CURVA TIPO DE AZÚCARES REDUCTORES

INTRODUCCION 0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙

𝑋 0.4 𝑚𝐿 𝑋 = 2𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
Los carbohidratos pueden clasificarse ya sea en
azucares reductores o no reductores. Los azucares 2𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 2 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟒 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
reductores, que son los más comunes, tienen la
capacidad de funcionar como agentes reductores debido Tubo 4: 0.8 mL de glucosa al 0.0005 M
a que están presentes en la molécula grupos aldehídos
libres o potencialmente libres como en las formas 0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙
𝑋 0.8 𝑚𝐿 𝑋 = 4𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
hemiacetálicas cíclicas. Este grupo aldehído es oxidado 1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
fácilmente a ácido carboxílico en pH neutro por enzimas
y agentes oxidantes moderados. Esta propiedad se 4𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 4 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟖 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
utiliza para detectar y cuantificar monosacáridos,
Tubo 1: 1 mL de glucosa al 0.0005 M
especialmente glucosa, en fluidos biológicos como la
sangre y la orina.
0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙
𝑋 1 𝑚𝐿 𝑋 = 5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
Los grupos aldehído y cetona de los monosacáridos 1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
pueden reducirse por medios no enzimáticos (con
hidrógeno o NaBH4) o con enzimas para producir los 5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 5 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟏𝟎 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
alcoholes de azúcar correspondientes.

OBJETIVOS Tubo Absorbancia µmoles Azúcar Reductor

1 0.097 1
Este experimento tiene por objeto obtener una curva de 2 0.195 2
calibración, mediante la cual se puedan transformar las 3 0.566 4
lecturas de absorbencia obtenidas en los experimentos 4 1.084 8
de cinética enzimática, en micro moles de azúcar 5 1.314 10
reductor, para de esta manera obtener la actividad de la
enzima invertasa en unidades internacionales.
1.6
RESULTADOS y = 0.1381x - 0.0391 1.314
1.4
R² = 0.9951
Calculo µmoles de azúcar reductor 1.2 1.084
ABSORBANCIA

1
Tubo 1: 0.1 mL de glucosa al 0.0005 M
0.8
0.566
6
0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥10 𝜇𝑚𝑜𝑙 0.6
𝑋 0.1 𝑚𝐿 𝑋 = 0.5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 0.4 0.195
0.097
0.5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 0.5 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟏 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹. 0.2
0
Tubo 2: 0.2 mL de glucosa al 0.0005 M 0 2 4 6 8 10 12
MICROMOLES DE AZUCAR REDUCTOR
0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙
𝑋 0.2 𝑚𝐿 𝑋 = 1𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 Gráfica 1: Absorbancia vs µmoles de
azúcar reductor
1𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 1 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟐 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.

Tubo 3: 0.4 mL de glucosa al 0.0005 M

DISCUSIONES

1
Al inicio del experimento, se preparó una serie de tubos
que contenían una solución de Glucosa-Fructosa
0.005M y Sacarosa 0.2, cada tubo con diferentes
concentraciones, también se les adiciono regulador de
acetatos y agua. Posteriormente se agregó 3,5 DNS y
se calentó para favorecer la reacción, ya que la reacción
se da a una temperatura aproximada de 92 ° C, se
colocaron los tubos en un baño con hielo y se dejó
desarrollar color (imagen 1).
Imagen 1: colores obtenidos para las diferentes
concentraciones de glucosa (de izquierda a derecha:
Testigo, T1, T2, T3, T4, T5).
La reacción producida entre el azúcar reductor
(Glucosa) y el 3,5 DNS, produjo una reducción en
presencia del grupo reductor de la Glucosa, el cual es el
grupo aldehído, este grupo es reductor debido a que
tiene un protón que puede perder fácilmente (protón
ácido), para que la reacción anterior se efectué, el 3,5
DNS debe encontrarse en pH básico, debido a que el
3,5 DNS estando en su pH ácido es insoluble en agua,
al estar en medio ácido, pierde un protón (del ácido
carboxílico) y se vuelve un anión, el cual es soluble en
agua, además, el medio alcalino promueve el equilibrio
de la fructuosa contenida en la disolución con la
glucosa, . El producto obtenido de la reacción anterior
es el D-Glucanato, 3 nitro, 5 amino salicilato y el 3
amino, 5 nitro salicilato.
- - -
Reacción entre Glucosa y 3,5 DNS (desprotonado)
para producir D- Glucanato.
Posteriormente leyó la absorbancia de cada solución
obtenida en el espectrofotómetro, las cuales se
realizaron a 540 nm, la finalidad de estas mediciones es
obtener la concentración de cada solución en base a la
absorbancia que presentaron. Como se observa en la
gráfica 1 de absorbancia vs µmoles de azúcar reductor,
se tiene una relación directamente proporcional, lo que
nos indica que al aumentar la concentración de glucosa
en la solución, aumenta la absorbancia.
CONCLUSIONES
 Los azucares reductores tienen un protón ácido,
el cual es responsable de reducir a otras
sustancias.
 La glucosa actuó como azúcar reductor en la
práctica.
 La absorbancia y la concentración de µmoles de
azúcar reductor guardan una relación
directamente proporcional.
BIBLIOGRAFÍA
1. E. Conn Eric, “Bioquímica fundamental”,
Universidad de California, Editorial Limusa, 2001,
México D.F, Páginas consultadas: 53 -54.
2. Voet Donald, “Fundamentos de Bioquímica”,
Editorial Médica Panamericana, 2ª Edición, 2007,
Madrid, España.