UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA DE ICA”

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA.

CURSO: MICROBIOLOGIA
CONTROL DE LECTURA No.2
TEMA: TOXINAS Y ANTITOXINAS
DOCENTE: DR. JUAN DE DIOS SANDOVAL RIVAS.
CICLO: III SEMESTRE: 2018-I

TOXINAS:

I.-Toxinas, Clasificación y Características.-

1.-Toxinas.-
Al mencionar este termino, se abarca un concepto general,
especialmente si se trata como el sinónimo de dañino o maligno a la salud del
individuo, por lo que se les denomino como veneno bacteriano por su capacidad
de producir trastornos en animales susceptibles.
Bacteriológicamente hablando las toxinas se dividen en dos grupos, exotoxinas y
endotoxinas. Esta clasificación fue dada según las propiedades que las diferencia
unas de otras.
1.1.-Exotoxinas.- Son excretadas por las bacterias y aparecen en el medio en que
crecen estas.
Características:
Son muy específicas.
Son muy toxicas.
Son inestables.
Son muy antigénicas.
Se convierten en toxoides debido al tratamiento con formol.

1.2.- Endotoxinas.- Sustancias intracelulares liberadas por desintegración

bacteriana, en el medio en el que ha crecido el germen.
Características:
No son específicas.
Son poco toxicas.
Son estables.
No son muy antigénicas.
No se convierten en toxoides.

2.- Origen de las toxinas.-

Las toxinas son producidas por plantas, bacterias y animales; las bacterias
toxígenas son escasas en nuestro medio aunque últimamente su numero a
aumentado debido al descubrimiento de nuevos productos tóxicos de otras
bacterias.
La clasificación de las bacterias toxígenas se hace un poco difícil ya que su poder
nosógeno (inicio y proceso de la enfermedad) es variable por lo que la toxicidad se
vera si el toxico puede o no estimular la producción de la antitoxina neutralizante.
Algunas plantas son capaces de producir toxinas muy poderosas por ejemplo:

TOXINAS PRECURSOR
Ricina Semilla de Ricino
Abrina Semilla del Abro
Robina Corteza de la acacia

Los venenos de serpiente, arañas y escorpiones son las toxinas mas conocidas
por su antigüedad

Efectos de las toxinas Origen Nombre de las toxinas

Hemólisis Estrep. Pyogenes Estreptolisinas O y S

Staph. Aureus Hemotoxinas alfa, Beta, Gama y delta.
Clost. Perfringens Toxinas alfa(lecitinasa), delta y theta
Clost. Novyi
Clost. Septicum Toxinas alfa y beta
Venenos de serpiente
Produce erupción Estrep. pyogenes Toxina eritrogenica
cutánea
Letal para los Coryn. Diphteriae
animales de Clost. Septicum
laboratorio Clost. Novyi Toxina letal
Clost. Chauvoei
Clost. Perfringens
Staph. Aureus
Produce necrosis en Staph. Aureus
los tejidos Clost. Perfringens Toxina necrosante
Coryn. Diphteriae
Produce síntomas Clost. Botulinum Neurotoxina
nerviosos patentes Clost. Tetan Tetanospasminas
Shigella dysenteriae Neurotoxina
Venenos de serpiente Neurotoxinas
Mata los leucocitos Staph. Aureus Leucocidina

Dirige el colágeno Clost. Perfringens Colagenasa

II.-NATURALEZA DE LAS TOXINAS.-

Aunque cada toxina tiene una peculiaridad diferente, hay algo en lo que todas son
iguales: SU NATURALEZA.
Toda toxina es de naturaleza proteica, por ejemplo:
Diftérica.
Botulínica.
Tetánica.
Muchas toxinas pueden destruirse fácilmente por medio del calor, enzimas
digestivas, y productos químicos; a excepción de las toxinas botulínica y titánica
Tetánica: estas son sensibles ante la presencia de ácidos y enzimas digestivas
Botulínica: esta es resistente a lo mencionado anteriormente; se a observado que
dicha toxina aglutina los hematíes de la gallina y la oveja, reacción que es inhibida
específicamente por la antitoxina. Su peso molecular es de 900 000;las toxinas se
precipitan con las fracciones albumosas y peptonas de las proteínas por medio del
sulfato amónico, el sulfato de aluminio, el cloruro de cinc, el alcohol y el ácido
nucleico.
La destrucción de las toxinas se da a una temperatura de 60º C y a 56 º C se
destruye por lo menos el 95% de las moléculas de la toxina; a esta regla general
existe una excepción, la toxina ESTREPTOCOCICA que no se destruye tras 20
minutos de ebullición.
Muy aparte de las toxinas también son dañinas a las toxinas, la luz, el oxigeno y
las enzimas digestivas.
La toxina epsilon del Clostridium Perfringens es producida inactiva, y se activa a
causa de la tripsina.
La acción de las toxinas solo se puede observar con la inoculación de esta a un
animal de experimentación, es imposible determinar si existe una toxina usando
una reacción química.
Es importante conocer la potencia de las toxinas por lo cual tenemos que:
T. Tetánica: su poder letal es tan activo que con 1ml puede matar de
50 000 – 75 000 cobayos
T. Botulínica: este es uno de los venenos más letales conocidos.
Una toxina botulínica del tipo “A” purificada se ha comprobado que contenía 31000
millones de dosis letales ratón por gramo. También se ha calculado que con 218
gramos de esta toxina bastarían para matar a toda la población humana.
Para que una toxina ejerza su acción es necesario primero pasar por un
“PERIODO DE INCUBACIÓN” es decir un tiempo suficiente para qe la toxina se
fije en los tejidos receptivos.
Una dosis pequeña de toxinas excita la formación de anticuerpos o antitoxinas, de
esta manera, si se quiere inmunizar a un animal se le aplicara esa técnica usando
dosis subletales o toxina atenuada.
EHRLICH.- demostró que la molécula de toxinas se compone de 2 partes
llamadas: Toxofora y Haptofora.
La acción nosógena de la toxina es causado por la Toxofora ( fracción termo y
quimiolabil). Por otro lado la acción Haptofora se encarga de la combinación de la
toxina con la célula así como también es responsable de las funciones
antigénicas. Mientras el grupo toxoforo se destruía por el simple reposo el grupo
Haptoforo no se alteraba. Claro que también se puede conseguir la anulación de la
toxina usando productos químicos tales como la Formalina y el Yodo.
Ehrlich llamo al grupo Haptoforo TOXOIDE. Los aportes de Ehrlich fueron muy
útiles para obtener métodos de inmunización contra las toxinas.

III.-ESPECIFICIDAD TISULAR DE LAS TOXINAS.-

La especificidad es un punto muy importante por ser una característica primordial

en cuanto se refiere a toxinas, tenemos por ejemplo al Clostridium Tetani cuyas
toxinas se clasifican según su combinación con un tejido determinado. Este clost.
Tetani libera una toxina específica hacia el tejido nervioso y el tejido sanguíneo.
La toxina que se combina con el tejido nervioso se llaman NEUROTOXINAS .
La toxina TETANOSPASMINA produce concretamente el tétanos.
La que ataca a los Hematíes se llaman HEMOTOXINA porque lisa los glóbulos
rojos con liberación de hemoglobina.
La toxina Diftérica ataca los centros nerviosos del sistema vascular y produce
lesiones degenerativas en el músculo cardiaco, riñones e hígado.
La toxina botulínica provoca parálisis de los músculos inervados por los pares
craneales.
Las toxinas de Estreptococos Pyogenes pueden lisar los hematíes formando un
eritema.

IV.-DETERMINACIÓN DE LA POTENCIA DE LAS TOXINAS.-

Para determinar la potencia de las toxinas se hacen experimentos con
animales a fin de comparar la toxina producida por diferentes cepas de gérmenes;
para esto se emplea lo siguiente:
Dosis.
Métodos de inyección.
Tiempo de acción.
Tamaño y especie del animal.

Para aplicar las dosis de una toxina a un animal se vera lo siguiente.

DMM: dosis mínima mortal, esta varia según la toxina que se use y el animal por
ejemplo:
DMM de T. Tetánica: es la cantidad mínima que mata un cobayo de 350 gr. De
peso en 96 horas.
DMM de la T. Diftérica es la cantidad mínima que mata un cobayo de 250 gr. De
peso en 96 horas.

Otra dosis a usar es la DMH ( Dosis mínima Hemolítica), así tenemos:

DMH de la T. Estafilocócica: es la cantidad que hemolisa un mililitro de suspensión
de eritrocitos de conejos al 2% en una hora a 37 ºC.

La toxina del Estreptococos Pyogenes produce un eritema. Para la titulación de

esta toxina se emplean niños receptivos. La toxina se inyecta en la piel del brazo,
y la unidad de medida se llama Dosis de Prueba Dérmica (DPD), o dosis de test
Dérmico (DTD). La dosis mínima que da una reacción de 1.5 cm de diámetro en
24 horas, se designa con el nombre de DPD de la toxina de la escarlatina.
Diversas bacterias gram-negativas, pertenecientes a varios géneros, produce
endotoxinas. Los géneros representados son: NEISSERIA, ESCHERICHIA,
SALMONELLA, BRUCELLA, VIBRIO, SHIGELLA, PASTEURELLA Y
PSEUDOMONAS. La inducción de endotoxinas a los animales produce fiebre y
depresión, pudiendo ser letal en grandes cantidades. La desintegración de los
gérmenes en los tejidos o en la circulación de los animales infectados es uno de
los mecanismos patogénicos.
Otros productos tóxicos, que aumentan la virulencia de los gérmenes o producen
determinados efectos, pero no caen dentro de la definición de exotoxinas ni
endotoxinas, son:
Coagulasa, que coagula el plasma.
Estreptoquinasa, que lisa la fibrina ( fibrinolisina).
Enterotoxinas, que es causa de intoxicación alimentaria.
Hialuronidasa, que facilita la difusión de la infección de los tejidos.

V.- ANTITOXINAS.-

Al referirnos a estas se nos viene a la mente la palabra antídoto, esta idea no esta
muy lejos del concepto real, pues estas son anticuerpos creados por la célula del
organismo a causa de la inoculación de dosis subletales de una determinada
toxina, esta antitoxina solo neutraliza a la toxina que fue inoculada y da origen a la
misma. Claro que esto también depende de la cantidad de antitoxina que se
aplique.
La unión toxina-antitoxina provoca una reacción de precipitación en la que
interviene un antígeno, un anticuerpo y un electrolito.
Las antitoxinas son relativamente estables, pero se destruyen a la temperatura de
62 º C. La refrigeración a 3 –5 º C conserva satisfactoriamente las antitoxinas y ,
cuando se deseca al vacío las alteraciones son mínimas durante largos periodos
de tiempo. La adición de 0.5 % de cloroformo a la antitoxina la conserva.

VI.- PRODUCCIÓN DE ANTITOXINAS.-

Para la producción de antitoxinas aun se sigue usando el método tradicional; se

prepara y tipifica la toxina. se inyecta un animal adecuado generalmente el
caballo, para producir la antitoxina. Se recoge el suero, se filtra y se conserva. La
antitoxina se titula para determinar su potencia. La antitoxina tetánica es la mas
usada en medicina veterinaria por lo que describiré someramente en este trabajo
su fabricación, para dar a los alumnos de este curso una idea del método general
de preparación de antitoxinas.

VI.- PRODUCCIÓN DE ANTITOXINAS

Se elige para la producción de toxinas un cultivo de Clostridium Tetani, que
produzca una toxina muy potente. El microbio se cultiva en caldo-infusión de
ternera, conteniendo 0.5 de cloruro sódico y 7 % de peptona. Se puede añadir
glucosa al medio para activar el crecimiento del germen, pero parece ser que esto
no incrementa la potencia de la toxina. Se cubre el medio con una capa de
parafina liquida y se esteriliza luego para eliminar el oxigeno antes de la siembra.
Se incuba el medio a 34-35 º C durante 10 a 14 días para lograr la máxima
producios de toxinas. A partir de los 14 días disminuye la concentración de toxinas.
La toxina soluble se separa de las bacterias vivas filtrando a través de un
Berkefeld N al filtrado se puede añadir el 0.5 % de fenol, o puede precipitarse la
toxina con sulfato amónico conservándola desecada. La toxina desecada se
disuelve fácilmente en solución salina y puede diluirse para titularla.
Seguidamente se titula el poder de la toxina, lo que se realiza haciendo una serie
de diluciones al 1/ 1000, 1/5000, 1/10000,1/15000,1/20000,1/25000, e inyectando
un ml de cada dilución a lotes de cobayos de 350 gr. de peso.

VIII.- ANTITOXINA TETANICA.-

Para obtener dicha antitoxina es necesario un caballo en buen estado. Se
procede a la inmunización contra el tétanos inyectándole toxoide o una mezcla
toxina-antitoxina, luego se le inoculan 10-20 DMM cobayo con intervalos de 3 días,
dichas dosis irán aumentando progresivamente hasta llegar a 1000 ml de cultivo
filtrado.
Cuando la concentración de antitoxinas a alcanzado un nivel apropiado se sangra
al animal pues este antídoto se obtiene por coagulación de la sangre.