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Índice de contenido i
Índice de figuras iii
Índice de tablas ix
Resumen x
Summary xi
1.- Introducción 1
2.- Hipótesis 7
3.- Objetivos 7
3,1.- Objetivos generales 7
3,2.- Objetivos específicos 7
4.- Materiales y Métodos 8
4,1.- Materiales 8
4,1,1.- Compuestos en estudio 8
4,1,2.- Reactivos y solventes 9
4,1,3.- Material de vidrio 11
4,1,4.- Electrodos 11
4,1,5.- Equipos 11
4,2.- Métodos 13
4,2,1.- Métodos de síntesis 13
4,2,1,1.- Síntesis de 1 metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol 13
4,2,1,2.- Síntesis de 1 metil- 2-Bromometil- 4-nitroimidazol 14
4,2,1,3.- Síntesis de 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol 15
4,2,2.- Medios de trabajo para estudios electroquímicos 17
4,2,2,1.- Medio acuoso 17
4,2,2,2.- Medio acuoso micelar 17
4,2,2,3.- Medio no acuoso 18
4,3.- Técnicas utilizadas 19
4,3,1.- Polarografía de pulso diferencial y Polarografía tast 19
4,3,2.- Voltamperometría cíclica 20
4,3,2,1.- Determinación de la razón de corriente (ip,a/ ip,c) 21
4,3,2,2.- Determinación del tipo de reacción electródica 23
4,3,4.- Curvas electrocapilares 26
4,3,5.- Voltamperometría adsortiva 26
4,3,6.- Modificación de GCE con NTC 27
4,3,7.- Voltamperometría de onda cuadrada (SWV) 29
i
5.- Resultados y Discusión 30
5,1.- Determinación de CMCs por técnicas electroquímicas 30
5,1,1.- Curvas electrocapilares 30
5,1,2.- Voltamperometría adsortiva 34
5,2.- Caracterización catódica 36
5,2,1.- Medio Acuoso 36
5,2,1,1. - Polarografía de pulso diferencial y Polarografía Tast 36
5,2,1,2.- Voltamperometría cíclica 40
5,2,2.- Medio Heterogéneo: Surfactantes 41
5,2,2,1.- Polarografía de pulso diferencial y Polarografía Tast 41
5,2,2,2.- Voltamperometría cíclica 47
5,2,3.- Medio no acuoso 56
5,2,3,1.- Polarografía de Pulso Diferencial y Polarografía Tast 56
5,2,3,2.- Voltamperometría Cíclica 58
•
5,3.- Estabilización de RNO2 : ¿micela o monómero? 63
5,3,1.-Voltamperometría cíclica 63
5,3,2.- Dispersión de luz 72
5,3,3.- Espectrofotometría UV-Visible 73
•
5,4.- Interacción del RNO2 con endobióticos y xenobióticos 76
5,5.- Reducción de derivados 4-nitroimidazolicos sobre GCE modificados con
NTCs 79
5,5,1. Voltamperometría cíclica 79
5,5,2. Voltamperometría de Onda Cuadrada 92
6.- Conclusiones 94
7.- Presentaciones a congresos 95
8.- Referencias 97
Figura 2. 4
Voltamperogramas cíclicos de barridos cortos a distintas velocidades de barrido de 4 NImOH,
en Medio 100 % DMF.
Figura 3. 13
Síntesis de 1 metil- 2-Hidroximetil- 4-nitroimidazol.
Figura 4. 14
Síntesis de 1 metil- 2-Bromometil- 4-nitroimidazol.
Figura 5. 15
Esquema general de la síntesis de 4NimOH.
Figura 6. 19
Polarograma de pulso diferencial (A) y polarograma Tast (B).
Figura 7. 22
Voltamperograma cíclico.
Figura 8. 25
Curvas teóricas para dismutación (A) y dimerización (B).
Figura 9. 30
Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de CTAB en solución de KNO3 0.1M (A),
Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de CTAB a diferentes potenciales aplicados (B).
Figura 10. 31
Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de Hyamina en solución de KNO3 0.1M.
Figura 11. 32
Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de Hyamina a diferentes potenciales aplicados.
Figura 12. 33
Curvas electrocapilares a diferentes concentraciones de SDS en solución de KNO3 0.1M (A),
Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de SDS a diferentes potenciales aplicados (B).
Figura 13. 34
Voltamperogramas lineales de Neutral Red 1μM sobre electrodo de Hg a diferentes tiempos de
acumulación (A). Dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación (B). Velocidad
de barrido: 345 mVs-1.
Figura 14. 35
Gráficos corriente versus concentración de CTAB en presencia de Neutral Red 1 μM.
Figura 15. 37
Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-NimMeOH en
britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
Figura 16. 38
Dependencia del potencial de pico (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al pH de una
Figura 17. 38
Dependencia del potencial de media onda (A) y de la corriente límite (B) con respecto al pH de una
solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.
Figura 18. 39
Polarogramas de pulso diferencial y dependencia del potencial de pico para 0.1mM de 4-NImMeBr
en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
Figura 19. 40
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 4.85x10-4M (A) y 4-NimMeBr 5.1x10-4M (B) a diferentes
pHs en tampón Britton Robinson 0.1M, velocidad de barrido: 100 mV/s.
Figura 20. 41
Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-NimMeOH en
presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
Figura 21. 42
Dependencia del Ep,c (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM
de 4-NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1M.
Figura 22. 42
Dependencia del E1/2 (A) y de la ilim (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM de 4-NimMeOH
en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.
Figura 23. 43
Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.1mM de 4-NimMeBr en presencia de CTAB 15
mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
Figura 24. 44
Dependencia del Ep,c (A) y de la ip,c (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM de 4-
NimMeBr, CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.
Figura 25. 45
Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.5 mM de 4-NimHOH en presencia de CTAB 15
mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
Figura 26. 48
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton Robinson 0.1M a pH 8.4 en
Presencia de 15 mM de diferentes surfactantes: A) CTAB, B) Triton-X, C) 100% BR (sin
surfactante), D) SDS y E) Hyamina. Velocidad de barrido = 1 V/s. Línea continua desde A) hasta E)
muestra el par redox RNO2/RNO2• aislada.
Figura 27. 49
Voltamperogramas cíclicos en aumento de la velocidad de barrido en presencia de surfactante
aniónico (A), no iónico (B) y catiónico (C) para 1mM de 4-NImHOH en Britton Robinson 0.1 M.
Figura 28. 50
Voltamperogramas cíclicos del par redox RNO2/ RNO2• de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton
Robinson 0.1M a pH 8.4 en presencia de Hyamina 15 mM a diferentes velocidades de barrido.
Figura 29. 50
Razón de corrientes Ipa/Ipc con respecto a la velocidad de barrido para 4-NimMeOH 1 mM en
tampón Britton Robinson 0.1 M y Hyamina 15 mM a pH 7.4, 8.4 y 9.4.
Figura 31. 53
Voltamperogramas cíclicos de 4-Nitroimidazol 2mM en CTAB 15mM desde pH 2 hasta 8, tampón
Britton Robinson 0.1 M.
Figura 32. 53
Voltamperogramas cíclicos a pH 8 a distintas velocidades de barrido (A) y Dependencia de la razón
de corrientes ((ip,a/ip,c) ) con la velocidad de barrido(B) para 4-nitroimidazol 2mM en medio CTAB
15mM.
Figura 33. 54
Voltamperogramas cíclicos de 2-nitroimidazol 2mM a distintos a pHs en CTAB 15mM (A) y en
Hyamina 15 mM (B), tampón Britton Robinson 0.1M.
Figura 34. 56
Polarogramas de pulso diferencial para el compuesto 4NimMeBr en Medio 100 % DMF.
Figura 35. 57
Polarogramas Tast para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.
Figura 36. 58
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH (A) y 4NimOH (B) en 100% DMF, 0.1M PTBA.
Figura 37. 58
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeBr en 100% DMF, 0.1M PTBA.
Figura 38. 59
Voltamperogramas cíclicos para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.
Figura 39. 60
Voltamperogramas cíclicos a distintas velocidades de barrido de 4-NimMeBr (A), Razones de
corriente con respecto la velocidad de barrido (B) en medio 100 % DMF (PTBA).
Figura 40. 60
Curvas teóricas de dismutación y dimerización para un electrodo esférico (Hg). Resultados
obtenidos para 4NimMeBr en 100% DMF.
Figura 41. 61
Relación logarítmica entre ip,c y la velocidad de barrido para 4-NimMeOH (A) y 4NImMeBr, en
Medio 100% DMF.
Figura 42. 62
Voltamperogramas cíclicos de 4NImMeBr en aumento de la velocidad de barrido en Medio 100 %
DMF.
Figura 43. 62
Relación logarítmica entre ip,cI y ip,cII y la velocidad de barrido para 4-NimMeBr (A) y razón de
corrientes ip,cII / ip,cI para 4NImMeBr, en Medio 100 % DMF.
Figura 44. 63
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH en ausencia (A) y presencia de surfactante catiónico 15
mM (B), Britton Robinson 0.1 M, ph 8.4.
Figura 46. 65
Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración de CTAB, 4
NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
Figura 47. 66
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Pt de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de CTAB (A). Dependencia de la intensidad de corriente (B) y Ep,c (C) con la
concentración de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
Figura 48. 67
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de Hyamina, Tampón Fosfato, pH 8.4.
Figura 49. 68
Dependencia de la intensidad de corriente y el Ep,c con la concentración de Hyamina, 4NimMeOH
5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
Figura 50. 69
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Pt de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de Hyamina (A). Dependencia de la intensidad de corriente (B) y Ep,c (C) con la
concentración de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
Figura 51. 70
Estructuras de los surfactantes catiónicos Bromuro de cetiltrimetilamonio, CTAB (A) y Hyamina (B),
utilizados para el estudio voltamperométrico de 4-NimMeOH.
Figura 52. 70
Voltamperogramas cíclicos sobre electrodo de Hg de 4-NimMeOH, en ausencia y aumento de la
concentración de BrETAB, 100% Tampón Fosfato, pH 8.4.
Figura 53. 71
Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración de BrETAB, 4
NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
Figura 54. 73
Distribución de tamaño obtenida por light scattering para CTAB.
Figura 55. 73
Espectros de absorbancia de 4-NimMeOH en aumento de la concentración de CTAB.
Figura 56. 74
Espectros de absorbancia de 4-NimMeOH en diferentes solventes.
Figura 57. 76
Compuestos utilizados para el estudio de interacción con RNO2•.
Figura 58. 77
Voltamperogramas cíclicos de 1 mM de 4-NimMeOH en tampón Britton Robinson 0.1 M, 15 mM
de CTAB, pH 8.4 a diferentes velocidades de barrido (100 – 10000 mV)(A). Dependencia de la
razón de corrientes (ip,a/ip,c) con el logaritmo de la velocidad de barrido (B).
Figura 60. 78
Razón de corrientes ipa/ipc del par redox RNO2/RNO2• en presencia de diferentes concentraciones
de endo/xenobióticos. Concentración de 4-NimMeOH 1mM en tampón Britton Robinson 0.1 M, 15
mM CTAB, pH 8.4. Velocidad de barrido: 5000 mV s-1.
Figura 61. 79
Voltamperograma cíclico de 4-NimMeOH 1.18×10-4 M sobre GCE, tampón Britton Robinson 0.1 M,
pH 2 . Velocidad de barrido:100 mVs-1
Figura 62. 80
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE, GCE/NTCs(H2O) y GCE/NTCs(DMF).
Concentración de la dispersión de NTC: 1 mg/mL, tampón, Britton Robinson 0.1 M pH 2. Velocidad
de barrido:100 mV s-1, tpo. de acumulación: 120 s.
Figura 63. 82
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE/NTCs(H2O). Concentración de la dispersión
de NTC: 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 250 mVs-1.
Inserto: Dependencia de la corriente con la velocidad de barrido.
Figura 64. 83
Curvas de calibración obtenidas con electrodos modificados con NTCs en distintos agentes
dispersantes. [NTCs]:1 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M pH 2, tiempo de acumulación:120
s.
Figura 65. 84
Curvas de calibración obtenidas a diferentes pHs Tampón Britton Robinson 0.1M. Concentración
de la dispersión de NTCs: 1 mg/mL, tiempo de acumulación: 120 s.
Figura 66. 85
Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE y GCE/NTCS(H2O). Concentración de la
dispersión de NTC: 0.2 y 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido:
100 mVs-1.
Figura 67. 86
Dependencia de la corriente de pico con la concentracion de NTC. [4-NimMeOH]: 3×10-6M, tampón
Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1, tiempo de acumulación: 420 s.
Figura 68. 87
Voltamperogramas lineales de 4-NimMeOH sobre electrodo GCE/NTC(H2O) a diferentes tiempos
de acumulación. Inserto: dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación.
[4NimMeOH]: 5×10-4 M, NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de
barrido: 100 mVs-1
Figura 69. 88
Dependencia del potencial de pico con respecto al pH. [4-NimMeOH] : 3×10-6 M, NTCs(H2O): 4
mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2. Velocidad de barrido: 100 mV s-1.
Figura 70. 89
Curvas de calibración de 4-NimMeOH obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a dos tiempos de
Figura 71. 90
Dependencia de la corriente de pico con el tiempo de acumulación. [4-NimMeBr] : 3×10-6 M,
NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1.
Figura 72. 91
Curvas de calibración de 4-NimMeBr obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a tiempo de acumulación
de 7min. NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2. Velocidad de barrido: 100
mVs-1.
Figura 73. 92
Voltamperogramas de onda cuadrada de [4-NimMeOH]: 3×10-6M obtenidas sobre
GCE/NTCs(H2O), (A) variación de frecuencia, (B) variación de amplitud. Tampón Britton Robinson
0.1 M, pH 2, tiempo de acumulación: 420 s.
Figura 74. 93
Curva de calibración de 4-NimMeOH obtenida sobre GCE/NTCs(H2O), tampón Britton Robinson
0.1 M, pH 2.
Tabla 2. 34
Valores de concentración micelar critica para CTAB y Hyamina.
Tabla 3. 36
Potenciales de pico para nitrocompuestos en medio acuoso, tampón Britton Robinson a pH 2.
Tabla 4. 46
Potenciales de pico para nitrocompuestos en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1
M.
Tabla 5. 52
Solución acuosa de Hyamina 5 mM Dato obtenido (referencia) desde soluciones en medio mixto b
30/70: Etanol/ tampón Britton-Robinson, c 60/40 : DMF/ tampón citrato.
Constantes de disproporcionación, tiempo de vida media para el anión radical nitro y potenciales
de pico catódico para el par redox RNO2/ RNO2• en solución acuosa con Hyamina 15 mM a
diferentes pHs.
Tabla 6. 57
Potenciales de pico catódico para nitrocompuestos en medio 100% DMF.
Tabla 7. 72
Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico CTAB.
Tabla 8. 72
Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico Hyamina.
Tabla 9. 74
Solvente utilizado y λmáx observado para 4-NimMeOH.
Tabla 10. 81
Valores de potencial de pico catódico de 4-NimMeOH sobre GCE modificado con NTC en dos
agentes dispersantes.
Tabla 11. 83
Valores de sensibilidad para dos agentes dispersantes.
Tabla 12. 83
Valores de sensibilidad para un electrodo GCE modificado con NTC dispersos en agua a distintos
pH. Potencial de pico catódico para 4-NimMeOH en las mismas condiciones.
Tabla 13. 91
Valores de sensibilidad para electrodo de GC modificado con diferentes NTCs.
TS 2 H2 O + 1/2 O2
T(S H ) 2
Vía Aeróbica
H 2O 2 OH + OH
2H + + e -
Fe ++ F e +++
SO D
O2 O2 (ox)D NA + T Vía Anaeróbica
ciclaje re dox
D NA
1e - H+ 1e - 2e - 2e -
RNO2 RNO2 RNO2 H RNO RNHOH RNH2
nitroso hidro xilam ina am ina
anió n ra dical nitro
dism utación
descom posición H 2O RNO RNO
(5-nitr oim idazo les) RNO2 H 2e - + 2H +
RNO2 RN=NR RN=NR + H2 O
- +
NO 2 H R azo
R O
radical im idazólico nitrit o azoxy 2e -
2H +
RNHNHR
1
Tal como lo muestra la figura 1, es posible la formación de una gran variedad de
intermediarios donde uno o más de ellos son responsables de la toxicidad de estos
compuestos. En condiciones anaeróbicas, el anión radical nitro (RNO2•) puede reducirse
para formar el derivado nitroso (RNO), el derivado hidroxilamínico (RNHOH) y finalmente
el derivado amino (RNH2), como lo muestran las siguientes reacciones de transferencia
electrónica:
Este anión radical superóxido (O2•) a su vez puede generar otras especies
reactivas de oxígeno como el radical hidroxilo (OH•), peróxido de hidrógeno (H2O2), etc..
Por lo tanto el anión radical nitro ocupa un rol fundamental en el mecanismo de
acción de los compuestos nitroimidazólicos, debido a que es la base de su actividad
biológica, es por ello que el conocimiento de su comportamiento es de suma importancia
ya que su química radicalaria es determinante para su uso.
9 2
1
6
i / μΑ 0,5
3 0,1
0
V/s
-3
-6
Además, en ese estudio se informó que el par RNO2/RNO2• no pudo ser aislado
debido al rápido decaimiento del RNO2• producto de una reacción de protonación por el
protón ácido del 4-nitroimidazol inicial (reacción padre-hijo) generando la base conjugada
(RNO2)- y el radical neutro RNO2H•. Esto describe una reacción intermolecular del tipo
padre-hijo entre el anión radical nitro y un protón ácido.
Como se puede concluir del análisis del estado de la técnica no se cuenta con
estudios exhaustivos que permitan descripciones más concretas acerca de los
mecanismos electroquímicos involucrados en la reducción de compuestos derivados del
4-nitroimidazol, así como tampoco existen estudios electroquímicos que apunten a
dilucidar la influencia de los sustituyentes en el anillo 4-nitroimidazólico y como éstos
afectan los mecanismos de la reducción y fundamentalmente como afectan la formación y
estabilidad del anión radical nitro.
3.- OBJETIVOS.
De síntesis
• Acetato de etilo, Equilab
• Acetona, Merck
• Ácido clorhídrico, Merck
• Ácido sulfúrico, Merck
• 1-Bencilimidazol, Aldrich
• 1-Metilimidazol, Aldrich
• Bicarbonato de sodio, Equilab
• Bromuro de tionilo, Sigma
• Cloruro de amonio, Scharlau
• Cloruro de sodio, Equilab
• Diclorometano, Equilab
• Dimetilsulfóxido-d6 (DMSO-d6), Sigma
• Etanol absoluto, Merck
• Éter etílico, Merck
• Hidróxido de potasio, Equilab
• Hielo seco, AGA
• Metanol, Equilab
• Nitrato de potasio, Merck
• Piridina, Sigma
• Sodio metálico, Merck
• Solución formalina 37%, Aldrich
• Solución hidróxido de amonio 25%, Equilab
• Sulfato de sodio, Merck
4,1,4.- Electrodos.
a) De trabajo:
4,1,5.- Equipos.
a) Sistema voltamperométrico/polarográfico y computacional:
• Analizador voltamperométrico BAS CV-50W y BAS CV-100W.
• Analizador voltamperométrico CHI 900 (CH Instruments Inc., USA)
b) Sistema espectrofotométrico:
• Espectrofotómetro UV-Vis UNICAM modelo UV-2, software VISION 2.1 para
control del instrumento.
O2N
N N N
Formalina 37% KNO3/H2SO4
OH OH
N ∆ N N
CH3 CH3 CH3
O2N
O2N N
N
SOBr2 Br
OH Piridina N
N
CH3
CH3
O2N
N N N N
Formalina 37% Na° / NH3 liq. KNO3/H2SO4
OH OH OH
N ∆ N NH4Cl N N
H H
(7) (8)
(5) (6)
Soluciones de trabajo.
Se prepararon por dilución de la solución stock hasta obtener la concentración requerida,
para el caso de polarografía de pulso diferencial y Tast se trabajó a concentraciones del
orden de 10-4 M.
Para Voltamperometría Cíclica la solución de trabajo fue en el orden de 10-3 M. Estas
soluciones se mantuvieron refrigeradas y protegidas de la luz para evitar su
descomposición.
Soluciones de trabajo.
Se tomó una alícuota de la solución stock preparada con DMF, se agregaron 0.34192 g
de electrolito soporte perclorato de tetrabutil amonio (PTBA) y luego se aforó a 10 mL con
DMF.
2.0 1.2
ip,c
ilim
1.0
1.5
0.8
1.0 A 0.6 B
i / μA
i / μA
0.4
0.5
0.2
0.0
0.0 E 1/2
Ep,c
0 -200 -400 -600 -800 -1000 0 -200 -400 -600 -800 -1000
E / mV (Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)
3 1 1
i p = 2,69 × 10 5 ⋅ n 2
⋅ A ⋅ D0 2 ⋅C ⋅v 2
(Ec.10)
3 1
i p = 2,69 ×10 5 ⋅ n 2
⋅ A ⋅ D0 2 ⋅C ⋅ v
(Ec.11)
Donde
C = [mol / cm3]
A = [cm2], área del electrodo
D0 = [cm2 / s], coeficiente de difusión
ν = [V / s], velocidad de barrido
n = número de electrones
ip = [A] Intensidad de pico
i p = 2,99 × 10 5 ⋅ n ⋅ (α ⋅ n a )
1 1 1
2 ⋅ A ⋅ C 0 ⋅ D0 2 ⋅v 2
(Ec.12)
Donde,
n = número de electrones transferidos finales
na = número de electrones transferidos antes de la etapa determinante
α = coeficiente de transferencia electrónica
1
Log i p = Log (k ) + ⋅ Log (v )
2 (Ec.13)
( )
∂ Log i p
= 0. 5
∂ Log (v )
(Ec.14)
De esta manera, un valor de pendiente igual a 0.5 de la ecuación 14, indica que el
proceso está controlado por difusión.
Por otra parte al realizar el mismo desarrollo para la ecuación 11 obtendremos una
pendiente (Log (ip) / Log (ν)) igual a 1, lo que indicaría que el proceso está controlado por
adsorción.
20
15
10 (Ip,c)0 Catódico
i / μA
5 (Ip,s)0
-5 (Ip,a)0 Anódico
-10
E / mV
Donde
(Ip,a)0: intensidad de corriente anódica
(Ip,c)0: intensidad de corriente catódica
(Ip,s)0: intensidad de la corriente en el potencial de inversión de barrido
i p ,a (i ) (0.485) ⋅ (i )
=
(i ) + (i ) + 0.086
p ,a 0 p ,s 0
i p ,c p ,c 0 p ,c 0
(Ec.15)
De este modo se evita la influencia negativa sobre la línea de base del pico de vuelta
debido a transferencias posteriores.
A + e ⎯⎯→
ks
B
2B ←⎯→
⎯ A + C
kdis
(a)
2B ←⎯⎯→ D
kdim
(b)
( E1 / 2 − E λ )
τ=
v (Ec.18)
E p , a + E p ,c
E1/ 2 =
2 (Ec.19)
y ν es la velocidad de barrido.
⋅ (Eλ − E 0 )
nF
a ⋅τ =
RT (Ec.20)
siendo,
nFv
a=
RT (Ec.21)
( Eλ − E 0 )
τ=
v (Ec.22)
Se ajustaron los valores de Eλ para que el producto a x τ sea igual a 4 en todas las
experiencias realizadas. Entonces así, se obtiene de las ecuaciones 16 y 17 la expresión,
ω = k 2 ⋅ C 0 ⋅ τ (Ec.23)
relación lineal que nos permite determinar la constante de segundo orden de decaimiento.
Obtenido el valor de k2 se pudo calcular los valores de tiempo de vida media del
radical, según:
1
t1 / 2 =
k2 ⋅ C 0 (Ec.24)
H
N N NH2 N N NH2
+ 2ē + 2H ↔ +
N N
H
Ecuación 25. Reducción de Neutral Red
Los NTCs fueron oxidados por tratamiento químico con una mezcla 1:1 de H2SO4:
HNO3 ambos 3M y llevados a reflujo por 3 horas, luego la suspensión fue filtrada y lavada
con abundante agua hasta llegar a pH neutro. Todos los experimentos
voltamperométricos fueron obtenidos después de purgar con N2.
Preparación del electrodo de trabajo
Antes de cada modificación, el GCE fue pulido con alúmina al agua de 0.3 y 0.05 μm, y
luego lavado con abundante agua. Los NTC oxidados fueron dispersados a diferentes
concentraciones (mg/mL) en agua y DMF y sonicados por 5 minutos, este último
procedimiento se repitió 3 veces. La inmovilización de los NTCs fue llevada a cabo
tomando un volumen de 5 µL de la dispersión de NTCs (DMF, H2O) y depositándolos
sobre la superficie del GCE (Esquema 2). Para secar la dispersión, el GCE fue introducido
a una estufa a 50°C por 15 min. Los electrodos resultantes fueron llamados
GCE/NTC(DMF) y GCE/NTC(H2O) de manera de identificar en que medio fue realizada la
dispersión.
150
5
3 100
i / μΑ
50
1 50°C 0
-50
-100
0.0 -0.2 -0.4 -0.6 -0.8
E/V
15 Min
80
6
70
i / μΑ
60
4 50
E/V
1.1 0.045 mM
1.0
Tiempo goteo / s
0.9
0.8
0.530 mM
0.7
0.6 A
E / mV (Ag/AgCl)
1.1
1.0
E/V
Tiempo goteo / s
-0.2
-0.4
0.9
-0.6
-0.8
-1.0
0.8 -1.2
-1.4
-1.6
0.7
B
0.6
-1.6 -1.4 -1.2 -1.0 -0.8 -0.6 -0.4 -0.2
Log [CTAB]
1.1 0.1
1.0
Tiempo goteo / s
0.9
0.8
3.6
0.7
0.6
A
0.5
0 -500 -1000 -1500 -2000
E / mV (Ag/AgCl)
0.7
B
0.6
-1.0 -0.8 -0.6 -0.4 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6
Log [Hyamina]
Figura 11. Tiempo de goteo vs logaritmo de la concentración de Hyamina a diferentes
potenciales aplicados.
1.00
1.0
0.95
Tiempo goteo / s
0.9
Tiempo goteo / s
0.90 E/ V
0.8 -0.2
-0.4
0.7 0.85 -0.6
-0.8
-1.0
0.6 0.80 -1.2
-1.4
0.5 B
A 0.75
0.4
500 0 -500 -1000 -1500 -2000 -1.6 -1.4 -1.2 -1.0 -0.8 -0.6 -0.4 -0.2
Para la voltamperometría adsortiva, se utilizó Neutral Red (NR) como estándar interno,
optimizándose inicialmente el tiempo de acumulación (Fig.13) y la velocidad de agitación
en ausencia de surfactantes, seleccionándose los parámetros de máxima intensidad de
corriente (200 s y 350 rpm). Bajo estas condiciones se observó una relación lineal entre la
corriente y la concentración de NR.
0.6 0.6 B
A
0.5 0.5
0.4 0.4
i / μA
i / μA
0.3
0.3
0.2
0.2
0.1
0.1
0.0
0.0
-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 0 50 100 150 200 250
E / mV (Ag/AgCl) Tiempo de acumulación / s
Figura 13. (A) Voltamperogramas lineales de Neutral Red 1μM sobre electrodo de Hg a
diferentes tiempos de acumulación. (B) Dependencia de la corriente de pico con el tiempo
de acumulación. Velocidad de barrido: 345 mVs-1
3.0
2.5
i / μΑ 2.0
1.5
1.0
0.5
0.0
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
[CTAB] / mM
Figura 14. Gráficos corriente versus concentración de CTAB en presencia de Neutral Red
1 μM.
• Efecto sustituyente
En medio 100% tampón Britton Robinson a pH 2, todos los compuestos fueron
estudiados, dando una señal de reducción tanto por PPD como por PTast. Los valores de
potencial encontrados se diferenciaron de manera significativa, en la tabla 3 se presentan
las estructuras de los compuestos y sus respectivos potenciales de pico.
Compuesto Ep,c mV
O2N
N
H
-527
N
H A
O2N
N
OH -560
N
H B
O2N
N
OH -132
N
CH 3
C
O2N
N
Br -180
N
CH 3
D
Tabla 3. Potenciales de pico para nitrocompuestos en medio acuoso sobre electrodo de Hg,
tampón Britton Robinson a pH 2.
O2N
N
OH
N
CH 3
A B
2.4
2.2 2.0
2.0
1.8
1.5
1.6
1.4
1.2
i / μΑ
1.0
i / μA
1.0
0.8
0.6 0.5
0.4
0.2
0.0
0.0
-0.2
0 -200 -400 -600 -800 -1000 0 -200 -400 -600 -800 -1000
E / mV (Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)
Figura 15. Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-
NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
3.0
-1100
-1000
A 2.5
B
-900
-800
2.0
-700
-600
ip / μA
Ep / mV
1.5
-500
-400
1.0
-300
-200
0.5
-100
0
0.0
2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12
pH pH
Figura 16. Dependencia del potencial de pico (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al
pH de una solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.
-900 1.25
-800 A B
-700
1.00
-600
E 1/2 / mV
i lim / μA
-500
0.75
-400
-300
0.50
-200
-100
0 0.25
2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12
pH pH
Figura 17. Dependencia del potencial de media onda (A) y de la corriente límite (B) con
respecto al pH de una solución 0.1mM de 4-NimMeOH en Britton Robinson 0.1 M.
-700
2.5
-600
-500
2.0
Ep / mV
-400 m = -45.2
-300
1.5 -200
i / μA
-100
0 2 4 6 8 10 12
pH
1.0
0.5
0.0
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 18. Polarogramas de pulso diferencial y dependencia del potencial de pico para
0.1mM de 4-NImMeBr en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
2 11 3 11
7
3.5
6 3.0
5
A B
2.5
4 2.0
1.5
3
i/μA
i/μA
1.0
2
0.5
1
0.0
0 -0.5
-1 -1.0
0 -200 -400 -600 -800 -1000 -1200 0 -200 -400 -600 -800 -1000 -1200
Para ninguno de los compuestos estudiados en medio acuoso fue posible obtener
la separación de la transferencia mono electrónica.
1.6
A B
1.4
1.2 1.8
1.6
1.4
1.0 1.2
1.0
0.8 0.8
i / μA
0.6
0.4
0.6
0.2
0.0
0.4 -200 -400 -600 -800 -1000 -1200
E / mV
0.2
O2N
0.0 N
OH
-0.2 N
-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 -1400
CH 3
E / mV
Figura 20. Polarogramas de pulso diferencial (A) y polarogramas TAST (B) para 0.1mM de 4-
NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
-1100 A 2.0 B
pico I pico I
1.8
-1000 pico II pico II
1.6
1.4
-900
1.2
1.0
m = 1.10
Ep / mV
-800
ip / μA
0.8
0.6
-700
0.4
0.2
-600
0.0
m = -37.6
-0.2
-500
-0.4
2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12
pH pH
Figura 21. Dependencia del Ep,c (A) y de la corriente de pico (B) con respecto al pH de una
solución 0.1mM de 4-NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1M.
O2N
N
-900
1.2
OH
N
A 1.0
B
-800 CH 3
0.8
E 1/2 / mV
-700
i lim/ μΑ
0.6
-600 0.4
m = - 37.89
0.2
-500
0.0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 4 6 8 10
pH pH
Figura 22. Dependencia del E1/2 (A) y de la ilim (B) con respecto al pH de una solución 0.1mM
de 4-NimMeOH en presencia de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.
1.5
O2N
i / μΑ
1.0 N
Br
0.5 N
CH3
0.0
E / mV (Ag/AgCl)
2
i / μΑ
1
pH
5,5
0 7,5
-200 -400 -600 -800 -1000 -1200 -1400
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 23. Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.1mM de 4-NimMeBr en presencia
de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
-1000
Ep / mV
m = 16.31
-900
-800
-700
m = 2.21
-600
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
pH
B
3
1
i / μΑ
-1 pico I
pico II
-2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
pH
Figura 24. Dependencia del Ep,c (A) y de la ip,c (B) con respecto al pH de una solución
0.1mM de 4-NimMeBr. CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M.
10 pH
1,8
8 6,8
7,5
8,4 O2N
6
10,5 N
i / μΑ
OH
4 N
H
2
E / mV (Ag/AgCl)
10
6
i / μΑ
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 25. Polarogramas de pulso diferencial y Tast para 0.5 mM de 4-NimHOH en presencia
de CTAB 15 mM en Britton Robinson 0.1 M a distintos pHs.
O2N
N
OH 7.5 -732 -888
N
H
O2N
N
OH 8.6 -744 -1000
N
CH 3
O2N
N
Br 5.5 -708 -968
N
CH 3
En presencia de SDS y Tritón-X, la morfología del pico de reducción del grupo nitro
es esencialmente la misma que en ausencia de éstos, lo que indica que tanto SDS como
Triton-X no modifican las características del proceso electroquímico. De acuerdo a estos
resultados, exploramos la posibilidad de estabilizar el anión radical nitro en la interfase de
micelas catiónicas resultante, siendo ésta muy buena para el estudio de radicales libres
en medio acuoso. Sin embargo, los resultados encontrados son de alguna manera
contradictorios con los informados anteriormente por McIntire y col.50, quienes estudiaron
la reducción electroquímica de nitrobenceno en presencia de surfactantes aniónicos,
catiónicos y no iónicos. En ese trabajo se reportó que el único medio capaz de estabilizar
el anión radical nitro y en consecuencia susceptible de ser detectado por
voltamperometría cíclica resulto ser empleando surfactantes aniónicos. Con surfactantes
catiónicos no fue posible estudiar el anión radical nitro de NB. Por otra parte, Saveant y
col.49, han informado una notable estabilización del anión radical de ftalonitrilo en
presencia de micelas catiónicas, sugiriendo que la disminución en 250 veces de la
velocidad de protonación del anión radical, se debía a su asociación con la micela
cargada positivamente. Los resultados combinados permiten concluir que la influencia de
los sistemas micelares sobre los procesos electroquímicos de un sustrato no se pueden
predecir sobre la base de simples consideraciones electrostáticas, siendo fuertemente
dependientes de las estructuras de los surfactantes y el sustrato65.
6
A B
4
4 3
i / μΑ
i / μΑ
2
2
0
1
-2
0
-4
0 -3 0 0 -6 0 0 -9 0 0 -1 2 0 0 -1 5 0 0 0 -3 0 0 -6 0 0 -9 0 0 -1 2 0 0 -1 5 0 0
E / mV E / mV
4 C
i / μA
-2
8 8
D E
6 6
4
i / μΑ
4
i / μΑ
2
2
0
0
-2
-2
0 -300 -600 -900 -1200 -1500 0 -300 -600 -900 -1200 -1500
E / mV E / mV
10μA
A B C
-500 -600 -700 -800 -900 -500 -600 -700 -800 -900
-500 -600 -700 -800 -900 -1000
E / mV E / mV E / mV
5
2.5
1
0.5
0.1
10 μΑ
1.0
0.8
ipa/ i pc
0.6
pH
7.4
0.4
8.4
9.4
-0.8 -0.4 0.0 0.4 0.8 1.2
Log ν
Figura 29. Razón de corrientes Ipa/Ipc con respecto a la velocidad de barrido para 4-
NimMeOH 1 mM en tampón Britton Robinson 0.1 M y Hyamina 15 mM a pH 7.4, 8.4 y 9.4
Las constantes cinéticas, k2, y los tiempos de vida media para el anión radical en
medio acuoso en presencia de micelas a diferentes pHs se muestra en la tabla 5, también
se incluye una comparación con soluciones de diferente concentración de surfactante y en
medio mixto sin micelas. De estos resultados podemos afirmar que el uso de surfactantes
es la única condición capaz de estabilizar el anión radical nitro de 4-MinMeOH hasta el
punto de ser detectable por VC, en solución acuosa en la zona de pH de 7-9. En medio
mixto sin surfactantes este estudio solo fue posible a partir de pH 10. Probablemente este
hecho se debe a la disminución en la velocidad de protonación del anión radical. Por otro
lado, cuando la concentración de Hyamina disminuyó de 15 a 5 mM, los valores de k2
muestran un aumento en seis veces y el potencial de pico catódico disminuyó alrededor
de 20 mV. Ambos hechos pueden ser asociados a la adsorción del surfactante sobre la
superficie del electrodo66,67, el que puede alterar el sobrepotencial del electrodo y a la
formación de agregados micelares que afectan la reacción de disproporcionación.
25 A B
15
20
10
15
i / μΑ
i / μΑ
10
0
5
-5
0
-5 -10
-500 -600 -700 -800 -900 -500 -600 -700 -800 -900
E / mV (Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)
Tabla 5
a
Solución acuosa de Hyamina 5 mM Dato obtenido (referencia 68) desde soluciones en
medio mixto b 30/70: Etanol/ tampón Britton-Robinson, c 60/40 : DMF/ tampón citrato.
Tabla 5.- Constantes de disproporcionación, tiempo de vida media para el anión radical nitro
y potenciales de pico catódico para el par redox RNO2/ RNO2• en solución acuosa con
Hyamina 15 mM a diferentes pHs.
10 μ A
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 31. Voltamperogramas cíclicos de 4-Nitroimidazol 2mM en CTAB 15mM desde pH 2
hasta 8, tampón Britton Robinson 0.1 M.
0.9
4
A B
3 0.8
2
i p,a / ip,c
i / μΑ
pH 8,0
0.7
1
0
0.6
-1
-2 0.5
-400 -500 -600 -700 -800 -900 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0
E / mV (Ag/AgCl) Log V
E / mV (Ag/AgCl)
E / mV (Ag/AgCl)
O2N O2N
N H
+
N
Br Br
N N
CH3 CH3
100% DMF
2.5 100% DMF + 50uL TBAOH
100% DMF + 100uL TBAOH
2.0
1.5
i / μΑ
1.0
0.5
0.0
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 34. Polarogramas de pulso diferencial para el compuesto 4NimMeBr en Medio 100 %
DMF.
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 35. Polarogramas Tast para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.
Los valores de Ep,c para los tres compuestos en medio 100% DMF se indican en
la tabla 6. El compuesto que presenta el potencial de reducción más bajo es el 4-
NimMeOH, a diferencia del medio 100% acuoso, en este medio se aprecia que la
incorporación de los sustituyente sobre el anillo base 4-Nitroimidazol, desplaza los
potenciales de reducción hacia valores más negativos.
Técnica -Ep,c/ mV
4-NimMeOH 1288
4NimMeBr 1200
4NimOH 1688
4Nim 900
Los voltamperogramas cíclicos para los tres compuestos se aprecian en las figuras
36 y 37 en las cuales se encuentra representado el par redox RNO2/RNO2• por la línea
continua.
5
6
4
4
3
2
i / μA
i / μA
2
0
1
-2
0
-4
-400 -800 -1200 -1600 -2000 -2400 -400 -800 -1200 -1600 -2000 -2400
E / mV ( Ag/AgCl) E / mV (Ag/AgCl)
Figura 36. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH (A) y 4NimOH (B) en 100% DMF, 0.1M
PTBA.
1.6
1.2
i / μΑ
0.8
0.4
0.0
E / mV (Ag/AgCl)
100% DMF
+ 30uL TBAOH
+ 60uL TBAOH
+ 90uL TBAOH
+ 120uL TBAOH
0.5 μΑ
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 38. Voltamperogramas cíclicos para el compuesto 4-NimMeBr en Medio 100 % DMF.
Tal como se aprecia en la figura 38, luego de la segunda adición de TBAOH (60μL
en total) desapareció la pre onda, dando un voltamperograma muy bien resuelto.
Posteriormente, se evaluó el efecto de la velocidad de barrido sobre la reducción de 4-
NimMeBr (par redox RNO2/RNO2•) en estas condiciones (Figura 39A) y así construir el
gráfico de razones de corrientes (ip,a/ip,c) vs Log velocidad de barrido (Figura 39B). Se
observa el comportamiento característico descrito para una reacción de transferencia
electrónica seguida de una etapa química.
2
0.9
1
ipa / ipc
i / μΑ
0.8
0
0.7
-1
0.6
-2
-600 -800 -1000 -1200 -1400 -1600 -1.2 -0.9 -0.6 -0.3 0.0 0.3 0.6 0.9
E / mV (Ag/AgCl) Log ν
Figura 39. Voltamperogramas cíclicos a distintas velocidades de barrido de 4-NimMeBr (A).
Razones de corriente con respecto la velocidad de barrido (B) en medio 100 % DMF (PTBA).
El anión radical nitro formado, puede sufrir reacciones de decaimiento químico por
disproporción o dimerización. A diferencia de los medios acuosos donde ocurre una
reacción de decaimiento por disproporción, en este medio no acuoso, ya que no hay una
alta disponibilidad H+ y se espera una reacción de dimerización como la reacción más
probable.
1.05 dis Hg
1.00 dim Hg
Experimental
0.95
0.90
0.85
ipa / ipc
0.80
0.75
0.70
0.65
0.60
0.55
-2.0 -1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
Log ω
Figura 40. Curvas teóricas de dismutación y dimerización para un electrodo esférico (Hg).
Resultados obtenidos para 4NimMeBr en 100% DMF.
0.5
1.2 B
A
0.4
1.0
0.3
Log ip,c
0.8 0.2
Log ipc
0.1
0.6
0.0
A 0,17226
A 0.76344 -0.1
0.4 B 0,40211
B 0.44472
R 0.99973
R 0,99556
-0.2
0.2
-1.2 -0.8 -0.4 0.0 0.4 0.8 -1.2 -0.9 -0.6 -0.3 0.0 0.3 0.6 0.9
Log ν Log ν
Figura 41. Relación logarítmica entre ip,c y la velocidad de barrido para 4-NimMeOH (A) y
4NImMeBr, en Medio 100% DMF.
Para procesos controlados por difusión este valor es cercano a 0.5 y para
procesos controlados por adsorción el valor es cercano a 1. Los valores para ambos
compuestos son cercanos al valor teórico de 0.5 descrito para procesos controlados por
difusión.
Para esclarecer el origen de la pre onda observada para el 4-NimMeBr por las
técnicas utilizadas, y descartar algún fenómeno de tipo adsortivo, se realizó un estudio de
velocidad de barrido sin la adición de TBAOH. La figura 42 muestra los voltamperogramas
obtenidos en medio 100% DMF.
16
12
8
i / μΑ
-4
-800 -1000 -1200 -1400 -1600
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 42. Voltamperogramas cíclicos de 4NImMeBr en aumento de la velocidad de barrido
en Medio 100 % DMF.
2.0
1.2 0,42589
A B
1.0
1.5
0,45157
0.8
ip,cII/ ip,cI
Log ip,c
0.6 1.0
0.4
0.5
0.2
ip,cI
ip,cII
0.0 0.0
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
Log ν Log ν
Figura 43. Relación logarítmica entre ip,cI y ip,cII y la velocidad de barrido para 4-NimMeBr (A)
y razón de corrientes ip,cII / ip,cI para 4NImMeBr, en Medio 100 % DMF.
5,3.- Estabilización de RNO2• : ¿micela o monómero?
75 16
70
14
65
60 12
55
10
50
45 8
i / μΑ
i / μΑ
40
6
35
30 4
25
2
20
15 0
10
-2
5
0 -4
-5
-6
-400 -500 -600 -700 -800 -900 -400 -500 -600 -700 -800 -900
E / mV E / mV
[CTAB]
20 μΑ
s / CTAB
26
-800
24
A B
E / mV (Ag/AgCl)
22 señal I
-900 señal II
i / μΑ
20
-1000
18 señal I
señal II
16
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0
Log [CTAB] Log [CTAB]
Figura 46. Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración
de CTAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
20 μΑ
-100
Ep,c
E / mV(Ag/AgCl)
45 ip,c -200
Ep,a
ip,a ΔEp
i / μΑ
15.0
-700
12.5
10.0
-800
B C
7.5
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5 -5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
Log[CTAB] Log[CTAB]
[Hyamina]
20 μΑ
s / Hyamina
E / mV (Ag/AgCl)
19
-900 señal I
señal II
18 señal I
i / μΑ
17
señal II -1000
16
-1100
15
14
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5 -5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
Log[Hyamina] Log[Hyamina]
[Hyamina]
40 μA
s / Hyamina
45
-0.1
Ep,c
40 -0.2 Ep,a
ip,c ΔEp
Ep / V
ip,a
i / μΑ
15
-0.7
B C
10
-0.8
5
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
-5.0 -4.5 -4.0 -3.5 -3.0 -2.5 -2.0 -1.5
Log [ Hyamina] Log[Hyamina]
CH3
+
N CH3 Br
CH3
A
H3C CH3 Cl
CH3
+
O N
O
CH3
H3C CH
CH3 3
B
CH3
+
N CH3 Br
Br
CH3
4 μA
E / m V (A g/A gC l)
-750
15
Ep,c
A B
-720
E / mV (Ag/AgCl)
12
-690
i / μA
9
-660
6 -630
ip,c -600
3
-570
0
0,0 -3
5,0x10
-2
1,0x10
-2
1,5x10 2,0x10
-2
0,0 5,0x10
-3
1,0x10
-2 -2
1,5x10 2,0x10
-2
[BrETAB] / M [BrETAB] / M
Figura 53. Dependencia de la intensidad de corriente (A) y el Ep,c (B) con la concentración
de BrETAB, 4-NimMeOH 5mM, en tampón fosfato pH 8.4.
CTAB tamaño/nm
10 mM en Agua 2.3 2.6 2.5 2.5 ± 0.15
10 mM en tampón BR pH 8.4 5.1 6.3 4.2 5.2 ± 0.8
10 mM + 4-NimMeOH en tampón BR pH 8.4 4.8 5.2 4.9 5.1 ± 0.6
0.03 M + 4-NimMeOH en tampón BR pH 8.4 5.1 4.8 4.8 5.0 ± 0.5
Tabla 7. Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico
CTAB.
Del mismo modo, las micelas de Hyamina tienen un tamaño menor que las de
CTAB, y tampoco presentan un cambio en su tamaño tras la adición del nitrocompuesto.
(Tabla 8)
Hyamina tamaño/nm
10 mM en tampón BR pH 8.4 4.1 4.2 4.1 4.13 ± 0.04
10 mM+4-NimMeOH en tampón BR pH 8.4 4.3 4.2 4.2 4.18 ± 0.06
Tabla 8. Tamaño de micelas observado por Light Scattering para el surfactante catiónico
Hyamina.
% en abundancia
30
0 20 40 60 80
Diámetro / nm
Figura 54. Distribución de tamaño obtenida por light scattering para CTAB.
[CTAB]
≠ Solventes → ≠ λ max
Solvente λ / nm
2ButOH 292
Benceno 296
THF 304
Tolueno 295
Et-glicol 302
2PropOH 299
CH3CH2Cl2 303
CH2Cl2 301
CHCl3 294
ACN 301
EtOH 296
O H H
N
H
HS OH
N
N N
H CH3
N N
O
N-acetil cisteína Adenina
SH H
O O O
N
HO N OH
NH2 H O
Glutatión
10
i p,a/ ip,c
0.8
i / μA
0.7
0
-5
0.6
ip,a/ip,c
-10
0.5
-500 -600 -700 -800 -900 -0.4 0.0 0.4 0.8 1.2
E / mV (Ag/AgCl) Log ν
12
8
i / μA
-4 N-Acetilcisteína
-500 -600 -700 -800 -900
E / mV (Ag/AgCl)
12
12
8
8
i / μA
4
i / μA
0
0
Glutation Adenina
-4
-4
-500 -600 -700 -800 -900 -1000
-500 -600 -700 -800 -900
En la figura 60, se muestran las razones de corriente ip,a/ip,c, estas son graficadas
en función de la concentración de los endo/xenobióticos. Se puede concluir de este
gráfico, que existe una interacción leve entre el anión radical nitro electroquímicamente
generado y los compuestos, lo cual se evidencia por la disminución de las razones de
corriente ip,a/ip,c a medida que aumenta la concentración de estos.
0.90
ip,a / ip,c
0.85
N-acetil cisteina
Glutation
Adenina
0.80
0 1 2 3 4 5 6
[endo/xeno] / mM
Figura 60. Razón de corrientes ipa/ipc del par redox RNO2/RNO2• en presencia de diferentes
concentraciones de endo/xenobióticos. Concentración de 4-NimMeOH 1mM en tampón
Britton Robinson 0.1 M, 15 mM CTAB, pH 8.4. Velocidad de barrido: 5000 mV s-1.
GCE -4
8 1.18 x 10 M
4
i / μA
-2
0 -200 -400 -600 -800
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 61. Voltamperograma cíclico de 4-NimMeOH 1.18×10-4 M sobre GCE, tampón Britton
Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido:100 mVs-1
Es por esta razón y considerando las ventajas que ofrece el uso de NTC, como su
elevada conductividad eléctrica, resistencia mecánica y actividad electrocatalítica75, que
se planteó el desarrollo de electrodos de GCE modificados con NTCs (GCE/NTCs) para
evaluar el comportamiento de nuestros nitrocompuestos.
80
G C E + N TC 1m g/m L(H 2 O )
G C E + N TC 1m g/m L(D M F)
60 GCE
40 5.21 x 10 M
-6
i / μA
20
-4
1.18 x 10 M
-20
-40
0 -200 -400 -600 -800
E / m V (A g/A gC l)
Figura 62. Voltamperogramas cíclicos de 4-NimMeOH sobre GCE, GCE/NTCs(H2O) y
GCE/NTCs(DMF). Concentración de la dispersión de NTC: 1 mg/mL, tampón, Britton
Robinson 0.1 M pH 2 . Velocidad de barrido:100 mV s-1, tpo. de acumulación: 120 s.
Como se muestra en la figura 62, los electrodos modificados exhibieron no tan solo
un aumento en la intensidad de la corriente, sino también un cambio significativo en el
valor de potencial, desplazando la señal hacia valores menos negativos. La disminución
del potencial puede ser atribuida a que la transferencia electrónica se ve favorecida sobre
los NTCs en comparación con GCE sin modificar. Los resultados obtenidos para los
dispersantes empleados se muestran en la tabla 10.
Electrodo -Ep,c / mV
GCE 500
DMF 310
H2O 318
Tabla 10. Valores de potencial de pico catódico de 4-NimMeOH sobre GCE modificado con
NTC en dos agentes dispersantes.
-3.6
-3.7
-3.8
Log ip
-3.9
400 -4.0
-4.1
300 -1.4 -1.2 -1.0 -0.8 -0.6
Log V
250 V/s
200
i / μA
100
0
20 V/s
-100
-200
0 -200 -400 -600 -800 -1000
E / mV (Ag/AgCl)
Los agentes dispersantes utilizados, fueron agua y DMF, observándose que los
GCE modificados con NTCs dispersos en agua presentaban una mayor sensibilidad
dentro de un mismo rango de concentración de 4-NimMeOH (Figura 64). Los valores de
sensibilidad encontrados se presentan en la tabla 11.
GCE 0.01
DMF 1.44
H2O 2.52
Otra condición experimental que se evaluó, fue el pH del medio, como muestra la
figura 71. La mejor respuesta a la variación de la concentración del 4-NimMeOH, se
obtuvo a pH ácido. Los valores encontrados se resumen en la tabla 12
Tabla 12. Valores de sensibilidad para un electrodo GCE modificado con NTC dispersos en
agua a distintos pH. Potencial de pico catódico para 4-NimMeOH en las mismas
condiciones.
0
0 1 2 3 4 5 6 7 100 150 200 250 300
[4NimMeOH] / μM
Figura 64. Curvas de calibración obtenidas con electrodos modificados con NTCs en
distintos agentes dispersantes. [NTCs]: 1 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M pH 2,
tiempo de acumulación: 120 s.
pH
12
10
2
7,2
8 11
i / μA
0
0 1 2 3 4 5 6
[4NimMeOH] / μM
Figura 65. Curvas de calibración obtenidas a diferentes pHs Tampón Britton Robinson 0.1M.
Concentración de la dispersión de NTCs: 1 mg/mL, tiempo de acumulación: 120 s.
9 90
GCE
GCE + NTC (0.2 mg/mL)
GCE + NTC (4 mg/mL)
60
6
30
3
i / μA
i / μA
0
-30
-3
-60
20
15
i / μA
10
0
0 2 4 6
[NTC] / mg/mL
Figura 67. Dependencia de la corriente de pico con la concentracion de NTC. [4-NimMeOH]:
3×10-6M, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1, tiempo de
acumulación: 420 s.
Por otra parte, se observó que el valor de potencial de pico no cambió a los
diferentes tiempos de acumulación. Se utilizó para las siguientes experiencias un tiempo
de acumulación superior a los 300s (420s) de modo de obtener una óptima señal de
reducción.
40
40 35
30
i / μΑ
25
30 20
15
10
0 100 200 300 400 500 600
i / μA
10
-10
-100 -200 -300 -400 -500 -600 -700
E / mV (Ag/AgCl)
Figura 68. Voltamperogramas lineales de 4-NimMeOH sobre electrodo GCE/NTC(H2O) a
diferentes tiempos de acumulación. Inserto: dependencia de la corriente de pico con el
tiempo de acumulación. [4-NimMeOH] : 5×10-4 M, NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton
Robinson 0.1 M, pH 2 . Velocidad de barrido: 100 mVs-1
-Ep / V (Ag/AgCl)
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0 2 4 6 8 10 12
pH
Figura 69. Dependencia del potencial de pico con respecto al pH. [4-NimMeOH] : 3×10-6 M,
NTCs(H2O): 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2. Velocidad de barrido: 100 mV s-1
25 6.42 μA / μM
20
i / μΑ
15
3.80 μA / μM
10
0 1 2 3 4 5 6
[4NimMeOH] / μM
240
A B
10 200
160
8
i / μA
120
6 i / μA 80
40 4mg / mL
NTC Largos Oxidados
4 NTC cnox NTC Cortos Oxidados
0
1 2 3 4 5 6 0 2 4 6 8 10
Tiempo de acumulación / min Tiempo acumulación / min
Una vez determinado el tiempo óptimo, se realizaron curvas de calibración con los
electrodos modificados con los diferentes NTC. En la figura 72 se muestran las curvas de
calibración obtenidas para un electrodo GC modificado con 4 mg/mL de NTC largos y
cortos oxidados, dispersos en agua y su comparación con el electrodo GC sin modificar.
140
120
100 GCE
i / μA 80 NTC Lox
NTC Cox
60
40
20
0 1 2 3 4 5 6 7
[4NimMeBr] / μM
Figura 72. Curvas de calibración de 4-NimMeBr obtenidas sobre GCE/NTCs(H2O) a tiempo de
acumulación de 7min. NTCs(H2O) : 4 mg/mL, tampón Britton Robinson 0.1 M, pH 2 .
Velocidad de barrido: 100 mVs-1
Electrodo S / μA/μM
GCE 0.01
GCE/ NTCcox 5.34
H2O/NTClox 9.76
Tabla 13. Valores de sensibilidad para electrodo de GC modificado con diferentes NTCs.
f / Hz
30
A 50
75
150
20 μA
B
20 μA
5
15
25
35
50
40
35
30
m = 14.2
25
i / μA
20
m = 23.5
15
10
5
0,4 0,8 1,2 1,6 2,0
[4NimMeOH] / μM
Nacionales
5. XXVI Jornadas Chilenas de Química, Universidad de Concepción. 10 – 13 de
Enero, Concepción, Chile (2006). Efecto de surfactantes sobre la estabilidad del
anión radical nitro generado por voltametría cíclica en medio acuoso. P. Jara-
Ulloa, L. Núñez-Vergara & J.A. Squella.
8. XXVII Jornadas Chilenas de Química, Chillán, Chile (2007). Estabilidad del anión
radical nitro en sistemas organizados: influencia del sustituyente. P. Jara-Ulloa, L.
Núñez-Vergara y J. A. Squella.