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Aminoácidos
Variações possíveis
Estrutura básica
Amina
Ácido Carboxílico
Glicina
Alanina
Metionina
Prolina
Fenil-Alanina
Titulação com NaOH 0,1M
Ponto ou pH isoelétrico
Pepitídeos
Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu
SGYA
Proteínas – Basicamente formadas pelos 20 aminoácidos excenciais
Proteínas simples – possuem somente Amino-ácidos
Proteínas conjugadas - proteínas com grupos químicos diferentes de Amino-ácidos
Grupos prostéticos – parte não aminoacídica.
Purificação de Proteínas
Geralmente ligadas ao tecido ou células microbianas
Tecido
homogenizado
Tecido homogeneizado
Proteínas solúveis
Sedimentos contendo
ribossomos e
macromoléculas
Salting out
Reservatório
Suporte poroso
Efluente
Cromatografia por troca iônica
A mistura protéica é
Grânulos de polímero adicionada à coluna
com grupos contendo trocadores
funcionais carregados de cátions
negativamente
Cromatografia por exclusão de tamanho
A mistura protéica é
adicionada à coluna que
contém um polímero com
ligações cruzadas
Grânulos de
polímero
poroso
Proteína de
interesse
Ligante
Mistura de Solução de
Proteínas Ligante
A mistura protéica é
adicionada à coluna
contendo um ligante
covalente ligado ao
polímero, específico
para a proteína de
interesse.
Marcadores
Células induzidas
Troca aniônica
Troca catiônica
Proteína purificada
Aminoácidos sequenciados
Estruturas tridimensionais dos
Interações entre os Peptídeos polipeptídeos
α-Helice
Diferença = 20 – 65 KJ/mol
Estrutura não dobrada Estrutura dobrada
Ligação de Hidrogênio
Interações hidrofóbicas
Interações Iônicas
Ligações covalentes
ou interações fracas
entre as cadeias
α-Hélice de queratina
Duas cadeias enroladas em espiral
Protofilamento
Protofibrila
Células
Filamento intermediário
Protofibrila
Protofilamento