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PRACTICA N° 06 Alumnos:
Arévalo Llatas, Adita Noemí
Código. 1424145023
II. OBJETIVOS
- Determinar la frescura de diferentes muestras de pescado.
Grado Puntuación
Aceptable Ausencia de I Olor/sabor característico de la especie 10
olores/sabores Muy fresco, algas marinas Pérdida de 9
Objetables olor/sabor Neutral 8
7
6
Ligeros olores y II Ligeros olores y sabores objetables 5
sabores objetables como a humedad/moho, ajo, 4
pan/levadura, ácido, frutal, rancio
Límite de aceptación
Rechazo Severos olores y III Fuertes olores y sabores objetables a 3
sabores objetables col vieja, NH3, H2S o sulfuros 2
1
Prueba triangular
La prueba discriminativa más empleada en el análisis sensorial de pescado es la prueba
triangular (Norma ISO 4120 1983), la cual indica si existe o no una diferencia detectable
entre dos muestras. Los asesores reciben tres muestras codificadas, se les dice que dos de
las muestras son idénticas y una es diferente, y se les solicita identificar la muestra
diferente.
El análisis de los resultados de la prueba triangular se efectúa comparando el número de
identificaciones correctas con el número que se esperaría obtener sólo por casualidad. La
tabla estadística del Apéndice A debe ser consultada a fin de probar los resultados
estadísticamente. El número de identificaciones correctas es comparado con el número
esperado mediante el uso de tablas estadísticas, por ejemplo, si el número de respuestas
es 12, 9 de las respuestas deben ser correctas a fin de obtener un resultado significativo
(con un nivel del 1 por ciento).
La prueba triangular es de utilidad para determinar, por ejemplo, si la sustitución de
ingredientes produce una diferencia detectable en el producto. La prueba triangular
generalmente se emplean para seleccionar los asesores del panel de degustación.
Las muestras marcadas con A y B pueden ser presentadas de seis formas diferentes:
ABB BBA AAB
BAB ABA BAA
Igual número de seis posibles combinaciones son preparadas y servidas a los miembros
del panel. Ellas deben ser servidas aleatoriamente, preferiblemente como duplicados. El
número de miembros en el panel no debe ser menor de 12 (en el Apéndice B se muestra
un ejemplo de la prueba triangular de la Norma ISO)
2. MÉTODOS FÍSICOS
2.1.PH
Las variaciones de pH del tejido muscular son indicativas de la calidad del mismo.
Cuando un organismo muere, cesan de funcionar los sistemas biológicos normales de
nutrición y excreción celular, entre ellos los más importantes son el suministro de oxígeno
y la producción de energía. La disminución de la concentración de oxígeno dentro de las
células ocasiona que en las mismas se originen nuevos procesos catabólicos, como por
ejemplo la descomposición del glucógeno, con la producción final de ácido láctico, el
cual
torna el pH más ácido. Es por lo tanto de esperar que en función de un tiempo de
almacenamiento las mediciones del pH del tejido muscular muestren cada vez valores
más ácidos. Esta tendencia se manifiesta en los primeros estadios del almacenamiento,
pero después empiezan a ocurrir otra serie de fenómenos tanto de origen enzimático como
microbiológico que conducen a la producción de substancias de origen básico que van
neutralizando el ácido láctico formado y revertiendo los valores de pH, hacia la
neutralidad y finalmente hasta pH netamente básicos. ( Huss, 1988., Ashie, et al.,1996).
Índice de Rigor.
Los primeros cambios que ocurren cuando el pez es capturado, son principalmente los
referentes a textura, apariencia y rigor mortis. Una vez que el pez muere, el mismo es
blando y flexible, y la textura de la carne en firme y elástica al tacto. Después de un
período de tiempo, el tejido muscular se contrae y se torna rígido y duro, en esta etapa el
pescado está en rigor mortis. El desarrollo del rigor ocurre cuando el contenido de ATP
en el músculo decrece a un nivel crítico, ya que no es posible la regeneración de este
compuesto. Esto ocasiona que las proteínas miofibrilares, como la actina y la miosina,
puedan interactuar y formar el complejo actomiosina, produciendo un endurecimiento del
tejido, asociado a lo que se denomina rigor mortis. (Huss, 1998). La resolución del rigor
ocurre cuando por acción de enzimas endógenas o por otros procesos o actividades
bioquímicas que se desarrollan dentro del tejido muscular. La extensión del rigor y su
resolución está directamente relacionada con el pH del sistema y por otros factores como:
especie, método de captura, temperatura, condiciones fisiológicas antes y después de la
muerte del animal. ( Huss, 1988., Ashie, et al, 1996). El estudio de las fases iniciales y el
desarrollo del rigor es usado junto a otras determinaciones como textura, pH,
cuantificación de nucleótidos etc, para evaluar los
primeros cambios que ocurren en el pescado. La metodología usada para medir el
progreso del rigor mortis y relacionarlo con calidad, se denomina Índice de rigor ( I R ).
El mismo consiste en medir el desplazamiento horizontal de un pescado entero, que está
libremente suspendido, pero sujeto por la cola. A medida que empieza a manifestarse el
rigor mortis, el tejido se torna duro y comienza la rigidez, con lo cual el pescado, se
arquea, levantándose sobre la línea vertical. La diferencia entre la vertical y la nueva
posición puede ser medida en grados. Posteriormente al resolverse el rigor, el tejido
vuelve a tornarse suave y flexible, retornando una vez más a la posición vertical.
3.2.Amoniaco
El amoniaco se forma por degradación bacteriana/desaminación de proteínas, péptidos y
aminoácidos. También es producido por la degradación autolítica del adenosina
monofosfato (AMP, Figura 5.4) en productos marinos enfriados. A pesar de que el
amoniaco ha sido identificado como un componente volátil en una variedad de pescados
en deterioro, unos pocos estudios han, de hecho, reportado la cuantificación de este
compuesto desde que fue posible determinar su contribución relativa al incremento en las
bases volátiles totales.
3.3.Trimetilamina (TMA)
La trimetilamina es una amina volátil pungente, generalmente asociada con el olor típico
"a pescado" del pescado en deterioro. Su presencia en el pescado en deterioro es debido
a la reducción bacteriana del óxido de trimetilamina (OTMA), el cual está naturalmente
presente en el tejido vivo de muchas especies de pescados marinos. Se cree que la TMA
es generada por la acción de las bacterias del deterioro, sin embargo, su correlación con
el número de bacterias no es generalmente muy buena. Actualmente se piensa que este
fenómeno es debido a la presencia de un pequeño número de bacterias "específicas del
deterioro", las cuales no siempre representan la mayor proporción de la flora bacteriana
total pero son capaces de producir grandes cantidades de compuestos relacionados con el
deterioro como la TMA. Uno de estos organismos específicos del
deterioro, Photobacterium phosphoreum, genera aproximadamente 10-100 veces la
cantidad de TMA producida por el organismo deteriorante más comúnmente
conocido, Shewanella putrefaciens (Dalgaard, 1995).
4. MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS
Bacterias del deterioro
El número total de bacterias en el pescado raramente indica calidad sensorial o duración
en almacén (Huss et al., 1974). Sin embargo, se reconoce que ciertas bacterias son las
principales causantes del deterioro (véase Sección 5.3). Diferentes sustratos ricos en
peptona y que contienen citrato férrico, han sido usados para la detección de bacterias
productoras de H2S como la Shewanella putrefaciens, las cuales aparecen como colonias
negras debido a la precipitación del FeS (Levin, 1968; Gram et al., 1987). El deterioro
ambiental es causado generalmente por miembros de la familia Vibrioanaceae, los cuales
también forman colonias negras en agar hierro al cual se añade una fuente de sulfato
orgánico (como el Agar Hierro, Lyngby). No existe un medio selectivo o indicativo
para Pseudomonas spp., contaminante de algunos pescados de agua dulce tropical, ni
para Photobacterium phosphoreum que contamina el pescado empacado. En el
Laboratorio Tecnológico de Lyngby, actualmente se desarrolla un método basado en
conductancia para la detección específica de P. phosphoreum (Dalgaard, comunicación
personal). La presencia, o ausencia, de bacterias patógenas es generalmente evaluada
mediante métodos basados en técnicas inmunológicas o de biología molecular. Estas
técnicas pueden también ser desarrolladas para bacterias específicas del deterioro; el
Laboratorio Tecnológico ha estado actualmente investigando el uso de anticuerpos
específicos para S. putrefaciens (Fonnesbech et al., 1993). También ha sido desarrollada
una prueba de genes, específica para S. putrefaciens, pero no ha sido probada en
productos pesqueros (DiChristina y DeLong, 1993).
Reacciones de deterioro
Algunas reacciones de deterioro pueden ser usadas para evaluar la situación
bacteriológica de los productos pesqueros. Según lo descrito anteriormente, han sido
desarrollados agares en los cuales es posible el recuento de organismos productores de
H2S. Durante el deterioro del pescado magro de carne blanca, una de las principales
reacciones de deterioro es la reducción bacteriana del óxido de trimetilamina a
trimetilamina (Liston, 1980; Hobbs y Hodgkiss, 1982). Cuando el OTMA es reducido a
TMA, ocurren algunos cambios físicos: disminuye el potencial redox, el pH incrementa
y la conductancia eléctrica incrementa. La medición de estos cambios, en un sustrato rico
en OTMA inoculado con la muestra, puede ser usada para evaluar el nivel de organismos
con potencial de deterioro; así, cuanto más rápido ocurre el cambio mayor es el nivel de
organismos del deterioro.
IV. MATERIALES
MUESTRA: Pescado fresco “Caballa”
Agua destilada
Matraz de 250 ml
Pipetas de 20, 10 y 0,2 ml
Luna de reloj
Embudo
Tubos de ensayo
Gradilla
Papel de filtro
Pisceta
Taper con tapa
Cuchillo y tabla de picar
Mortero y pilón
Soporte y aro
Balanza
V. PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS
o Cálculo del índice de frescura mediante análisis organoléptico
Procedimos a evaluar la muestra de pescado ´caballa ‘empleando la tabla que se muestra
a continuación:
VALORES DE APRECIACION
3 2 1 0
Piel -Pigmentación -Pigmentación -Pigmentación -Pigmentación
viva y viva, pero sin en fase de apagada
tornasolada. brillo. decoloración
apagada.
-Sin decoración.
Mucosidad -Acuosa -Ligeramente -Lechosa -Gris amarillenta
cutánea transparente. turbia.
Ojos -Convexo -Convexo y -Plano -Cóncavo en el
(Abombado). ligeramente -Córnea centro
hundido opalescente
-Córnea -Cornea -Pupila opaca. -Córnea lechosa
Transparente. ligeramente -Pupila gris
opalescente
-Pupila negra -Pupila negra
brillante. apagada-
Para la evaluación de la carne y de las vísceras, tanto de su estado como color y olor, se
realizó un corte a nivel abdominal.
Con los valores obtenidos, establecimos el índice de calidad para la muestra ensayada.
- Observamos el color.
FUENTE: PROPIA
FUENTE: PROPIA
FRESCURA pH
Pez vivo 6,8 a 6,9
Pescado fresco 6,0 a 6,2
Pescado en inicio de putrefacción 5,5 a 6,0
VI. RESULTADOS
Resultado de cálculo de la frescura mediante análisis organoléptico
3+ 3+ 2+ 2+ 1+ 1+ 2+ 2
Me = =2
8
Según la unión europea con el resultado obtenido podemos decir que el pescado caballa
es de categoría B.
El resultado del pH obtenido para el pescado caballa es 6,0 lo que indica que es un pescado
fresco.
MUESTRA
Nombre común Nombre científico
Caballa Scomber scombrus
MUESTRA
Nombre común Nombre científico
JUREL
Trachurus murphyi
MUESTRA
Nombre común Nombre científico
Lisa Mugil cephalus
MUESTRA
Nombre común Nombre científico
Bonito Sarda chiliensis
VII. DISCUSIONES
IX. BIBLIOGRAFIA
MINSA. (s. f.). Aprueban Norma Sanitaria para las Actividades Pesqueras y
Acuícolas. Recuperado a partir de
http://www.sanipes.gob.pe/normativas/12_DECRETOSUPREMO040-2001-PE.pdf
X. ANEXOS
CUESTIONARIO
http://lmsextremadura.educarex.es/pluginfile.php/10128/mod_resource/content/1/6TEC
NOLOGIA_DEL_PESCADO.pdf
- Congelación
Igual que en el caso de pescado destinado a la comercialización en fresco, el pescado que
va a ser congelado puede ser congelado en alta mar o bien, una vez que ha llegado a las
lonjas, se lleva a la industria para sea congelado lo antes posible. El pescado congelado
en el barco debe someterse a varios procesos preliminares (lavado, descabezado y
eviscerado, lavado, envasado entero, fraccionado o en filetes) antes de ser congelado. El
envasado antes de la congelación es muy importante por varios motivos: Protege al
pescado de posibles pérdidas de humedad. Otro sistema también utilizado para evitar este
fenómeno es el glaseado, que consiste en formar una capa fina de hielo sobre el producto
mediante agua pulverizada o inmersión del producto y una posterior congelación
superficial. Evita que se transmitan malos olores o sabores del pescado. Evita infecciones
por microorganismos. La legislación define a los productos congelados como productos
pesqueros enteros o fraccionados, eviscerados, inalterados y frescos, que han sido
sometidos a la acción del frío hasta lograr en el centro de las piezas temperaturas de entre
-16 ºC y -24 ºC en un tiempo mínimo, es decir, a la acción de congelación o
ultracongelación. Los productos congelados deben conservarse en las mismas
condiciones que en la congelación, o incluso a temperaturas más bajas (-25 ºC--30 ºC),
evitando las oscilaciones de temperatura de ± 3 ºC. El objetivo de la congelación es
disminuir la temperatura del producto hasta convertir la mayoría de agua del producto en
hielo. La transformación del agua en hielo se produce de forma gradual, pero interesa que
sea lo más rápida posible para que se formen cristales pequeños y evitar así que se dañe
el tejido muscular. La congelación consiste en someter a los productos a la acción de un
frío más intenso en cámaras o túneles especiales hasta alcanzar, en el centro de la pieza,
temperaturas de entre -16 ºC y -25 ºC, con lo que se obtienen productos con una
conservación de semanas e incluso meses.
- La ultra congelación
Es el proceso de congelación donde el frío se acelera para que en menos de dos horas la
temperatura del centro del producto baje de 0 ºC hasta -5 ºC, que es la zona de máxima
cristalización (transformación del agua en hielo). Después continúa la congelación hasta
alcanzar temperaturas de entre -16 ºC y -35 ºC. La ultra congelación se suele reservar para
productos de calidad.
Los sistemas de congelación son:
3. Explique cuáles son los factores por los que se presenta histamina en el
pescado.
La acción proteolítica de las catepsinas causa la degradación de la proteína de pescado
a aminoácidos y bajo la acción de descarboxilación bacteriana, formando compuestos
aminos no volátiles como histamina, putrescina, tiramina y esparmino. Los aminoácidos
importantes iniciadores para la degradación están el ácido glutámico, arginina, lisina,
tirosina e histidina.
Las bacterias asociadas a la formación de histamina están comúnmente sobre las
branquias y en los intestinos del pez vivo sin originar daño, sus mecanismos de defensa
no inhiben el crecimiento bacteriano, aumentando el número de bacterias que aprovechan
la histidina libre presente en el medio. Tanto la enzimas como las bacterias pueden ser
inactivadas por cocción; sin embargo una vez que la histamina ya está formada no es
posible eliminarla. La histamina es muy resistente al calor.
Durante la formación de la histamina, cuando existe la enzima descarboxilasa, ésta puede
producir la toxina en el pescado, aún cuando las bacterias esten inactivas. La enzima es
más estable que las bacterias en estado congelado y puede ser reactivada con el
descongelamiento.
Oxido de trietilamina(OTMA)
Uno de estos compuestos volátiles puede ser la trimetilamina (TMA) derivada de la
reducción bacteriana del óxido de trimetilamina (OTMA). La TMA tiene un olor a
"pescado" muy característico. Al inicio de esta fase pueden aparecer olores y sabores
ligeramente ácidos, afrutados y ligeramente amargos, especialmente en peces grasos. En
los últimos estadios de esta fase se desarrollan olores nauseabundos, dulces, como a col,
amoniacales, sulfurosos y rancios. La textura se toma suave y aguada, o dura y seca. FAO
Aminoácidos libres
En los peces de carne oscura predomina entre los aminoácidos libres la histidina (aumenta
con la descomposición microbiana). Además de este aminoácido existe 1-metilhistidina
libre. Anserina y carnosina se encuentran en tejido fresco así como taurina.Los péptidos
y aminoácidos libres son degradados por desaminación y descarboxilación. Entre los
productos finales, destacan el amoníaco, sulfuro de hidrógeno, mercaptanos, disulfuros,
dióxido de carbono, ácidos grasos volátiles y alcoholes. Un aminoácido dado puede ser
atacado por vías metabólicas diferentes; por ejemplo, la lisina es descarboxilada por
ciertas bacterias mientras que es desaminada por otras. En algunos casos, el metabolismo
de proteínas y péptidos produce los compuestos característicos de la alteración
putrefactiva de los productos marinos. El sabor “a bravío” que se desarrolla en gran
medida, a cambios proteolíticos.
Hipoxantina
El primer proceso autolítico que tiene lugar en el pescado afecta a los carbohidratos y a
los nucleótidos. Tras la muerte del pescado, la regeneración de la adenosina trifosfato
(ATP) que se produce in vivo cesa y es rápidamente degradado comenzando el proceso
de rigor mortis. Las reacciones de degradación son las siguientes:
En muchos casos, el grado en que se producen las etapas 5 y 6 de la reacción depende de
la especie. Consecuentemente, la concentración de inosina y hipoxantina aumenta durante
la conservación, utilizándose ambos como indicadores del grado de frescura. Las
moléculas de ATP son rápidamente degradadas tras la muerte a adenosina monofosfato
(AMP), y posteriormente a IMP (inosín monofosfato). La desfosforilación, del IMP es
fundamentalmente autolítica y tiene lugar durante las primeras fases del almacenamiento
en refrigeración. De hecho, la desaparición del IMP se correlaciona con la falta de
frescura en algunas especies.
Inicialmente, la acumulación de hipoxantina tiene su origen en un proceso de alteración
autolítica y en las fases finales probablemente se deriva de la actividad bacteriana.
Aunque el grado de degradación de los derivados nucleotídicos es obviamente un
indicador del tiempo de muerte, los compuestos por ellos mismos pueden contribuir al
desarrollo del flavor, así el IMP actúa como un potenciador del flavor mientras que la
hipoxantina es un producto de la reacción desagradable, especialmente amargo.
(HERNANDEZ, 2011)
Urea
Cuando el OTMA se reduce a TMA o DMA, aparece el olor tan característico a pescado
descompuesto. La urea y el amoníaco también pueden descomponerse e incrementar el
olor desagradable del TMA. (GIMFERRER MORATÓ, 2007)
Urea: en los peces cartilaginosos, la urea es el componente mayoritario de la fracción de
nitrógeno no proteico con 1,3 – 2,1 g/kg convirtiéndose en amoniaco durante su
almacenamiento. En muchas especies de pescado, el desarrollo de la TMA es paralelo a
la producción de hipoxantina. La hipoxantina puede formarse por la descomposición
autolítica o bacteriana de nucleótidos, la tasa de formación por la acción bacteriana es
mayor que por autolisis. Por lo general, muchos de los olores relacionados con la
alteración del pescado son productos de degradación de los aminoácidos. (GIL
HERNANDEZ, 2010)