DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMETRICA DE ACETAMINOFEN EN

LA REGIÓN DE ULTRAVIOLETA
Maicol Escobar (1367077); Jhony Bolaños (1667890)
Maicol.escobar@correounivalle.edu.co; jhony.bolanos@correounivalle.edu.co
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Química, Universidad del Valle,
sede Yumbo, código del programa 2131, Colombia.
Fecha de práctica: 26 de abril de 2017
Fecha de entrega:15 de mayo de 2017

Resumen: Se determinó el contenido de acetaminofén en las tabletas comerciales de

500mg producidas por Genfar, por medio del método espectrofotometría en el ultravioleta;
Se realizaron dos curvas de calibración, una por patrón externo y la otra por patrón
interno. El contenido obtenido por tableta de cada método fue de 531,471±0,034mg y
529,169±0,180mg el porcentaje de error para cada método es de 6,29% y 5,83%
respectivamente.

1. Datos, cálculos y resultados
1.1 Preparación de las curvas de
calibración y la muestra
1.1.1 Patrón externo
Se tomaron 0,0200±0,0001g de
acetaminofén en un vaso de 25mL y se le
adiciono 5±0,015mL de metanol grado
espectroscópico, se transfirió a un matraz
volumétrico de 100±0,1mL y a partir de
esta solución se prepararon las
soluciones patrones para la curva
1.1.2 Muestra
Se pesaron dos tabletas de acetaminofén
marca Genfar de 500mg, pesaron
0,5525±0,0001g y 0,5650±0,0001g; se
maceraron las tabletas y se transfierieron
0,0226±0,0001g del macerado a un vaso
de precipitado de 25mL, se le adiciono
5±0,015mL de metanol grado
espectroscópico y se agito durante 15
minutos; se trasvaso a un matraz de
100±0,1mL y se tomaron 3±0,010mL los
cuales le diluyeron en un matraz de
50±0,06mL hasta el enrace
1.1.3 Patrón interno

20,0𝑚𝑔𝐴𝑐𝑒𝑡. Se transfirieron 0,5±0,005mL de la

= 200 ± 0,005𝑚𝑔/𝐿 solución de la muestra a 5 matraces
0,100𝐿
volumétricos de 25±0,04mL, y se
0,5𝑚𝐿𝑥200𝑚𝑔/𝐿 adicionaron los matraces 0mL,
= 4 ± 0,010𝑚𝑔/𝐿 0,5±0,005mL, 1,0±0,008mL, 2±0,010mL y
25𝑚𝐿
3±0,010mL respectivamente de la
1𝑚𝐿𝑥200𝑚𝑔/𝐿 solución patrón de acetaminofén
= 8 ± 0,008𝑚𝑔/𝐿
25𝑚𝐿
3𝑚𝐿𝑥200𝑚𝑔/𝐿 1.2 Cálculos estadísticos
= 12 ± 0,004𝑚𝑔/𝐿
50𝑚𝐿
Utilizando la solución de 12±0,004mg/L se
2𝑚𝐿𝑥200𝑚𝑔/𝐿 hizo un barrido entre 200 y 300nm en el
= 16 ± 0,005𝑚𝑔/𝐿 espectrofotómetro UV-1700 shimadzu
25𝑚𝐿
para escoger la longitud de onda de
3𝑚𝐿𝑥200𝑚𝑔/𝐿 máxima absorbancia, con esta longitud se
= 24 ± 0,004𝑚𝑔/𝐿 realizaron las mediciones.
25𝑚𝐿
 1.2.1 Patrón externo La señal de la muestra fue 0,8156, se
calculó la concentración por interpolación

0,8156 − 0,0342
𝑋= = 12,7553𝑚𝑔/𝐿
Tabla No1 0,0613𝐿/𝑚𝑔
Absorbancia mg/L
0,2688 4,000 𝑆𝑟 1 1 ̅̅̅
(𝑦 − 𝑦̅)2
𝑆𝑥 = √ + + 𝑐2
0,5544 8,000 𝑚 𝑀 𝑁 𝑚 𝑆𝑥𝑥
0,7623 12,000 = 0,43156𝑚𝑔/𝐿
0,9907 16,000 Se calculó la concentración en la tableta
1,5155 24,000
12,7555𝑚𝑔𝐴𝑐𝑒𝑡. 50𝑚𝐿 0,1𝐿
𝑥 𝑥 𝑥0,55875𝑔
Tabla No2 𝐿 3𝑚𝐿 0,02235𝑔
= 531,471 ± 0,034𝑚𝑔𝐴𝑐𝑒𝑡.
0,999018 0,024135
r 314 Sr 741 531,471𝑚𝑔 − 500𝑚𝑔
t t %𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = 𝑥100%
500𝑚𝑔
calcula 39,06063 tabula
= 6,2942%
da 431 da 2,78
0,061264 0,001568
m 527 Sm 447 1.2.2 Patrón interno
0,034154 0,022793
b 054 Sb 801 Tabla No3
0,624393 mg/L
LDD 458 Absorbancia patrón
3,382109
LDC 831 0,0145 0
0,2532 4
1,6 0,4907 8
1,4 0,9745 16
1,4426 24
1,2
Absorbancia

0,8
Tabla No4
0,6
r 0,99998341 Sr 0,003819562
0,4 t t
0,2
calculada 300,6884846 tabulada 2,78
m 0,059610991 Sm 0,000198248
0
0,000 10,000 20,000 30,000 b 0,01514569 Sb 0,002677454
Concentración mg/L LDD -0,62185109
LDC 0,38667244
Figura1: curva de calibración patrón
interno
 1,6 La espectroscopia de absorción molecular
se basa en la transferencia de energía a
1,4 radiante a las moléculas lo que causa que
los electrones de estas pasen de un
1,2
estado de menor energía (basal) a un
estado de mayor energía (excitado), para
Absorbancia

1,0
que el electrón realice esta transición se
0,8 le debe de suministrar suficiente energía,
0,6 por ello se determina una longitud de onda
a la cual se suministra la cantidad de
0,4 energía necesaria. [1]
0,2
La absorción de radiación ultravioleta
0,0 (200–400 nm) se restringe a un número
0 10 20 30 limitado de grupos funcionales, llamados
Cocentración mg/L cromóforos (como los alquenos, alquinos,
carbonilos, benceno, etc.), que contienen
Figura 2: curva de calibración patrón electrones de valencia con energías de
interno excitación relativamente bajos. La
presencia de grupos cromoforos en el
La concentración de la muestra se calculó acetaminofén es la razón por la cual este
por interpolación compuesto absorbe radiación en la región
del ultravioleta [1]
−0,1514569
𝑋= = 0,2540𝑚𝑔/𝐿
0,0596𝐿/𝑚𝑔

Sx= 0,04557mg/L
Figura 3: estructura del acetaminofén
Se calculó la concentración en la tableta El espectrofotómetro UV-1700 de marca
shimadzu fue el que se utilizó en la
0,2540𝑚𝑔𝐴𝑐𝑒𝑡. 25𝑚𝐿 50𝑚𝐿
𝑥 𝑥 𝑥 práctica para la determinación; en la
𝐿 0,5𝑚𝐿 3𝑚𝐿 figura 4 se muestra un esquema de su
funcionamiento
0,1𝐿
𝑥0,55875𝑔
0,02235𝑔

= 529,167 ± 0,180𝑚𝑔𝐴𝑐𝑒𝑡.

529,167𝑚𝑔 − 500𝑚𝑔
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = 𝑥100%
500𝑚𝑔
= 5,8334%

2. Análisis de resultados Figura 4: diagrama del espectrofotómetro

uv-1700 [2]
 Tabla No5
Código Nombre Código Nombre
WI Lampara de M1 Espejo
halógeno cortador de la
luz de la fuente
D2 Lampara de M2 Espejo toroidal
deuterio
S1 Ranura de M3 Divisor de haz
entrada
S2 Ranura de M4 Espejo de la
salida muestra
G Rejilla M5 Espejo de la
difractora referencia
F Filtro cortador W Ventana
de luz
extraviada
L
Sam.
Lentes
Agujero para la
PD
Ref.
Fotodiodo
Agujero para la
Figura 5: Lampara de deuterio
muestra referencia

El detector utilizado es un fotodiodo de

En la región del ultravioleta se utiliza la silicio que se compone de una unión pn de
lampara de deuterio, la cual a baja presión polarización inversa formada por un
produce un espectro continuo en la región circuito integrado de silicio.
ultravioleta. El mecanismo por el cual se
produce dicho espectro requiere la
formación inicial de una especie
molecular excitada y luego su disociación
para dar dos especies atómicas más un
fotón ultravioleta. Las reacciones para el
deuterio son
𝐷2 + 𝐸𝑒 → 𝐷2∗ → 𝐷 ´ + 𝐷 ´´ + ℎ𝑣

donde Ee es la energía eléctrica

absorbida por la molécula y es la molécula
de deuterio excitada. La energía del
proceso global puede representarse
mediante la ecuación

𝐸𝑒 = 𝐸𝐷2∗ = 𝐸𝐷´ + 𝐸𝐷´´ + ℎ𝑣

En este caso, es la energía cuantizada fija

de mientras y son las energías cinéticas
de los dos átomos de deuterio. La suma
de y puede variar de manera continua
desde cero hasta; por consiguiente, la
energía y la frecuencia del fotón también
pueden variar en forma continua. Es decir,
cuando por casualidad las dos energías
cinéticas son pequeñas hv será grande, y
viceversa. La consecuencia es un
verdadero espectro continuo desde
alrededor de 160 nm hasta el comienzo de
la región visible [3]
Figura6: esquema de un diodo de silicio y
formación de una capa de agotamiento
La polarización inversa crea una capa de
agotamiento que reduce la conductancia
de la unión a casi cero. Si la radiación
choca con el circuito integrado, se forman
huecos y electrones en la capa de
agotamiento que son barridos
a través del dispositivo para producir
una corriente que es proporcional a la
potencia radiante. Requieren sólo
alimentación de bajo voltaje o pueden
funcionar en polarización cero, por
ello se puede usar en instrumentos
portátiles que funcionen con baterías.
Los diodos de silicio son más sensibles
que los fototubos al vacío, pero menos
sensibles que los tubos
fotomultiplicadores. Los fotodiodos tienen
intervalos espectrales de alrededor de
190 a 1100 nm [4]
El contenido determinado de
acetaminofén en la tableta resulto de
531,471±0,034mg y 529,167mg para el
método de patrón externo y el método de
patrón interno respectivamente, los
porentajes de error respectivos fueron de
6,2942% y 5,8334% por lo que se
establece que el método de patrón interno
es más preciso respecto al valor
reportado en la tableta que es de 500mg.
El error porcentual es debido a que el
método de espectrofotometría Uv-Vis
no es específica porque este método no
separa o distingue otros productos de
degradación que pueda contener
medicamento, es decir podrían existir uno
o varios productos de degradación que en
su estructura química tengan el mismo
grupo cromoforo que la molécula original,
y por lo tanto la absorbancia total obtenida
podría ser la sumatoria de las
absorbancias de la molécula original más
sus productos de degradación. Teniendo
en cuenta lo anteriormente dicho, un
método analítico adecuado para ser
utilizado sería el HPLC [5].
3. Conclusiones
- El método espectrofotométrico UV
no es especifico
- Las soluciones a analizar
mediante espectrofotometria en el
uv deben de garantizar que solo el
analito presentara absorción
- Los grupos auxocromos cambian
la longitud de absorbancia máxima
del grupo cromoforo de la
molecula a determinar
- La determinación se lleva a cabo
con la longitud de onda de mayor
absorbancia
- Los métodos de patrón interno y
patrón externo no presenta
diferencias significativas en
cuanto a la sensibilidad
4. Preguntas
1. Explique, teniendo en cuenta la
estructura del acetaminofén,
porque esta sustancia absorbe en
el ultravioleta
R/ ya se respondió en el análisis
2. Determine si las sensibilidades de los
dos métodos difieren significativamente.
¿se presentan efectos de matriz en la
determinación por curva regular
de calibración?
Prueba t para comparar sensibilidades:
1. H0= La pendiente del método de patrón
externo no difiere significativamente de la
pendiente del método de patrón interno,
por lo que no hay evidencia de efectos de
matriz.
H1= La pendiente del método de patrón
externo difiere significativamente de la
pendiente del método de patrón interno,
por lo que hay evidencia de efectos de
Sr=0,035
tcal=0,58
El valor de t tabulada al 95% es 2,31 el
cual es mayor que la t calculado, por lo
que se retiene la hipótesis nula
3. El equipo que usted utilizo en
esta práctica es de doble haz.
¿Qué ventajas tiene este
respecto a un equipo de un solo instrumental- 6ed. México: Mc Graw-Hill,
haz? ¿el instrumento es de doble 2008. Página: 349
haz temporal o espacial? Explique.
[4] SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. Y
R/ La principal ventaja del equipo de doble CROUCH, S.R. Principios de análisis
haz respecto al de un haz, es en el tiempo instrumental- 6ed. México: Mc Graw-Hill,
que se utiliza en las mediciones, ya que 2008. Página: 196
este permite tener el blanco y la solución
a medir al mismo tiempo, mientras que en [5] Métodos utilizados en la determinación
el de un solo haz hay que poner el blanco de acetaminofén. Disponible en:
medir, sacar el blanco, poner la solución y http://web.sivicos.gov.co/negados/pdf/75
medir. 1183_2010011928.pdf

DOBLE HAZ ESPACIAL [6] Equipos de doble haz temporal y doble

En un instrumento de doble haz en el haz espacial disponible en :
espacio se forman dos haces mediante un http://quimikaparaidiotas.blogspot.com.co
espejo en forma de V llamado divisor de /2009/12/esquema-de-haz-sencillo-y-
haz. Un haz pasa a través de la solución doble-haz.html
de referencia y continúa hasta un
fotodetector. En forma simultánea, el
segundo rayo atraviesa la muestra hasta
un segundo detector ajustado. Las dos
señales de salida se amplifican y su
cociente se determina de manera
electrónica.

DOBLE HAZ TEMPORAL

Es un sistema de doble haz con espejos
móviles rotativos llamados “choppers” El
haz de luz recorre la muestra y la
referencia a través de estos espejos. La
radiación transmitida por la muestra y la
referencia incide luego sobre el detector,
sea gracias a una sencilla geometría
adecuada del sistema o mediante la
reunificación de los recorridos ópticos por
un segundo espejo móvil recombinante [6]

5. Referencias

[1] Cromoforos . Disponible en.

http://www.fao.org/docrep/field/003/ab48
2s/AB482S03.htm
[2] Manual del espectrofotómetro UV-
1700 disponible en:
https://www.chem.uci.edu/~dmitryf/manu
als/Shimadzu%20UV-
1700%20users%20guide.pdf
[3] SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J. Y
CROUCH, S.R. Principios de análisis