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BIOQUÍMICA
Bucaramanga
1 Contenido
2 INTRODUCCIÓN ............................................................................................. 6
3 PRE INFORME DE LABORATORIO................................................................ 8
3.1 Portada....................................................................................................... 8
3.2 El Índice General........................................................................................ 8
3.3 Introducción................................................................................................ 8
3.4 Revisión bibliográfica ................................................................................. 8
3.5 Materiales y Métodos ................................................................................. 9
3.6 Plan de Trabajo .......................................................................................... 9
3.7 Nomenclatura............................................................................................. 9
3.8 Referencias ................................................................................................ 9
3.9 Anexo ......................................................................................................... 9
4 INFORME DE LABORATORIO...................................................................... 11
4.1 Portada..................................................................................................... 11
4.2 Resumen.................................................................................................. 11
4.3 El Índice General...................................................................................... 11
4.4 Introducción.............................................................................................. 11
4.5 Revisión bibliográfica ............................................................................... 11
4.6 Materiales y Métodos ............................................................................... 12
4.7 Resultados ............................................................................................... 12
4.8 Discusión.................................................................................................. 12
4.9 Conclusiones............................................................................................ 12
4.10 Recomendaciones ................................................................................ 12
4.11 Revisión bibliográfica ............................................................................ 12
4.12 Referencias........................................................................................... 13
4.13 Anexo.................................................................................................... 13
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO ........................... 14
5.1 NORMAS PERSONALES ........................................................................ 14
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS ......... 15
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN ................ 16
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA .................................................................. 16
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS...................................................... 16
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS. ......... 18
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO ........................................................ 21
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA .......................................................... 22
6.3 REACCIÓN DE BIURET .......................................................................... 23
6.4 REACCION XANTOPROTEICA............................................................... 24
6.5 REACCION DE MILLON .......................................................................... 25
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI .................................................................. 26
6.7 PREGUNTAS:.......................................................................................... 28
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS .......................................... 30
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES ........................................................ 32
7.2 REACCIÓN DE BIURET .......................................................................... 33
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS ....................................... 35
7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS: MÉTODO
DE BRADFORD................................................................................................. 36
7.5 PREGUNTAS:.......................................................................................... 39
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS .................................. 41
8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ....................................................... 45
8.2 PRUEBA DE BENEDICT ......................................................................... 46
8.3 REACCIÓN DE FEHLING........................................................................ 47
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH ....................................................................... 48
8.5 PRUEBA DE TOLLENS ........................................................................... 49
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO) ............................................................. 51
8.7 PREGUNTAS........................................................................................... 51
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS....................... 53
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ....................................................... 54
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS .................................................................... 54
SAPONIFICACIÓN ........................................................................................ 55
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III .............................................................. 56
9.4 PREGUNTAS:.......................................................................................... 57
10 BIBLIOGRAFÍA............................................................................................ 58
Tablas
El desarrollo del trabajo práctico se apoya en una serie de pasos que van
describiendo el progreso de una técnica a través de mediciones, cálculos,
observaciones cualitativas y cuantitativas de los procedimientos
planteados en la guía. La práctica de laboratorio integra, en el estudiante
la habilidad de trabajar en el laboratorio, utilizando las técnicas más
habituales de un laboratorio bioquímico y aprendiendo a interpretar los
resultados experimentales.
3 PRE INFORME DE LABORATORIO
3.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos
escritos, en el entorno de gestión encuentra un manual de normas APA.
La portada contiene el nombre la universidad, la escuela a que pertenece
el nombre de los integrantes del grupo con los datos necesarios para su
identificación.
3.2 El Índice General
Presenta toda la información del contenido, incluyendo el índice general,
el índice de tablas, el índice de figuras y el índice de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
3.3 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales
características de las técnicas, así como, descripción de objetivos
generales y específicos que da lugar al trabajo experimental. Esta es una
sección realizada, redactando las ideas de los autores o sea ustedes.
3.4 Revisión bibliográfica
Consiste en presentar y describir un tema de acuerdo con las temáticas
propuestas por la guía del componente práctico. Se toman los principales
aspectos teóricos de acuerdo a la metodología que se platea para
desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los créditos
respectivos a los autores consultados y las ideas resultantes son
redactadas por el estudiante.
3.5 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las
precauciones a tener, así como describir la información relávate que
permita el buen desarrollo de la práctica.
3.6 Plan de Trabajo
En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y salir
de forma ordenada siguiendo en todo momento las instrucciones que haya
impartido el Profesor. Localizar al iniciar la sesión de prácticas los
diferentes equipos de emergencia en el correspondiente laboratorio:
Duchas y lavaojos, Botiquín, Absorbente para derrames, Alarma de
emergencia, Salida de emergencia y Recipiente para el vidrio roto.
Polares sin carga Los grupos R de estos aminoácidos son más solubles en
agua, que los aminoácidos apolares, debido a que
contienen grupos funcionales que forman puentes de
hidrógeno con el agua.
Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema de
una sola letra, impuesto en genética molecular.
Nomenclatura
A Ala Alanina
G Gly Glicina
I Ile Isoleucina Ae
Apolares alifáticos
L Leu Leucina Ae
V Val Valina
F Phe Fenilalanina Ae
Apolares aromáticos
W Trp Triptófano Ae
C Cys Cisteina
Apolares con azufre
M Met Metionina Ae
T Thr Treonina Ae
R Arg Arginina
Polar con carga
H His Histidina Ae
positiva
K Lys Lisina
NaOH Gradilla 2
albúmina Estufa 1
α Naftol
Hipoclorito de sodio
Reactivo de
Hopkins- Cole
Ácido sulfúrico
(H2SO)
Reactivo de Millón
Aminoácidos:
Glicina, tirosina,
triptófano,
fenilalanina y
arginina
Fenol
Albumina de huevo
Procedimiento
observe el cambio
de color
Hidróxido de Sodio
con 1.5 mL de
(NaOH
3 proteína de Agregue 2 gotas de hipoclorito de Sodio al
trigo 1%. 10% a cada tubo.
+
alfa-naftol
hipoclorito de Sodio
Hidróxido de Sodio
(NaOH
+
con 1.5 mL de
4 5 ml de solución respectiva
Leucina alfa-naftol
hipoclorito de Sodio
NINHIDRINA
BIURET
XANTOPROTÉICA
COAGULACIÓN
ADAMKIEWICK o
HOPKINS COLE SULFATO DE AMONIO
MILLÓN
SAKAGUCHI
(+) Negro o
(-) Incolora gris
(+) Rojo
Otros Cisteína,
Arginina
aminoácidos cistina,
metionina
Tomada:
6.7 PREGUNTAS:
NaOH Gradilla 2
albúmina Estufa 1
hidróxido
sódico Observar y tomar apuntes con 3 mL de
de los cambios. solución
con 3 mL de +
3 respectiva
Leche 1% acetato de
plomo +
hidróxido
sódico
con 3 mL de +
5
Glucosa acetato de
plomo
1- Reactivo de Bradford
Azul de coomasie G-250 5 mg
Etanol 2.5 ml
Ácido fosfórico 5 ml
Agua Hasta 50 ml
Mezclar en el orden indicado, disolver con agitación y a continuación filtrar
METODO
µl (alb) 0 10 20 30 40 50 60
V. leche (µl) 20 25 30
RESULTADOS
1- Elaboración de la recta patrón. Para ello representar en el papel
milimetrado adjunto la absorbancia de cada uno de los tubos que
contenían albúmina bovina frente a la cantidad de proteínas
correspondiente. Si se dispone de una calculadora con capacidad para
hacer rectas de regresión, compruebe el coeficiente de correlación de la
recta obtenida. En cualquier caso determine la pendiente de la recta.
7.5 PREGUNTAS:
Referente teórico.
NaOH +Calor
+R
Reacción
-Sulfato cúprico.
-Citrato de sodio.
Acetato cúprico
Rotación óptica
almidón Estufa 1
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
con 3 ml de
reactivo de
1 Glucosa al
Benedict Preparar los tubos de Agregue a cada tubo
1%
ensayo. de ensayo 2
con 3 mL de
reactivo de ml de reactivo de
2 sacarosa al
Benedict Benedict
1% Agregue a cada tubo de
ensayo 2 +
con 3 mL
reactivo de
3 de almidón
Benedict
al 1%
con 3 mL ml de reactivo de Baño de agua
de jugo de reactivo de Benedict. hirviente por
4
cebolla al Benedict
10 minutos.
1%
Tubos de ensayo en un
con 3 mL de
reactivo de baño de agua hirviente
5 Fructosa al
Benedict por unos 10 minutos.
1%
con 3 mL reactivo de
6
de agua Benedict Observar y tomar apuntes
de los cambios. Positiva 3 ml de solución
aparece un precipitado respectiva
rojizo, verde o amarillo.
10 minutos.
con 3 mL de Reactivo Fehling A
6 Observar y tomar apuntes de los
Lactosa al 1% Reactivo Fehling B cambios.
3 ml de solución respectiva
reactivo de Molisch
con 3 mLde de
1 + Preparar los tubos de ensayo. reactivo de Molisch
Glucosa al 1%
H2SO4 +
+
reactivo de Molisch
con 3 mL de coloque el tubo en posición
6 + vertical y observe la
maltosa al 1%
H2SO4 formación del anillo rojo
violeta
NaOH al 5%
con 3 mL de solución
1 + Preparar los tubos de ensayo. dos gotas de solución de
Glucosa al 1%
AgNO3 al 5% α-naftol
con 3 ml de solución
1 lugol
Glucosa al 1%
Preparar los tubos de Agregar 5 gotas de lugol
con 3 mL de solución ensayo.
2 lugol
sacarosa al 1%
con 3 mL de solución
3 lugol Agregar 5 gotas de lugol
almidón al 1%
con 3 mL de solución
4 lugol
jugo de cebolla al 1% Observar y tomar apuntes
de los cambios.
con 3 mL de solución
5 de almidón de papa al lugol
1%
3 ml de solución respectiva
8.8 PREGUNTAS
Explique por qué el monosacárido gliceraldehido da negativa la prueba
Molish.
Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas
básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones
mucho más bajas que los dos primeros. Además, pueden contener P, N y
S. Constituyen un grupo de sustancias muy heterogéneas con
características químicas diversas, pero con algunas propiedades físicas
comunes, que podrían resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo,
alcanos (ej: hexano), benceno, acetona y alcoholes.
Céridos
Complejos Fosfolípidos
Glucolípidos
Esteroides
Prostaglandinas
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantidad
Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Estufa 1
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
+
Observar y tomar apuntes de los Agite los tubos
cambios.
+
Dejar en reposo.
SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con
bases fuertes, NaOH o KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben
el nombre de jabones. Esta reacción se denomina de saponificación. Son
saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen ácidos grasos
en su estructura.
Agitar.
10 minutos.
con 3 mL de
2 Aceite Tinta roja Agregar 3mL de aceite vegetal.
vegetal
TORRES, G. (2013). 6. DESCRIPCIÓN DE PRÁCTICAS PRÁCTICA no. 1: METODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION
DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS. UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA YA DISTANCIA.
Universidad de Bogotá, & Jorge Tadeo Lozano. (2014). GUÍA no 9: ENSAYOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS.
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https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/reaccion-de-benedict.
http://www.academia.edu/6410068/BIOQUIMICA_INF_4
Universidad Complutense de Madrid. (Marzo de 2007). UCM- Manual de Gestión de Residuos Peligroso. Recuperado el
15 de Enero de 2012, de http://www.ucm.es/info/ucmp/cont/descargas/documento28113.pdf
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/practicasgenerales.htm
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf
http://veterinaria.uaemex.mx/_docs/603_958_MP%20Bioqu%C3%ADmica.pdf