PRACTICA N° 02

DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES POR EL METODO DE

RECUENTO POR DISOLUCION EN TUBO NMP

INTRODUCCION

Debido a que un gran numero de enfermedades son transmitidas por via fecal-oral utilizando
como vehículo los alimentos y el agua, es necesario contar con un microorganismo que funcionen
como indicador de contaminación fecal. Estos deben de ser constantes, abundantes y exclusivos
de la materia fecal, deben tener una sobrevivencia similar a la de los patógenos intestinales y
deben de ser capaces de desarrollarse extra intestinalmente.

Para su estudio, se dividen en dos grupos. El grupo de bacterias coliformes totales el cual
comprende a todos los bacilos gram negativos aerobios o anaerobios facultativos,no esporulados,
que fermentan la lactosa con producción de gas en un lapso máximo de 48 horas a 35°C 1°C. este
grupo esta conformado por 4 generos principalmente: enterobacter, echerichia, citobacter y
klebsiella.

El grupo de coliformes fecales,esta constituidos por bacterias gram-negativas capaces de

fermentar la lactosa con producción de gas a las 48 horas de incubación a 44.5°C 1°C. este grupo
no incluye la especie determinada,sin embargo la mas prominente es echerichia coli. La
demostración y el recuento de microorganismo coliformes, puede realizarse mediante el empleo
de mdios de cultivo liquidos y solidos con características selectivas y diferenciales.

OBJETIVOS

Familiarizarse con los métodos de recuento, especialmente con el de NMP

Detectar bacterias coliformes totales y fecales en los alimentos

Detectar si la muestra traída es apta para el consumo humano

MARCO TEORICO

MATERIALES Y EQUIPOS

 Materiales
 Tubos de ensayo de 12 ml aprox
 Gasa
 Algodón
  Pabilo
 Jeringas de tuberculina
 Asas de cohi
 Mecheros
 Alcohol
 Agua destilada
 Cajas Petri
 Pipetas de 10 ml
 Propipetas
 Campanitas de durham

Equipos

 Estufa
 Autoclave
 Cuenta colonias
 Incubadora

REACTIVOS

 Caldo lauril sulfato

 Caldo verde brillante bilis
 Caldo EC

PROCEDIMIENTO

Preparación de prueba presuntiva

Preparaos el caldo lauril sulfato de acuerso a lo indicado en el frasco del caldo,luego agregamos