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INTRODUCCIÓN

La determinación de grasa en los ingredientes alimenticios se basa en su propiedad de ser

solubles en solventes orgánicos. Existen diferentes métodos para realizar el análisis cuantitativo
del contenido de grasa en alimentos. La elección del método apropiado se hará en función del
material de la muestra, la exactitud requerida y la rapidez con que se necesiten los resultados.
Entre los métodos clásicos están la extracción con disolventes o Soxhlet en los que la muestra es
sometida a una digestión con ácido clorhídrico antes de la extracción. Hoy en día, las
extracciones Soxhlet están en gran parte automatizadas permitiendo procesar varias muestras
simultáneamente. Estos sistemas ofrecen al usuario muchas ventajas, tales como uso fácil,
recuperación de disolventes, funciones de seguridad y requerimiento de poco espacio en la mesa
de trabajo.
En la presente práctica se determinará el contenido de grasa en la harina de maíz mediante uno
de los métodos más utilizados y conocidos, como es el método de Soxhlet.

OBJETIVOS

 Determinar el porcentaje de grasa en la harina de maíz.

 Determinar el principio de funcionamiento del método de Soxhlet.
 Comprender la importancia del método de extracción, Soxhlet.
 Determinar en qué otros alimentos, puede emplearse el método de extracción,
Soxhlet.

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MARCO TEÓRICO

Harina de maíz
Entre los alimentos de la categoría de los cereales que tenemos disponibles entre los alimentos
en nuestra tienda o supermercado habitual, se encuentra la harina de maíz.
Este alimento, pertenece al grupo de los granos y harinas.
La composición química de la harina depende del grado de extracción, así conforme aumenta el
grado de extracción, disminuye la proporción de almidón y aumenta el contenido en
componentes de las envolturas del cereal como minerales, vitaminas y fibra. La harina de maíz
de mayor consumo es blanca, por lo que el grano ha sido despojado de sus envolturas externas y
del germen. Apenas contiene vitamina B1, minerales y carece totalmente de fibra vegetal.

Tabla º 1 Composición nutricional de la harina de maíz

Harina de Maíz
Calorías (Kcal) 48
Agua (g) 12
Proteínas (g) 8.3
Grasas (g) 2.8
Hidratos de 75.7
carbono (g)
Fibra (g) 0
Magnesio (mg) 47
Sodio (mg) 52
Potasio (mg) 120
Vit. B1 (mg) 0.4
Vit. B2 (mg) 0.13

Método de Soxhlet

Es una extracción semicontinua con un disolvente orgánico. En

este método el disolvente se calienta, se volatiliza y condensa
goteando sobre la muestra la cual queda sumergida en el
disolvente. Posteriormente éste es sifoneado al matraz de
calentamiento para empezar de nuevo el proceso. El contenido de
grasa se cuantifica por diferencia de peso. (Nielsen, 2003)

Ventajas y desventajas del método Soxhlet

Las ventajas más importantes son el contacto continuo de la
muestra con una porción fresca de disolvente, simplicidad, bajo
coste de adquisición y la posibilidad de procesar grandes
cantidades de muestra. Dentro de sus limitaciones, encontramos el
tiempo necesario para la
Extracción y los volúmenes de disolvente, en general muy
elevados frente a otras técnicas, lo que implica la necesidad de
concentrar los extractos orgánicos obtenidos. (Canosa, 2005)

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Solventes

Colocación del solvente

La cantidad de solvente debe ser la necesaria para que al ascender al cartucho y antes de que se
haga la sifonada, no quede seco el balón inferior porque de esa manera, o se seca la muestra y se
quema, o cuando caiga el líquido de la sifonada sobre el vidrio recalentado se puede producir
una explosión de los vapores con el consiguiente riesgo de accidente. Si la cantidad no está
estipulada en la norma, se carga el solvente desde arriba, lentamente, para que vaya cubriendo el
cartucho y luego produzca el rechupe Esta es la cantidad mínima. Pero como durante la
operación hay pérdida del solvente por evaporación, y además debe quedar una cantidad mínima
en el balón para que no se concentre el extracto demasiado, hay que agregar por lo menos una
cantidad semejante en exceso.

Solventes a utilizar
La experiencia que se posee es que hay una temperatura máxima y mínima de ebullición en la
que el equipo funciona adecuadamente.
En la tabla Nº 2 se expone una lista, no exhaustiva, de los solventes comunes utilizados en las
extracciones con Soxhlet. Otra característica importante en cuanto al tipo de solventes es que
los de carácter no polar suelen tener alguna dificultad en sifonar puesto que no mojan el vidrio.
Ello es frecuente con los derivados clorados como el diclorometano y el cloroformo y los
hidrocarburos superiores al hexano (Núñez, 2008).

Tabla Nº 2. Punto de ebullición de solventes

Solventes (ºC) Punto de ebullición

Éter 35
Diclorometano 40
Cloroformo 62
Metanol 65
Etanol –benceno 65
Hexano 69
Etanol tolueno 73
Acetato de etilo 77
Etanol 78
Éter de petróleo 35-50
Benceno 80
Ciclohexano 81
Ácido fórmico 101
Dioxano 102
Tolueno 111

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Características del éter de petróleo 40-60°C

Esta fracción está compuesta principalmente por pentano y 2-metilpentano. Presenta el aspecto
de un líquido incoloro. Es miscible con triclorometano

Sinónimo:
Bencina de Petróleo, Ligroína, Nafta

CAS: [64742-49-0]

Propiedades físicas y químicas

Aspecto: Líquido
Color: incoloro
Granulometria: N/A
Olor: Característico.
pH:
N/A
Punto de fusión/punto de congelación: N/A
Punto inicial de ebullición e intervalo de ebullición: 40 - 60 °C
Punto de inflamación: - 21 °C
Inflamabilidad (sólido, gas):
N/A
Límites superior/inferior de inflamabilidad o de explosividad: 7 %(v) / 1 %(v)
Presión de vapor: 350 hPa (20 °C)
Densidad de vapor: N/A
Densidad relativa:
0,65 g/ml (15 °C)
Solubilidad: en ( )Insoluble en agua
Coeficiente de reparto n-octanol/agua:
N/A
Temperatura de auto-inflamación: 245 °C
Temperatura de descomposición: N/A
Viscosidad cinemática: N/A
Viscosidad dinámica: 0,25 mPa.s (25 °C)

Otros métodos de extracción

El contenido total de lípidos se determina comúnmente por métodos de extracción con

disolventes orgánicos (por ejemplo Soxhlet, Goldfish, Mojonnier), sin embargo también puede
cuantificarse por métodos de extracción que no incluyen disolventes (por ejemplo, Babcock,
Gerber) y por métodos instrumentales que se basan en propiedades físicas o químicas de los
lípidos (por ejemplo, infrarrojo, densidad y absorción es rayos X).

Método de Goldfish
Es una extracción continua con un disolvente orgánico. Éste se calienta, volatiliza para
posteriormente condensarse sobre la muestra. El disolvente gotea continuamente a través de la
muestra para extraer la grasa. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso entre la
muestra o la grasa removida (Nielsen, 2003)

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Método de Mojonnier
La grasa es extraída con una mezcla de éter etílico y éter de petróleo en un matraz de
Mojonnier, la grasa extraída se pone a peso constante y es expresada en porcentaje de grasa por
peso. La prueba de Mojonnier es un ejemplo de extracción discontinua con disolvente. Esta
extracción no requiere remover previamente la humedad de la muestra. (Nielsen, 1998).

Método de Bligh-Dyer
El método se basa en la homogenización de la muestra con cloroformo, metanol y agua en
proporciones tales que se forme una sola fase miscible con el agua de la muestra. Al añadir
alícuotas de cloroformo y agua se logra la separación de fases. El material lipídico se encuentra
en la fase no acuosa, mientras que el material no lipídico se encuentra en la fase acuosa. Los
lípidos se pueden extraer de dos gramos de muestra seca hasta veinte gramos de muestra
húmeda. El contenido de agua de la muestra se ajusta a dieciséis mililitros para conservar la
proporción de cloroformo, metanol y agua la cual es esencial si se pretende una separación de
fases y una extracción cuantitativa de lípidos. La ventaja de este procedimiento es que las etapas
de filtrado y lavado son eliminadas. Sin embargo no es un método muy cuantitativo y tiene un
elevado margen de error para muestras secas de cereales.

Método de Röse-Gottlieb.
De acuerdo a este método, la separación de la grasa es lograda por amoniaco y etanol con un
posterior efecto de deshidratación sobre los fosfolípidos. La grasa es disuelta en éter recién
destilado y se añade algo de petróleo de tal suerte que se separen algunos compuestos no
lipídicos que se puedan encontrar en la fase etérea. Esta mezcla es completamente inmiscible en
agua de manera que mediante una extracción adecuada es simple dejar la grasa en la fase etérea
y el residuo graso es pesado. Este método es particular para leche fresca que no contiene ácidos
grasos libres, los cuales en disolución alcalina forman sales de amonio y esto es insoluble en
éter. Esta es la razón por la cual esto no se aplica a quesos, los cuales si tienen ácidos grasos
libres. (Boekenoogen, 1964)

Método de Gerber.
Éste, así como los demás métodos volumétricos presentan un carácter un tanto cuanto empírico
ya que varios factores afectan la gravedad específica de la grasa separada, variaciones propias
de la grasa, ácidos grasos presentes, solubilidad de la grasa en los disolventes, etc. Con estos
métodos volumétricos la muestra se sitúa en un butirómetro y se descompone utilizando ácidos
o álcalis de manera que la grasa es liberada, esta se separa por métodos mecánicos (centrifuga) y
se colecta en el cuello calibrado. (Boekenoogen, 1964)

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MATERIALES Y METODOS

Reactivo Muestra Materiales Equipos

Eter de petroleo Harina de Maíz Cartucho de Balanza analítica

40-60°C celulosa

Merck KGaA
64271 Darmstadt,
Germany

Equipo Soxhlet
Beacker 50 ml

Plancha calefactora.

PROCEDIMIENTO

Se armó el equipo Soxhlet para la determinación de grasa en harina de maíz. Como el equipo de
extracción era nuevo, no hubo la necesidad de lavar ni enjuagar con éter de petróleo.
Se pesó 5 g de muestra con aproximación de 0.1mg en una balanza analítica colocando dicha
muestra en un cartucho de celulosa. Se agregó cuidadosamente cierto volumen del solvente:
éter de petróleo en el equipo hasta que el líquido caiga y llegue al balón hasta la mitad de éste.
Se colocó el cartucho en la parte superior del equipo y se procedió a seguir llenando hasta que el
solvente sobrepase el cartucho sin que rebalse nuevamente al balón. Luego de ello se procedió
a instalar el sistema de refrigeración; como el procedimiento se realizó dos veces con dos
muestras de pesos similares, se colocaron dos equipos Soxhlet en serie para la entrada de agua
de abajo hacia arriba. Se encendió el manto calefactor y se esperó hasta que el calor caliente el
solvente hasta ebullición. Se continuó con el proceso de extracción durante 3 horas
aproximadamente recirculando por lo menos unas 8 veces.
Luego de concluir este periodo, se procedió a recuperar el solvente evaporando poco a poco
hasta que solo quede la grasa en el balón. Se esperó a que el balón con la muestra de grasa
disuelta se enfríe. Finalmente se pesó el balón.

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CALCULOS Y RESULTADOS

Para obtener porcentaje de grasa en las muestras de harina de maíz analizadas, se determinó:

Peso del balón del evaporador rotatorio , w1, (g)

Peso del balón con grasa extraída w2, (g)
Peso de la muestra, S, (g)
w2 − w1
% Grasa cruda = x 100
S

153,6238 − 152,7967
% Grasa cruda = x 100
5,0228

% Grasa cruda = 16,4669

137,7760 − 136,8892
% Grasa cruda = x 100
5,0041

% Grasa cruda = 17.7215

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS

 De acuerdo a los resultados obtenidos del porcentaje de grasa cruda en la muestra de

harina de maíz se tiene conocimiento por una práctica realizada en la Universidad
Nacional del Santa, 2014 que el valor obtenido fue de 5,8604 y 5,265%
experimentalmente en el laboratorio de Análisis Instrumental de Productos
Agroindustriales diferenciándose su promedio de los nuestros en un 207,3%.
Además basándonos en la información de una tabla de Suarez Moreno, Diana extraída
del Instituto Colombiano del Bienestar Familiar 1978 que muestra un valor de 3,7%
para el contenido de grasa en harina de maíz el nuestro sigue resultando elevado, más
que triplicado, dichas diferencias entre nuestros resultados y las fuentes bibliográficas
mencionadas, pudieron deberse a que el procedimiento indicado para la determinación
del porcentaje de grasas por el método de Soxhlet según Núñez Carlos Eduardo, 2008
culmina con el desarmado del equipo y se extrae el cartucho que está saturado de
solvente y se debe colocar en un lugar aireado o en la campana para que la muestra se
seque por completo, es decir, posiblemente tomando el peso del cartucho al final de la
práctica se obtenía un resultado más cercano al teórico.
Sin embargo, cabe la posibilidad de que la razón para que los resultados obtenidos se
alejen tanto de los teóricos se deba a que simplemente la muestra que se determinó en el
laboratorio no fue exactamente la de harina de maíz sino de un derivado muy similar
físicamente como se muestra en la figura N°3, pudo haberse tratado de afrechillo de
maíz cuyo contenido porcentual de grasa difiere en aproximadamente un 10% con los
de la harina de maíz, como según los reporta Bressán, Pablo; 2008, este producto
presenta un contenido porcentual de materia grasa de 13%.

Figura N°3 Afrechillo de Maíz

 Uno de los pasos importantes para la buena utilización del método Soxhlet, es la adición
del solvente orgánico y cómo influye este en una buena extracción de lípidos de la
muestra. Pues bien en el laboratorio realizado se añadió cierta cantidad de solvente, no
una cantidad calculada sino más bien una cantidad que solo tenía que cumplir con el
llenado del sifón hasta que lo rebalse y otra hasta que solo tape la muestra y no rebalse
el sifón. Lo cual también es indicado en Núñez (2008), que Si la cantidad no está
estipulada en la norma, se carga el solvente desde arriba, lentamente, para que vaya
cubriendo el cartucho y luego produzca el rechupe, esta es la cantidad mínima. Pero
existen otras bibliografías que hacen relaciones acerca del peso de la muestra con el
volumen del solvente según cuantas sifonadas tenga, como por ejemplo 1/6 para un total
de 30 sifonadas.

 En cuanto al uso del solvente éter de petróleo este consiste en una mezcla de alcanos,
como pentano, hexano y heptano sin sufrir ningún cambio químico, esta mezcla ejerce
su acción al interaccionar con las de soluto y rodearlas el cual se conoce como
solvatación (Gutiérrez, 2011), la elección de este solvente fue porque en los laboratorios
se acostumbra a usarlos por ser baratos, ya que si usamos etil éter este nos saldría más
caro aunque disuelve mejor a las grasas, pero en contraste el éter de petróleo es menos

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higroscópico lo cual hace que suceda una eficiente extracción sin interferencias
causada por la humedad del ambiente.

 En cuanto al calentamiento que sufría el balón con el solvente, este fue hecho sin
problemas a explosiones ya que el balón usado presenta gran resistencia, por ello estuvo
directamente en contacto con la plancha de calentamiento. Con las calidades de vidrio
borosilicato actuales no hace falta colocar un disipador de calor (plancha de amianto)
entre el calentador y el balón salvo que se trabaje con mechero de gas (Núñez, 2008).

 Con lo que respecta a los resultados como bien se sabe el sistema se basa en la afinidad
que tiene el solvente para mezclarse con la muestra, en este caso como se trata de un
solvente orgánico, este arrastrara todo lo que sea afín con él. Los lípidos se definen
como un grupo heterogéneo de compuestos que son insolubles en agua pero solubles en
disolventes orgánicos tales como el éter de petróleo, cloroformo, benceno o acetona
(Nielsen, 1998). Por otro lado como el éter de petróleo tiene un punto de ebullición de
40 a 60°C. Al momento de subir la temperatura con la plancha calentadora las
moléculas del solvente disminuyen su densidad por lo que ascienden por la sección B.
Por otro lado el solvente, por la presencia de agua como refrigerante, condensa a causa
de un intercambio de calor pasando del estado gaseoso al estado líquido aumentando
gota a gota el nivel de solvente en sonde ocurre el contacto directo entre el solvente
orgánico y la muestra en el punto C extrayendo los aceites o ácidos grasos que se
encuentren presentes. Por ello y por el principio de presión de vapor hace que la
continuidad de caída de las gotas aumente hasta llegar al punto A tal como se muestra
en la figura N° 2, punto de quiebre en donde el líquido por capilaridad arrastra toda la
muestra regresando una y otra vez al balón. Una vez que el sistema está en régimen las
sifonadas se producen a intervalos regulares. Los tiempos comunes del sifonado están
entre 5 y 20 minutos, según la potencia del calentador, el solvente la temperatura
externa (Núñez 2008). En nuestro caso por cada sifonada se tardaba alrededor de 15
minutos; además de ello se pudo observar que a medida que aumentaba la potencia del
calentador aumentaba el vapor de solvente, por lo que en el punto B se apreciaba un
aumento de líquido que no precipitaba, ello se puede explicar por qué la presión de
vapor del solvente en el punto D era mayor en estado gaseoso que en estado líquido por
lo que la presión debido al peso de precipitación del líquido no llega a superar la presión
del solvente que asciende en forma de vapor, motivo por el cual a mayor vapor mayor
líquido que se acumula en el punto B. Es por ello que constantemente se fue aumentado
el flujo de refrigeración de agua para equilibrar el proceso.

Figura N° 2 Equipo de extracción Soxhlet

A
C

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CONCLUSIONES

 El porcentaje de grasa obtenida de las muestras de harina de maíz fueron de 16.5% y

17.7%. Los valores teóricos se encuentran aproximadamente entre 2% a 6%.
Arrojándonos así un error de casi 200%. Los valores del contenido de grasa van a ser
distintos de acuerdo a la variedad que alimento que tengamos, ya sea el lugar de origen,
la transformación que se les dé o las propiedades y características que posea.

 El principio del método de extracción Soxhlet, se basa en el principio de lo semejante

disuelve a lo semejante. Por lo tanto, en la determinación de grasa en los ingredientes
alimenticios, se usa un solvente orgánico el cual se calienta para que se volatilice, se
hace pasar el solvente a través de la muestra, arrastrando consigo las substancias
solubles. El proceso descrito se repite en forma continua, hasta que no queden residuos
de material extraíble en la muestra, posteriormente el solvente se destila y el material
soluble permanece en el recipiente colector.

 La importancia del método empleado radica en que es un método directo y el

rendimiento obtenido es óptimo con respecto al uso del solvente. Es una operación la es
importante en todos los procesos tecnológicos relacionados con la industria química y
agroquímica

 Es una extracción semicontinua con un disolvente orgánico, el sistema de extracción

Soxhlet ha sido ampliamente utilizado en la extracción de aceite de semillas, este
sistema se compone de un balón donde se encuentra un solvente orgánico, que es
calentado hasta ebullición, un tubo de extracción Soxhlet, donde es colocada la muestra,
la cual va contenida en un cartucho de celulosa y un condensador. Después de
evaporarse el solvente orgánico es condensado y cae al tubo Soxhlet, en el cual extrae el
aceite contenido en la biomasa hasta que el tubo se llena, cuando el tubo está lleno de
solvente, este es sifonado hasta el balón que contiene el resto de solvente y se repite el
proceso

RECOMENDACIONES

Previamente al desarrollo de armar el cartucho se recomienda un pre-secado de la muestra

ya que de esta manera se rompen las emulsiones aceite-agua provocando que la grasa se
disuelva fácilmente en el solvente orgánico.
Enjuagar el Beacker que se usará en la experimentación con el solvente éter de petróleo para
evitar que contamine la nueva muestra con grasas solidas que pudieron haber quedado
impregnadas de alguna anterior muestra.
Los solventes inflamables de punto de ebullición inferior a 100°C se deben destilar, calentar
o evaporar sobre un baño de agua o como fue el caso sobre una plancha de calentamiento.
Nunca directamente sobre las cocinillas.
La cantidad de solvente debe ser la necesaria para que al ascender al cartucho y antes de que
se haga la sifonada, no quede seco el balón inferior porque de esa manera, o se seca la
muestra y se quema, o cuando caiga el líquido de la sifonada sobre el vidrio recalentado se
puede producir una explosión de los vapores con el consiguiente riesgo de accidente.

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