Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
9 - Fermentatia Lactica
9 - Fermentatia Lactica
Produsele lactate fermentate reprezintă, fără îndoială cele mai vechi produse alimentare
obținute cu ajutorul microorganismelor (bacterii lactice endogene).
Dintre produsele lactate fermentate cel mai consumat produs este iaurtul
Termenul de “probiotic” - utilizat din 1965 se referă la factori promotori de creștere produși
de microorganisme (în opoziție cu antibioticele).
Definitia OMS: “microorganisme vii, care administrate în cantități adecvate conferă beneficii
de sănătate organismului gazdă”.
Anticarcinogene și antitumorale
Prebioticele sunt ingrediente alimentare, nedigerabile, care acționează benefic asupra
organismului gazdă prin stimularea selectivă a creșterii sau/și activității unuia sau a unui număr
limitat de bacterii din colon. Cu alte cuvinte, conduc la creșterea populației de microorganisme
benefice, cum ar fi lactobacilii sau bifidobacteriile, în detrimentul altor specii.
Prebioticele sunt carbohidrați care nu sunt digerați în stomac și intestinul subțire, ajungând în
colon, unde sunt metabolizați selectiv de anumite componente ale microflorei.
Majoritatea prebioticelor utilizate comercial sunt poli- sau oligozaharide, care derivă din
materialul vegetal, sau sunt sintetizate din dizaharide naturale precursoare.
Rolul bacteriilor lactice în obținerea produselor lactate fermentate este de a transforma lactoza
în acid lactic, provocând acidularea mediului, atingând punctul izoelectric al cazeinei (pH=4,6),
provocând coagularea acestuia și obținerea de coagul. Alături de acidul lactic se obțin cantități
mici de acetaldehidă, diacetil, acid acetic și alcool etilic, care contribuie la definitivarea aromei
specifice produsului. Cultura starter poate produce și alti compuși, care să contribuie la
atingerea unor proprietăți specifice produsului (viscozitate, consistență, textură).
Principala problemă în fabricarea produselor lactate fermentate, în special a iaurtului, este
apariția fenomenului de sinereză – separarea apei de laptele coagulat. Pentru evitarea acestui
fenomen, producătorii parcurg cateva etape în scopul creșterii capacității de legare a apei de
către amestecul de lapte și anume:
1. creșterea conținutului de solide, fie prin adaos de lapte praf fie de lapte concentrat;
rezistență la bacteriofagi;
Cele mai utilizate tulpini utilizate la fabricarea iaurtului sunt: Streptococcus thermophilus și,
Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, ambele microorganisme fiind homofermentative.
FAO (Food and Agriculture Organization) a dat următoarea definiție pentru branză: “Brânza este
produsul proaspăt sau maturat obținut prin îndepartarea lichidului rezultat după coagularea
laptelui integral, parțial sau total desmântânit, smântânii sau combinațiilor acestora.”
Prepararea brânzei din lapte reprezintă cea mai elegantă și eficientă soluție de conservare a
proteinelor și grăsimilor din lapte. Brânzeturile pot fi privite ca produse în care cei mai
importanți constituenți ai laptelui au fost concentrați și care se pot depozita pe un termen
considerabil de mare.
Brânza este o importantă sursă nutritivă, furnizând aprox. 5% din proteinele consumate.
Brânza reprezintă un aliment concentrat, care se obține cel mai frecvent din lapte de vacă, dar și
din lapte de capră, oaie sau bivolită, fiind format din: cazeină, grăsimi în cantități variabile, săruri
minerale și o parte din “serul” din lapte, în care sunt dizolvate lactoza, proteinele de zer și
vitaminele.
conținutul de grăsime:
procesul de fabricație: - proaspete, maturate (Olanda, Tilsit, Sveiter etc), în saramură (feta,
telemea), cu pastă opărită (Dalia, Rucar, Dobrogea), topite, framântate (brânza de burduf).
Inainte de inoculare, materiei prime i se poate adăuga CaCl2, care facilitează coagularea și NaNO3
cu rol în inhibarea bacteriilor butirice.
Inocularea se realizează fie la 20 – 300C / 30 - 45 min, fie la 10 - 120C / 10 - 12 h, sub agitare, prin
adăugare de culturi pure de bacterii lactice, specifice fiecărui sortiment, la care se pot adăuga
microorganisme adjuvante.
Eliminarea zerului, concentrarea proteinelor și grăsimilor are loc sub efectul combinat al
unor procese biochimice, biologice și fizico-chimice, multe având loc simultan, deseori având
efecte complexe reciproce. De ex. expunerea cheagului la temperatura ridicata si pH scăzut
intensifică sinereza, dar dacă temperatura este prea mare microorganismele acidulante se
inactivează, rezultând o sinereză slabă – calitate slabă a produsului finit. Un pH prea acid
conduce la o pierdere semnificativă de minerale, în special Ca, obtinându-se un produs
sfarâmicios. O eliminarea excesivă de zer din cheag este însoțită și de eliminarea de
substanțe dizolvate, se reduce cantitatea de lactoză, substrat al culturilor starter, produsul
obținut fiind uscat și cu defecte de aromă.
Adăugarea de sare reduce acidularea, favorizând închegarea prin solubilizare a proteinelor. Sarea
acționează și ca potențiator de aromă.
Modelarea presupune formarea pastei de brânza pentru produsele semitari, respectiv turnarea în
forme de diferite secțiuni, pentru produsele tari.
Maturarea reprezintă etapa de transformare a brânzei crude în produs finit, prin modificare
compozitiei chimice, aspectului, texturii și aromei, ca urmarea a activității enzimelor din lapte, a
culturilor starter, a enzimelor de coagulare, a microflorei ce poate infecta laptele sau cheagul și a
microorganismelor utilizate în fabricarea unor produse (drojdii, mucegaiuri). Cuprinde trei etape:
- maturarea finală, în care au loc reacții biochimice cu viteză mică, cu rol în definitivarea
aromei specifice.
Maturarea are loc la 15 – 20 0C pentru produsele cu format mic si 20 -26 0C pentru cele cu format
mare, iar definitivarea la 10-140C.
Legumele fermentate își au originea în Asia și Orientul îndepărtat, datând probabil de peste 2000 de
ani, de unde au ajuns în Europa în anii 1500.
Diferența constă însă în faptul că fermentația nu se desfășoară sub acțiunea unor culturi starter,
ci se bazează pe microflora lactică naturală a produselor vegetale, care este extrem de variată,
incluzând specii homo- și heterofermentative.
Materialul vegetal conține însă o microfloră complexă, ceea ce impune selectarea acelor condiții,
factori care să faciliteze activitatea bacteriilor lactice și să fie ostile celorlalte specii.
Acesti factori se rezumă la prezența sării, la temperatură propice și condiții anaerobe. În acest
mediu, majoritatea microorganismelor nelactice vor crește foarte încet (dacă supraviețuiesc), în
timp ce bacteriile lactice vor produce, prin fermentație, acidularea mediului și eliminare de CO2,
contribuind astfel la creșterea ostilității mediului pentru alte specii de microorganisme.
Pseudomonas
Flavobaterium
Micrococcus
Staphylococcus
Bacillus
Enterococcus
Enterobacter
Klebsiella
Escherichia
Lactobacillus
Pediococcus
Streptococcus
Tetragenococcus
Leconostoc
Drojdii si fungi 0.3 - 4.6 log CFU/g
Fusarium
Ascochyta
Aspergillus
Penicillium
Rhodotorula
Activitatea microbiană începe o dată cu adăugarea saramurii. Inițial mediul este aerob, dar
datorită efectului combinat al dislocuirii fizice a aerului, cu respirația reziduală și consumul de
oxigen de către celulele vegetale, treptat atmosfera va deveni anaerobă, oferind puține sanse de
dezvoltare speciilor aerobe. Unele dintre acestea sunt sensibile și la sare, reducând șansele de
creștere și supraviețuire.
În condițiile de temperatură (20-250 C), unele specii facultativ aerobe (Enterobacter, Escherichia,
Erwinia) și alți coliformi, pot supraviețui, dar doar pentru o perioadă scurtă de timp, atât datorită
competiției cu bacteriile lactice cât și datorită acidulării mediului.
Faza homolactică (negazoasă), in care se dezvolta alte bacterii lactice L. plantarum si brevis,
facultativ heterofermentative, metabolizând zaharurile pe diferite cai, provocând aproape
dublarea aciditatii mediului, dominând fermentatia, chiar daca pot fi prezente si alte specii
lactice.
In final aciditatea se apropie de 1.6%, pH= 4, conditii in care doar L. plantarum este capabil sa
creasca. Fermentatia se considera terminata in cca o luna, când aciditatea mediului se apropie
de 1.8% si pH=3.4 - 3.6.
In produsul finit predomina acidul lactic, dar sunt prezenti si alti metaboliti (acid acetic – 0.3%,
etanol – 0.5%, cantitati mici de diacetil, acetaldehida, manitol), care contribuie la definirea
aromei produsului. Acumularea de CO2 din etapa heterofermentativa contribuie la rândul sau la
intensificarea gustului.
Principalele reactii biochimice
Formarea de CO2 fiind nedorita, se evita etapa heterofermentativa prin utilizarea unor
concentratii saline ridicate (5 - 8%), care inhiba cresterea de Leuconostoc, fermentatia
homolactica fiind declansata de Pediococcus sp si Lactobacillus plantarum.
Formarea de CO2 fiind nedorita, se evita etapa heterofermentativa prin utilizarea unor
concentratii saline ridicate (5 - 8%), care inhiba cresterea de Leuconostoc, fermentatia
homolactica fiind declansata de Pediococcus sp si Lactobacillus plantarum.
Pasteur, Lister si Delbrueck au fost cei care au identificat acidul lactic ca fiind un metabolit
microbian.
Obţinerea industrială prin procese fermentative datează din 1881 şi a fost realizată de Avery în
Littleton, MA, SUA.
Începând cu 1990, producţia mondială de acid lactic a cunoscut o creştere semnificativă, printre
cei mai mari producători de acid lactic prin fermentaţie numărându-se NatureWorks LLC (SUA),
Purac (Olanda), Galactic (Belgia), Cargill (SUA) şi câteva companii din China.
Utilizări
Producţia mondială de acid lactic era de 275.000 t la nivelul anului 2006, cu o rată de
creştere anuală de cca 10%, dar rata de creştere poate fi mult mai mare (14-19%) datorită
polimerilor biodegradabili obţinuţi din acid lactic.
Industria alimentară 85% : - agent conservant, acidulant, aromatizant sau cu rol de tampon
într-o mare varietate de produse alimentare cum ar fi dulciuri, pâine şi produse de
panificaţie, băuturi răcoritoare (sucuri de fructe, siropuri, nectaruri), dulceţuri, produse
lactate, condimente, maioneze, bere, la prepararea esenţelor, extractelor, precum şi la
fabricarea conservelor de legume, fructe, peşte. Sărurile de calciu sau sodiu ale esterilor
acidului lactic cu acizi graşi se utilizează drept conservanţi şi emulgatori în panificaţie.
Alte domenii:
Microorganisme producătoare
Bacteriile lactice sunt heterotrofe, necesita medii nutritive complexe, cresc în condiţii
anaerobe, dar pot supravieţui şi în prezenţa aerului, fiind aerotolerante. Pot creşte la
temperaturi de la 5 la 450C şi sunt tolerante la medii acide, fiind capabile să crească şi la un
pH = 4.4, chiar dacă domeniul optim de pH este cuprins între 5.5 şi 6.5.
Se clasifică în homofermentative, care produc peste 85% acid lactic din glucoza şi
heterofermentative, care pe lângă acid lactic, care reprezintă cca 50%, produc şi alţi compuşi
precum etanol, diacetil, formiat, acetoina, acid acetic şi dioxid de carbon.
In procesele industriale de obţinere ale acidului lactic se utilizează doar bacterii lactice
homofermentative, cu precădere Lactobacillus lactis, L. delbrueckii, L. helveticus, L. casei,
L.bulgaricus, L.leichmanii, aparţinând Lactobacilaceaelor, bacterii Gram-pozitive,
nesporulate, aero- şi acido-tolerante, al căror produs majoritar al fermentaţiei de
carbohidraţi este acidul lactic.
Unele specii de fungi, cum ar fi Mucor, Monilia sau Rhizopus, sunt la rândul lor producătoare
de acid lactic, cel mai cunoscut fiind Rhizopus oryzae, care poate produce acid L-lactic cu un
randament de peste 70%.
Biochimia
acidului lactic
C6H12O6 + 2 ADP + Pa
glucoză
2 CH3CH(OH)COOH+2 ATP
acid lactic
Materii prime
Sursa de C
- materiale cu conţinut de amidon din cartofi, tapioca, grâu, porumb, orz, morcovi.
- zer - disponibil in cantitati apreciabile, deoarece aprox. 85% din totalul cantitatii de lapte
prelucrat pentru branzeturi se transforma in zer, care prezinta pentru mediu un important factor
de poluare afectand structura fizico-chimica a solului și viața acvatică. Aproximativ 50% din
producţia mondială de zer se procesează: o parte (45%) se foloseşte ca atare, 30% sub formă de
zer pulbere, din 15% se extrage lactoza, iar restul se foloseşte drept concentrat de proteine de
zer. Datorita continutului de lactoza si a altor elemente nutritive esentiale cresterii
microorganismelor, zerul devine o materie prima importanta in biotehnologie in special pentru
obtinere de acid lactic.
Sursa de azot - hidrolizate proteice: extract sau hidrolizat de drojdie, peptone; extractul de
porumb poate inlocui partial extractul de drojdie si peptonele; în completarea sursei
organice de N în substrat pot fi adăugate săruri de amoniu.
Procedee tehnologice
Fermentaţiile discontinue sunt superioare celor continue din toate punctele de vedere, mai
puţin cel al productivităţii. Randamentul procesului poate fi mărit prin realizarea de procese
discontinue repetate sau semicontinue, mai ales în cazul substraturilor scumpe. Operarea
continuă oferă avantajul maximizării productivităţii.
Fermentaţia lactică anaerobă operează optim la un pH 5.5 – 6.0, în unele cazuri 6.0 - 6.5, pH la
care acidul se obţine sub formă de sare. Valori ale pH-ului sub 4.5 inhibă puternic creșterea
celulară.
Asigurarea unei concentrații celulare ridicate este esențială pentru obținerea unor productivități
ridicate.
Parametrii de proces:
- Condiții anaerobe;
Procedee alternative
transformarea acidului lactic într-un derivat uşor separabil şi purificabil, spre exemplu într-
un ester; eficienţa economică a procedeului propus fiind susţinut de posibilitatea recuperării
şi recirculării alcoolului într-o proporţie de peste 85%. Prin acest procedeu se elimină
formarea gipsului și se evită operarea în mediu corosiv prin eliminarea acidului sulfuric.
extracţia reactivă este o altă variantă de recuperare a acidului lactic din mediu de
fermentaţie folosind amine terţiare în soluţii alcoolice; dezavantaj: consumul relativ ridicat
de solvenţi organici, al căror caracter toxic asupra celulelor microbiene nu este neglijabil.
separarea prin schimb ionic, utilizând anioniţi, în special în cazul proceselor care se
desfăşoară într-o singură etapă (cu zaharificare şi fermentaţie simultană) în fază solidă, când
în mediu se obţine preponderent acidul liber.
Dezavantaj: prezenţa în mediul de fermentaţie şi a altor specii de anioni (SO42-, Cl-), care
intră în competiţie cu anionii de lactat, iar îndepărtarea acestora din mediu pe parcursul
fermentaţiei este nedorită.
separarea acidului lactic din mediul de fermentaţie utilizând site moleculare de tip Silicalite
(de tip zeolitic), care prezintă un diametru de pori adecvat pentru separare, prezintă
afinitate scăzută pentru apă şi se caracterizează prin stabilitatea termică şi hidrotermică
ridicată. Rezultatele obţinute relevă o capacitate de reţinere ceva mai mică decât pe alţi
absorbanţi polimerici. Cu toate acestea simplitatea procedeului prezintă un mare avantaj.
Procedeu discontinuu
Materii prime:
- zer, zer deproteinizat, zer hidrolizat, permeat de zer, lapte degresat și fără cazeină;
- mediul necesită suplimentare cu surse de azot: extract de drojdie, autolizat de drojdie, extract de
porumb sau peptone;
Fermentaţia de regim se conduce anaerob, în fermentatoare confecţionate din lemn sau V2A, având
capacităţi cuprinse între 20 şi 30 m3. Fermentatoarele sunt prevăzute pe lângă sistemele de agitare
cu o conductă de abur, utilizată atât pentru încălzirea mediului de fermentaţie în faza iniţială, cât şi
pentru coagularea microorganismelor lactice în faza finală. Instalaţiile moderne de fermentaţie sunt
prevăzute cu sisteme automate de reglare a temperaturii.
- factori semnificativi:
- cantitatea de inocul şi mediul de precultură, care joacă un rol important în cantitatea de acid lactic
produsă,
În vederea menţinerii acidităţii totale a mediului în jurul a 0,2% la fiecare 6 ore se adaugă o
suspensie de lapte de var. Prin acest procedeu de neutralizare în timp, bacteriile se menţin pe toată
durata procesului în activitate maximă. În final aciditatea se reduce la 0,1 %. După coagularea
bacteriilor lactice la o temperatură de 950C şi decantarea acestora, lichidul limpede, respectiv
filtratul după separarea masei celulare, se decolorează în trepte prin tratare cu cărbune activ sau
kieselgur. Produsul brut decolorat se concentrează sub vid, iar lactatul de calciu va cristaliza la 10 -1
50C în decurs de 10 - 12 ore. Lactatul de calciu se purifică prin cristalizări repetate.
Procedeul continuu
Fermentatorul de regim, care este elementul central al instalaţiei, este prevăzut cu sistem automat
de reglare a temperaturii (43 10C) şi sisteme de dozare automată a zerului sterilizat, respectiv a
suspensiei de lapte de var. Debitul de zer se reglează funcţie de conţinutul de acid lactic al mediului,
care se elimină continuu din fermentator. Mediul din fermentator se colectează într-un rezervor
intermediar şi parcurge etapele de coagulare, decantare şi prelucrări ulterioare.
Reducerea perioadei de lag, viteze mari de creştere, consum rapid de lactoză şi obţinerea unor
concentraţii mari de acid lactic s-au obţinut prin suplimentarea mediului cu extract de drojdie şi
microaerarea mediului.
- recircularea biomasei, care permite realizarea unor concentrații celulare ridicate în fermentator,
obținerea unor cantități sporite de acid lactic la un timp de staționare mic. În acest mod de operare,
productivitatea acidului lactic se poate dubla prin creșterea vitezei de diluție;
- trecerea mediului din fermentator în celula catodică a unei unităţi de electrodializă, unde are loc
separarea acidului lactic format şi recircularea mediului în fermentator;