NSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

QUÍMICO BACTERIÓLOGO PARASITÓLOGO

REPORTE DE LABORATORIO
Fecha: 4-Abril-2018 Grupo: 4QM1
Integrantes: Equipo: 1 Sección: 1
· Bolaños Nicolás Lilia
· Mérida Romano Adarely Nayfé

COMO SE VE AFECTADA LA VELOCIDAD ENZIMÁTICA DE LA HIDRÓLISIS DE SACAROSA A

DIFERENTES pH Y DISTINTAS CONCENTRACIONES DE LA INVERTASA

OBJETIVO
● Demostrar que la velocidad de la
reacción enzimática es directamente
proporcional a la concentración de
enzima.
● Analizar la importancia del pH del
medio sobre la velocidad de la reacción
enzimática.
● Efecto del carácter iónico de la enzima
y el sustrato.

RESULTADOS
Tabla 1. Efecto de la concentración de enzima
*Regulador de fosfatos 0.2 M

Cálculos de la concentración de enzima:

Tubo 1: Tubo 2:

Tubo 3: Tubo 4:

Tubo 5:

Tabla 2. Efecto del pH


DISCUSIONES
Las enzimas poseen grupos químicos ionizables
(carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH;
imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus
aminoácidos; el pH les da la propiedad de
encontrarse ionizables o no y les proporciona
carga. Las enzimas por ser proteínas tiene enlaces
débiles que le dan la estructura tridimensional en el
espacio, por lo tanto, un cambio en el pH
ocasionará que los grupos ionizables se
modifiquen rompiendo los enlaces débiles que le
dan la forma perdiendo así su estructura y con ello
el sitio activo que le permite realizar toda la
actividad catalítica. Por lo tanto habrá un pH en el
cual la conformación será la más adecuada para la
actividad catalítica, conocido como pH óptimo que
se considera también como el pH donde la
velocidad enzimática es máxima. En el caso de la
invertasa al realizar la gráfica correspondiente se
logró identificar un crecimiento sigmoidal, donde
se identificó el pH óptimo de la invertasa que es de
5.
La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los
cambios de pH. Desviaciones de pocas décimas
por encima del pH óptimo pueden afectar
drásticamente su actividad. Es por ello que todas
las reacciones catalíticas no se llevan a cabo a un
pH óptimo ya que este al variar en tan solo una
décima decaería la velocidad, desnaturalizando así
la enzima, es por ello que se llevan a pH menores
al óptimo.
Pero no solo se afecta la velocidad de reacción por
el pH sino también por la concentración de enzima
que usemos. Esto debido a que al aumentar la
concentración de la enzima hay una interacción
entre varias enzimas sobre el sustrato lo que
incrementa la velocidad de reacción, esto se
deduce cuando al aumentar la concentración de la
enzima, asciende la velocidad de reacción de
forma directamente proporcional. El sustrato se
encuentra saturado de enzimas que están llevando
a cabo su actividad catalítica.
Cuando se graficó la velocidad enzimática de la
invertasa sobre su concentración se logró observar
que hubo un incremento proporcional, a excepción
del último dato que fue un error en la técnica,
concluyendo con ello que la invertasa al
encontrarse en mayor concentración aumenta la
velocidad enzimática. Sin embargo una limitante
de la enzima será la concentración del sustrato ya
que si este se acaba no habrá reacción que llevar a
cabo, por lo tanto se detendrá la actividad
catalítica.
CONCLUSIONES
El pH y la concentración de enzima tiene un efecto
positivo o negativo sobre la actividad catalítica de
las enzimas.
El pH óptimo de la enzima invertasa es de 5, sin
embargo trabaja a pH menor a éste (4,7 como se
usó en las demás prácticas).
El incremento en la concentración de la enzima
invertasa, aumenta de manera proporcional la
velocidad de la reacción.
BIBLIOGRAFÍA
● J.M. García-Segura, J.G. Gavilanes, A.
Martínez del Pozo, F. Montero, M.
Oñaderra y F. Vivanco. (1999)
Técnicas Instrumentales de Análisis en
Bioquímica. Editorial Síntesis. pp 215-
219
● Rosa P., Oliver I. & Rodríguez A.
(2003) “Bioquímica: Técnicas y
métodos”, Madrid: Hélice pp. 216-231.