BACTERIOFAGO

En 1951, se descubrió la destrucción de colonias de

micrococcus, debido:
1. Ciclo de vida
2. Enzimas líticas
3. Virus como agente causal.
Este agente no se desarrollaba en ningun medio, pasaba a
través de filtros para bact. e inactivado a 60 C/1hr.
Se trató de emplear la acción destructiva de los fagos
sobre bacterias suceptibles para prevenir y tratar enf.
Fue un instrumento ideal para conocer los mecanismos
de autoreplicación biológica
Colifagos T4 y T3
 ESTRUCTURA
Rigido como los virus en general: Pequeño
icosaedrico (colifagosT3,T7), simetría
helicoidal (Colifagos pares T2, T4, T6) y
filamentosos (T1, estructura simple).
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Los genomas pueden ser mol. de ADN lineal,
circular, de doble cadena. Todos tienen los
mismos nucleótidos pero las secuencias
terminales difieren en genomas indv. y pocos
nucleótidos se reiteran en los extremos de la
moleculas (A,B,C,D,...W,X,Y,Z,A,B,C.); estos
estan unidos covalentemente y al escindirse
azar la redundancia evita la perdida de genes
TRANSFECCION: Infección por acidos
nucleicos desnudos

El AN de los fagos es infeccioso como el de los

virus animales, pero la pared celular
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bacteriana es una barrera más formidable que
la membrana de celula animal, por tanto la
transfección solo se realiza en los esferoplastos,
cuando las bacterias son tratadas con Ca,
congelamiento y descongelamiento
 GLUCOSILACION Y METILACION

El 5-hidroximetiluracilo y 5-hidroximetilcitocina
con frecuencia estan unidos, por Enz.
codificadas por fagos, a uno o dos residuos de
glucosa.
Además una pequeña porción de las bases de los
fagos es metilada por Enz. específicas del
huésped.
Estos tipos de sustitución confieren resistencia a
la degradación por las endonucleasas de
restricción, que la bacteria sintetiza para
protegerse de ADN extraño.
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FISIOLOGIA DE LA INYECCION LITICA
POR FAGOS

Como los virus animales, algunos bacteriófagos

lisan a sus huespedes (fagos virulentos) y otros
integran su genoma en el genoma del huesped
(fagos temperados o lisógenos)
Analizando el periodo de latencia entre la
infección y la liberación de la nueva progenie
viral es de por lo menos 4 hrs.para poliovirus,
12 hrs. para virus de vacuna y de13 a 25 min.
para los fagos.
 CICLO DE REPLICACION DEL
BACTERIOFAGO T4

Se distinguen etapas que son comunes a otros

virus bacterianos y eucarióticos.
1.Adsorción entre órganos de adherencia de
fagos y de moleculas receptoras especificas en
la superficie bacteriana (lipoprtn,lps,pelos,
etc.)
Las mutaciones en las bacterias destruyen la
complementariedad otorgandoles resistencia.
Pero poblaciones de fagos, mutantes de espectro
de huesp, restablecen la complementariedad y
crecen en bacterias mutadas.
2. La Inyección del Ac. nucleico del fago, induce la
producción temprana de enz. Deshidrofolato
reductasa, alterando la disposición de las
subunidades proteicas de la cola del fago,
contrayendose la vaina, llevando el centro de la
cola aprox.12nm dentro de la bacteria.
Las entradas son selladas para evitar la lisis desde
el interior y el aborto del ciclo de multiplicación
viral.
3. Sintesis del material genetico viral.
4. Ensamblaje.
5. Lisis bacteriana y
6. Liberación de la progenie viral.
 LIZOGENIZACION

• No todos los fagos dan como resultado lisis de la

célula huésped. Existen fagos que reprimen toda
expresión genetica e integran su genoma en el
de la célula huésped.
• Profago: genoma integrado.

• Bacteria Lisogena que alojan profagos.

• Los Fagos Lisógenos o Temperados, son fagos
capaces de integrar sus genomas.
• Los conceptos obtenidos del estudio de los fagos
temperados han influido en las ideas de los
virus tumorales.
 PROFAGO
La frecuencia de lisogenización varía con el sist.
fago-huesped, como con la multiplicidad de
infección. El # de profago por lisógeno es igual al #
de genomas bacterianos, pero hay más de un sitio
de unión para el mismo profago.
La superinfeción puede ocasionar la integracion de

dos profagos en el mismo locus. Los cromosomas

bacterianos poseen sitios de inserción para
profagos no relacionados y todos pueden ser
ocupados simultaneamente.
Finalmente existe el fago mu que no tiene un locus
específico e integra su genoma en cualquier parte
del genoma bacteriano, en esencia es un transposón
 CONCEPTO DE INMUNIDAD
En condiciones normales el profago es estable. La
terminación del estado lisógeno es espontáneo y con
baja frecuencia. La inducción es incrementada por
agentes que inh. la replicación del ADN huesped.
Cultivos de bacterias lisógenas que contienen fagos
infecciosos no son lisados por estos debido a que el
genoma inyectado no puede expresarse.
La razón es que uno de los genes del profago
codifica un represor.
La inmunidad es altamente específica y las
bacterias lisógenas para un fago no son inmunes a
otros fagos temperados.
 Los bacteriofagos y sus productos génicos como agentes antimicrobianos

Los virus que infectan a las bacterias (bacteriófagos o fagos) fueron descubiertos
hace casi 90 años y su empleo ha constituido una herramienta fundamental en el
desarrollo de la biología molecular.
Los fagos, al principio, se vislumbraron como agentes que permitieran combatir
las infecciones bacterianas. Este objetivo quedó relegado por el descubrimiento y
empleo generalizado de los antibióticos.
El preocupante y creciente desarrollo de las resistencias bacterianas ha hecho
que, desde hace unos años, se piense de nuevo en los fagos como una alternativa
terapéutica al uso de los antimicrobianos actuales.
EL uso terapéutico de estos agentes, así como otras alternativas tales como el
empleo de “enzibióticos”, las enzimas líticas codificadas por los fagos. (Ernesto García y
Rubens López, 2002)
 ENZIMAS LÍTICAS FÁGICAS COMO ANTIBIÓTICOS: ENZIBIÓTICOS

•Las enzimas líticas de los fagos se utilizan para destruir la pared bacteriana
desde el interior de la célula infectada y así facilitar la liberación de la
descendencia fágica.
• Estas enzimas reciben diferentes denominaciones de acuerdo con el enlace
químico que destruyen en la pared del huésped.
•De esta manera, se habla de lisozimas, amidasas, etc.
• Experimentos llevados a cabo en 1993 con plantas transgénicas de patata
que expresaban el gen de la lisozima del fago T4 demostraron que tales
plantas eran resistentes a la infección por el fitopatógeno Erwinia
carotovora .
• Siguiendo un planteamiento análogo, muy recientemente, el grupo de
Vincent Fischetti de la Universidad Rockefeller ha utilizado la capacidad
bactericida de las enzimas líticas codificadas por los fagos para prevenir y
eliminar microorganismos patógenos en ratones colonizados por
estreptococos del grupo A y neumococos.
• En el caso de Streptococcus pyogenes se usó una enzima lítica purificada a
partir de un extracto crudo de un lisado de fago. Diez nanogramos (1000 U)
de enzima purificada fueron suficientes para esterilizar un cultivo de 107
bacterias en cinco segundos.
• Enzima instiladas en la cavidad bucal proporcionaban protección frente a
107 bacterias del grupo A sin afectar al resto de la microbiota comensal.
• En el caso de Streptococcus pneumoniae se pudo demostrar que con la
amidasa Pal, cuyo gen fue clonado a partir del genoma del fago Dp-1,
bastaban asimismo unos pocos segundos para destruir 15 serotipos muy
comunes, incluyendo algunos con alta resistencia a la penicilina.
• En experimentos con ratones que habían sido previamente colonizados se
comprobó que un único tratamiento con Pal bastaba para erradicar el
estado de portador, observándose también que el tratamiento no sólo no
afectaba a otros microorganismos que normalmente colonizan la
orofaringe, sino que tampoco aparecían neumococos resistentes a la
enzima.
 PERSPECTIVAS FUTURAS

•Se ha pronosticado con sobradas razones que es posible que, en ciertas

enfermedades infecciosas, hayamos vuelto a la era preantibiótica.
•En lo que existe acuerdo generalizado es en que, tanto con el empleo de fagos
como de alguno de los productos fágicos, estamos ante terapias novedosas y
prometedoras que, usadas junto con los antibióticos, pueden proporcionar un
medio muy eficaz para combatir el preocupante problema de la aparición de
bacterias resistentes a todo el arsenal antibiótico de que se dispone.
•Todo ello propicia un escenario que garantiza la realización de nuevos estudios
en el campo de la terapia fágica. En teoría, la terapia fágica presenta evidentes
ventajas frente a la antibioticoterapia.

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