AGAR HEKTOEN

Es un medio de cultivo selectivo y diferencial1 usado principalmente para aislar Salmonella y

Shigella de muestras de heces. Contiene indicadores de fermentación de lactosa y producción
ácido sulfhídrico, así como inhibidores que previenen el crecimiento de bacterias Gram positivas.

Fundamento

* En el medio de cultivo la proteosa peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para
el desarrollo microbiano.

* La lactosa, sacarosa y salicina son los hidratos de carbono fermentables.

* Las sales biliares inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, de algunos coliformes y de la
mayoría de las cepas de Pseudomonas spp.

* El azul de bromotimol y la fucsina ácida son los indicadores de la fermentación de hidratos de

carbono, mientras que el citrato de hierro actua como indicador de la formación de SH2 a partir
del tiosulfato debido a que se forma sulfuro de hierro, compuesto de color negro.

*El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante.

*El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibición de este microorganismo por
las sales biliares está disminuida por la adición de cantidades relativamente elevadas de proteosa
peptona y de hidratos de carbono así como la baja toxicidad de los indicadores presentes en el
medio de cultivo

Lectura de resultados

*Microorganismos fermentadores de lactosa: Colonias amarillas o anaranjadas

*Microorganismos no fermentadores de lactosa: Colonias del color del medio, verde-azuladas.

*Microorganismos productores de SH2: Colonias con centro negro.

AGAR XLD (agar de xilosa, lisina, desoxicolato)

Es un medio moderadamente selectivo y de diferenciación para el aislamiento y la diferenciación
de patógenos entéricos gram negativos (Salmonella y Shigella) a partir de muestras clínicas. Es
adecuado en especial para el aislamiento de la especie Shigella.

Fundamento

 Contiene extracto de levadura como fuente de nutrientes y vitaminas.

 Utiliza el desoxicolato de sodio como agente selectivo y, por consiguiente, inhibe los
microorganismos Gram positivos.
 La xilosa se incorpora en el medio dado que la fermentan prácticamente todos los
entéricos, excepto Shigella, y esta propiedad hace posible la diferenciación de dicha
especie.
  La lisina se incluye para permitir la diferenciación del grupo Salmonella de los organismos
no patógenos.
 Añaden lactosa y sacarosa para producir ácido en exceso
 Para aumentar la capacidad de diferenciación de la fórmula, se incluye un sistema
indicador de H2S, para la visualización del ácido sulfhídrico producido

Lectura de resultados
Especie de Salmonella: colonias rojas, algunas con centros negros. El agar en sí se volverá rojo
debido a la presencia de colonias tipo Salmonella.

Especie de Shigella: colonias rojas.

Coliformes: colonias de color amarillo a naranja.

Pseudomonas aeruginosa: colonias rosadas, planas y rugosas. Este tipo de colonia se puede
confundir fácilmente con Salmonella debido a las similitudes de color.

AGAR MACCONKEY
Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos gram
negativo fermentadores y no fermentadores de lactosa. Se utiliza con frecuencia para el
aislamiento de coliformes.

Fundamentos
Por la presencia de las sales biliares y el cristal violeta se inhibe el crecimiento de las bacterias
Gram-positivas. Por la presencia de la lactosa, las bacterias capaces de fermentarla acidifican el
medio, cambiando el color del rojo neutro y formando colonias rojas o rosadas, pudiendo
presentar un halo turbio correspondiente al precipitado biliar.

Lectura de resultados
Las bacterias lactosa-negativas dan colonias incoloras.

Las bacterias lactosa-positivas cambian a rojo neutro

AGAR TSI (Agar-hierro-triple azúcar)

Es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación de entero bacterias

Fundamento
El agar triple azúcar hierro contiene trescarbohidratos (glucosa, lactosa y sacarosa ). Cuando
dichos carbohidratos se fermentan, laproducción resultante de ácido es detectada por el indicador
rojo fenol

El cloruro sódico mantiene el equilibrio osmótico del medio

Lecturas de resultados

Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificará el medio haciendo virar a amarillo el

indicador en el fondo del tubo

Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su superficie volviéndolo

de color amarillo

Si produce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de las sales de hierro), se presentará un

ennegrecimiento del tubo. La producción de sulfhídrico y el consiguiente ennegrecimiento pueden
impedir ver la fermentación de la glucosa (fondo amarillo), pero este hecho implica directamente
que la bacteria es fermentadora de glucosa.

Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteria es productora de gas.

Caldo MR-VP (Rojo de Metilo Voges-Proskauer)

Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un microorganismode fermentar la glucosa
con producción de ácido por la vía ácido mixta o con producción de un producto final neutro
(acetoína) por la vía butanodiólica

Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable.

La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a través de distintas vías
metabólicas. Según la vía utilizada, se originarán productos finales ácidos (ácido láctico, ácido
acético, ácido fórmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol). Siembra:

Por inoculación directa, a partir del cultivo en estudio.

Lectura de resultados
Rojo de metilo

 Rojo : positivo (acidificación en los cultivos de Coliformes y Enterobacterias)

 Amarillo o naranja: negativo

VP

 Rosado : positivo para VP (producción del Acetilmetilcarbinol o acetoina)

 No rosado : negativo para vp

Acatoina : La acetoina es una molécula que se emplea como almacén natural de energía en las funciones
metabólicas de algunas bacterias fermentativas