LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA 031020

Practica 4: Cromatografía en capa fina.

Hilary Kate Inagan Huertas Kate.inagan@udea.edu.co
Wendy Vanessa Rojas Cortes Wendy.rojasc@udea.edu.co

Cromatografía de capa fina.

Resumen

Se realizó de manera experimental el método de separación conocido como “cromatografía de capa fina” que
consiste en tomar dos placas delgadas que sirvan de material de soporte (en este caso, placas de aluminio) y sembrar
con ayuda de un capilar una muestra patrón compuesta de ácido gálico, resorcinol y β-naftol en el lado izquierdo de
las placas y del lado derecho, sembrar una muestra desconocida. (Fase estacionaria)
Posteriormente, se procede a depositar una placa en una cámara que contenga una mezcla de hexano-acetato de
etilo en proporción 8:2 y repetir este procedimiento con la segunda placa en proporción 6:4. La fase móvil debe
ascender a las placas y al llegar hasta cierto punto, se debe retirar la placa de la cámara con la mezcla.
Al retirar la placa, se debe dejar secar y luego introducir en la cámara de yodo por 5 minutos, y se procede a analizar
los resultados que se obtuvieron.
Palabras clave: Placa, Fase móvil, fase estacionaria, cromatografía.

Introducción Marco teórico

En este informe se pretende analizar los procesos y
resultados que se obtuvieron al realizar el método de
separación cromatográfica que se define como “la
diferencia de distribución de los componentes de una
mezcla entre dos fases inmiscibles, una móvil y una
estacionaria”. En esta práctica la fase móvil consistía de
una mezcla de hexano-acetato de etilo y la fase
estacionaria constaba de dos placas de aluminio
sembradas con una muestra patrón y una muestra
desconocida, todo esto con el fin de identificar cada
compuesto que se haya separado, su factor de retardo
y que tipo de solvente es el más efectivo dependiendo
la sustancia que se quiera separar.
Los resultados de laboratorio fueron regulares, los
posibles errores se debieron a factores humanos.
Objetivos:
•Conocer y adquirir experiencia de los materiales de
laboratorio y sus distintos usos.
•Comprender el concepto de cromatografía y factor
de retardo.
•Analizar, comparar y observar la eficiencia de ciertos
solventes utilizados para separar mezclas.
•Calcular el valor del 𝑅𝑓 para los compuestos
analizados.
Cromatografía: La cromatografía es un método físico
de separación en el que los componentes que se han
de separar se distribuyen entre dos fases, una de las Commented [afas2]: Valoración 15%
cuales está en reposo (fase estacionaria, F.E.) mientras
que la otra (fase móvil, F.M.) se mueve en una
dirección definida.
Fase estacionaria: Es la fase que se deposita sobre un
material de soporte (placas de aluminio o de vidrio)
Fase móvil: Es la fase que asciende a lo largo de la fase
estacionaria por capilaridad.
Capilaridad: La capilaridad es una propiedad de los
líquidos que depende de su tensión superficial (la
cual, a su vez, depende de la cohesión o fuerza
intermolecular del líquido), que le confiere la
capacidad de subir o bajar por un tubo capilar.
Frente de disolvente: Altura máxima que alcanza un
disolvente en la placa.
Materiales y equipo
• 2 placas cromatográficas.
• 2 cámaras.
• Cámara de yodo.
• 2 capilares.
• Muestra patrón y muestra desconocida.
Commented [afas1]: Valoración 10%

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4. Después de que el eluente haya ascendido
Sección experimental: “Resultados” hasta un poco antes de la parte superior de
cada una de las placas, las retiramos y
1. Tomamos dos placas cromatográficas, marcamos hasta donde subió el solvente.
trazamos una línea horizontal en uno de los
extremos luego sembramos en ellas la mezcla
patrón que está compuesta por ácido gálico,
resorcinol y B-naftol a lado izquierdo sobre la
línea trazada utilizando un capilar,
seguidamente sembramos a lado derecho una
muestra desconocida en este caso la muestra
50 que contiene B-naftol y acido gálico. Así:

5. Colocamos las dos placas ya marcadas dentro

de una cámara de yodo y las dejamos por 5
minutos. luego Observamos las manchas que
aparecen en cada una de las placas y
comparamos las manchas de los compuestos
patrones con las de los compuestos de la
muestra.

2. Introducimos unas de las dos placas

cromatográficas en una cámara que contiene
una mezcla hexano-acetato de etilo en
proporción 8:2 procurando que los solutos no Commented [afas3]: En esta sección es donde se
estén en contacto con el solvente. realiza el reporte de los Rf obtenidos, o sea sus
resultados y en el análisis los discute
3. Ahora introducimos la segunda placa Valoración 15%
cromatográfica en la misma cámara, pero en
proporción 6:4. Teniendo en cuenta que Estas
cámaras cromatográficas deben estar muy
secas para poder introducir las placas.

6. Elegimos la placa donde se obtiene mejor

separación e identificamos cada uno de los
compuestos separados para determinar su
factor de retardo y así poder discutir los
resultados.

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Análisis de resultados
 El primer punto a analizar son los términos
empleados en el procedimiento anterior
llamado cromatografía un método físico de
separación en el que los componentes que se
han de separar se distribuyen entre dos fases,
una de las cuales está en reposo
(fase estacionaria, F.E.) mientras que la otra
(fase móvil, F.M.) se mueve en una dirección
definida.
 El segundo punto a analizar es el efecto que
tiene la concentración en una cromatografía
de capa fina, con concentración nos referimos
a cuanta cantidad de muestra problema
coloquemos, como sabemos el resultado de
una cromatografía en capa fina es la
observación de manchas, el efecto que tiene la
concentración realmente es el tamaño que
nuestra mancha tendrá, es decir a mayor
concentración habrá una mancha de mayor
proporción, en este caso tuvimos una pequeña
variación que fue que las manchas se
presentaban alargadas, esto lo debemos a que
el punto de aplicación de las muestras en
donde se debía poner más de esta no fue en el
mismo lugar, aunque no fue un problema
mayor ya que la variación del Rf no fue
significativa.
 Nos damos cuenta también que el compuesto
patrón de las dos placas avanzó igual, pero en
la placa 6:4 se tornó de color mucho más
oscuro en el compuesto desconocido.
 El tercer punto a analizar es la identificación
de los compuestos separados teniendo en
cuenta que la muestra patrón estaba
compuesta por ácido gálico, resorcinol y β-
naftol (3 componentes) y la muestra 50 estaba
compuesta por β-naftol y acido gálico (2
componentes) Commented [afas4]: Acá ud debería decir
inmediatamente que había una completa identificación
de la muestra problema según lo observado en la
cromatografía y lo que teóricamente se esperaba y
luego lo pone como una conclusión de su trabajo
Esto es un reto de la práctica, o sea ud logró
determinar cual es la identidad de su muestra
problema?, o sea logró identificar???, este es el trabajo
científico, tomar un problema e intentar llegar a la
solución o solucionarlo o mostrar cual camino no
funciona para resolver el problema
7. Relacionamos la polaridad de los compuestos
orgánicos separados con la de los solventes
utilizados en la fase móvil.
 Relación de polaridades.
Un orden aproximado de polaridades entre
los compuestos separados y los solventes
empleados es:
Ácido gálico>resorcinol>β-Naftol
Concluyendo que entre más capacidad tenga
la sustancia de crear puentes de hidrogeno,
mas polar es.
Los componentes de la muestra desconocida
son el ácido gálico y el β-naftol, el ácido gálico
al ser un ácido orgánico con muchos grupos Commented [afas5]: Muchos grupos polares de tipo
polar (-OH) es la sustancia que tiene una alcohol o hidroxilo
menor velocidad de desplazamiento frenada
Commented [afas6]: Ya que es más adsorbida sobre la
por la fase móvil que es polar lo que hace que superficie de la silica gel por tener más afinidad
sea la que quede más cerca de la línea
marcada por nosotros, La fase móvil realiza la labor de retirar o generar
contacto con el soluto adsorbido para retirar estas
interacciones de adsorción, no lo frena antes intenta
llevársela consigo
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sustancia, el factor de retardo será menor y
en cambio, el β-naftol es el que se observa en viceversa. Commented [afas8]: Demasiado espacio
la parte más arriba teniendo una velocidad de
Commented [afas9]: Muy bien, aquí algo importante
desplazamiento mayor, el β-naftol en su
es el concepto de resolución entonces lo que hay que
estructura posee dos anillos bencénicos observar es que hay muy buena separación entre las
haciéndola muy poco polar, aunque tiene un manchas o valores de Rf claramente diferenciados o
Conclusión
grupo OH polar no tiene un efecto separados
significativo. Valoración 23%
El tipo de cromatografía dependerá de la
naturaleza de la fase móvil y estacionaria. La
Entonces:
polaridad de eluyente determinara la Commented [afas10]: del eluyente determinará
En orden de menor a mayor en cuanto a
efectividad de éste como disolvente en la
polaridad:
cromatografía de capa fina. El número de
manchas notables en la placa cromatográficas
 Sustancia C: β-Naftol.
será el número de componentes presentes en
 Sustancia B: Resorcinol.
la sustancia. Si las manchas de la placa Commented [afas11]: Acá era buena una conclusión
 Sustancia A: Acido gálico.
cromatográficas aparecen cerca del punto de de su trabajo:
aplicación será debido a que son más polares Se logró la identificación de una muestra problema de
con respecto al eluyente, y si aparecen más ácido gálico y betanaftol…..
cercanas a la frontera del eluyente quiere decir Valoración 12%
8. Relación de polaridad y el factor de retardo:
que son menos polares con respecto al
eluyente.
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑜 Commented [afas7]: Este cálculo es mejor organizarlo
𝑅𝑓 =
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒 en la sección de Resultados y cálculos, ya luego lo
Cuestionario discute en la sección de análisis
1. ¿qué tipos de cromatografía se utilizan
 Dd :4 cm
según la fase estacionaria? Commented [afas12]: Cromatografía de adsorción (las
 Sustancia A:0.6 cm
normales HPLC, GC, TLC, HPTLC, fase estacionaria
 Sustancia B:2 cm sólida, de distintas categorías puede ser C18, o sílica
 Cromatografía plana: Cromatografía en papel
 Sustancia C:3.5 cm gel, entre otras)
Cromatografía en capa fina (TLC)
Cromatografía de partición (la fase estacionaria puede
0.6 ser un líquido soportado sobre un soporte sólido)
𝑅𝑓𝑎 = = 0.15  Cromatografía en columna: Cromatografía de Cromatografía de exclusión por tamaño (soporte sólido
4
gases (GC) Cromatografía líquida (LC) en forma de esferas microscópicas que realizan
separación por tamaño molecular)
cromatografía líquido - líquido Cromatografía de intercambio iónico (la fase
2 estacionaria es una resina de intercambio iónico)
𝑅𝑓𝑏 = = 0.5 cromatografía sólida – líquido
4 Son cromatografías que se clasifican según la
interacción del soluto con la fase estacionaria, esta fase
3.5 2. ¿para que se utiliza la cromatografía y en que estacionaria en algunos casos puede ser líquido y
𝑅𝑓𝑐 = = 0.87 se diferencia de la electroforesis? configura determinadas cromatografías como son
4
Cromatografía líquido-líquido y cromatografía gas-
 La técnica cromatográfica es muy útil el líquido
Factor de retardo Sustancia proceso se basa en el hecho de que diferentes
0,15 Sustancia A moléculas se comportan de manera diferente
0,5 Sustancia B cuando se disuelven con un solvente y se
0,87 Sustancia C mueven a través de un medio absorbente. Commented [afas13]: Demasiado espacio entre
párrafos
 (Las sustancias mencionadas en la tabla se
encuentran organizadas en orden de
polaridades, mayor a menor). Como se
aprecia en la tabla el factor de retardo es Commented [afas14]: Electroforesis no es
inversamente proporcional al nivel de cromatografía, en cromatografía se usan columnas
polaridad, es decir, entre más polar sea una  La electroforesis es una cromatografía, pero la empacadas con fase estacionaria de diferente
naturaleza química, en electroforesis usa un gel al cual
fuerza que hace a mover a las moléculas es un
le aplican un campo eléctrico, en cromatografía no se
aplica campo eléctrico al sistema

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campo eléctrico y las separa. En una
cromatografía común son las propiedades
mismas de las moléculas que hacen que se
separen, por ejemplo, su solubilidad en
diferentes líquidos, por ejemplo, agua y
alcohol.
3. ¿en qué campos es más útil la cromatografía
sobre papel?
La cromatografía en papel es un proceso muy
utilizado en los laboratorios para realizar
análisis cualitativos ya que pese a no ser una
técnica muy potente no requiere de ningún
tipo de equipamiento.
La fase estacionaria está constituida
simplemente por una tira de papel de filtro. La
muestra se deposita en un extremo colocando
pequeñas gotas de la solución y evaporando
el solvente.
Luego el disolvente empleado como fase
móvil se hace ascender por capilaridad. Esto
es, se coloca la tira de papel verticalmente y
con la muestra del lado de abajo dentro de un
recipiente que contiene fase móvil en el
fondo.
Después de unos minutos cuando el solvente
deja de ascender o ha llegado al extremo se
retira el papel y seca. Si el solvente elegido fue
adecuado y las sustancias tienen color propio
se verán las manchas de distinto color
separadas. Cuando los componentes no
tienen color propio el papel se somete a
procesos de revelado.
Hay varios factores de los cuales depende una
cromatografía eficaz: la elección del solvente
y la del papel de filtro.
4. Menciones cinco solventes que se utilicen en
TLC
 Hexano (muy apolar)
 Diclorometano (bastante apolar)
 Éter dietílico (algo polar)
 Acetato de etilo (bastante polar)
 Metanol (muy polar)
5. ¿se podrá utilizar agua como solvente en
TLC?
 No se la puede utilizar debido a que no es Commented [afas17]: Se puede utilizar, por ejemplo
muy volátil y tardaría demasiado tiempo en para hacer más polar la fase móvil, por ejemplo puede
ascender por la fase estacionaria de sílica, usar Hexano-eter-agua 2:1:1, la pregunta va
pero la principal razón es que al ser un relacionada en este aspecto
compuesto muy polar no interacciona con los
solutos que en su mayoría son compuestos Commented [afas15]: Se usa mucho en separación de
orgánicos, esto hace del agua una pésima fase pigmentos
móvil en la cromatografía de capa fina.
6. Si se tiene como eluente hexano-éter 1:1 y
necesita aumentar la polaridad de este ¿Cuál
de los dos componentes?
 se aumenta la proporción de éter dado que
éste es el único compuesto polar de los dos,
aunque el éter es ligeramente más polar que
el hexano. Con mayor concentración de éter
el eluyente sería ligeramente más polar (el
hexano, es un compuesto apolar como
cualquier alcano).
7. A un eluente benceno-cloroformo 1:1 se
requiere disminuir la polaridad ¿Cuál de
los dos componentes aumentaría?
 De los dos componentes sólo el cloroformo es
una sustancia polar (el benceno es
completamente apolar) por lo tanto se debe
disminuir la concentración de este en el
eluyente para que tenga menor poder
eluyente (una proporción de 2:1 o 3:1,
cualquiera valdrá).
8. ¿en qué se diferencian los términos
adsorción y absorción?
Commented [afas16]: Mucho espacio en la línea de
texto
 Se llama sorción a los procesos químicos y
físicos por los que una sustancia
queda agregada o unida a otra sustancia, cada
una proveniente de fases separadas. Según
como se produzca, la sorción se puede
clasificar en diferentes tipos, los dos más
comunes son la absorción y la adsorción. El Commented [afas18]: Valoración 11%
fenómeno contrario a la sorción es
la desorción.
 La diferencia clave entre ambos procesos es
que en la absorción hay transferencia de masa
y volumen entre ambas fases, mientras que la
adsorción es un fenómeno superficial y cada
fase permanece separada.
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Bibliografía

http://www.profesorenlinea.cl/fisica/Capilarida
d.html Commented [afas19]: Valoración 5%

http://biomodel.uah.es/tecnicas/crom/inicio.htm Commented [afas20]: Introducción 15%

Objetivos 10%
Resultados 15%
http://blog.utp.edu.co/docenciaedwin/files/2014
Discusión 23%
/09/TIPOS-CROMATOGRAF%C3%8DA.pdf
Conclusiones 12%
Cuestionario 11%
https://www.uam.es/docencia/jppid/document Bibliografía 5%
os/practicas/actuales/guion-p6.pdf
Total 91/100=4,6
https://curiosoando.com/que-diferencia-
absorcion-y-adsorcion

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