1.

INTRODUCCIÓN

La limpieza, desinfección y esterilización de superficies, equipos, aparatos e

instrumental, son procesos que están orientados a la minimización de la
transmisión de infecciones, tanto de los estudiantes como del docente encargado.

Al ingresar a un laboratorio de fitopatología deben poseer conocimientos acerca de la

correcta utilización del material sanitario y de los productos.

Cada vez que se limpian, se desinfectan, o esterilizan productos sanitarios se forma parte
de una cadena, por ello se adquiere una responsabilidad que obliga a que se garantice la
correcta ejecución de estos procesos.

Es importante recordar que al realizar cualquier procedimiento se debe tener la seguridad

requerida y considerar todas las muestras como de alto riesgo.

2. OBJETIVOS

1. Familiarizarse con los métodos y procesos de desinfección y esterilización

comúnmente utilizados en un Laboratorio de Fitopatología.

2. Manejar de forma adecuada la terminología y metodologías fitopatológicas

3. Demostrar la importancia de la asepsia para eliminar o reducir contaminaciones de

medios de cultivo por microorganismos.

4. Conocer el funcionamiento adecuado de los equipos e

instrumentos empleados en la esterilización.

5. Señalar los principales grupos de agentes utilizados como limpiadores e indicar su

mecanismo de acción y aplicaciones.

6. Señalar la importancia del control de la eficacia de un proceso de limpieza y

desinfección.

7. También la verificación del proceso de limpieza y desinfección realizado en las

superficies de los laboratorios como el piso, losetas, mesas, etc.

8. Identificar los símbolos de peligrosidad para ser cuidadosos y no poner en riesgo la

salud y la vida de los demás, ni la de nosotros mismos.
3. MARCO TEÓRICO

3.1. Definiciones de términos usados en un laboratorio de fitopatología:

a. ASEPSIA: Conjunto de procedimientos que se llevan a cabo para la exclusión o

eliminación total de microorganismos patógenos, en especial por métodos físicos. Nos
permite prevenir que haya una variabilidad en los resultados de la investigación que se
realiza, es fundamental para realizar trabajos confiables sin contaminación.
Mantener el mayor cuidado en la limpieza del material y del laboratorio mismo es
fundamental para realizar trabajos confiables. El medio ambiente se encuentra, por lo
general, cargado de microorganismos diversos que pueden contaminar el ámbito de trabajo,
por ello es conveniente no descuidar la limpieza de los materiales, instrumentos y equipo
necesario para el trabajo. Los materiales de vidrio y cualquier otro elemento deben estar
profundamente limpios antes de comenzar el trabajo.
b. LIMPIEZA: es el proceso mediante el cual se remueve, a través de medios mecánicos
o físicos el polvo, la grasa y otros contaminantes de las superficies, equipos, materiales,
personal, etc. Este proceso, junto con un adecuado proceso de desinfección, es
indispensable para controlar la presencia de los microorganismos en el ambiente.
c. HIGIENE: se refiere a los cuidados, prácticas o técnicas utilizados para la conservación
de la salud y la prevención de las enfermedades. Para ello el alumno debe acatar las
normas de seguridad establecidas en el laboratorio.
d. LAVADO: Durante los trabajos con microorganismos, específicamente hongos, es
necesario y fundamental trabajar con mucha asepsia, debido a que es indispensable el
mantenimiento de los cultivos puros. Por lo tanto, es conveniente que luego de lavar
todo el material de vidrio, éste sea enjuagado dos veces con agua destilada, para
eliminar todo residuo de detergente antes de ser esterilizado.
e. ESTERILIZACIÓN: La esterilización de los materiales de vidrio y medios de cultivo nos
asegura un estado de asepsia que permite trabajar sin dificultades cuando se ejecuta
en forma eficiente. La forma más común de esterilización es por medio del calor, seco
o húmedo. Un objeto estéril (en sentido microbiológico) está libre de microorganismos
vivos.
f. DESINFECCIÓN: Produce la destrucción de agentes infecciosos o contaminantes, total
o parcialmente, presentes en objetos y ambientes. Asegura la eliminación de formas
vegetativas, pero no de esporas bacterianas.
g. DESINFECTANTE: Sustancia química que destruye los microorganismos y que se
aplica sobre material inerte sin alterarlo de forma sensible.
h. ANTISEPSIA: Conjunto de acciones emprendidas con el fin de eliminar los
microorganismos patógenos presentes en un medio, o inhibir su proliferación.
i. ANTISÉPTICO: Sustancia química de aplicación que destruye o inhibe los
microorganismos o gérmenes del área de trabajo en un laboratorio.
j. ESTERILIZACIÓN: Es un proceso para obtener un producto libre de todo
microorganismo en estado latente o activo, causante de enfermedades o
infecciones. La esterilización de los materiales de vidrio y medios de cultivo nos asegura
un estado de asepsia que permite trabajar sin dificultades cuando se ejecuta en forma
eficiente.
k. PASTEURIZACIÓN: Proceso térmico realizado en líquidos con el objetivo de reducir la
presencia de agentes patógenos.
l. MICROORGANISMO PATÓGENO: Microorganismo capaz de causar la enfermedad,
como agentes bióticos (hongos, bacterias, virus, viroides, nematodos, fitoplasmas,
plantas parasitas y protozoos) y agentes abióticos (altas temperaturas, deficiencia de
nutrientes, sales, quemaduras por pesticidas, exceso o falta de agua, etc.)

3.2. DESINFECCIÓN DEL AMBIENTE (LABORATORIO Y ALMACENAMIENTO)

Como ya se ha dicho, cuando se trabaja con hongos, bacterias, virus, fitoplasmas, viroides,
nematodos, plantas parasitas y protozoarios causantes de enfermedades hacia las plantas,
es necesario tener los ambientes de trabajo así como los utensilios, materiales de vidrio,
etc. en completo estado de asepsia. Existe un conjunto de procedimientos para eliminar o
reducir la contaminación por microorganismos ya sean hongos entomopatógenos,
fitopatógenos, patógenos del hombre, saprofitos, etc. que puedan interferir con el trabajo
que se desea realizar. Éstos pueden estar flotando en el aire, depositados sobre las
superficies de trabajo y del ambiente como paredes, techos, estantes, entre otros.
El alcohol es muy utilizado en trabajos de laboratorio para desinfectar la superficie de la
cámara de flujo laminar así como las superficies de trabajo. Los alcoholes actúan
desnaturalizando las proteínas, disolviendo las capas lipídicas y como agentes
deshidratantes.
La legía es también llamado hipoclorito de sodio es un compuesto químico altamente
oxidante, sirve para desinfectar, esterilización, la eliminación de bacterias y son aplicadas
en superficies que se requiere un alto grado de limpieza.
Los detergentes aniónicos y no iónicos, aunque no poseen acción desinfectante, son
excelentes agentes de limpieza gracias a su acción emulsionante y tensioactiva, lo cual
hace que arrastren la suciedad. Los jabones convencionales quedarían incluidos en este
grupo.
El ácido muriático es un ácido clorhídrico diluido al 28% y es el limpiador por excelencia
para superficies de cerámica, remueve el exceso de adhesivos fuertes, ideal para la
limpieza de manchas de óxido, de agua o sarro.
Para reducir la contaminación en el ambiente de trabajo, se pueden realizar aplicaciones
de sustancias antisépticas como el Timol.
Preparación: Preparar una solución de 1 gramo de Timol en 1 litro de agua. Esta solución
se asperja sobre muebles, paredes, etc. y todo aquello que forma parte del interior del
laboratorio.
Precauciones al aplicar: Evitar que caiga sobre la piel y los ojos, de ser así lavar bien con
agua corriente. Evitar inhalarlo. Luego de aplicar, dejar la habitación totalmente cerrada. No
aplicar sobre alimentos. Aplicar sobre toda superficie del laboratorio: paredes, muebles,
pisos, zócalos, etc. El operador debe estar provisto de máscara, guantes y toda protección
posible. La operación de aplicación no debe durar más de 10 minutos.
Otros materiales de uso para limpieza en casos específicos:
El papel toalla, es un tipo de papel que se utiliza en labores de secado, ya que funciona
como absorbente y limpieza las partículas se adhieren fácilmente.
La escobilla, se utilizan para limpiar los tubos de ensayo y demás utensilios utilizados en
la práctica. Para lavar correctamente se debe hacer con agua y jabón y posteriormente
aclarar al menos tres veces. Para concluirse enjuagará un poco con agua destilada.
El peróxido de hidrógeno (agua oxigenada), como desinfectante tiene muy escaso poder,
pero gracias a su mecanismo de acción (libera oxígeno molecular al entrar en contacto con
la catalasa de los tejidos) posee cierta utilidad en la eliminación de restos orgánicos.
Los paños libres de pelusa tenemos un paño que cubre toda necesidad de limpieza. Elegir
sobrepaños que son antiestáticos, libres de pelusa, no abrasivos, resistentes y con
suavidad suficiente para utilizarse en la limpieza.
El algodón es la borra o pelusa blanca, suave y absorbente que cubre la semilla de esta
planta; esta borra, limpia y esterilizada, se emplea para usos higiénicos.