Transducción de señales

Reacción de alarma, un ejemplo de cómo varios órganos se sincronizan para realizar una función. En la evolución la
reacción de alarma apareció muy temprano, cada vez que nos vemos en una situación de estrés sentimos ciertos
síntomas. Ejemplo: nuestro corazón late más profundamente, nuestros órganos se bronco dilatan, etc… La reacción de
alarma está desarrollada por la liberación de catecolaminas desde la medula adrenal. Estamos formados por un sistema
autorregulado, de forma que se liberen catecolaminas y luego el organismo vuelva a las condiciones basales,
manteniéndose así las variables en un rango estrecho. Si las catecolaminas están constantemente siendo liberadas, no
es una situación fisiológicamente normal, por ejemplo puede ser un caso de hipertensión.

Sobre el riñón existe la glándula adrenal, corteza y medula, en algunos casos las personas desarrollan el
feocromocitoma, tumor que tiene la característica de sobre secretar catecolaminas. Estas personas tienen problemas en
el corazón, en los vasos sanguíneos, etc.

Enfermedades crónicas no transmisibles, representan entre el 60-70% de morbilidad. En orden de enfermedades más a
menos comunes se encuentran: enfermedades cardiovasculares, cáncer, diabetes y enfermedades respiratorias. Las
enfermedades crónicas no tienen cura.

La población humana ha ido envejeciendo y junto a ello se dan enfermedades que no eran comunes anteriormente, por
ejemplo: Alzheimer.

En Chile, el cáncer de la vesícula biliar es frecuente, donde existe una mayor incidencia sobre las mujeres. Cada vez
que se detectan cálculos biliares se procede a remover la vesícula.

Qué porcentaje de las personas que tienen calculo biliar desarrollan cáncer de vesícula?

Respuesta: Solamente el 1% de las personas que tienen calculo podrían desarrollar cáncer.

Es necesario remover la vesícula?

Respuesta: La función es que produce bilis. Al removerla tiene a largo plazo consecuencias ya que se comienza a
acumular líquidos en lugares no deseados, por ejemplo, el caso del hígado graso. Sacar la vesícula es una operación,
sacar los cálculos es una intervención.

Transducción de Señales

En transducción de señales se habla de comunicación celular. Se ha descubierto que en nuestras células existe una
forma de comunicación primitiva conocida como nanotubos, filamentos huecos donde dos células mantienen una
solida comunicación, siendo capaz de transportar Calcio, Magnesio e incluso mitocondrias. Se cree que fue el primer
intento de comunicación de forma relativamente cercana.

En la levadura (seres primitivos), para reproducirse algunas de ellas son capaces de emitir una señal a la vecindad, y a
la vecindad son captadas por receptores permitiendo el apareamiento y la formación de un ser vivo nuevo. Como sabe
la celula que tiene que cumplir ese mensaje? Como ese mensaje se reconoce? Como se codifica ese mensaje al interior
de la celula? Por lo tanto se comienza a hablar de transducción de señales.

TRANS: Al otro lado. DUCTO: Que porta o que lleva.

Transducción de señal: Todos aquellos mecanismos que transfieren información de una celula o entre células con la
idea de modificar el comportamiento de la celula. Por ejemplo: moverse, migrar, cambiar el metabolismo, inducir
proliferación, inducir su especialización, etc.

Vías de transducción de señales: Cuando un ligando reconoce a un receptor, va a haber una cadena ordenada y
secuenciada de eventos relativamente lineales. Inicialmente se va a captar la señal, se codificará, se amplificará y
finalmente llevará a cabo una respuesta.

Hoy en día tenemos la concepción de que más que tener una vía transduccional, tenemos una red transduccional. Todo
al interior de la celula está en comunicación. INTERNET CELULAR.

Se creía que bastaba 1 molécula para cambiar el comportamiento celular, pero en realidad una celula está sensando
todo en tiempo real. No sensa una señal, sensa multiples señales.

Tenemos 3 tipos de alfabetos: uno que opera al interior de la célula, otra al exterior.

En el exterior de la célula existen los primeros mensajes. Ejemplo: Glucosa. Existen algunos mensajeros químicos que
se especializaron como las catecolaminas. En el caso de la adrenalina que se libera desde la medula adrenal está
actuando como primer mensajero o como hormona. Todas las hormonas son consideradas como primeros mensajeros
al igual que en el sistema inmune, las interleukinas son mensajeros químicos que se han especializado en transmitir
información entre células inmunes. En la obesidad, en los adipocitos no solamente almacena grasa, la celula adiposa se
convierte en celula del tipo inmunológica y secreta por ejemplo citoquinas que impactan sobre el musculo esquelético,
dañando la transmisión de la insulina.

En los ojos existen conos y bastones que permiten ver la luz, la luz impacta un receptor y dentro de ese receptor hay un
ligando llamado retinal que recibe la luz para que cambie la conformación y active el receptor, de manera que uno
pueda reconstituir la imagen.

Cuando se ayuna el páncreas secreta glucagón, cada vez que aparece glucagón en la sangre es porque se debe
aumentar la glucosa en ella.

En algunos tipos de cáncer, la celula cancerígena secreta un factor de crecimiento que auto-estimula su proliferación.
Ejemplo: cáncer de mamas.

En la reacción de alarma, como las catecolaminas actúan sobre los órganos involucrados?

En la evolución se desarrollaron dominios, uno de ellos siempre tiene que estar, ese será el que reconocerá el primer
mensajero.

En una reacción química, el ligando + el receptor producirá un complejo cuya estabilidad dependerá de la estabilidad.
En química hablamos de afinidad cuando se forman enlaces químicos. Ejemplo: enlaces covalentes, iónicos, ambos
fuertes. La idea es que se forme un enlace pero que a la vez se desarme, que sea reversible. Existen algunas
interacciones que permiten la reversibilidad como las fuerzas de van de waals. No será lo mismo si se forma 1 enlace
 en vez de 10 enlaces, el primero será más débil. En los receptores fundamentalmente hablamos de la constante de
disociación, una Kd muy baja (en nanomolares) la afinidad será muy alta. Otro concepto que interesa es jugar con el
número de receptores. Ejemplo: si no queremos que una celula responda al ligando, no debo tener receptores. Algo que
hace la celula es jugar con los receptores para así variar la respuesta fisiológica.

Existen patologías donde se producen cambios en el número de receptores. Cuando están crónicamente elevadas las
hormonas de la tiroides (arritmia, palma de la mano caliente), estas controlan el número de receptores beta-
adrenérgicos del corazón. Por lo tanto la persona frente a las catecolaminas responde al número de receptores.

Se debe tener en cuenta que el número como la actividad son factores que se pueden modificar en la célula y se pueden
determinar experimentalmente. En el cáncer de mamas, estas son dependientes o independientes de las hormonas. Se
les toma una biopsia, la pregunta que se hace el patólogo es si tiene receptores para estrógenos, si tiene estrógenos el
tratamiento será impedir la acción del estrógeno sobre el receptor con TAMOXIFENO.

La ecuación de Scatchard permite determinar el número y la afinidad del receptor. PREGUNTA DE PRUEBA.

Receptor ER2 es un receptor para un factor de crecimiento. Los tumores simplemente sobreexpresan los receptores.
Hoy en día existe un anticuerpo monoclonal sumamente efectivo llamado Trans___ que cuando una mujer es positiva
en cáncer para ese receptor, la efectividad del tratamiento es sumamente alta. Menos del 20% de mujeres tiene esta
característica.

Las proteínas receptoras son más complejas pues la mayor parte son dímeros, es decir se juntan. Casi todos los
receptores biológicamente activos son dímeros o trímeros. Al interaccionar dos receptores pueden haber dos
posibilidades:

- Homodímero: la más fácil, esto ocurre en la superficie

- En la zona del citosol el receptor puede interaccionar con otras proteínas como es el caso de las catecolaminas que se
unen a un receptor ligado a la proteína G. Por lo tanto los receptores a través de esos dominios son capaces de tener
ciertas propiedades: reconocer ligandos, reconocer proteínas, aparte de ser un receptor pueden tener actividad
enzimática. Por ejemplo, existen receptores que pueden fosforilar.

El primer evento cuando se une ligando con receptor es el cambio en la conformación del receptor, que se encontraba
en un estado basal, de esta forma se activa. De esta manera puede interactuar con otras proteínas o reclutarlas en el
vecindario del citosol.

Que pasa cuando dos proteínas se juntan? Cambios de conformación.

El cambio conformacional es un mecanismo para transmitir información. Dependiendo de si el ligando activa al

receptor, vamos a hablar de agonista y al revés, de antagonista. Existen agonistas naturales como las catecolaminas o
agonistas sintéticos conocidos como Fármacos.

Las catecolaminas producen broncodilatación para aumentar el flujo de oxígeno actuando sobre células musculares
lisas. Gracias a este conocimiento se puede construir un fármaco que imite la acción de las catecolaminas. El mismo
salbutamol, que es un agonista sintético que imita la acción, entonces producirá el mismo efecto.

Que pasa con las personas que usan el salbutamol por un tiempo prolongado? Necesitan cada vez más dosis porque se
pierde la respuesta por desensibilización de receptores. En la preparación del puff, tienen glucocorticoides que son
sumamente delicados y peligrosos, son potentes antiinflamatorios. En super dosis se utilizan como inmunosupresores
cuando las personas se trasplantan. Los glucocorticoides aumentan los receptores beta al igual que las hormonas
tiroideas. Por lo tanto, uno de los objetivos aparte de desinflamar es tratar de evitar la desensibilización de los
receptores.

Se hablará de agonistas y antagonistas, ¿qué es el agonista inverso? PREGUNTA DE PRUEBA.

Los ligandos pueden ser hidrosolubles o liposolubles, algunos pueden ser grandes y no traspasar la célula. Carga y
tamaño son algunas de las características que sirven para saber donde puede estar el receptor del ligando.

Los receptores de 7 dominios transmembrana se cree que fueron los primeros receptores en aparecer durante la
evolución. Todos tienen la misma estructura, cuando se activan se asocian con otra proteína llamada la “Proteina G”.
En cada uno el receptor es diferente, pueden haber variaciones aminoacidicas, por lo tanto puede estar la gran
posibilidad de que haya un receptor único en su composición aminoacídica. DIAPOSITIVA N° 8.a. Por ejemplo si la
valina (aa 20) es parte del sitio de unión del ligando podría ser en algunas personas que determinara el grado de
respuesta del ligando con el receptor y que tengamos distintos tipos de afinidades. Los chilenos se caracterizan en que
en la posición 20 hay 50% de Valina, 25% de Treonina y 25% de Glutamina, en otras poblaciones existen otros
aminoácidos preponderantes. Si en la población 99% tiene Valina y 1% Treonina, esto se llama MUTACIÓN. Si el
porcentaje es mayor al 1% se llama POLIMORFISMO.

Cuando una compañía farmacéutica desarrolla un medicamento, se debe hacer estudios en varias poblaciones para
comprobar que el efecto sea benéfico en todas. Farmacogenética, predice o entiende cuales son los efectos que tienen
estas alteraciones en las secuencias que produzcan efectos farmacológicos o toxicológicos.

En la hélice III existe un Aspártico (carga negativa) que es esencial para reaccionar con el grupo amino que tienen las
catecolaminas. Una vez que interaccionan se forma el enlace y se produce un cambio conformacional. Lo más
importante es que el cambio tiene una señal comunicacional externa que debe decodificarse o transformar la
información que está afuera al interior, creando un nuevo mensaje: SEGUNDO MENSAJERO.

La molecula mensajera transporta información en el exterior o interior de la celula. Cuando se produzca el segundo
mensajera forma letras de un alfabeto (SEGUNDO ALFABETO), formando un mensaje y un concepto. Una vez que
se forman los mensajeros se requiere que la celula tenga receptores internos (SENSORES). La mayor parte de los
efectores son enzimas porque catalizan y amplifican la señal. En la reacción de alarma aumentan las catecolaminas y
aumenta la glicemia, sale la glucosa ya que almacenamos glicógeno en el hígado, por lo tanto cuando la catecolamina
se une al receptor se produce una serie de cadenas lentas. Al final basta que una molécula de epinefrina se una al
receptor para producir “diez elevado a 8” moléculas de glucosa. Por lo tanto hay un proceso de amplificación que no
es lineal debido a enzimas. En el caso de una reacción de alarma si el proceso fuera lineal y no tuviéramos energía
correríamos un tiempo y luego nos quedaríamos detenidos.

Qué pasará con una persona que toma puff en la zona del hígado? También tendrá efectos sobre él. Lo que se busca
finalmente es que el efecto del fármaco sea solamente local.

Este grupo de receptores tiene la característica de reconocer a un transductor (PROTEINA G). Este transductor es
capaz de decodificar la señal y se llama G porque tiene la característica de unir un nucleótido de Guanina. Cuando la
proteína G tiene unido GTP vamos a decir que la proteína G está activa y al revés, en GDP estará inactivo.
Normalmente en estado basal, sin estimulación del receptor la proteína G no va a estar activa porque tiene unido GDP.
Lo que se busca es que haya un cambio de GDP a GTP. La proteína G es un nombre colectivo de tres proteínas que se
llaman “subunidades”. La proteína alfa es la que determina el nombre de la proteína G. Está la Alfa S, Alfa I, Alfa 0,
etc, luego la proteína se llamará Gs, Gi, G0, etc. Las proteínas Beta y Gamma son tan importantes como la proteína
Alfa, pero estas dos primeras siempre andan juntas y nunca se disocian.

En el cambio conformacional, la proteína G reconozca el cambio conformacional, se asocie y se active. Cuando la

proteína G habrán cambios conformaciones en las subunidades y se asociarán a otras proteínas, estas proteínas también
tendrán consecuencias. La subunidad alfa une el GDP y la beta/gamma estarán unidas al receptor en su forma inactiva.
Cuando la proteína G se activa hay una disociación, donde alfa va a transformar GDP en GTP. Por lo tanto, esto es un
ciclo.

Todo lo que sentimos se da a través de los receptores asociados a proteína G. Cuarta familia más grande del genoma.
60% de los medicamentos tienen como blanco los receptores acoplados a proteína G.

Existen 15 Alfa, 6 Beta, 12 Gamma. Existen 10 Adenilato Ciclasa. Hay muchas fosfolipasas, muchos canales ionicos,
etc. Con la misma señal se pueden obtener respuestas diferentes. En las catecolaminas ocurren efectos en el corazón,
ahí existen los beta 1.

¿Qué tipo de receptor hay en el pulmón y en el corazón? PREGUNTA DE PRUEBA.

Si hay más beta 1 en el corazón y más beta 2 en el pulmón, las catecolaminas actuarán en mayor cantidad sobre el
corazón. En el salbutamol, actuará más sobre el beta 2. La secuencia de eventos será exactamente la misma si el efecto
es en el corazón o en el pulmón. La subunidad alfa va a interactuar con una proteína llamada Adenilato Ciclasa,
enzima que toma el ATP y forma el cAMP que es la formación de un ciclo. Esto dependerá si el nucleótido sea
Adenina o Guanina. La proteína G va a activar la adenilato ciclasa sea en el pulmón o en el corazón.

El cAMP dura nada, la idea es que sea muy transitorio y se degrade mediante la Fosfodiesterasa. En el pulmón una
persona con broncoconstricción se le puede dar salbutamol para relajar, existe otra opción donde se puede evitar la
degradación del cAMP mediante bloqueo de la fosfodiesterasa. Existe una serie de compuestos conocidos como 3-
metilxantinas, donde una de ellas es la cafeína. Hay alimentos que las contienen, en algunas personas que son
asmáticas se les da teofilina para que aumente el cAMP mediante inhibición de su degradación por la fosfodiesterasa.

Existen dos formas para aumentar el cAMP, una es aumentando la producción del cAMP y otra es inhibiendo la
fosfodiesterasa usando cualquiera de las 3-metilxantina. Por otro lado si se quiere reducir el cAMP se puede inhibir la
Adenilato ciclasa o aumentando la actividad de la fosfodiesterasa. Siempre hay que tener en consideración que en
cualquier sustancia se hablará de una concentración en equilibrio que va a depender de la formación y la degradación.

Qué tipo de receptor en el hígado hay? En el caso del tejido adiposo existe el receptor beta 3 adrenérgico, lo que hace
es desdoblar los triglicéridos y formar los acidos grasos. La contracción muscular se da por el aumento de calcio, en
una broncodilatación el calcio disminuye. El calcio es más alto en el medio extracelular (milimolar) que en el
intracelular (nanomolar), por lo tanto lo que se hace es abrir una puerta o un canal de la membrana plasmática para que
por gradiente de concentración el calcio ingrese a la celula. Otra fuente de calcio es en el retículo sarcoplásmico (de las
células musculares), este organelo está involucrado en la síntesis de proteínas y almacenamiento de calcio
(micromolar).

Los segundos mensajeros son captados por sensores, cuyos dominios reconocen por ejemplo al cAMP. La proteína que
une al cAMP por excelencia es la proteína quinasa A, cuya función es fosforilar (introducir un grupo fosfato). Se
requiere que para agregar un grupo fosfato esté el aminoácido Serina, Treonina o Tirosina que tienen en común un –
OH, cambiando el protón por el fosfato. Cuando se activa la PKA lo que se observa en la proteína es que estos
aminoácidos tendrán asociado el fosfato, cambiando de conformación por cambio de carga. Para fosforilar también se
requiere ATP, la PKA se llama “A” porque requiere que se una cAMP. La PKA está formada por dos subunidades C
de “catalítica” y dos subunidades R de “regulatorio”. En el estado inactivo de la PKA estos dos tipos de subunidades
se encuentran unidos. Cuando se produce cAMP por acción de la adenilato ciclasa el cAMP se va a unir a la proteína
R, que tiene dos sitios de unión, y va a provocar un cambio conformacional y la afinidad entre la R y la C se pierde y
se disociarán.

Cuando queremos producir broncodilatación activando el receptor beta 2 la catecolamina se une al receptor, cambio
conformacional, se reconoce con la proteína Gs, se va a activar, se va a separar alfa de beta/gamma, la alfa va a tener
unido GTP en el estado activo, va a cambiar la conformación, interacciona con la adenilato ciclasa, cambia de
conformación y va a pasar de un estado inactivo a uno activo, la adenilato ciclasa va a tomar el ATP y va a formar el
cAMP, una vez que se forma el cAMP, este migrará y se unirá a la subunidad R de la PKA para liberar la subunidad
catalítica que tiene la capacidad de fosforilar.

Una proteína quinasa es una enzima que tiene la característica de fosforilar solamente activada por segundos
mensajeros. Cada vez que se introduce un fosfato hay un cambio conformacional. NO PORQUE SE FOSFORILA
UNA PROTEÍNA SE PUEDE ACTIVAR. A veces se produce el efecto opuesto: inactivar.

Tenemos glicógeno, se forma mediante la glicógeno-sintasa, no es una reacción reversible. Existe otra reacción que
lleva a la degradación del glicógeno. Se puede jugar con ambas según lo que se desee hacer con el glicógeno. Para
degradar glicógeno la PKA tiene que inhibir la formación de glicógeno, algo se le debe hacer a la glicógeno sintasa.

Las fosfatasas están encargas de remover el grupo fosfato del sustrato.

Existen otros receptores que en vez de aumentar los niveles de AMPc, la disminuyen como la proteína Gi. Lo que hace
cuando interacciona con la Adenilato Ciclasa la inhibe, esto tiene como consecuencia que los niveles de AMPc
disminuyen, la PKA estará menos activa.

El cólera es una enfermedad seria, ocurre por problemas gastrointestinales, la persona se deshidrata, vomita, debe estar
hospitalizada. Otro ejemplo es la tos convulsiva, fundamentalmente define al sistema inmune. Se producen toxinas de
cada uno, Toxina del cólera y toxina pertussis. Dos enfermedades, dos microorganismos totalmente distinto, el
mecanismo por el cual actúa sobre el organismo es semejante.

La subunidad alfa tiene un dominio donde une GTP o GDP, otro que le permite interaccionar con las otras
subunidades, otro donde se una la Adenilato Ciclasa, la subunidad alfa tiene una enzima que se llama dominio
catalítico, muy próximo a la zona donde se une GTP/GDP (Se llama dominio GTPasa, donde hidroliza el GTP y lo
pasa a GDP). La subunidad tiene un tiempo molecular donde luego actúa la GTPasa para pasar de un estado activo a
uno inactivo.

La toxina del colero interacciona en el dominio catalítico, introduciéndole un grupo químico que hace que cambie de
un estado activo a un estado inactivo, ese grupo se conoce como ADP ribosa. La subunidad alfa normalmente no tiene
ADP ribosa. Un análogo de la ADP ribosilación sería cualquier modificación covalente.

El vibrio cólera dentro de su genoma es capaz de producir la toxina del cólera (Buscar información de él).
Si la adenilato ciclasa siempre está activa, es porque la subunidad alfa siempre va a tener GTP unido y la enzima
catalítica no va a hidrolizarla. Se conoce con tanto detalle que la Arginina 201 es un aminoácido clave en la actividad
catalítica de la GTPasa y lo que hace es que toma el NAD que se encuentra en el interior de la celula, lo corta y libera
la nicotinamida y se forma la ADP ribosa. La ADP ribosilación inactiva la GTPasa y como consecuencia la subunidad
alfa queda siempre unida a GTP, quedando siempre encendido y el sistema de apagado va a estar inhibido. Mucho
cAMP actúa sobre la PKA y esta va a estar fosforilando una serie de canales fundamentalmente de Cloruro y canales
de agua y eso explica los desequilibrios ionicos que se producen y provoque la situación de diarrea, no es reversible.

El calcio, a diferencia de cAMP, no se sintetiza ni se degrada. Cada vez que se quieren subir los niveles de Calcio en la
célula, todas aquellas reacciones que van a permitir el aumento de calcio, se les llamara reacciones de
encendido/apagado. Dentro de la celula hay una serie de tampones de calcio (proteínas, moléculas, etc) que quelan el
calcio, también hay organelos que capturan el calcio (mitocondrias) porque varias enzimas del ciclo de krebs son
dependientes de calcio, esto explica por qué algunas mitocondrias están cerca de la superficie celular y del retículo
sarcoplásmico. También existen bombas para sacar el calcio.

Las espigas producen un patrón único como código de barra que la celula o ciertos sensores celulares son capaces de
leer. Como son capaces de producir esas espigas? Porque se va jugando con el movimiento del Calcio:

Cuando queremos aumentar los niveles de Calcio, se debe permitir la apertura de canales de Calcio pudiendo regular la
apertura. Existen canales sensibles a voltaje, basta que se produzcan fluctuaciones para hacer un cambio potencial en
la membrana, cambiando las conformaciones de los canales y permitiendo el ingreso de Calcio. Adicionalmente hay
sistemas receptores, estimulos, primeros mensajeros que son capaces de controlar la PKA que cuando se activa uno de
sus sustratos fosforila el canal de calcio que se encuentra en la superficie.

Por que el cAMP en la reacción de alarma mi corazón late más? La PKA fosforila los canales de Calcio, favorece la
conformación que deja ingresar más calcio, produciendo más contracción. En este caso hablamos de fuerza contráctil
(efecto inótropico positivo), la frecuencia también cambia (efecto cronotropico positivo). Tanto cAMP como Calcio
van de la misma mano, favoreciendo la contracción por acción de las catecolaminas.

La PKA también fosforila los canales del retículo sarcoplásmico. En el caso del cardiomiocito, la contracción se da
porque hay mayor nivel de calcio por dos mecanismos: Por fosforilación sobre los canales de la membrana plasmática
y sobre el retículo sarcoplásmico.

Los canales del retículo sarcoplásmico son complejos porque funcionan como receptores (RECEPTOR DE
RIANODINA). La rianodina es un compuesto químico artificial que cuando lo agregamos experimentalmente se
produce mayor contracción y liberación de calcio. El ligando endógeno que hace esto es el calcio. Parte del calcio que
viene de afuera, su misión es difundir por el citosol, llegar a la superficie del retículo y activar este canal.

En el corazón, la celula que permite la contracción es el cardiomiocito, uno es capaz de dilatar las señales de calcio
agregando una sonda fluorescente de calcio. Existen varias sondas como el fluo3am, el fluo4am. AM es
acetometoxiester que se le agrega externamente, permitiendo difundir por la membrana plasmática, pero dentro de ella
existen esterasas que recortan el AM y dejan el fluo3 o fluo4 confinado al interior de la celula sin que se arranque. La
gracia de esto es que cuando el calcio se une a estos sensores fluorecen.

Existe otro sistema que se relaciona con calcio porque existen algunos neurotransmisores y hormonas que utilizan
receptores acoplados a proteína G. La proteína que usan es Gq, la Alfa-q utiliza la Fosfolipasa C, que es la formadora
de 3 segundos mensajes: Un lípido llamado diacilglicerol (DAG), una molecula con carga llamada Inositol trifosfato
(IP3) y también con la generación indirecta de calcio.

¿Cómo se liberan estos segundos mensajeros? En la membrana plasmática existen múltiples tipos de lípidos, hay uno
particular conocido como PIP2 (Fosfatidil Inositol trifosfato) que en su estructura posee un glicerol, y dos alcoholes
que en vez de tener un lipido en esos –OH, tienen un inositol fosfato (azúcar). La zona más lipidica se encuentra
inserta en la membrana y la zona que tiene carga estará más cerca del citosol. La fosfolipasa C corta el –OH y queda el
inositol liberado, quedando con tres grupos fosfatos: IP3. El IP3 difunde y viaja a la superficie del retículo, uniéndose
al receptor IP3, que es un canal parecido al de Rianodina, produciendo la liberación de Calcio.

La contracción muscular se produce por acción de Actina y Miosiona que están asociadas a ciertos tipos de Troponina,
en el musculo es la troponina C que inhibe el complejo. Cuando se quiere activar el complejo es que el Calcio se une a
la troponina C, quedando la Actina y la Miosina libres para ejercer la acción muscular.

Clase 22 Marzo 2018:

La PKC en el dominio C2 une calcio. Es un dominio especializado. Cuando une calcio queda como semi-activo pero
logra su completa actividad cuando se recluta la membrana biológica y un dominio de la PKC denominado C1
interacciona con el DAG, quedando completamente activa.

En el asma hay un proceso de bronco constricción. Normalmente en un tubo bronquial cambian significativamente el
calibre porque están rodeados de células musculares. En el caso de asmáticos el asma se puede dar por dos tipos
distintos: neurogénica y alergénica. La sintomatología es muy parecida por la broncoconstricción.

En el caso de la neurogénica esta involucrado el SNC y en el SNC hay acciones que inervan el árbol bronquial.
Particularmente es de tipo colinergco y el mediador que es ACh actúa sobre receptores muscarínicos. Cuando se
activan usan Gq, donde se genera IP3, DAG y el Calcio está involucrado en producir la contracción.

El asma de tipo alergénica es cuando estamos expuestos a estimulos de distinta naturaleza. Ejemplo: polen,
animales, acaros, etc. En este caso se libera histamina y activa el receptor H1. Tanto el receptor muscarínico como el
H1 son acoplados a proteína G. Tiene el mismo mecanismo que el del asma neurogénico.

90% del asma es de tipo alergénico. Lo que se quiere en el día de hoy es tratar de provocar una broncodilatación
rápida y aliviar la existencia de los asmaticos.

Uso de los imitadores de catecolaminas que son agonistas beta 2 adrenergico que se pueden usar como inhaladores,
tratando de aumentar los niveles de cAMP y provocar broncodilatación. Otro medicamento del cual se hablo es de la
3-metilxantina cuyo blanco es la fosfodiesterasa de AMPc inhibiéndola.

El calcio se une a la calmodulina, por un lado con el calcio hace ciertas acciones sobre el aparato contráctil y es un
activador de la fosfodiesterasa de AMPc. Por lo tanto, se reducen los niveles de AMPc sobre esta celula.

Para producir contracción necesitamos altos niveles de calcio y bajos niveles de AMPc. En caso de asma neurogénica
o alergénica lo que vemos es que aumenta el calcio, por lo tanto hay un aumento en la contracción. Tambien el calcio
regula la actividad de la fosfodiesterasa de AMPc. Si se activa la fosfodiesterasa los niveles de AMPc disminuyen.
La PKC fosforila canales ionicos, fosforila bombas y fosforila conexinas que forman parte de las gap junctions que
permite conectar dos células. Adicionalmente participan en la muerte celular, migración celular, proliferación de las
células, especialización.

La glucosa químicamente es una azúcar que tiene grupos hidroxilos, aldehídos. Por lo tanto son compuestos
reductores sumamente reactivos. Puede reaccionar con muchas cosas. Cada vez que aumenta en la sangre, se busca
que aumente pero que rápidamente entre a las células, para que entre se requieren transportadores de glucosa.
Particularmente está la GLUT-4 que es el único que es controlado por la insulina. Cada vez que aumenta el nivel de
glucosa en la sangre aumenta la insulina en la sangre. Como entra la glucosa?

Los transportadores están cerca de la membrana plasmática, por lo que tienen que translocarse para que la glucosa
logre entrar a través del transportador. En una celula en reposo, los transportadores están en el citosol. El GLUT-4
está dentro de la vesícula. Esta vesícula lipídica se funciona con la membrana, entonces los transportadores
funcionan de canales. Debe haber una señal para que los transportadores se muevan a la membrana. La señal es la
insulina, esta tiene que ser reconocida por un receptor. Existen dos ejemplos de receptor: de insulina y los Epidermal
Growth Factor. Los EGF se descubrieron en la salida de los roedores. Nosotros cuando nos hacemos una herida en el
dedo nos chupamos porque la saliva también tiene egf, gracias al egf tiene propiedades regeneradoras, estimula la
proliferación y diferenciación.

Los factores de crecimiento controlan la proliferación de las células y su diferenciación. Como el EGF hace estas
acciones? Tiene un receptor que se encuentra en la membrana. Aunque estructuralmente no se parece al receptor
de insulina, se comportan de manera análoga puesto que ambos receptores simultáneamente tienen una actividad
enzimática. Como cualquier receptor, va a tener un dominio que reconocerá al ligando y lo unirá. El ligando puede
ser la insulina o el egf, por lo tanto al unirse se cambia la conformación del receptor. Los receptores en vez de tener
proteína g en su propia estructura tienen una enzima que usan sustratos que son capaces de ser modificados. La
actividad enzimática se llama K, es decir, es una quinasa. Cuando el receptor de insulina se activa se despierta es la
actividad enzimática, comportándose como la PKA o PKC, fosforilando proteínas. Los sustratos son proteínas, por lo
tanto se fosforilarán. A diferencia de PKA y PKC, dentro de la proteína van a haber aminoácidos susceptibles de
fosforilarse: la serina, treonina y tirosina. Estos receptores fosforilan residuos de tirosina que se encuentran
presentes en la proteína. Por este motivo la actividad catalítica se llama TK.

Las PKA y PKC fosforilan serinas y treoninas porque los sustratos que fosforilan tienen alguno de estos aminoácidos.

Solamente el 1% del total de fosforilaciones se efectúan en tirosinas. A pesar de ser muy pocas, son extremadamente
relevantes.

El receptor de egf y el de insulina tiene en común esta actividad catalitica. Son receptores TK con actividad intrínseca.

La diferencia que tiene el receptor de insulina con los otros receptores es que el el primero esta formado por dos
subunidades: dos alfa y dos beta. La alfa permite reconocer la insulina y la beta transducen.

Lo que hace la actividad de la tirosina quinasa es la autofosforilación del propio receptor. Que significa esto? Con la
unión del ligando una subunidad fosforila a la que esta al lado. Para que fosforile la secuencia debe tener tirosina. El
receptor de insulina por dentro, en la región citosólica, se le pegan grupos fosfatos en las tirosinas. Para que sirve
esto? Cuando se fosforila en tirosina cambia la conformación. Es como un adaptante para una serie de proteínas que
se encuentran en el citosol para que se unan físicamente al receptor. Ejemplo del árbol de pascua que se le van
pegando adornos. Una proteína que va a reconocer al receptor fosforilado es la fosfolipasa C, esta fosfolipasa es de
tipo gamma. Se asocia con los receptores de tirosina quinasa y la fosfoilpasa C de tipo beta a receptores acoplados a
proteína G.

Dependiendo del nivel de insulina, de la señal, se van a producir distintos tipos de fosforilación en tirosina.

La proteína mas importante que se asocia al receptor de insulina es la IRS. La IRS contiene muchas tirosinas. Una
zona del IRS, un dominio PTB, es capaz de reconocer particularmente la secuencia de aminoácidos que contiene
tirosinas. Al asociarse, la actividad catalitica, comienza a fosforilar alguna de las tirosinas de la IRS con la finalidad de
atraer otras proteínas.

Por lo tanto: Unión de ligando a las dos subunidades alfa – Cambio de conformación sensado por dos subunidades
beta – Autofosforilacion en residuos de Tirosina – Reclutamiento y reconocimiento de IRS-1 por el dominio PTB – IRS
se fosforila – IRS recluta otras proteínas (PI3-quinasa, cuyo dominio es SH2) – Activación PI3-quinasa (p110) –
Formación de PIP2 y PIP3 – Señalización para reclutar otras proteínas (AKT y Pdk1) – PDK1 fosforila AKT – Activación
completa de AKT.

Todos los dominios PTB se especializan en el reconocimiento de tirosinas. También existen los dominios SH2 que le
permite reconocer tirosinas fosforiladas. El SH2 no está en el IRS, sino que está en otra proteína que reconoce a la
zona del IRS fosforilado. La proteína que se activa se conoce como PI3-quinasa, esta posee dos subunidades p110 y
p85, p85 es la forma regulatoria y p110 es la forma catalítica. El IRS se une a la unidad p85 reguladora y deja activa a
la unidad catalítica, fosforilando a lípidos como el PIP y el PIP2, fosforilándolos a PIP2 y PIP3 respectivamente, ambos
son segundos mensajeros que van a estar en la membrana plasmática, tienden a tener la misma función que el DAG,
permitir el reclutamiento y la activación. Por lo tanto PIP2 y PIP3 van a reclutar proteínas que están en el citosol.
Estas proteínas poseen dominios PH. Toda proteína que tenga este dominio PH va a reclutarse y adosarse a la
membrana. EDK o AKT poseen estos dominios y se unen principalmente a PIP3.

Se pueden formar tanto PIP2 como PIP3 pero siempre hay mayor afinidad por PIP3

Hay una proteína importante que tiene dos nombres: PKB, luego AKT. Esta proteína está inactiva en el citosol, sensa
esta superficie que se generó (PIP2), tiene el dominio PH, se une y adquiere otra conformación. Se recluta otra
quinasa Pdk1. Se posicionan juntos, se activan, la akt parcialmente y la Pdk1 totalmente. La Pdk1 fosforila a la AKT y
la akt queda totalmente activa. La AKT es el efector más importante de la acción de la insulina.

Por qué es importante AKT? Porque controla la síntesis de glicógeno, de proteínas, de lípidos, controla que la celula
permanezca viva, participa de la transcripción de genes, participa de la proliferación celular.

En cáncer, sistemáticamente donde uno encuentra siempre mutación es en esta vía de transducción de la insulina o
de los egf.

La AKT cambia el comportamiento de una proteína conocida como AS160 fosforilandola. Inactiva por fosforilación a
AS160. Es inactiva porque lo que hace normalmente en reposo, es controlar a la proteína G pequeña conocida como
RAT inactivándola. Por lo tanto RAT está unida a GDP. Al inactivar por fosforilación RAT-GTP se active y permita
migrar a la superficie.
Existen dos tipos de Proteina G, las heterotriméricas que están formadas por alfa, beta y gamma. Existe otro tipo de
proteína G: las pequeñas, solamente están formadas por subunidad alfa. El mecanismo de activación es igual en las
dos, vía GTP.

Los terceros mensajeros son los factores de transcripción.

Son proteínas profesionales que regulan la transcripción de genes.

La PKA controla la actividad de diferentes facotres de transcripción.

Las hormonas esteroidales difunden a través de la membrana y el receptor se encuentra en el citosol. El receptor
unido a ligando es un factor de transcripción. Existen aproximadamente 30.000 genes. Se dividen en genes de
respuesta primaria o Smart Genes, estos representan 1000 genes, los otros son los de respuesta secundaria o tardía.
Los Smart genes son los responsables de generar los factores de transcripción.

Existe una región codificadora, inmediato a ella es el terminador y antes de ella es el promotor. El sitio +1 es al
comienzo de la región codificadora. Los factores de transcripción representan un alfabeto nuclear, explica de como
nuestros genes se encienden o están permanentemente apagados. Existe una combinación precisa de factores de
transcripción que conlleva a la transcripción o a inhibirla, algunos factores son capaces de unirse al DNA.

La forma activa de estos factores es al menos dimérica, formando un homodimero si el mismo factor de transcripción
interacciona con otro o un heterodimero.

En la fecundación, los gametos se fusionan y comienza a haber una duplicación de material genético, donde la
transcripción requiere de los factores de transcripción maternos.

El gen de la insulina esta sumamente controlado, pero hay una combinación precisa de factores de transcripción que
permite que se exprese en las células beta del páncreas.

Los Smart genes son capaces de controlar su propia transcripción.

80% de los factores de trancripción se clasifican en tres clases de acuerdo a su conformación espacial.

Los receptores de hormonas esteroidales son factores de transcripción. Existe un grupo que es capaz de reaccionar
frente a señales externas, uno sensa los niveles de colesterol que tenemos. El p53, guardian del genoma, ante
situación de estrés se activa y ejerce su acción. Existe otro grupo que le gusta viajar entre nucleo y citosol, por
ejemplo la insulina que controla un control de transcripción llamado foxom, foxom cada vez que está dentro del
nucleo activa la muerte celular. La akt fosforila a foxom, logrando que este se quede en el citosol.

El mecanismo de transcripción de receptores esteroidales es lento. Los factores de transcripción reconocen al

ligando y al promotor, existe un mecanismo genómico porque precisamente entran, se traslocan, se unen, etc,
favoreciendo o no la transcripción de genes. Los receptores de estrógenos adoptan una conformación de dedos de
zinc, a partir de esto se reconoce el DNA. Se llaman dedos de zinc porque tienen cisteinas que son capaces de cortar
el zinc.
P53 es un factor de transcripción que en todas nuestras células se está formando pero también se va degradando si
la celula está en optimas condiciones. Las células tumorales se caracterizan porque tienen alto p53, está atento a la
proliferación celular, activándose ante algún cambio y provocando una acción, primero sobre la senescencia sobre la
muerte celular y la diferenciación. El p53 puede ejecutar un programa de muerte celular. También es capaz de
detener el ciclo celular. P53 al ubiquitinarse se degrada.

Factores de transcripción regulados por receptores de superficie.

NFAT esta dentro del citosol o dentro del nucleo, se une al promotor y controla la expresión de un canal de calcio,
controla la expresión de ip3, controla su propia expresión. Quien activa NFAT? Calcio.

El NFAT en una celula en reposo está hiperfosforilado, cuando aumentan los niveles de calcio de manera sostenida la
calmodulina se asocia, adopta una conformación y activa a la calcinemurina. La calcinemurina fosfatasa defosforila
NFAT.

DSCR también se llama CAIN, NFAT es capaz de codificar para su propio inhibidor.

El NF-k-beta es dimérico y este factor se encuentra inhibido en el citosol y cuando viaja al nucleo se une al promotor
con otros factores de transcripción, activando así determinados programas. A veces junto con la inflamación,
promueve factores antiinflamatorios. Este factor es importante porque se puede ver en el VIH, por ejemplo, activan
estos mecanismos de transducción y liberan al nf-k-beta de su inhibidor y lo activa. P50 y p65 son los inhibidores. NF-
k-beta permite la expresión de genes, y entre ellos controla la expresión de su propio inhibidor.