materiales y equipos necesarios:
- Baño de agua
- Tubos de ensayo de 20 cm3.
- Pipetas graduadas de 1 y 5 cm3.
- Varillas de vidrio.
Reactivos necesarios:
- Solución de yoduro de potasio 7 % p / : disolver 7 g de yoduro de potasio p.a. en 100 cm 3
de agua destilada . Preparar antes de cada determinación.
- Ácido clorhídrico diluido: diluir 100 cm3 de ácido clorhídrico p.a. (d = 1,19) con 200
cm3 de agua destilada.
- Solución de almidón: agregar 1 g de almidón soluble en suspensión sobre 100 cm 3 de
agua destilada hirviente. Agitar. Mantener en ebullición 1 minuto. Enfriar.
Técnica
a) - Colocar 5 cm3 de leche en un tubo de ensayos, agregar 1,5 cm 3 de solución de yoduro
de potasio, mezclar bien agitando y observar el color.
b) - Agregar 4 cm3 de ácido clorhídrico diluido, mezclar bien con una varilla cuyo extremo
sea achatada. Observar el color del coágulo.
c) - Colocar los tubos en baño de agua hirviendo previamente calentado a 85 ºC y dejar
estar 10 minutos (durante este período el coagulo sube a la superficie), enfriar rápidamente.
Observar el color del coagulo y del líquido.
d) - Agregar 1 cm3 de solución de almidón al líquido, por debajo del coagulo y observar el
color.
Interpretación de los resultados
El ión hipoclorito reacciona frente al ioduro liberando iodo
ClO- + 2 I- + 2 H+ Cl- + I2 + H2O
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- Vidrio de reloj.
- Baño de agua.
Reactivos necesarios:
- Solución de ácido clorhídrico 5 N.
- Tiras embebidas con solución de curcumina al 0,1 % p / V en etanol 96 % V / V y secadas
al aire. Guardar en recipiente oscuro y cerrado.
- Solución de carbonato de sodio anhidro p.a. al 2 % p / V.
Técnica
Alcalinizar con carbonato de sodio 5 cm3 de leche en cápsula de porcelana, evaporar y
calcinar el residuo a 500 ºC. Agregar 5 - 10 cm3 de ácido clorhídrico 5 N, hasta ligera
acidez, filtrar, sumergir hasta la mitad una tira de papel de curcumina y secar sobre vidrio
de reloj a 60 -70 ºC sobre baño de agua. En presencia de ácido bórico el papel de cucumina
se torna rosado o rojizo de acuerdo con la cantidad de ácido bórico presente. Tocar la tira
de papel con una varilla humedecida en la solución de carbonato de sodio. El color vira al
azul.
DETECCIÓN DE ANTISÉPTICOS DE AMONIO CUATERNARIO RESIDUALES
Fundamento del método: los compuestos de amonio cuaternario se combinan con ciertos
colorantes hidrosolubles para dar compuestos coloreados insolubles en agua pero solubles
en solvente orgánico. La lecitina interfiere en la reacción si se encuentra en
concentraciones superiores a 2 g / dm3. Su contenido normal en leche es de
aproximadamente 400 mg / dm3.
Materiales y equipos necesarios
- Agitador mecánico.
- Centrífuga.
- Tubos de centrífuga de vidrio de 50 cm3 de capacidad. No utilizar tubos de material
plástico porque pueden retener parcialmente la coloración.
- Erlermeyer de 125 cm3 con tapa esmerilada.
Reactivos necesarios:
- Sulfato de cadmio, p.a.: solución acuosa a 10 % p / V.
- Eosina p.a. (eosina amarilla Merck 1343 o similar): solución acuosa al 0,1 % P / V .
- 1,2 dicloroetano puro.
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- Leche pasteurizada libre de tensioactivos.
Técnica
- Colocar 2 cm3 de leche en un erlermeyer con tapa, agregar 16 cm 3 de agua destilada y
0,20 cm3 de la solución de sulfato de cadmio. Agitar enérgicamente unos segundos para
precipitar las proteínas de la leche.
- Agregar 20 cm3 de dicloroetano y 3 cm3 de la solución de eosina. Agitar durante 20
minutos y centrifugar 15 minutos a 4000 rpm. Si las proteínas de la leche forman una capa
en la interfase, aspirar la fase acuosa y luego perforar la capa cuidadosamente para poder
extraer la fase orgánica. Si esta no se presenta límpida filtrar por placa de vidrio
sintetizado.
Observaciones
- La fase orgánica coloreada indica la presencia de compuestos de amonio cuaternario
agregados, ya que el límite de sensibilidad de la reacción: 0,5 mg / Kg. (ppm), es superior a
la cantidad de dicho compuesto que puede quedar en el producto, proveniente de la
desinfección de los envases: 0,2 mg / Kg (ppm).
Nota: Compuestos que contienen amonio cuaternario. Emplear cualquiera de las soluciones
que se indican a continuación u otra similar si se desea preparar un tipo.
- Cloruro de benzethonium : solución acuosa de 1 microgramo / cm 3 .
- Bromuro de cetil piridino : solución acuosa de 2 microgramos / cm 3 .
- Antigermen 50 (Pfizer) : solución acuosa de 2 microgramos / cm3 .
Preparación del tipo: Colocar 2 cm 3 de leche en un erlermeyer con tapa esmerilada y
agregar un volumen adecuado de la solución de referencia del compuesto cuaternario.
Dejar durante la noche (16 horas) para permitir reaccionar al tensiactivo con las proteínas
de la leche. Continuar como se indicó en la técnica.
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COLORACIONES OBSERVABLES DURANTE EL
ENSAYO
Concentración
de C1 disponible 1: 1000 1: 2000 1: 5000 1: 10000 1: 25000 1: 50000
Etapa a Pardo Amarillo Amarillo
amarillento intenso claro que
empalidece _____ _____ _____
b Pardo Amarillo Amarillo
amarillento intenso brillante _____ _____ _____
c Pardo Amarillo Amarillo Amarillo Amarillo Amarillento
amarillento intenso claro
d Azul Azul Azul Rojo Rojo Rojo
violáceo violáceo violáceo púrpura púrpura púrpura
oscuro claro
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- Cloruro de sodio para análisis, cristales pequeños, secado en horno de mufla a 300 + 25
ºC durante 5 minutos o en su defecto a 130 + 1 ºC por lo menos 24 horas y enfriado a
temperatura ambiente en el desecador.
- Agua destilada hervida y enfriada a 20 + 2 ºC inmediatamente antes de su utilización.
- Solución acuosa de etilenglicol al 33 % V/V para el baño refrigerante.
Preparación de las soluciones patrón
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Procedimiento
Calibración del aparato: Encender al aparato y dejarlo como mínimo media hora en
funcionamiento antes de realizar las determinaciones equipo Advance la luz que indica las
determinaciones deberá encenderse y apagarse intermitentemente.
Controlar el nivel del líquido refrigerante agregando siempre, al comienzo de cada jornada,
unas gotas de la solución refrigerante.
Se considera que el nivel es normal cuando el líquido rebalsa y cae por el vertedero.
Colocar 2 cm3 de la solución que corresponde a la disminución del punto de congelación
de 0,408 ºC (0,422 ºH) en un tubo de ensayos seco y enjuagado con la misma solución.
Limpiar bien con papel absorbente suave, el termistor y el agitador. Colocar el tubo en el
aparato. Controlar la calibración. (En el Advance: oprimir el botón de control, el aparato
actuará automáticamente y aparecerá un resultado en el visor digital). Si el valor leído es
superior o inferior a 0,408 ºC (0,422ºH) ajustarlo como indique el manual correspondiente.
Si el resultado difiere en + 0,002 ºC ( 0 ºH ) se considera correcta la calibración. No se
deben efectuar ajustes mientras se realiza una medición.
Repetir la calibración con una nueva porción de solución patrón hasta que el valor que
aparece en el visor concuerde con el de la solución. Completar la calibración utilizando la
solución que corresponde a la disminución del punto de congelación de 0,600 ºC (0,621
ºH) en forma similar a lo indicado antes. Repetir el procedimiento hasta que 2 lecturas
sucesivas del aparato coincidan con los valores correspondientes a las soluciones patrón.
Medición del punto de congelación
Calibrar diariamente el crióscopo. Es conveniente que las muestras a ensayar y las
soluciones estándar se encuentren a la misma temperatura (entre 0 y 5 ºC ó a temperatura
ambiente).
Antes del ensayo eliminar cualquier cuerpo extraño o glóbulo de grasa por filtración a
través de lana de vidrio. Las muestras pueden conservarse hasta 3 meses a -18ºC.
Colocar 2,0 cm3 de leche, previamente mezclada por suave agitación, en un tubo de ensayo
seco y enjuagado con la misma muestra. Limpiar cuidadosamente con papel absorbente, el
termistor y el agitador.
Colocar el tubo en el aparato. Controlar según indique el manual .
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
En el ADVANCE oprimir el botón de control y esperar por el resultado. Repetir la
operación hasta que 2 mediciones consecutivas no difieran en más de 0,002 ºC (o ºH).
Si el congelamiento de la muestra se inicia antes del rango de temperatura establecido,
repetir el ensayo con otra porción.
Si se repite la anormalidad calentar la muestra a 45ºC durante 5 minutos para que funda la
grasa cristalizada. Llevar a temperatura ambiente.
Limpiar cuidadosamente el termistor y el agitador con papel absorbente inmediatamente
después de realizada la determinación a fin de evitar el depósito de residuos sólidos sobre
sus superficies.
Expresión de resultados
El resultado final se expresará en ºC. Si el crióscopo estuviera calibrado en grados Horvet (
ºH ), aplicar la siguiente fórmula para realizar la conversión correspondiente.
ºC = 0,96418 ºH + 0,00085
El resultado final se expresará con 3 cifras decimales y será el promedio de los valores
obtenidos para la muestra y los duplicados. Los duplicados no deben diferir entre sí en más
de 0,002ºC ( ºH ).
Fuente
Advance Instruments Inc. Manual de instrucciones del Crióscopo
Automatic Advance Digimatic 4 DII , Massachusetts , 1978
Federación Internacional de lechería, norma provisoria FIL-IDF 108_1982.
CITIL.- INTI Método LF.07a.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
DETERMINACIONES EN LECHE EN POLVO
1. EVALUACIÓN SENSORIAL
La cantidad de muestra necesaria se reconstituye disolviendo leche en polvo en agua de
acuerdo a la siguiente fórmula:
13 g de leche en polvo en 100 ml de agua.
La reconstitución debe ser realizada en agua microbiológicamente apta, incolora e inodora
a 25 ºC, excepto en el caso de leches enteras en polvo que no se solubilicen en agua fría,
prefiriéndose en este caso agua a 40 ºC.
La solución será preparada no menos de 1 hora ni más de 3 horas antes de la evaluación y
distribuida en vasos de vidrio transparente, no contaminado por gustos y olores. Los vasos
con la leche reconstituida y aquellos que contengan las muestras deberán conservarse
adecuadamente tapados hasta que la evaluación tenga lugar.
La leche reconstituida debe ser guardada bajo condiciones tales que la protejan del efecto
de la luz. La leche entera reconstruida a 40 ºC , debe ser enfriada mediante agitación suave.
Durante la evaluación la leche recontituída deberá mantenerse a 25ºC. Deberá evitarse
desviaciones de temperaturas mayores a los 2 ºC.
ATRIBUTOS
Se tiene en cuenta dos atributos: apariencia y flavor.
Apariencia: comprende el color, pureza visible, y presencia de grumos escamas o gránulos
duros.
Flavor: tiene en cuenta el gusto y olor.
2. DETERMINACIÓN DE HUMEDAD
Por desecación de 1 g de muestra en estufa a 102 ºC durante 2 horas, o por el método de
Markusson.
3. INDICE DE SOLUBILIDAD
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
centrifuga en un tubo graduado en condiciones determinadas y se lee el volumen de
sedimento, que depende de la solubilidad del producto. Se necesita equipamiento especial.
La técnica que se aplica responde a normas del Ministerio de Salud Pública y Medio
Ambiente.
4. DETERMINACIÓN DE GELATINA
Soluciones necesarias
Solución acuosa saturada de ácido pícrico.
Solución ácida de nitrato de mercurio. Disolver Hgº en dos veces su peso en HNO 3 y
diluir a 25 veces el volumen.
Técnica
1. A 10 ml de muestra adicionar 10 ml de solución ácida de nitrato de Hg.
2. Agitar la mezcla, agregar 20 ml de agua, agitar nuevamente.
3. Dejar 5 minutos, filtrar.
4. A una alícuota del filtrado en un tubo de test agregar un volumen igual de solución de
ácido pícrico.
Interpretación:
Un precipitado amarillo se produce en presencia de cantidades considerables de gelatina.
Una leve turbidez se pone en evidencia por pequeñas cantidades de gelatina.
Nota: En la aplicación a productos lácteos ácidos, fermentados, cultivados o muestras muy
viejas de leche, crema o manteca, crema esterilizada, leche evaporada o queso cottage hay
que tener la precaución de reconocer los precipitados producidos por el ácido pícrico
cuando se agrega al filtrado en ausencia de gelatina.
Muchas muestras con o sin cuajo y enteramente libres de gelatina, dan al ser dejadas en
reposo distinto precipitado al ser tratados como enuncia la técnica, pero difieren en sus
características con respecto al precipitado con gelatina. El precipitado con gelatina-ácido
pícrico se muestra finamente dividido más propenso a quedar en suspensión, depositándose
solo lentamente, adhiriéndose tenazmente a las paredes y fondo del contenedor, el cual es
lavado con dificultad.
El precipitado producido por el ácido pícrico en ausencia de gelatina es floculento, se
separa rápidamente (dejando suero prácticamente limpio), no se adhiere a las paredes del
contenedor, es fácilmente removido por agua.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
Cuando la gelatina está presente en la muestra, el precipitado de ácido pícrico-gelatina
permanecerá en suspensión largo tiempo en forma de flóculo; pero dejando estar una noche
el precipitado sedimentado se encontrará tenazmente adherido al fondo y paredes del
contenedor. Si existe gelatina presente en una concentración relativamente alta (1%) el
precipitado será voluminoso y con tendencia a sedimentar rápidamente.
5. DETERMINACIÓN DE DISPERSABILIDAD
El método es aplicable leche descremada en polvo y a leche entera en polvo instantánea
Dispersabilidad es el porcentaje en peso de la materia seca de la muestra que puede
dispersarse en agua, determinado por un procedimiento especificado bajo condiciones
estándar.
Se distribuye uniformemente una porción de la muestra de contenido de humedad
conocido, sobre la superficie de agua a 25 ºC, agitar manualmente un corto tiempo, filtrar
parte de la mezcla a través de un tamiz y determinar el contenido de sólidos totales del
líquido recogido.
Se utiliza equipamiento especial y se aplica la técnica adoptada por el Ministerio de Salud
Pública y Medio Ambiente.
6 . DETERMINACIÓN DE LA HUMECTABILIDAD
Se define el tiempo de humectación como el tiempo en segundos determinado por
procedimientos estandarizados requeridos para que todas las partículas de la leche en polvo
se humedezcan cuando se echan sobre la superficie del agua.
Consiste en distribuir uniformemente una porción de la muestra sobre la superficie del
agua a 25 ºC y determinar el tiempo requerido para que todas las partículas se hundan por
debajo de dicha superficie y cualquier resto que quede sobre ella tome un aspecto
típicamente húmedo.
Técnica
Se pesan 10 g de leche en polvo en vaso de precipitado, se vuelca sobre el tubo de vidrio y
con la ayuda de una espátula se distribuye en forma pareja.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
En el vaso de precipitado de 500 ml se deben haber colocado previamente 250 ml de agua
(d) a 25ºC, se pone en marcha el cronómetro y cuando pasa por 5 correr la placa de vidrio
en un tiempo que no pase de 2,5 seg y controlar el tiempo que tarda en hundirse todas las
partículas, se para el cronómetro y se descuentan los 5 segundos iniciales.
Los límites se rigen por el C.A.A.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Antes de retirar las muestras, agitar manual o mecánicamente hasta formar una emulsión
uniforme que fluya con facilidad.
Si la muestra es muy espesa, calentar a 30-35 ºC. Si se forman grumos de manteca, calentar
a 38 ºC introduciéndola en un baño de agua.
Homogeneizar bien las alícuotas tomadas para los análisis y pesar inmediatamente.
2. ACIDEZ DE LA CREMA
Técnica
1. Pesar de 5 a 10 g de la muestra preparada en un erlermeyer (M)
2. Adicionar de 50-100 ml de mezcla 1:1 de etanol-éter neutralizada.
3. Titular con NaOH 0,1 N a la fenolftaleína hasta color débilmente rosado que
permanezca más de 30`(V).
Cálculo
Acidez en ácido láctico / 100 g = V x N x 9 / M (g)
Para realizar el resto de los análisis se siguen las técnicas generales de leches.
DETERMINACIONES EN MANTECA
Con la denominación de manteca o mantequilla se entiende a la emulsión del tipo de
agua obtenida por el desuero, lavado y amasado de los conglomerados de glóbulos grasos
que se forman por el batido de la crema pasterizada, con o sin maduración biológica
producida por bacterias específicas (art. 596 Res. 1276. C.A.A.).
Puede neutralizarse parcialmente la crema por sustancias alcalinas de uso permitido,
acidificar o aromatizar por acción de bacterias lácticas o por adición de recuperados de
dicha acción.
La consistencia debe ser sólida, plástica a 20ºC, de textura lisa y uniforme, untuosa, sin
huecos ni bolsillos de agua o aire, debe tener el sabor característico, de color amarillento,
sin manchas, vetas o puntos coloreados. Al examen microscópico debe observarse un
tamaño y distribución uniforme de pequeños glóbulos de agua.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
No debe contener antioxidantes, colorantes, agregados, conservantes ni aditivos de ninguna
naturaleza.
El análisis de la manteca incluye la determinación de humedad, caseína, sal, grasa, acidez
valorable, cobre, hierro, pH del suero, examen de la grasa por los índices de Reichert,
Polenske y Kirchner, índice de iodo, acidez, índice de saponificación, índice de refracción,
antioxidantes, colorantes. Industrialmente se realizan además ensayos reológicos.
1. TOMA DE MUESTRA
La composición de la periferia de la manteca es distinta de la del centro, por lo que se han
recomendado los siguientes procedimientos:
a. Tubos o rollos de manteca: introducir el muestreador de la manteca a todo lo largo desde
el borde superior atravesando el centro hasta otro punto ubicado en una posición
diagonalmente opuesta, darle un giro completo y retirado .
Colocar la punta del sacabocado en la boca del recipiente y transferirla de inmediato
cortándola en secciones de 7,5 cm con ayuda de una espátula.
Repetir la operación otras dos veces introduciéndolo en puntos equidistantes del primero y
recoger en el mismo recipiente.
b. Manteca en trozos: tomar un trozo de cada caja y muestrear un número de cajas
equivalente a la raíz cuadrada del que compone el lote con un mínimo de 3 y un máximo
de 25.
Si el peso de los trozas es menor al medio kilo, dividirlos diagonalmente en cuatro partes y
tomar dos de los cuartos opuestos .Usar recipientes de vidrio para guardar las muestras.
2 . PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Ablandar toda la muestra contenida en el recipiente calentándola en un baño de agua de
más de 39ºC.
Agitar a intervalos frecuentes durante el ablandamiento, para reincorporar la grasa que
pudiera separarse y comprobar la fluidez de la muestra.
La consistencia óptima se alcanzará cuando la emulsión continúa intacta pero es lo
suficientemente fluida como para evidenciar fácilmente el nivel alcanzado por la muestra .
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
Retirar del baño y agitar vigorosamente a intervalos frecuentes hasta que se enfríe y
adquiera consistencia cremosa y deje de evidenciar su nivel.
Tomar y pesar inmediatamente las alícuotas para el análisis.
3. EVALUACIÓN SENSORIAL
Las muestras de manteca deberán almacenarse a temperatura constante (14 ºC + 1 ºC)
durante 10 días como mínimo antes de la evaluación sensorial, a excepción de
evaluaciones realizadas en caso de litigio.
La evaluación sensorial se llevará a cabo teniendo en cuenta tres atributos por separado
* Apariencia
* Consistencia
* Flavor
*La apariencia involucra las siguientes características: color, pureza visible, desarrollo de
hongos, textura y agua dispersa.
*La consistencia involucra la firmeza y untabilidad. Aquí es importante mantener la
temperatura recomendada porque pueden resultar evaluaciones imprecisas.
*El flavor incluye el gusto y olor. También es importante el efecto de la temperatura ya
que la consistencia de la muestra produce una sensación en la boca.
Asignación del valor para cada atributo:
Puntaje de acuerdo a la concordancia con el estándar sensorial establecido:
5. Muy buena concordancia.
4. Buena concordancia.
3. Regular concordancia (leves defectos) .
2. Mala concordancia (notorios defectos)
1. Muy mala concordancia (marcados defectos) .
0. No apto para consumo humano en ese estado.
Una vez realizada la evaluación del producto, se lo clasifica de acuerdo a los resultados
obtenidos.
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
De acuerdo al C.A.A. (art. 596, Res 1276, 19/07/88) para clasificar las mantecas se aplica
la siguiente escala de puntos:
PUNTAJE 91 89 P 91 58 P 88
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8 . INDICE DE PERÓXIDOS
Durante el almacenamiento los enlaces insaturados presentes en la grasa absorben oxígeno
y reaccionan de manera similar a los peróxidos.
El índice de peróxidos indica el grado de oxidación que ha sufrido la grasa. Es
groseramente paralelo a la intensidad de color que se obtiene en el ensayo semicuantitativo
de Kreiss.
Soluciones y drogas necesarias
Cloroformo, ácido acético glacial, solución de KI saturada recién preparada, tiosulfato de
Na 0,01 N
Técnica
1. Pesar de 30 a 150 g de muestra ( según la frescura ) y añadirle 250 ml de cloroformo .
2. Mezclar 2 o 3` y filtrar inmediatamente por un filtro de pliegues.
3. Volver a filtrar por un papel que contenga sulfato de sodio anhidro.
4. Pipetear 25 ml del filtrado a un erlermeyer con tapa esmerilada.
5. Adicionar 37 ml de ácido acético glacial.
6. Adicionar 1 ml de solución de KI.
4. Esperar exactamente 1`, agitando de vez en cuando.
5. Adicionar 30 ml de agua.
6. Titular el iodo liberado con tiosulfato de Na 0,01 N, hasta la casi total desaparición del
color amarillo del iodo.
7. Adicionar 0,5 ml de almidón y dar por finalizada la titulación al desaparecer el color
azul (V).
8. Hacer un blanco de reactivos. (Debe ser 0,5 ml ) .
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
Cálculo
Índice de peróxidos ( meq / Kg ) = V . N . R . 1000 / M
Siendo: R = V cloroformo/V alícuota.
Fundamento
El propósito de esta técnica es caracterizar la materia grasa de leche y distinguirla de otro
tipo de grasas utilizadas como adulterantes.
Alcance de la técnica
Este método es aplicable a la grasa extraída de cualquier producto lácteo (ver técnica de
extracción de la materia grasa).
Definición
El índice de los ácidos grasos volátiles solubles (Índice de Reichert Meissl) es el número
de cm3 de una solución de álcali 0,1 N necesaria para neutralizar los ácidos grasos volátiles
solubles en agua, obtenidos a partir de 5 g de manteca en las condiciones especificadas por
el método.
Principio del método
Luego de la saponificación de la materia grasa con una solución de hidróxido de sodio en
glicerina, la solución de jabón es diluida con agua y acidificada con una solución de ácido
sulfúrico. Los ácidos grasos volátiles son destilados separándose los ácidos solubles de los
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CÁTEDRA: Análisis de Alimentos Tema: Análisis de leche y derivados lácteos
insolubles, por filtración. La solución acuosa de los ácidos volátiles solubles es titulada con
una solución de álcali valorada.
El método es empírico, ya que de esta forma se dosa sólo una fracción de los ácidos grasos
volátiles solubles (ácidos de cadena de 4 a 6 carbonos y parcialmente el ácido de C 8). Por
consiguiente, para obtener resultados precisos y reproducibles deben respetarse
rigurosamente las indicaciones concernientes a procedimientos y aparatos a utilizar.
Material de vidrio y accesorios:
(No incluye material general de laboratorio; las dimensiones de los elementos que
componen el aparato de destilación se muestran en un esquema adjunto).
1- Balón de destilación de 300 cm3 de capacidad (A).
2- Cabezal de destilación (B).
3- Refrigerante (C).
4- Matraz con dos aforos, uno a 100 cm3 y otro a 110 cm3 (D).
5- Disco de amianto de 120 mm de diámetro, espesor 6 mm, con una abertura central de
60-65 mm de diámetro, destinado a sostener el balón durante el calentamiento (E).
6- Piedra pómez, granulometría 0,6-0,7 mm, calentada al rojo blanco, lavada con agua
destilada, etanol y éter etílico.
Nota: Para las conexiones pueden utilizarse tapones de goma, neoprene, silicona o juntas
esmeriladas 24 / 40.
Reactivos y preparación de soluciones:
1- Solución de NaOH-glicerina.
Disolver 50 g de hidróxido de sodio en 50 cm3 de aguas destilada hervida y fría.
Dejar sedimentar los carbonatos. Mezclar 20 cm 3 de la solución límpida con 180 cm 3 de
glicerina neutra.
2- Solución acuosa de ácido sulfúrico (1+ 4).
Agregar a 100 cm3 de agua destilada, 25 cm3 de ácido sulfúrico concentrado.
3- Agua destilada, hervida durante 15 minutos para eliminar el CO 2 disuelto.
4- Solución valorada de hidróxido de sodio 0,1 N.
5- Solución de fenolftaleína 1 % en etanol 95 ºGL.
Nota: Todos los reactivos deben ser de grado analítico.
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Técnica
a) Pesar (5,00 + 0,01) g de grasa dentro del balón de destilación. Para facilitar la
operación fundir previamente la grasa a 50-60 ºC y trasvasar con ayuda de una varilla de
vidrio.
b) Agregar 24 cm3 de la solución NaOH-glicerina, calentar a llama directa agitando
continuamente con movimiento de rotación para evitar el sobrecalentamiento. Suspender el
calentamiento cuando deja de formarse espuma y el líquido se torna límpido.
c) Dejar enfriar el balón hasta una temperatura aproximada de 90 ºC, añadir 1 g de piedra
pómez y 135 cm3 de agua destilada, recientemente hervida y aproximadamente a la misma
temperatura. Agregar 10 cm3 de la solución de ácido sulfúrico (1+4), conectar
inmediatamente el cabezal regulando la llama de manera de efectuar la destilación en 30
minutos, empleando una corriente de agua a (20 + 1) ºC, en el refrigerante. Para evitar el
recalentamiento de éste por efecto de la proximidad del mechero, se aconseja colocar una
tela de amianto que aísle ambos elementos.
d) Una vez completada la destilación, (destilar hasta un volumen de 110 cm 3) colocar el
matraz en un baño de agua a 15 ºC durante 15 minutos. Tapar el matraz, retirar del baño y
mezclar su contenido invirtiéndolo 4 ó 5 veces sin agitar, filtrar a través de papel de filtro
de velocidad mediana, diámetro 9 cm recogiendo 100 cm 3 del filtrado en un matraz
aforado. El filtrado deberá ser límpido. Trasvasar a un erlermeyer de 250-300 cm3 y titular
con solución valorada de hidróxido de Na 0,1 N usando 0,5 ml de solución alcohólica de
fenolftaleína como indicador, hasta la aparición de una coloración rosada que persista entre
½ y un minuto.
e) Deberá realizarse un ensayo en blanco, sin grasa, efectuándola en lugar de la
saponificación.
f) (ítem b) un calentamiento en agua hirviente durante 15 minutos. La titulación del
correspondiente destilado, no deberá insumir más de 0,5 ml de álcali. En caso contrario
preparar nuevos reactivos.
Expresión de resultados:
El índice de Reichert Meissl es un número abstracto que se expresa con una sola cifra
decimal: su valor resulta de la aplicación de la fórmula siguiente:
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IRM = 1,1 N ( a - b ) .
Donde
N = normalidad de la solución de álcali.
a = número de cm3 gastados en la titulación de la muestra.
b = número de cm3 gastados en la titulación del blanco.
La diferencia entre dos determinaciones paralelas no debe ser superior a 0,5.
El índice de Kirchner es el volumen de álcali necesario para neutralizar los ácidos grasos
volátiles solubles en agua destilados de la grasa que forman sales de plata solubles en agua.
Este índice es una medida del ácido graso característico de la manteca, ya que las únicas
sales de plata solubles que se forman en el destilado son las del ácido butírico.
DETERMINACIONES EN QUESOS
El queso es el producto fresco o madurado que se obtiene por separación del suero de la
leche o de la leche reconstituida (entera, parcialmente o totalmente descremada),
coaguladas por acción del cuajo y / o enzimas específicas, complementada o no por
bacterias específicas o por ácidos orgánicos permitidos a este fin, con o sin el agregado de
sustancias colorantes permitidas especias o condimentos u otros productos alimenticios.
(Art. 605)
Las normas del C.A.A. establecen límites del contenido de agua y grasa, clasificándolos
según los contenidos:
AGUA: C.A.A. (art 607)
QUESO DE PASTA BLANDA O FRESCO: 45 % A % 55 %
QUESO DE PASTA SEMIDURA: 36 % A % 44,0 %
QUESO DE PASTA DURA: 27 % A % 35,0 %
GRASAS: C.A.A. (art 608):
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QUESO DOBLE CREMA: G % 60 %
QUESO GRASO: 40 % G % 59,9 %
QUESO SEMIGRASO: 25 % G% 39,9 %
QUESO MAGRO: 10 % G% 24,9 %
QUESO DE LECHE DESCREMADA: G% 10 %
1. EVALUACIÓN SENSORIAL
Para realizar la evaluación sensorial las muestras deben tener temperaturas de 14 ºC +/- 4 ºC
Atributos:
* Apariencia exterior
* Apariencia interior
* Consistencia-Textura
* Flavor
* APARIENCIA EXTERIOR:
Se realiza mediante examen visual del queso entero: formas, corteza, superficie.
*APARIENCIA INTERIOR:
La evaluación de la apariencia interior, aberturas, color, se realiza mediante examen visual
de la superficie de corte o de una muestra del centro corazón) del queso.
* APARIENCIA, TEXTURA:
La evaluación de la consistencia se realizará sobre pequeños trozos obtenidos por corte o a
partir de una muestra del centro del queso, flexionando, presionando y desmenuzándolos
entre el índice y el pulgar, como así también masticándolos.
* FLAVOR:
El olor se determinará sobre el queso cortado o sobre el centro del queso. Para determinar
el gusto se masticarán y mezclarán con la saliva pequeños trozos de queso.
PUNTAJE: Los puntos asignados por el panel para los cuatro atributos de acuerdo la
asignación hecha en manteca se sumará y dividirá por cuatro.
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CLASIFICACIÓN:
Promedio Calidad
2. MUESTREO
a. Por corte: Se hacen dos cortes radiales si el queso tiene base circular o paralelos a sus
lados si se trata de un queso de forma rectangular que una vez retirada la corteza pese no
menos de 50 g. .
b. Con muestreador: Se utiliza un aparato adecuado al tipo de queso a muestrear de
distintas maneras: introduciendo oblicuamente hacia el centro del queso en uno o más
puntos distantes no menos de 10 cm del borde; o introduciéndolo perpendicularmente en
una de las caras atravesando la opuesta ; introduciéndolo horizontalmente en una de las
caras verticales a mitad de distancia entre dos caras horizontales y hacia el centro del
queso.
Para quesos blandos agitar, mezclar y luego tomar la muestra.
3. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Eliminar cuidadosamente la capa superficial no comestible junto con las porciones
mohosas o muy endurecidas.
Cortar las muestras retiradas y pasarlas tres veces por una picadora.
Desmenuzar las muestras obtenidas con el muestreador por una picadora y mezclarlas bien.
Por secado de 2 o 3 g de muestra en una estufa a vacío a 100 ºC y no más de 100 mm, o
bien por secado parcial en un baño de vapor y deshidratación posterior en una estufa de tiro
forzado 4 hs. a 135 ºC .
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5. DETERMINACIÓN DE LA GRASA DEL QUESO
METODO DE GERBER
Para la determinación de materia grasa en quesos se puede aplicar el método de Gerber,
con la utilización de un butirómetro especialmente diseñado para quesos. Posee una copa
con perforaciones donde se coloca la muestra desmenuzada, 5 g de queso, se agregan los
reactivos ácido sulfúrico y alcohol amílico y se continúa como se indicó para leche.
MÉTODO DE WERNER-SCHMID
Es otra técnica alternativa para determinar materia grasa en quesos. Se calienta la muestra
con HCl que disuelve la caseína; la grasa liberada se extrae con una mezcla de ésteres. Es
un método general para alimentos con bajo contenido en azúcares.
Reactivos
Amoníaco, HCl (c), etanol, éter dietílico, éter de petróleo
Técnica.
1. Pesar de 1 a 2 g de muestra en un vaso de precipitados (M)
2. Humedecer con gotas de NH3 y macerar con un pisón.
3. Adicionar 3 ml de agua y 7 ml de HCl ( c ) .
4. Cubrir el vaso con un vidrio de reloj y calentar cuidadosamente agitando.
5. Después de disolver todas las partículas por ebullición a fuego lento enfriar
parcialmente la disolución.
6. Adicionar 10 ml de alcohol y agitar.
7. Transferir cuidadosamente al disolución a un embudo separador.
8. Lavar varias veces el vaso y la varilla con éter dietílico hasta completar 25 ml de éter .
9. Agitar vigorosamente durante 1`, adicionando 25 ml de éter de petróleo.
10. Agitar nuevamente, dejar separar las capas y pasar la más densa a otra ampolla.
11. Extraer por lo menos tres veces con los éteres mezclados.
12. Lavar los extractos combinados con un pequeño volumen de agua.
13. Pesar el matraz vacío (P)
14. Filtrar al matraz y eliminar el disolvente.
Pesar el matraz previo secado a 100 ºC durante 45-60` (G)
Cálculos
% GRASA = ( g-p ) . 100 / M
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BIBLIOGRAFIA
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