ESPECTROFOTÓMETRIA EN SOLUCIONES ACUOSAS

EXPERIMENTO N° 2

Materiales:

1. Embudo
2. Matraces de 250 ml
3. 02 vaso de precipitado de 200ml
4. Bagueta
5. Balanza
6. Cloruro de sodio
7. 04 Fiolas de 100 ml
8. Espectrofotómetro uv/visible
9. Agua destilada
 ESPECTROFOTÓMETRIA

• La espectrofotometría es la medición de la cantidad de energía

radiante que absorbe o transmite un sistema químico en función
de la longitud de onda es el método de análisis óptico más usado
en las investigaciones químicas bioquímicas. El
espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la
radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene
una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia.

• La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que

permite determinar la concentración de un compuesto en
solución. Se basa en que las moléculas absorben las
radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz
absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para
hacer este tipo de medidas se emplea un espectrómetro, en el
que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa
por una solución y medir la cantidad de la luz absorbida por la
 misma.

Principio de la Espectrofotometría

• Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el

vidrio que parece ser completamente transparente absorbe
radiación de longitudes de ondas que no pertenecen al espectro
visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.
• En la espectrofotometría se aprovecha la absorción de radiación
electromagnética en la zona del ultravioleta y visible del
espectro. La muestra absorbe parte de la radiación incidente en
este espectro y promueve la transición del analito hacia un
estado excitado, transmitiendo un haz de menor energía
radiante. En esta técnica se mide la cantidad de luz absorbida
como función de la longitud de onda utilizada. La absorción de
las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las moléculas, y es característica de cada
sustancia química.
• La espectrofotometría ultravioleta-visible utiliza haces de
radiación del espectro electromagnético, en el rango UV de 180
a 380 nm, y en el de la luz visible de 380 a 780 nm, por lo que
es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la región
ultravioleta y visible del espectro.

• LEY DE BEER

La Ley de Beer afirma que la cantidad de luz absorbida por un

cuerpo depende de la concentración en la solución.

Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azúcar

disuelta y en otro vaso tenemos la misma cantidad de agua pero
con mayor cantidad de azúcar en solución. El detector es una
celda fotoeléctrica, y lo que se mide es la concentración de la
solución de azúcar.

Según la ley de Beer, si hiciéramos que un rayo de luz

atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldría del otro
lado sería mayor que si repitiéramos esto en el segundo, ya que
en este último las ondas electromagnéticas chocan contra un
mayor número de átomos o/y moléculas y son absorbidos por

estos.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1) Se pesa 1gr de NaCl.

2) Se adiciona todo el NaCl a un vaso de 200 ml y se

adiciona aproximadamente 60 ml de agua, se agita
enérgicamente hasta diluir completamente el NaCl.
Se adiciona el NaCl Se adiciona 60 ml de
en un vaso de agua.
200ml.
Se agita, hasta diluir
completamente el NaCl.

3) Se trasvasa la solución a
una fiola de 100 ml,

donde se adiciona agua hasta aforar los 100ml.

Se transvasa la
solución, y luego se
adiciona agua.
4) Se transvasa los 100 ml a otro vaso de precipitado
donde se mide la absorbencia utilizando el equipo
espectrofotómetro uv/visible.

5) Repetir todos los pasos anteriores para pesos de

0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4, 0.50, 0.55, 0.65 gr.
Peso
1g 0,0011A

Peso
0,009 A
0.2 g

Peso
0.25 g
0,010 A

0,011
 Peso
0.3 g

Peso
0.35 g -0,006

Peso
-0,0098 0.4 g

Peso
0.50 g -0,005
 Peso
-0,004 0.55 g

-0,003

Peso
0.65 g

TRABAJO
1. Calcular la concentración para c/u de las
pruebas realizadas.

2. Construir una curva en papel milimetrado

ploteando la concentración vs absorbencia de
las soluciones salinas preparadas.
 CONCENTRACIÓN VS ABSORBENCIA
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

-0.002

-0.004

-0.006

-0.008

-0.01

-0.012

X Y
TABLA
DE 1*10−2
2*10−3
25*10−4
3*10−3
35*10−4
4*10−3
5*10−3
55*10−4
65*10−4
DATOS, CONCENTRACIÓN VS ABSORBANCIA
3. Identificar las soluciones desconocidas (06)
dadas por el profesor a partir de datos de la
curva de absorbencia vs concentración.

Soluciones desconocidas
 Pesos
desconoci
dos
de NaCl

Colocar en el
vaso
precipitado,
una nuestra
dada de NaCl.
 Luego agregamos
encima de la
muestra 60 ml de
agua destilada, en
el vaso precipitado

Se agita la solución
hasta diluir
completamente el
NaCl.

Se coloca la
muestra en una
fiola de 100ml y
luego agregamos
agua destilada
hasta la línea
indicada.
 ABSORBENCIA VS CONCENTRACIÓN
(ÁCIDO OXALICO )
0
0 1 2 3 4 5 6 7
-0.002

-0.004

-0.006

-0.008

-0.01

-0.012

-0.014

SOLUCIONES DESCONOCIDAS

Gramos A

0,2 -0,004

0,5 -0,009

0,35 -0,007

0,55 -0,013

0,3 -0,011

0,25 -0,010