Escuela de Química Laboratorio de BIO 110 Membrana celular y transporte celular Pertenece a: Daniel Caballero (4-782-2042) y Mario Beitia (1-744-1849) Introducción: Los objetivos principales del siguiente experimento es describir las componentes de las membranas, así como también identificar los factores que afectan la integridad de la membrana por otra parte explicar la importancia de la difusión y la osmosis para la célula por lo cual determinaremos cuando una solución es hipotónica, hipertónica e isotónica. La membrana celular está formada por una bicapa de fosfolípidos, proteínas, carbohidratos y colesterol, en donde los fosfolípidos tienen característica hidrofóbicas, que le confiere la selectividad; las proteínas permiten el paso de moléculas hidrofilicas a través de la membrana además y pueden ser integrales o periféricas. Los carbohidratos están unidos ya sea a los fosfolípidos (glucolípidos) o a las proteínas (glucoproteínas) y la función de estos es la adhesión y comunicación intercelular. El colesterol determina la fluidez de la membrana celular. Según (Mathews, C. K.; Van Holde- 2003), El transporte es muy importante para la célula porque le permite expulsar de su interior los desechos del metabolismo, también el movimiento de sustancias que sintetiza como hormonas. Además es la forma en que adquiere nutrientes mediante procesos de incorporación a la célula de nutrientes disueltos en el agua. Las vías de transporte a través de la membrana celular y los mecanismos básicos para las moléculas de pequeño tamaño son: transporte pasivo y transporte activo Transporte pasivo: El transporte pasivo permite el paso molecular a través de la membrana plasmática a favor del gradiente de concentración o de carga eléctrica. El transporte de sustancias se realiza mediante la bicapa lipídica o los canales iónicos, e incluso por medio de proteínas integrales. Hay cuatro mecanismos de transporte pasivo: *Ósmosis: transporte de moléculas de agua a través de la membrana plasmática. *Difusión simple: paso de sustancias a través de la membrana plasmática, como los gases respiratorios, el alcohol y otras moléculas no polares. *Difusión facilitada: transporte celular donde es necesaria la presencia de un carriel o transportador (proteína integral) para que las sustancias atraviesen la membrana. Sucede porque las moléculas son más grandes o insolubles en lípidos y necesitan ser transportadas con ayuda de proteínas de la membrana. *Ultrafiltración o Diálisis: En este proceso de transporte pasivo, el agua y algunos solutos pasan a través de una membrana por efecto de una presión hidrostática. El movimiento es siempre desde el área de mayor presión al de menos presión. Transporte activo: El transporte activo es un mecanismo celular por medio del cual algunas moléculas atraviesan la membrana plasmática contra un gradiente de concentración, es decir, desde una zona de baja concentración a otra de alta concentración con el consecuente gasto de energía. Los ejemplos típicos son la bomba de sodio-potasio, la bomba de calcio o simplemente el transporte de glucosa. Procedimiento: - Anote las observaciones. A. Tipos de soluciones: Efecto de solventes: Efecto de la concentración - Pele una remolacha y en células vivas. corte ocho cuadritos y Haga un corte fino de tome 8 tubos de ensayo epidermis de Rhoeo sp y y coloque lo siguiente: coloque en un portaobjeto - tubo 1: tome 2 cubos de con una gota de y remolacha y añada 3ml obsérvelo en el agua del grifo. microscopio. Anote los sus - Tubo 2: tome 2 cubos observaciones. de remolacha y añada B. Factores que afectan la 3ml de cloroformo. permeabilidad (fusión) de la - tubo 3: tome 2 cubos de membrana. remolacha y añada 3ml Efecto de la temperatura: de alcohol. - Pele una remolacha y - Tubo 4: tome 2 cubos corte seis cubos y tome de remolacha y añada 3 tubos de ensayo y 3ml de acetona. coloque lo siguiente: - Tubo 5: agregue 1ml de - Tubo 1: tome 2 cubos aceite + 1ml de alcohol. de remolacha y añádale - Tubo 6: agregue 1ml de 5ml de agua a aceite + 1ml de temperatura ambiente. acetona. - Tubo 2: tome 2 cubos - Tubo 7: agregue 1ml de de remolacha y clara de huevo + 1ml de colóquelo en baño alcohol. maría. - Tubo 8: agregue 1 ml de - Tubo 3: tome 2 cubos clara de huevo + 1ml de de remolacha y acetona. colóquelos sobre agua - Anote los resultados en con hielo. un cuadro. C. Transporte celular: difusión y Cuadro 2. Efecto de concentración en ósmosis. células vivas, hoja de Rhoeo sp. Difusión celular: Observaciones resultados - Coloque 2 tubos de ensayo y añada lo Se coloca un Se logra siguiente: corte de la observar la - Tubo1: agregue agua epidermis de epidermis de la fría y una gota de rojo esta planta, se planta, ya que al neutro. agrega en un absorber el agua - Tubo2: agregue agua portaobjeto con que se le agrego caliente y añada una una gota de su membrana es gota de rojo neutro. agua, se colocan de mayor - Observe las en el tamaño. coloraciones y anote los microscopio. resultados. Difusión a través de una Luego procede Se observa en la membrana selectivamente agregar una gota parte exterior permeable. de solución cristales enormes saturada de NaCI de sal, así como Resultados: por un lado del adentro de la cubreobjetos. célula pero en Cuadro 1. Comportamiento de menor coloides. proporción. Observaciones resultados Tubo de ensayo Esta se Cuadro 3 Efecto de la temperatura al con agua coloque disuelve afectar la permeabilidad de la pequeña cantidad lentamente membrana. de gelatina granulada. Procedimiento Observaciones (intensidad de la Tubo de ensayo Se disuelven coloración(1-5) con agua coloque más pequeña cantidad rápidamente Tubo 1: 5 mL de 2 de gelatina debido al agua + 2 cubos granulada en baño aumento de de remolacha. Se maría. temperatura. deja a temperatura ambiente. Tubo 2: 5 mL de 5 agua + 2 cubos de remolacha. Colóquelo en baño maría. Cuadro 5: solventes que interactúan afectando la permeabilidad de la Tubo 3: 5 mL de 3 membrana. Continuación de cuadro agua + 2 cubos 4. de remolacha. Colóquelo en Actividad resultado baño de hielo. Tubo 5: 1 mL de Este se aceite + 1 mL de desnaturalizaba, alcohol son parcialmente Cuadro 4: efecto de los solventes al solubles. afectar la permeabilidad de la membrana. Tubo 6: 1mL de Este se aceite + 1 mL de desnaturalizaba, Tubo Condición Intensidad acetona estos son de parcialmente coloración solubles. (1-5) Tubo 7: 1 mL de Se produce una 1 Remolacha + 4 clara de huevo + coloración agua del grifo 1mL de alcohol blancuzca en la 2 Remolacha + 1 clara. cloroformo Tubo 8: 1 mL de Se precipito, 3 Remolacha + 2,5 clara de huevo + produciendo un alcohol acetona. líquido blancuzco. 4 Remolacha + 4 acetona 5 Aceite + 1 Cuadro 6: difusión en agua, alcohol transporte celular.
6 Aceite + 1 Procedimiento resultados
acetona Tubo 1: 5 mL de Se esparció el 7 Clara de 4 agua a colorante más huevo más temperatura rápido que el del alcohol ambiente. Déjelo tubo 2. Su reposar de 10 a coloración es 8 Clara de 4 15 minutos sin más clara que al huevo + agitar, luego inicio. acetona añada una gota de rojo neutro. Tubo 2: 5mL de El colorante se agua fría. Déjelo ha esparcido reposar de 10 a más lentamente Deposítelo en un encontraba 15 minutos sin que el otro, su vaso químico que inicialmente. agitar, luego coloración sobrepase la añada una gota permanece más abertura, déjelo de rojo neutro. oscura que la del reposar por hora tubo 1. y media. Cuadro 7: difusión a través de una Cuadro 9: osmosis en células membrana selectivamente vegetales. permeable. Procedimiento resultados Procedimiento Resultados Saque el tejido Se formó una En dos tubos de Esta aumento su central de la especie de celofán coloque grosor zanahoria con solución liquida, una solución de cuidado, llene le producto del sacarosa al 25% hueco con azúcar granulada hasta tres sacarosa y el agua cuartos de esto. granulada, producto de las Cierre muy bien póngalo en un células. con un hilo y vaso químico, colóquelo en un déjelo reposar vaso químico con por hora y media agua. ahora. Siguiendo el Mientras que Corte una papa Estos flotan y procedimiento esta disminuyo l en cubos tienen una anterior el otro proporción del uniformes. consistencia más tubo de celofán grosor inicial. Introduzca la suave respecto a cloquero en una mitad de estos las que están en solución en un vaso la otra solución. sobresaturada de químico con sacarosa. agua de la pluma. Repitiendo lo Los cubos en Cuadro 8: osmosis en células vivas. anterior solo que esta solución Células animales. estos se agregan flotaban, además Procedimiento Resultado con agua que su saturada en NaCI composición es Con cuidado Sucedió que el menos suave quite la cascar de grosor de esta respecto a la que uno de los polos membrana se encontraba en del huevo, para aumento un agua dulce. no romper la poquito más a membrana. como se Discusión: E (energía) con que colisionan las partículas y por ende también la Conocemos que algunas de las capacidad de difusión de estas. funciones de la membrana plasmática Continuando vemos las variaciones son: de limitar la célula, posee de colores del 1 al 5 cuando a los permeabilidad selectiva. Además está trozos de remolacha se le agregan compuesta por una doble capa distintos solventes polares y no lipídica, conformada por colesterol, polares, respectivamente esto etc… en el cuadro 1. Cuando se provocara que al ser polar reaccione agregó los cristales de CuSO4 en el mejor con el pigmento de color tubo de ensayo, se observó en el presente en los trozos de remolacha. fondo del tubo la concentración de la Los valores asignados a los distintos sustancia, ya que si se agitaba el colores aparecen en el cuadro 4. El tubo esto provocara que se diluya cuadro 5 es la continuación del homogéneamente. Seguidamente, cuadro 4 donde se presentan trabajamos con coloides, considero resultados cuando se combina un que por efecto más importante, seria soluto, con un solvente la mayoría de resaltar la acción del efecto Tyndall aquellos que empleamos se que brevemente su definición: es el desnaturalizaron debido a que estos fenómeno físico encargado de que se precipitaron, esto guarda una las partículas coloidales en una relación directa con la solubilidad de disolución o un gas sean visibles al los reactivos. dispersar la luz. Continuando el cuadro 6 representa En el cuadro 2 y 3 observamos el la difusión en H2O que a distintas efecto de concentración de células temperaturas, el colorante presentara vivas, primero en las hojas de Roheo distintos cambios. Cuando la sp. Que contiene un pigmento rojo temperatura del H2O fue alta, el tinte natural llamada antocianina, que está presentó una mayor cinética presente en las vacuolas de células molecular. Mientras que la vegetales. Se le procede temperatura en grados centígrados primeramente agregar agua dulce del ambiente en que nos que provoca que esta se hinche encontrábamos fue mayor que debido a su absorción, mientras que cuando se encontraba a temperaturas al agregarle una gota de agua bajas. saturada con cloruro de sodio ocurrirá que esta se vea directamente El cuadro 7 nos muestra el incluyendo los cristales, pero además movimiento a través de una será más pequeña, debido a la membrana permeable absorción de la sal del agua presente. selectivamente, es importante definir En el cuadro 3 aparece cuando se que el celofán ocurre una difusión, el expone variaciones de T medio hipotónico (mayor (temperatura), sabemos que al concentración de partículas) mientras aumentar la temperatura, aumenta la para que haya un equilibrio el otro será hipertónica (el otro estará en Conclusión menor concentración). En resumen Comprobamos que existe dos esta sería la característica básica tipos de transporte de porque uno gana volumen, mientras membrana de forma pasiva y que en el otro este disminuye. activa. En el cuadro 8, usamos de referencia Que a nivel biológico todo la cascara del huevo como ejemplo tiende a buscar una isotónica de una mega célula, que al extraer en celular. unos de sus polos la cascara y Comprendimos que a nivel exponerlo en un vaso químico por un biológico se dan estos periodo determinado de tiempo, procesos naturales, que sin absorbió cierta cantidad de agua. ellos no podría darse y por En el cuadro 9, profundizamos en el ende continuar la vida en proceso de osmosis en células nuestro planeta. (Rincon, vegetales. Cuando se realizó el 2015) proceso de extraer la parte interna de la zanahoria y agregarle azúcar, al Bibliografía cabo de cierto tiempo encontramos educarchile. (2000). la celula: transporte a una solución acuosa de agua y través de la membrana. chile. azúcar. Debido a que el medio (la zanahoria) es hipotónico (presenta Mathews, C. K., & Van Holde, K. e. (2003). menor cantidad de soluto, pero mayor google web. Recuperado el 28 de cantidad de H2O) mientras que la septiembre de 2015, de wikipedia : azúcar medio externo (es hipertónica https://es.wikipedia.org/wiki/Transp debido a la mayor cantidad de soluto, orte_celular pero menor concentración de agua. Phill, W. (febrero de 2012). google web. Debido a que todo sistema siempre Recuperado el 28 de septiembre de busca el equilibrio (isotónica) del 2015, de ehowerespañol: medio interno se libera agua a través http://www.ehowenespanol.com/im de la membrana plasmática. Mientras portante-difusion-vida-celula- que al realizar la parte experimental info_285898/ con la papa en agua dulce y salada ocurre lo anterior. Es importante Rincon, I. M. (2015). laboratorio membrana y mencionar que aquella que se transporte celular. David, Chiriqui: adiciona sal y agua ocurre plasmólisis UNACHI. mientras que la que se encontraba en un medio con agua dulce ocurre un fenómeno que llamamos turgencia. Anexo: Cuestionario: 1. Mencione los principios de ósmosis. R= los principios de la 3. ¿Qué importancia tiene para la ósmosis: vida el proceso de difusión y Relación entre moles y ósmosis? osmoles: Ya que la R= Es importante porque concentración de agua en produce la entrada o salida de una solución depende del sustancias a través de una número de partículas de membrana semipermeable, soluto en la solución, es debido a la presencia de poros necesario un término diminutos. Esto lo realiza la referido a la concentración célula a través de la ósmosis, para describir la en donde no gasta energía, ya composición total de que es un transporte pasivo. partículas de soluto, sin La membrana plasmática que importar su composición rodea a una célula actúa como exacta. una barrera para la mayoría de Osmolalidad y osmolaridad: las moléculas, especialmente La concentración osmolal para aquellas que son de una solución se peligrosas para la vida de la denomina Osmolalidad célula. La membrana permite cuando la concentración se el paso de materiales expresa en osmoles por Kg beneficiosos por el proceso de de agua; se llama difusión. La evolución de la osmolaridad cuando se difusión celular permite a las expresa en osmoles por células acordonarse de forma litro de solución. diferente y interactuar con su 2. ¿En qué consiste el modelo de entorno inmediato. mosaico fluido? 4. Defina solución verdadera y R= consiste en un modelo de coloide. la estructura de la membrana R= Una disolución está plasmática se disponen compuesta por el soluto y el formando una bicapa de disolvente. El soluto es el fosfolípidos, situados con sus componente que cambia el cabezas hidrofílicas hacia el estado físico al formarse la medio externo o hacia el disolución y el disolvente el citosol, y sus colas que lo mantiene. hidrofobicas dispuestas en Coloide: es un tipo especial de empalizada. Las proteínas se dispersión cuyas partículas no intercalan en esa bicapa de se asientan al reposar, lípidos dependiendo de las permanecen en suspensión. interacciones con las regiones También se lo llama de la zona lipídica. suspensión coloidal o dispersión coloidal.