investigaciones fitoquímicos y la actividad antimicrobiana de nubigenum

Clinopodium Kunth (Kuntze) extractos crudos

Gianluca Gilardoni, 1 Omar Malagón, 4 Vladimir Morocho, 4

Riccardo Negri, 1 Solveig Tosi, 2,3 María Guglielminetti, 3 Giovanni Vidari, *, 1,2 Paola
Sep./Oct. 2011
Vita Finzi 1,2
Artículo
1 Università degli Studi di Pavia, Dipartimento di Chimica, Italia,
Brasileira de Farmacognosia 21 (5): 850-855, 2 Università degli Studi di Pavia, Centro Interdipartimentale di Studi e Ricerche sull'Etnobiofarmacia,
Italia,
3 Università degli Studi di Pavia, Laboratorio di Micologia, Dipartimento di Scienze della Terra e

dell'Ambiente, Italia,
Revista Brasileira de Farmacognosia Revista 4 Universidad Técnica Particular de Loja, Instituto de Química Aplicada, Loja, Ecuador.

palabras clave:
actividad antimicrobiana Abstracto: El aceite esencial de la especie nubigenum Clinopodium ( Kunth) Kuntze, Lamiaceae, se
mayo de 2011 Disponible No en línea del 12 Ago 2011
nubigenum Clinopodium analizó mediante GC-MS y GC-FID, teniendo en cuenta la literatura más reciente. Entre los compuestos
aceite esencial identificados setenta, la mayoría son monoterpenoides oxigenados. El aceite esencial, probado para la
GC-MS actividad antimicrobiana, resultó eficaz in vitro contra Candida albicans. Desde el extracto acuoso MeOH
schizonepetoside tipo de las partes aéreas de la planta de dos compuestos no volátiles, schizonepetoside llamado A y
Recibido el 27 de Dic de 2010 Aceptado el 25 de de
de cerro schizonepedoside C, han sido aislados. Son terpenoides glicosilo raras, que previamente fueron aisladas
de una sola planta, pero nunca encontrados antes en el género Clinopodium.

ISSN 0102-695X
http://dx.doi.org/10.1590/S0102- 695X2011005000139

Introducción Materiales y métodos

nubigenum Clinopodium ( Kunth) Kuntze, una planta Material vegetal

aromática perteneciente a la familia Lamiaceae, se conoce también
con el sinónimo nubigenus timo
Kunth, nubigena Micromeria ( Kunth) Benth, y
nubigena satureja ( Kunth) Briq (Índice Kewensis,
2010). Es ampliamente creciendo en América Latina entre 3000 y 4000 m
snm La planta es conocida popularmente por los indígenas como “tipo de
cerro” y, en Ecuador, se utiliza como un remedio tradicional por diferentes
comunidades. Las personas Saraguro utilizan una infusión acuosa de la
planta para tratar los resfriados (Andrade et al., 2009); en la región de
Azuay, la planta se utiliza como un remedio para la gripe (Rios et al., 2007);
pueblos quechuas en la Alta Sierra aplican una decocción de C. nubigenum para
curar el dolor de estómago; Cañar comunidades utilizan una infusión de la
planta para evitar la incontinencia urinaria en los niños; en Tungurahua,
Chimborazo provincias, Cañar, Azuay y de Ecuador la planta encuentra
aplicaciones también como digestivo, estomacal, un remedio tónico, y en
contra de la disentería y síndromes menstruales (de la Torre et al., 2008).
propiedades aromáticas de C. nubigenum se deben a la presencia de un
aceite esencial, puede obtenerse fácilmente por destilación al vapor, que ha
sido analizado en este estudio. Además, se analizó la fracción no volátil de
un H 2 extracto de O-MeOH.
Las partes aéreas de la planta se recogieron en enero de
2009, durante el período de floración no, en Aguarongo (3242 m
msnm 17700288E- 9585973N), en la Parroquia de San Lucas, en el
interior del territorio Saraguro, provincia de Loja, Ecuador. Se ha
identificado por uno de los autores (VM). Una muestra de vales se
conserva en la UTPL (Universitad Tecnica Particular de Loja), Loja,
Ecuador, con el número de identificación PPN-la-018.
Instrumentos y materiales
GC-MS se realizaron análisis en un cromatógrafo de gases
Agilent Technologies 6890N, junto con un Agilent Technologies
5973N (fuente de impacto electrónico) Sistema de ATB-1550; GC-FID
análisis se realizaron en un cromatógrafo de gases Perkin Elmer Auto
System; Los espectros de RMN se determinaron en MeOH-d4
obtenido de Sigma-Aldrich; disolventes de ACS para los procesos de
extracción y disolventes de calidad HPLC para purificaciones
cromatográficas se adquirieron de Carlo Erba Reagenti (Milán, Italia);
C-18 de fase inversa

850

RP-18 LiChroprep (25-40 micras) y gel de sílice Kieselgel 60 (malla
230-400) se adquirieron de Merck.
destilación de aceite esencial y el análisis
Dos muestras (200 g cada una) de las partes aéreas se secó con aire y
frescas de la planta se hydrodistilled por separado, la producción de dos aceites
esenciales, A y B, respectivamente, separando espontáneamente de las capas
acuosas recogidas, con un rendimiento de aproximadamente el 1% w / w. El lote
planta fresca se destiló en Loja (Ecuador) inmediatamente después de la recogida;
el lote seco se separó por destilación en Pavia (Italia) después de cuatro semanas.
Los aceites esenciales recogidos, después de secar sobre
sulfato de sodio anhidro, eran líquidos claros y amarillo y móviles, que se
caracterizan por un olor agradable, fresco y de menta. Dos muestras (1 mu
l) de una solución v / v 5% de cada aceite en diclorometano se inyectaron
por separado en GC-MS y se analizaron en las mismas condiciones, la
segunda muestra después de la adición a una mezcla de norte- alcanos
homólogos de heptano a nonadecano. La mezcla de hidrocarburos último
sirve para calcular el valor lineal Índice de retención (LRI) de cada
constituyente de aceite, de acuerdo con Van Den Dool y Kratz (1963).
El instrumento GC-MS estaba equipado con una columna
capilar HP-5 (longitud: 30 m, diámetro interno:
0,25 mm, espesor de la fase estacionaria: 0,25 m); helio (1 ml / min) fue el
gas portador; el inyector fue operado en el modo de división, con una
relación de división de 19 y a la temperatura de 250 ° C; el análisis GC se
realizó con el siguiente programa de temperatura del horno: temperatura
inicial se mantuvo a 60 ° C durante 1 min, después se aumentó a 260 ° C
con una tasa de gradiente de 5 ° C / min, y se mantuvo a 260 ° C durante
un adicional de 10 min. La MS espectros fueron adquiridos en el modo de
escaneado, con una m / z
gama de 41 a 350 amu; retraso del disolvente: 2 min.
El instrumento GC-FID estaba equipado con una columna
capilar HP-5 (longitud: 25 m, diámetro interno:
0,25 mm, espesor de la fase estacionaria: 0,25 m), utilizando nitrógeno como
gas portador a 1 ml / min; el inyector fue operado en el modo de división, con
una relación de división de 25 y a la temperatura de 250 ° C, temperatura del
detector se fijó en 280 ° C; el análisis GC se realizó con el siguiente programa
de temperatura del horno: temperatura inicial se mantuvo a 60 ° C durante 1
min, después se aumentó a 200 ° C con una tasa de gradiente de 5 ° C / min,
luego a 280 ° C con una tasa de gradiente de 15 ° C / min. y se mantuvo a
280 ° C durante 5 min adicionales.
Disolvente de extracción y purificación glucósidos
partes aéreas secos (300 g) se sometieron a la extracción
del disolvente por maceración durante 1 h a temperatura ambiente; la
operación se repitió con tres disolventes de polaridad creciente: norte- hexano,
nefelométrica; 1 ml de la suspensión
MeOH, 90%
investigaciones fitoquímicos y la actividad antimicrobiana de Clinopodium
nubigenum Kunth (Kuntze) extractos crudos
Gianluca Gilardoni et al.
MeOH acuoso. Después de la extracción, cada mezcla se filtró y los
filtrados se evaporaron por separado bajo vacío a 40 ° C para
proporcionar tres residuos, pesando 3,6 g ( norte- hexano), 16,0 g
(MeOH), y 1,4 g (90% de MeOH), respectivamente. El último extracto
se sometió a cromatografía preparativa de líquido en una columna
C-18, se eluyó con un gradiente creciente de MeOH en H 2 O. Dos
fracciones de esta separación se purificaron adicionalmente por
cromatografía líquida preparativa sobre gel de sílice. La elución con
un gradiente creciente de MeOH en diclorometano dio dos
monoterpenoides glicosiladas puros. Los compuestos se identificaron
por
1 H-RMN y 13 espectroscopia C-RMN, incluyendo DEPT y
experimentos COSY, como schizonepetoside A ( 1) y
schizonepetoside C ( 2). Los datos fueron idénticos con los
reportados en la literatura (Kubo et al, 1986;. Lee et al., 2008).
Los ensayos biológicos
La actividad antimicrobiana de los aceites esenciales A y
B se evaluó frente a diferentes especies de bacterias ( Bacillus
subtilis ATCC 6633, Escherichia coli
ATCC 10536, Staphylococcus aureus ATCC 6538) y hongos,
aisladas de pacientes ( Candida albicans ( CP Robin) Berkhout, Trichophyton
mentagrophytes ( CP Robin) Sabour.), Y de medio ambiente ( Aspergillus
niger Tiegh. ATCC 16404 reclasificado recientemente como
brasiliensis Aspergillus Varga, Frisvad y Samson). Los ensayos se realizaron
por triplicado basadas principalmente en los procedimientos de CLSI
(NCCLS, 2006; 2008), con algunas modificaciones reportadas en este
párrafo. A lo largo del experimento, Luria Bertani y Sabouraud se utilizaron
como medios de cultivo para bacterias y hongos, respectivamente;
temperaturas de incubación fue de 37 ° C durante C. albicans,
E. coli y S. aureus, Los otros microorganismos se cultivaron a 28 ° C. Esta
temperatura fue elegido para T. mentagrophytes en consecuencia para
Fernández-Torres et al. (2002). Los controles se prepararon con medio de
cultivo o medio de cultivo con el disolvente.
La actividad petrolera estaba en primera detectada cualitativamente
en placas de Petri (140 mm) por medio del método de difusión en agar Las
suspensiones madre se prepararon a partir de cultivos que crecen en medios
sólidos de 5 cm de placas Petri. Los cultivos de C. albicans, S. aureus, E. coli, y B.
subtilis fueron de 48 h de edad, mientras que los cultivos de A. niger y
T. mentagrophytes eran 7 días de edad. Para hongos filamentosos, es
decir, T. mentagrophytes y A. niger, suspensiones previas Se
prepararon transfiriendo parte de la colonia en un tubo que contiene
NaCl 0,85% de agua con toboganes cubierta rota y después se agitó
durante 1 min por vórtice. Se prepararon suspensiones de inóculo
transfiriendo microorganismos en 2 ml de agua estéril con 0,85% de
NaCl (api bioMérieux) ajustado a 0,5 McFarland por medición
Rev. Bras. Farmacogn. Braz. J. Pharmacogn. 21 (5): Sep./Oct. 2011 851
investigaciones fitoquímicos y la actividad antimicrobiana de nubigenum Clinopodium Kunth
(Kuntze) extractos crudos
Gianluca Gilardoni et al.

para cada microorganismo se distribuyó uniformemente sobre la
superficie de agar de 9 cm placas de Petri. Los resultados se registraron
después de 24 y 48 h para todos los microorganismos, con la excepción
de T. mentagrophytes que se examinó después de cinco días. La
actividad del aceite contra hongos y bacterias se evaluó midiendo el
diámetro de la zona de inhibición usando discos de papel de filtro
(diámetro de 0,5 cm) impregnadas con 9 l de aceite esencial y 1 l de
DMSO (Sigma-Aldrich). La penicilina G sal de Na y anfotericina B (ambos
de Sigma-Aldrich) fueron los compuestos de referencia para las bacterias
y hongos, respectivamente. Se determinó la concentración inhibitoria
mínima (MIC) solamente para los microorganismos que mostraron una
inhibición de halo> 1 cm. El aceite esencial se añadió al medio de cultivo
líquido en placas de 24 micropocillos a una concentración final de 1,5 a
20! l / ml. Tween 80
casi ausente en el aceite B, con isopulegona que ocurre en una
cantidad relativamente alta (Figura 2). La comparación GC-MS de los
dos aceites esenciales A y B se muestra en la Figura 3. Se sabe que
la biosíntesis de producto mentofurano de isopulegona a través de
citocromo P-450 oxidación dependiente de 9-hydroxypulegone
(Dewick, 2009;. Mc Clanahan et al, 1988); aislamiento de los dos
compuestos glicosilados 1 y 2 de C. nubigenum
( vide infra) es una prueba más de la vía. Por lo tanto, algunas división de
glucosa a partir de 1 y 2 probablemente ocurrió durante el proceso de secado
de la planta, el almacenamiento y el transporte de Ecuador a Italia,
explicando las diferencias entre los dos aceites.

se incluyó 0,002% (v / v) para mejorar la solubilidad en aceite. Para

determinar la concentración más baja requerida para matar el organismo
de ensayo (concentración mínima fungicida o bactericida, MFC o MBC,
respectivamente), el método descrito por Gadd (1986) fue seguido. El
inóculo inicial se subcultivada a partir de 24-48 h de edad, placas de
micropocillos contenida el aceite en un fresco 48 culturales libre del tóxico
medio y se examinaron después de 24, y 72

h, respectivamente.

Figura 1. el análisis por GC-FID del aceite esencial A de aire-partes aéreas

Resultados y discusión
secas de C. nubigenum.

El aceite A esencial, obtenido a partir de las partes aéreas de

secado al aire de C. nubigenum, estaba compuesta principalmente de
monoterpenos y sesquiterpenos. Setenta componentes de esta mezcla
compleja se identificaron por comparación de su EI-MS espectros y los índices
de retención lineal calculados (LRI) con informado recientemente de datos
(Adams,
2007); la identidad de los compuestos no mencionados en el texto de
referencia se estableció por medio de bibliotecas EI-MS electrónicos
Wiley y NIST. El análisis cualitativo completo se presenta en la Tabla
1, incluyendo el compuesto porcentaje cuantificación por GC-FID y la
integración pico de GC-MS. La composición determinada para este
aceite esencial corresponde a 97,6% y el 88,7% de todo el
cromatograma GC-FID y GC-MS, respectivamente; mayor Figura 2. el análisis por GC-FID del aceite esencial B de las partes aéreas frescas de C.
nubigenum.
compuestos son pulegona,
mentofurano, isopulegona, α-copaeno, zonarene, Hace algunos años, El Seedi y colaboradores informaron el
1-octen-3-il acetato, limoneno, linalool, pag- cimeno, piperitenona, análisis de aceite esencial de nubigena Micromeria HBK (El-Seedi et
β-pineno, y 1,6-octadien-3,7-dimetil-3-ol. al., 2008). Curiosamente, ninguna planta aparece con tanta autoridad
en el Índice Kewensis, contrariamente al nombre nubigena Micromeria
La composición del aceite esencial B, obtenido por
hidrodestilación de partes aéreas frescas, resultó ser prácticamente (Kunth) Benth, que se considera un sinónimo de
idéntica a la otra, a excepción de las cantidades relativas de C. nubigenum Kunth (Kuntze) (Índice de Kewensis, 2010). por lo tanto existe la
mentofurano y isopulegona. De hecho, se detectaron 1,56% de duda de que las dos plantas son especies diferentes. De hecho, la comparación
isopulegona y 11,57% de una mezcla inseparable de mentofurano y de nuestros resultados con los datos reportados por El Seedi muestra claramente
mentona en el GC-FID del aceite A (Figura 1), con mentofurano gran las diferencias dramáticas en la composición de los aceites esenciales. Por
medida prevalecientes (GC-MS), mientras que mentofurano era ejemplo, aproximadamente 54% de timol y carvacrol se identificaron en el

852 Rev. Bras. Farmacogn. Braz. J. Pharmacogn. 21 (5): Sep./Oct. 2011

 investigaciones fitoquímicos y la actividad antimicrobiana de Clinopodium
nubigenum Kunth (Kuntze) extractos crudos
Gianluca Gilardoni et al.

Tabla 1. El análisis químico del aceite esencial de C. nubigenum. LRI: Lineal Índice de Retención (Van den Dool y Kratz, 1963). COMPUESTOS

% A% B LRI COMPUESTOS % A% B LRI

1-Butanol-2-acetato de metilo * 0,01 <0,01 876 acetato de isobornilo 0,1 <0,01 1288

-pineno 0.85 0,45 934 trans- acetato Sabinyl 0.23 0.10 1294

canfeno 0.12 0.03 949 de etilo nonanilo 0.18 0.02 1312

3-metil-ciclohexanona 951 de etilo Myrtenyl 0.89 0,05 1,328

sabinene 3.26 0,33 974 piperitenona 1.52 0.34 1345

ß-pineno 978 Acetato de citronelilo 1.06 0.46 1355

furan 2-pentil 0.11 0.06 992 El eugenol 1.11 0.51 1361

3-Octanol 0.11 0,04 996 óxido de piperitenona 0.21 0.11 1370

pag- Mentha-1 (7), 8-dieno 0.05 0.03 1005 α-copaeno 7.03 2 0,09 1.381

limoneno 6.46 2.07 1030 trans- acetato mirtanol 0.22 0.08 1387

trans- ß-ocimeno 0.06 0.01 1048 β-Bourbonene 0,76 0.29 1389

gamma-terpineno 0.01 0.01 1059 β-Cubebene 1393

pag- Mentha-3,8-dieno 0.02 0.02 1071 Elemene <β-> 0,32 <0,01 1395

terpinoleno 0.09 0,01 1,090 ( MI)- cariofileno 0.18 0 0,06 1,423

pag- cimeno 2.08 1.73 1091 β-copaeno 0.50 0 0,16 1,433

1,6-octadien-3-ol, 3,7-dimetil- * 7.31 7.00 1101 α-humuleno 1458

linalol 0.52 0,81 1101 γ-Muurolene 1.06 0 0,38 1,480

nonanal 0.06 0.02 1105 germacreno D 1485

1-octeno-3-ilo 0.46 0.02 1113 ( E, E) - alfa-farneseno 0.39 0 0,29 1,510

acetato de 3-Octanol 0.25 0.02 1124 Zonarene 5.76 2 0,08 1.529

a-Campholenal 1128 α-Calacorene 0.41 0 0,05 1,547

cis- óxido de limoneno 1135 β-Calacorene 0.57 0 0,05 1,568

cis-p- Mentha-2,8-dien-1-ol 1137 1α, 10α-epoxi-Amorph-4-eno 0.25 0.06 1576

pag- Menth-3-en-8-ol 0.14 0.01 1150 β-Copaen-4-α-ol <β-> 1592

mentona 11,57 0.15 1156 α-Corocalene 0.06 0.02 1629

mentofurano 1167 Muurola-4,10 (14) dien 1-β-ol 0.04 0,01 1,635

cis- isopulegona * 1.56 4.74 1178 α-Muurolol 0,02 <0,01 1649

a-terpineol 0.05 0.10 1194 cis- Calamenen-10-ol 0.08 0 0,06 1,668

decanal 0.06 0.08 1207 Cadalene 1683

El ácido acético, no 3-enil éster * 0.80 0.13 1209 Mostakone 0.59 0,01 1,687

Benzofuran-4,7-dimetil * 0.33 0.08 1216 Amorpha-4,9-dien-2-ol 0.26 1705

Coahuilensol, éter de metilo 0.30 0,01 1,226 10- ni- Calamenen-10-ona 1711

pulegona * 37.11 72.79 1249 Pentadecanal * 1718

acetato de linalilo 0.05 0.01 1257 hexadecanal * 1783

Cinamaldehído <( E) -> 0.03 0.02 1274 2-pentadecanona, 6,10,14-trimetil * 1849

Nene. % 97.59 98 0.09

A: de partes aéreas secadas al aire. B: a partir de partes aéreas frescas. * Identificado sólo por las bibliotecas Wiley y NIST MS.

hydrodistillate de M. nubigena HBK, mientras que estos fenoles no se
detectaron como componentes importantes de los aceites A y B en este
estudio. Además de las diferencias entre especies o la existencia de
variedades botánicas, otros factores, entre los que importantes son el
clima, el suelo, el período de cosecha y el ciclo vegetativo, y el método
de la planta y la preservación aceite esencial, puede explicar los
diferentes contenidos químicos de los aceites. Por otra parte, vale la
pena señalar que recogimos la
planta en el período de no floración, mientras que el aceite esencial
anterior se obtuvo por hidrodestilación de hojas y flores (El-Seedi et
al., 2008).
Además del aceite esencial, schizonepetoside A ( 1) y C ( 2) fueron
aislados del extracto acuoso MeOH de las partes aéreas de secado al
aire de C. nubigenum.
Estos compuestos son monoterpenoides glicosilada raras, aislado
previamente, a lo mejor de nuestro conocimiento, sólo desde la planta tenuifolia
schizonepeta Briq. (Kubo et

Rev. Bras. Farmacogn. Braz. J. Pharmacogn. 21 (5): Sep./Oct. 2011 853

investigaciones fitoquímicos y la actividad antimicrobiana de nubigenum Clinopodium Kunth
(Kuntze) extractos crudos
Gianluca Gilardoni et al.

al., 1986; Lee et al., 2008), después de lo cual han sido nombrados. Ellos
fueron identificados por datos de RMN idénticos con los reportados en la
literatura.
El microorganismo más sensible era DO.
albicans con una inhibición de halo> 1 cm. El MIC de los aceites esenciales A
y B contra C. albicans se mostró en la Tabla 3. La actividad fungicida (MFC)
de la levadura se detectó después del tratamiento 48 h con una
concentración de 8 l / ml y 5! l / ml de aceite de A y B, respectivamente.
Curiosamente, sólo actividad fungistática dio como resultado después del

O O
tratamiento 24 h.

OH OH
HOHO HOHO Los datos de actividad informados en este documento son
OO OO
coherentes con la actividad antimicrobiana se muestra por muchos géneros y
OH OH
especies pertenecientes a la familia Lamiaceae (De Martino et al., 2009).
1 2 Propiedades antimicrobianas del género
Clinopodium Se investigaron principalmente para especies del Viejo Mundo. La

La Tabla 2 muestra los datos de actividad de la DO. mayoría de ellos demostraron ser antimicrobiano o bien contra diferentes

nubigenum aceites esenciales A y B contra los microorganismos bacterias u hongos (Stojanović et al, 2006;.. Castilho et al, 2007;. Stojanović et

ensayados. No hay diferencias entre los datos replicados fueron al, 2009). Casi sesenta especies del género Clinopodium crecen en América

detectables a simple vista. Diferencia entre A y B era detectable tropical (Harley, 2000), pero las actividades biológicas de muy pocos de ellos

sólo contra A. niger se han probado hasta ahora (El-Seedi et al, 2008;. Estrada-Reyes et al.,

después de 24 h de incubación, pero ambos aceites no mostró actividad después de 48 2010). La actividad antimicrobiana de la

h.

Figura 3. comparación GC-MS del aceite esencial A, a partir de las partes aéreas de secado al aire, con aceite esencial de B, a partir de las partes aéreas frescas de C. nubigenum.

Tabla 2. La actividad de los aceites A y B de la esencial C. nubigenum frente a microorganismos bacterianos y fúngicos, tal como se muestra por el diámetro de la zona de inhibición (cm).

hongos Las bacterias

Muestra Candida Trichophyton Escherichia Estafilococo

Aspergillus niger Bacillus subtilis
albicans mentagrophytes coli aureus

El aceite esencial A 9 l 1,5 después de 24 h, 1.2 0.6 0.7 0 0.8

0 después de 48 h

El aceite esencial B 9 l 2 después de 24 h, 1.2 0.6 0.7 0 0.8

0 después de 48 h

sal Penicilina G Na 9 g - - - 2.4 2.7 2.7

La anfotericina B 10 g 1.3 1.4 1.7 - - 0

854 Rev. Bras. Farmacogn. Braz. J. Pharmacogn. 21 (5): Sep./Oct. 2011


aceite esencial de nubigena Micromeria HBK fue detectado por El-Seedi et
al. (2008), y los datos relativos a C. albicans
y S. aureus son comparables con los reportados en este documento para C.
nubigenum. Además, se presenta por primera vez los anticandidiales valores de
MIC y MFC del aceite esencial, al tiempo que demuestra su actividad fungicida.
Este resultado es muy importante para encontrar un nuevo remedio contra C.
albicans, que es la especie predominante que causan infecciones fúngicas
Tabla 3. Concentración inhibitoria mínima (MIC) y la concentración
fungicida mínima (MFC) de los aceites A y B esencial de C. nubigenum.
Candida albicans
Muestra MIC después de 24 h MFC después de 48 h
l / mL l / mL
Un aceite esencial 8 8
El aceite esencial B 5 5
Anfotericina B 1 und
Und: Indeterminado.
Reconocimiento
Este artículo está dedicado a la memoria de Riccardo Negri.
Agradecemos al MIUR italiano de apoyo financiero (fondos PRIN).
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* Correspondencia
Giovanni Vidari
Università degli Studi di Pavia, Dipartimento di Chimica través Taramelli
0382987323
Rev. Bras. Farmacogn. Braz. J. Pharmacogn. 21 (5): Sep./Oct. 2011 855