Guia Parasitologia 2017 I

Universidad Peruana los Andes
Facultad de Ciencias de la Salud
Guía de Prácticas
Curso Parasitología
2017
Profesor: MG: Freddy Orihuela Villar
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INDICE
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REGLAMENTO DEL LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA 7
GENERALIDADES 8
TECNICAS DIRECTAS
Diagnóstico de enteroparasitos 9
Diagnóstico de hemoparasitos e histoparasitos 9
Diagnóstico de artrópodos 11
TECNICAS INDIRECTAS
Diagnóstico de enteroparasitos 12
Diagnóstico de hemoparasitos e histoparasitos
RECOGIDA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS CLINICAS 13
Heces 13
Conservación y transporte (Persevantes)
Test de Graham 17
Gusanos y otros parásitos macroscópicos 17
Contenido duodenal 17
Sangre 17
Suero 18
Líquido Cefalorraquídeo 18
Muestras de tejido 18
Biopsia
Exudado borde ulcera
Aspirado de lesión
Orina 19
Muestras para prueba de PCR 19
REPORTE DE RESULTADOS (enteroparasitos) 19
Cualitativo
Semicuantitativo
Ejemplo de reporte de Examen parasitológico 20

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PRACTICAS DE LABORATORIO 21
Practica nº 1. Examen directo de Heces 22
Elementos No parasitarios 26
PROTOZOARIOS
Practica nº 2. Observación de Amebas - Rizópodos 33
Practica nº 3. Observación de Flagelados 38
Procedimiento para diagnóstico de Trichomonas 39
Practica nº 4. Observación de Histoparasitos Y Hemoparasitos I 42
Técnicas y procedimientos en Leishmaniosis 42
Técnicas y procedimientos en Tripanosomiasis 45
Practica nº 5. Observacion de Ciliados 50
Practica nº 6. Observacion de Hemoparasitos II: Plasmodium 52
Extensión de sangre 52
Gota gruesa 53
Coloración 55
Determinación de parasitemia 58
Características morfológicas de especies de Plasmodium 62
Practica nº 7. Observacion de Coccideos intestinales 65
Método Kinyoun 65
HELMINTOS
Practica nº 8. Observacion de Nematodes 71
Practica nº 9. Observacion Trichuris trichiura 73
Practica nº 10. Observacion de Uncinarias 74
Observacion Strongyloides stercoralis 76
Practica nº 11. Observacion Enterobius vermicularis 78
Método de Graham 78
Practica nº12. Observacion de Cestodos I 81
Practica nº13. Observacion de Cestodos II 84
Practica nº14. Observacion de Cestodos III 86
Practica nº15 .Observacion de Trematodos 88
ARTROPODOS
Practica nº16. Observación de insectos de importancia medica 89
3
Practica nº17. Examen Coprofuncional 94
Examen Macroscópico 96
Examen Físico-Químico 99
Examen Microscópico 107
Características de los Síndromes Digestivos 113
Modelo de reporte de examen coprológico funcional 115
ANEXOS
Métodos de concentración 117
Sedimentación 117
Sedimentación por Centrifugación 118
Método Ritchie 118
Método Telemann 120
Método Charles-Barthelemy 121
Concentración por centrifugación 122
Concentración por Formalina-Acetato etilo 123
Sedimentación Simple 125
Método Sedimentación simple en copas 125
Sedimentación espontanea en tubo 127
Técnica Baerman Modificada 127
Método de Lumbreras Modificado 128
Flotacion
Metodo Faust 128
Metodo Willis 131
Metodo Sheater 132
Métodos Cuantitativos para el recuento de huevos y larvas 135
Método Dilución Stoll 136
Método Kato-Katz 140
Método Directo 142
Técnica de Ferreira 143
Técnica Mac Master 144
Técnicas Especiales 145
Método Harada-Mori 145
Método de Baerman 147
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Migración de Larvas en Agar 149
Procedimientos para Fijar Helmintos 152
Métodos de coloración para Helmintos 153
Coloración Carmín clorhídrico 153
Coloración de Bonilla,Naar y Beloy 154
Coloración hematoxilina férrica de Delafield 154
Método de la tinta china 155
Coloraciones Especiales para Protozoarios 157
Hematoxilina férrica 157
Tricromica de gomori 161
Reacción Inflamatoria en Heces 163
Modelo de reporte de reacción inflamatoria 164
Control de Calidad Interno en Parasitología 165
Diagnóstico Inmunológico de Enfermedades Parasitarias 172
Cuadros Comparativos - Resumen 178
Examen de Biopsias del Tubo digestivo 185
Preparación de Reactivos 186
GLOSARIO DE TÉRMINOS PARASITOLÓGICOS 192
ALGORITMOS DIAGNOSTICOS 198
PUZZLE 206
ATLAS DE PARASITOS 208
BIBLIOGRAFIA 215
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REGLAMENTO DEL LABORATORIO DE
PARASITOLOGIA
1. El alumno deberá llegar puntual en su horario de clase.
2. El alumno debe de ingresar al laboratorio con una bata o mandilón de manga larga.
3. El alumno debe de asistir al laboratorio con su Manual de Practicas
4. Libros y cuadernos deben mantenerse en la mesa de trabajo, solo bajo la indicación del
docente
5. El alumno debe contar con su material necesario para la práctica de laboratorio

correspondiente.
6. El alumno debe limpiar su área de trabajo con hipoclorito de sodio antes y después de
la práctica de laboratorio.
7. Durante la práctica de laboratorio el alumno debe usar guantes y mascarilla.
8. Queda estrictamente prohibido comer, beber, llevarse cosas a la boca y fumar en el

Laboratorio.
9. Una vez terminada su práctica, las muestras serán desechadas por el alumno en los
depósitos correspondientes.
10. En caso de romperse o derramarse muestra fecal deberá verterse fenol o hipoclorito
sobre él y dejarlo cuando menos 10 minutos antes de limpiar y avisar al Docente o
personal de laboratorio.
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GENERALIDADES
El parasitismo es una modalidad de asociación que ha evolucionado con
bastante éxito; los organismos que han optado por esta forma de vida tienen, en
general un potencial biótico mayor. Incluso se argumenta que existen más parásitos,
como especies y como individuos, en relación a seres de vida libre, ya que son raros
los últimos que no albergan una o más especies de parásitos.
La prevalencia de las parasitosis está estrechamente vinculada a diferenciales
climáticas, fenómenos demográficos y al desarrollo socioeconómico de las diferentes
zonas del planeta. No es de extrañar que los protozoos y helmintos patógenos sean parte
de la vida cotidiana en los trópicos, sin ser privativos de ellos.
Las enfermedades parasitarias afectan a diversos grupos de población de todas las
edades y razas, representando un elevado riesgo para la salud y la vida de extensos
sectores. Por sus características peculiares, afectan de preferencia a los grupos jóvenes y
de mayor productividad, que viven en zonas suburbanas de las grandes ciudades o en
zonas rurales. El ciclo de cada parásito expresa la complejidad del fenómeno biológico.
Las variables agente, huésped y ambiente (tríada ecológica) son fundamentales

para orientar el diagnóstico parasitario. Se debe tomar en consideración el estado
parasitario buscado (huevo, quiste, larva, etcétera.), tanto en el huésped como en el
ambiente, para seleccionar el tipo y características de la muestra (orina, deposición,
ambiente, etc.) así como escoger el mejor procedimiento o técnica para su diagnóstico.
Debido a la existencia de infecciones transmitidas en forma natural desde animales
vertebrados al hombre y viceversa (zoonosis), la búsqueda de los parásitos se extiende
incluso al reservorio animal. Por ejemplo, en toxocariasis y equinococosis se puede
solicitar colaboración a los laboratorios de medicina veterinaria para estudiar las
deposiciones de las mascotas (perros). También se pueden estudiar fuentes infectantes,
como carnes (triquinosis, sarcocistosis), tierras en el caso de geohelmintiasis (ascariasis,
tricocefalosis, toxocariasis) y aguas en el caso de las enteroparasitosis que se transmiten
por contaminación fecal.
El objetivo de las técnicas diagnósticas es pesquisar e identificar al parásito (en
cualquiera de sus estados) lo que se realiza con técnicas directas, o a través de técnicas
indirectas que evalúan la respuesta inmune del huésped .El hallazgo de una forma
parasitaria en cualquiera de sus estados es considerado un diagnóstico patognomónico,
en cambio la evidencia de la respuesta inmune positiva hacia un agente parasitario sólo
hace posible un diagnóstico presuntivo.
Las técnicas para diagnosticar PARASITOS se pueden dividirse:
I. TECNICAS DIRECTAS permiten observan al parásito ya sea como

trofozoito, quiste, larva, gusano adulto, ninfa, etc.
II. TECNICAS INDIRECTAS detectan antígenos del parásito o anticuerpos
generados en el hospedero producto de la infección (pruebas serológicas) y
de otro tipo, que unido a la clínica dan un diagnostico probable.
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TÉCNICAS DIRECTAS
Diagnóstico de enteroparasitos
Se basan en el diagnóstico morfológico de los distintos estados de los parásitos. Tiene
como objetivo pesquisar e identificar distintas formas de protozoos (trofozoíitos, quistes,
ooquistes) y helmintos (proglótidas y huevos). Su sensibilidad depende de las
características de las técnicas, de la carga infectante, de la biología de los parásitos, del
transporte y preparación de la muestra, de la implementación de equipos adecuados y de
la disponibilidad de tiempo y experiencia de los observadores.
Las técnicas de uso más habituales son los métodos de Teleman.modificado y el de
Burrows o PAF. este último tiene la ventaja de permitir un apropiado diagnóstico de
trofozoítos, lo que tiene particular importancia en el estudio de la amebiasis intestinal.
Ambas son de gran utilidad para el clínico, pues pueden informar la presencia de varios
parásitos y comensales al mismo tiempo.
El reconocimiento de Cryptosporidium spp. como un importante agente etiológico de
diarrea, principalmente en pacientes inmunocomprometidos, hizo necesaria la
incorporación de la técnica modificada de Ziehl Neelsen a la rutina en el laboratorio. Ella
debe ser solicitada en forma explícita por el clínico.
El estudio de enteroparásitos generalmente se realiza con muestras de deposiciones, pero
puede efectuarse en forma excepcional en el líquido biliar, y aspirado duodenal. El
examen parasitológico de deposiciones puede ser seriado (1 a 3 muestras), o de sólo una
muestra (examen directo o en fresco).Este último se utiliza para el diagnóstico de
urgencia, frente a cuadros diarreicos y disentéricos en niños y adultos, especialmente en
pacientes inmunocomprometidos. La muestra se envía inmediatamente al laboratorio, en
donde se da prioridad a su análisis, por lo que la respuesta puede ser entregada antes de
una hora. Otro examen de gran utilidad es el test de Graham, que se utiliza, especialmente
para la pesquisa de huevos de helmintos (Enterobius vermicularis) en las márgenes de la
zona perianal.
El diagnóstico de tricomoniasis urogenital habitualmente se realiza por examen de una
muestra de flujo vaginal, la que se observa directamente al microscopio. Existen técnicas
específicas de cultivo e inmunodiagnóstico (imunofluorescencia) que se emplean en
investigación clínico-epidemiológica.

Estos métodos se utilizan en la búsqueda de parásitos circulantes en pacientes que
están en fase aguda de la infección. Son de utilidad en el diagnóstico de Tripanosomiasis
americana (Enfermedad de Chagas) malaria y filariasis.
Se emplean las siguientes técnicas:
 Examen de sangre al fresco. Una gota de sangre recién extraída se observa entre
lámina y laminilla, directamente al microscopio.
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 Frotis de sangre. Se extiende una gota de sangre recién extraída, sobre un
portaobjeto, se tiñe con May Grunwald Giemsa o Wright.
 Gota gruesa. Se colocan tres gotas de sangre en un portaobjeto, se mezcla con
movimientos concéntricos con un alfiler o con el extremo de un portaobjeto, se
extrae la fibrina. se seca a temperatura ambiente y luego se tiñe
 Microstrout o microhematócrito. Se toma una muestra de sangre en tubo de
microhematócrito y se centrifuga a 100 rpm por tres minutos. Se fractura el capilar
en el límite de la capa leucocitaria. Se deposita sobre un portaobjeto la capa de
leucocitos y plasma y se observa al microscopio.
 Xenodiagnóstico. Esta técnica sólo se
utiliza para enfermedad de Chagas. Se
emplean ninfas de Triatoma spp. libres de
infección, las que se alimentan con sangre
del paciente. Los resultados se obtienen a
los 30, 60 y 90 días. Esta técnica sólo es
utilizada en algunos centros de
investigación y puede ser reemplazada por
PCR para T cruzi.
 PCR Trypanosoma cruzi. Se basa en la

pesquisa de fracciones del parásito a
partir de secuencias conocidas de su
ADN. la técnica se basa en la ampliación
de un segmento del ADN del parásito,
para luego caracterizarlo e identificarlo.
El Pneumocystis carinii actualmente se diagnostica por el examen de muestras de lavados

broncos alveolares o expectoración, que son teñidas con Giemsa o Gomori. Se están
implementando técnicas de apoyo diagnóstico complementarias (IFI, y PCR).
El diagnóstico de triquinosis sólo excepcionalmente se realiza mediante una biopsia
muscular. Habitualmente se realiza mediante los antecedentes clínicos epidemiológicos,
los que pueden ser apoyados por la presencia de eosinofilia en el hemograma y técnicas
serológicas (ELISA Trichinella spiralis), la que se ha hace positiva en la fase de invasión.
El diagnóstico directo de la presencia de la larva de Taenia equinococcus se realiza por el
estudio histológico de piezas quirúrgicas, en el cual se identifica claramente la capa
cuticular (escleroproteica anucleada), patognomónica de esta parasitosis. También se
puede estudiar el contenido del quiste, siendo posible encontrar la arenilla hidatídica, que
está constituida por diferentes formas del parásito, entre ellas protoescólices; es
patognomónico el hallazgo de "ganchitos" que son parte estructural de este cestodo. La
biopsia está contra indicada en pacientes en quienes se sospecha hidatidosis, por el
riesgo de romper el quiste y provocar un shock anafiláctico o una siembra de parásitos.
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Diagnóstico de artrópodos
Tienen como objeto identificar el género y la especie y están basadas en la observación
con lupa o microscopio del artrópodo en algunos de sus estados. Las muestras pueden
ser trasladadas en seco o en agua al laboratorio y pueden ser tomadas del huésped
(ectoparásitos permanentes) o del ambiente (ectoparásitos temporales).
Entre los artrópodos que más afectan al hombre se encuentran los ácaros de la piel
(Sarcoptos scabiei y Demodex folliculorum). La técnica de toma de muestra, denominada
Acaro test, es la ideal para obtener el parásito. Otro artrópodo de alta prevalencia es el
arácnido Loxoceles laeta (Araña del rincón), cuyo diagnóstico específico se realiza al
examinar su morfología y específicamente la distribución de sus ojos (tres pares
distribuidos en forma de triángulo).
El diagnóstico de miasis primarias y secundarias, específicas o accidentales se realiza al
visualizar el estado de la larva de estos insectos, que desarrollan una metamorfosis
incompleta, así como su tamaño y morfología.
ARTROPODOS DE INTERES MEDICO
CLASE ORDEN EJEMPLOS

Moscas
Dípteros
Mosquitos
Blattaria Cucarachas
Insectos
Hemíptero Triatomídeos
Siponaptera Pulgas
Anoplura Piojos
Arañas
Scorpionida
Escorpiones
Arácnidos
Acaros
Acarina
Garrapatas
Crustáceos Copepodo Cyclops
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TÉCNICAS INDIRECTAS
Diagnóstico de enteroparasitos
En la Amebiasis la técnica de ELISA podría ser utilizada para el diagnóstico de absceso
hepático, pero hasta el momento no ha dado buenos resultados, por la alta prevalencia de
la infestación que hace que existan muchas personas infectadas asintomáticas con
anticuerpos contra E histolytica.Si bien se han descrito han descrito técnicas ELISA para
pesquisa de antígeno de Giardia lamblia en deposición, la presencia de poliparasitismo
hace que los métodos de Teleman y PAF sean de elección, pues son de menor costo y
mayor rendimiento.
Las técnicas de inmunodiagnóstico son herramientas de gran valor para evaluar la
infección por ciertos agentes patógenos, especialmente histoparasitos, pues no requieren
de una interpretación subjetiva, de detalles morfológicos o de la toma de muestra invasiva
para evidenciar el agente patógeno, como biopsias por ejemplo. La detección de
anticuerpos séricos (IgG e IgM), se utiliza para el diagnóstico de diversas histoparasitos
Se debe recordar que algunas son enfermedades crónicas, en las cuales los parásitos
permanecen en los tejidos en estado latente, por lo que la IgG permanecerá positiva por el
resto de la vida, motivo por el cual es muy importante considerar el título de IgG. La
presencia de IgM, en cambio refleja una etapa aguada y primo infección de la parasitosis.
Se está estudiando la aplicación clínica de rutina de IgE e IgA .
Para determinar la presencia de anticuerpos (IgG, IgM, IgA, IgE) se pueden emplear una
variedad de técnicas, entre ellas CIEF (contrainmuno-electroforesis), ELISA (ensayo de
inmunoanálisis) e IFI (inmunofluorescencia indirecta). cada una de estas técnicas puede
emplear distintos tipos de antígenos del parásito: somáticos (crudos o purificados),
metabólicos (secretor - excretor), de superficie (parásito completo o secciones de
éste).Para el diagnóstico de patologías parasitarias crónicas se sugiere el uso de dos
técnicas complementarias.
En clínica es de mucha utilidad que el análisis de una curva serológica, que se obtiene
evaluando en dos momentos la concentración de inmunoglobulinas para determinar la
evolución de la respuesta inmune. Es de especial importancia en infecciones cuando se
desea objetivar una fase aguda. Por ejemplo se emplea para determinar primo infección
en toxoplasmosis, enfermedad de Chagas y toxocariasis. Actualmente se dispone de
ELISA Cisticercosis (Cisticercus cellulosae) ELISA Toxocara (Toxocara spp.).ELISA
Fasciola (Fasciola hepática),ELISA Triquinosis (Trichinella spiralis) ELISA Hidatidosis
(Taenia equinococcus).Las intradermoreacciones, técnicas para medir inmunidad celular,
actualmente no se están utilizando de rutina. Se han comenzado a implementar técnicas
de biología molecular para algunas parasitosis, entre ellas la PCR (reacción en cadena
polimerasa) dirigida a fragmentos del ADN del parásito. Este método sirve como indicador
de la presencia de parásito en la sangre y en tejidos. Se están haciendo esfuerzos por
montar PCR Amebiasis (Entamoeba histolytica), que sería de utilidad en casos de invasión
tisular (abscesos hepáticos).
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RECOGIDA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS CLINICAS
HECES
Recogida. Se deben recoger 3 muestras, preferentemente en días no consecutivos ya
que la expulsión de parásitos no es constante. Se recomienda recogerlas en un periodo de
10 días ya que la excreción de protozoos intestinales es cíclica y al hacerlo así es más
probable coincidir con los días de máxima excreción. La probabilidad de detectar parásitos
en una sola muestra puede ser tan baja como 50%-60% pero es >95% si se analizan 3
muestras. En la estrongiloidiasis crónica la rentabilidad diagnóstica del examen de heces
es menor.
Cantidad. En cada recipiente de transporte se debe incluir una cantidad de heces del
tamaño de una nuez o unos 10 ml en el caso de heces líquidas.
Cantidades muy escasas reducen la sensibilidad del examen. Con cantidades excesivas
de heces los fijadores no alcanzan la proporción adecuada para conservar los posibles
protozoos presentes y las heces fermentan y al aumentar la presión en el frasco pueden
derramarse durante el transporte o apertura. En los quince días previos a la recogida de
las heces no se deberían tomar antibióticos (especialmente tetraciclina o metronidazol) ni
sales de bismuto. En los cuatro días previos se deben evitar los contrastes radiológicos,
laxantes oleosos y antipalúdicos ya que interfieren en la detección de protozoos.
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Conservación y transporte. Si el procesamiento se va a demorar es necesario
utilizar productos fijadores que mantengan la morfología (especialmente de los protozoos)
e impidan la evolución de huevos y larvas de helmintos sin necesidad de refrigeración de
la muestra, también disminuyen el riesgo de infección y el hedor en el laboratorio de
microbiología. Las alternativas más habituales son:
- Formol en un tampón de acetato de sodio y ácido acético (SAF): puede ser
utilizado para concentración, tinciones y con la mayoría de inmunoensayos.
- Formol al 10%.
- Mertiolato-yodo-formol (MIF)
- Alcohol Polivinilico (PVA)
En determinados casos las heces deben necesariamente remitirse sin

conservantes, ejemplo de ello son:
*Detección de antígeno de Entamoeba histolytica. Si no se va a procesar en
el momento es necesario refrigerar en nevera (2-8 ºC)
*Cultivo de larvas de Strongyloides y Uncinarias (métodos de Baermann, de
Harada-Mori, cultivo en placa de agar etc.). Además, para mantener viables
estos helmintos no deben refrigerarse, conservándose mejor entre 22ºC y
35ºC.
*Estudio de viabilidad de los huevos de Schistosoma spp. No refrigerar.
*PCR. Si se va a demorar su realización, deben congelarse.
a. Muestra en formol al 10%: se recogen durante 7 u 8 días. Se realiza el

examen directo, debe tener una relación de una parte de heces y 3
partes de conservante. Las heces se concentran por el método de
sedimentación (acetato de etilo) Se utiliza el sedimento para realizar los
extendidos para su posterior coloración. Se deposita una gota de ese
sedimento sobre un portaobjeto y con un cepillo de dientes se distribuye, en
ambos sentidos, hasta lograr un extendido fino. Se realizan por lo menos 3 a
5 extendidos. Se procede a realizar la coloración permanente.
Ventajas:
 Buen fijador.
 Fácil de preparar.
 Buena preservación de la morfología de huevos de helmintos, larvas,
quistes de protozoos y coccidios.
 Adecuado para las técnicas de concentración y de la microscopía de
epifluorescencia
 Adecuado para las coloraciones ácido-alcohol resistente (safranina).
 Compatible con inmunoensayos y microscopía de epifluorescencia.
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Desventajas:
 No es aconsejado para coloraciones permanentes como Tricromica.
 Conservante inadecuado para la morfología de trofozoitos.
 Puede interferir con PCR, especialmente luego de un tiempo
prolongado de fijación.
b. Muestra con SAF: se trabaja de la misma manera que el anterior. Debe
tener una relación de una parte de heces y 3 partes de conservante.
Antes de depositar la gota de sedimento sobre el portaobjeto para realizar los
extendidos para su posterior coloración, se coloca una gota de albúmina de
Mayer para fijar las heces al preparado por la escasa capacidad de fijación
que tiene el conservante SAF. Se realizan por lo menos 3 a 5 extendidos
Ventajas:
 Los componentes fijan y colorean al mismo tiempo.
 Fácil de preparar.
 Útil para trabajos de campo. Vida media prolongada.
 Adecuado para técnicas de concentración.
Desventajas:
 No es aconsejado para coloraciones permanentes como Tricrómica
 Conservante inadecuado para la morfología de trofozoitos.
c. Muestra con PVA: debe tener una relación de una parte de heces y 3
partes de conservante. Mezclar inmediatamente. Deben recogerse 6
muestras en días no consecutivos, en recipientes individuales. Las heces
con PVA se filtran con una gasa en un tubo de centrífuga (preferentemente
de plástico). Se centrifugan 10 minutos a 1500 rpm. Se descarta el
sobrenadante que contiene el exceso de conservante. Se secan las
paredes del tubo con gasa. El sedimento se utiliza para realizar los
extendidos para su coloración posterior. Se deposita una gota del
sedimento sobre un portaobjeto y con un cepillo de dientes se
distribuye, en ambos sentidos, hasta lograr un extendidos fino. Se realizan
por lo menos 3 a 5 extendidos. Se procede a realizar la coloración
permanente (Tricrómica o Hematoxilina férrica)
Ventajas
 Buen conservante de la morfología de trofozoitos y quistes.
 Fácil de preparar las coloraciones permanentes como Tricrómica.
 Las muestras conservadas permanecen estables por mucho tiempo.
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Desventajas:
 Inadecuado para la conservación de la morfología de huevos, larvas,
coccidios y microsporidia.
 Contiene compuestos mercuriales.
 Difícil de preparar en el laboratorio. Difícil y caro de eliminar.
 No sirve para técnicas de concentración. No puede usarse para
técnicas de ELISA.
 No es adecuado para coloraciones ácido-alcohol resistente
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TEST DE GRAHAM
Consiste en una muestra de los márgenes del ano recogida con papel celo al levantarse
por la mañana, y se debe recomendar al paciente que no se lave la zona perianal antes de
realizar la toma. Se debe utilizar celofán transparente (translúcido tipo Scotch) que se
colocará sobre un portaobjetos. Es necesario recoger tres muestras en tres días
consecutivos que deben ser transportadas al laboratorio en un sobre de papel cerrado o
en un frasco, y nunca sueltos ya que los huevos de E. vermicularis ya son infectivos a las
4-6 horas de haber sido puestos.
GUSANOS Y OTROS PARÁSITOS MACROSCÓPICOS

La mayoría de los gusanos adultos o fragmentos eliminados espontáneamente son
Áscaris lumbricoides que pueden ser expulsados por el ano, por la boca o por la nariz y
Enterobius vermicularis y proglótides de cestodos que pueden verse en la superficie de las
heces. Raramente se detectan otros como Trichuris trichiura y Dipylidium caninum. Las
proglótides de T. saginata, migran activamente atravesando el ano, por lo que se las
puede encontrar en los márgenes del mismo o en la ropa. Ocasionalmente se remiten
larvas de mosca, Anisakidae, y otros elementos con aspecto de parásitos (incluyendo
restos alimentarios y moldes mucosos intestinales). Cualquiera de ellos se debe enviar al
laboratorio en un recipiente limpio, con agua o suero salino y conservar refrigerado.
CONTENIDO DUODENAL
La obtención de contenido duodenal puede ser útil en algunas parasitosis pero pocas
veces se realiza sólo para este fin. Se puede recoger mediante sonda, endoscopia
gastrointestinal útil en la búsqueda de coccidios intestinales (proctoscopías y
colonoscopías sirven para la búsqueda de Entamoeba histolytica.) o cuerda encapsulada
(Enterotest) o por La cápsula de Beal. Aumenta la sensibilidad en el diagnóstico de
parásitos que habitan en el duodeno como Giardia lamblia y Strongyloides stercoralis,
Ancylostoma o Necator y Fasciola hepática o cuyos huevos se eliminan por vía biliar. La
cápsula entérica (Enterotest) es un sistema comercializado compuesto por una cápsula de
gelatina que contiene un cordón de nailon, con un peso en el extremo y un indicador de pH
para comprobar que ha pasado del estómago. Uno de los extremos del cordón se fija a la
cara del paciente y la cápsula se deglute, llegando hasta el duodeno, la gelatina se
disuelve y el cordón se libera y se impregna de bilis y moco duodenal. Se retira tirando del
extremo oral y se analiza el material adherido.
SANGRE
Plasmodium spp. La sangre debe extraerse en cuanto se sospeche malaria, haya o no
fiebre en ese momento. Puede ser necesario extraer muestras cada 6-12 horas durante 48
horas para descartar por completo la infección con microscopía, sobre todo en pacientes
no inmunes, pacientes que han recibido fármacos antipalúdicos como profilaxis o
tratamiento o cuando no se disponga de pruebas rápidas de detección antigénica (PRD).
Estudios recientes indican que los resultados de la microscopía y las PRD son similares
con sangre capilar obtenida por punción digital o con sangre venosa anticoagulada
recogida en tubos con EDTA, siempre que las extensiones se preparen en menos de 30
minutos desde la extracción para evitar el deterioro de la morfología parasitaria.
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Trypanosoma spp. Para el método de Strout se necesita sangre recogida sin
anticoagulante. Si la parasitemia es elevada se puede detectar el parásito a partir de
sangre anti coagulada, suero o plasma. Para observar los parásitos en movimiento, o
conseguir su aislamiento en cultivo, es necesario enviar la muestra al laboratorio
inmediatamente y analizarla en un plazo óptimo de menos de 4 horas después de su
obtención, para ello se puede conservar refrigerada o a temperatura ambiente. En el
diagnóstico parasitológico de la infección congénita, se recomienda la utilización de sangre
periférica obtenida del talón. La utilidad de la sangre del cordón es discutida por la posible
contaminación con sangre materna. En las infecciones crónicas la parasitemia puede ser
indetectable o fluctuante, por lo que se aconseja procesar volúmenes de sangre de al
menos 10 ml en adultos y 5 ml en niños.
SUERO
Hay que desinfectar la piel y extraer sangre en un tubo seco, sin anticoagulante que se
mantendrá refrigerado a 2ºC-6ºC o congelado si su procesamiento se va a demorar unas
horas. Algunos ensayos serológicos y de PCR se pueden realizar a partir de muestras de
sangre secas en papel absorbente que pueden remitirse por correo. Algunas pruebas
serológicas pueden realizarse empleando sangre anticoagulada.
LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
Cuando se sospecha una enfermedad del sueño, un Chagas cerebral o una
meningoencefalitis amebiana se deben priorizar las pruebas a realizar y es esencial
contactar con el laboratorio para realizar de inmediato un examen en fresco del LCR.
MUESTRAS DE TEJIDO
Para las sospechas de leishmaniasis cutáneas y de chancros de inoculación de
tripanosomiasis son adecuadas las siguientes muestras:
- Biopsia: con un sacabocados (biopsy punch), estéril de 3-4 mm de diámetro se

toma un cilindro de tejido del reborde indurado de la lesión. Nunca se debe tomar del
fondo de la úlcera que suele estar infectado secundariamente siendo difícil la
visualización de los parásitos. Se deposita en un tubo con unas gotas de suero salino
fisiológico o de tampón NET 10 (NaCl 10 mM, EDTA 10 mM, Tris. HCl, pH 8,0, 10
mM).
- Exudado del borde de la úlcera: se realiza una incisión con un bisturí y se raspan
los márgenes de dicho corte. El material obtenido se introduce en un tubo de las
características anteriores para cultivo y otra parte del material se extenderá en un
portaobjetos para examen microscópico.
- Aspirado de la lesión: con una jeringuilla de 1 ml, se puede inocular un pequeño

volumen de solución salina en el borde de la úlcera y aspirarlo comprimiendo la
lesión. Parte del material se deposita en un tubo estéril y se realiza un frotis con el
resto. Las muestras se mantendrán a temperatura ambiente hasta su procesamiento.
Este sistema se emplea también para aspirar adenopatías en caso de sospecha de
tripanosomiasis africana. En el caso de sospecha de leishmaniasis visceral, las
muestras de elección son el aspirado o biopsia de médula ósea y la sangre
18
anticoagulada. Se mantendrán a temperatura ambiente hasta su transporte al
laboratorio. La sangre preferentemente se debe procesar inmediatamente para la
separación de las células mononucleares de sangre periférica y en su defecto se
puede conservar hasta 24 horas a 4ºC. La punción esplénica no se recomienda por
el riesgo de ruptura. Las muestras de piel para detección de Oncocerca spp. se
deben remitir en un tubo con unas gotas de suero salino a temperatura ambiente o
bien realizar la toma en el laboratorio.
ORINA
Para detectar Schistosoma haematobium en orina se debe enviar al laboratorio un
volumen de más de 100 ml de orina incluso toda la orina de 24 horas. La rentabilidad
aumenta si la muestra se recoge entre las 10 y las 15 horas del día y si se realiza ejercicio
antes de recogerlo. Se envía al laboratorio en un recipiente limpio y se refrigera o se
añade aproximadamente un 1% de formol.
MUESTRAS PARA PRUEBAS DE PCR

Para la detección de ácidos nucleicos por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es
conveniente que la muestra no sufra muchos cambios de temperatura y es preferible que
se conserve a 4ºC. Para tiempos de conservación prolongados conviene congelarlo a -
20ºC. Dependiendo de la prueba a realizar, la adición a la muestra de proteinasa K o
guanidina-EDTA puede mejorar la sensibilidad del ensayo.
19
REPORTE DE RESULTADOS
(Enteroparasitos)
Los resultados indicarán el(los) método(s) empleado(s), el género o la especie del parásito
observado y su estadio evolutivo. La densidad parasitaria puede expresarse como el número de
formas parasitarias observadas por campo de microscopio con objetivo de 10X y 40X.
Todo formato de respuesta de resultados debe contener los siguientes datos:
 Nombre paciente , edad, sexo, fecha,
 Características organolépticas de las heces : consistencia, color
 Presencia de sangre y moco
 Observación microscópica (presencia de leucocitos, eritrocitos, levaduras, fibras
musculares no digeridas y parénquima de células vegetales en cantidad considerable),
“Esta información facilitará un mejor diagnóstico clínico”
Resultado positivo
El informe debe contener el nombre del paciente, los agentes observados y su estadio o forma
evolutiva:
 quistes (q)
 ooquistes (o)
 trofozoítos (t)
 esporas (e)
 huevos (h)
 larvas (l)
Cualitativo
 Escaso
 Regular
 Buena cantidad
Semicuantitativo
Contando las formas parasitarias. Si se observan 1 ó 2 elementos en toda la lámina,
escribir el nombre del agente y su estadio evolutivo
 (+) Si se observan de 2 a 5 elementos por campo microscópico 10X ó 40X.
 (++) Si se observan de 6 a 10 elementos por campo microscópico 10X ó 40X.
 (+++) Si se observan >10 elementos por campo microscópico 10X ó 40X.
Resultado negativo
Informar que no se observaron quistes, trofozoítos, ni huevos de parásitos.
20
EJEMPLO DE REPORTES DE EXAMEN PARASITOLOGICO
LABORATORIO X
NOMBRE : xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
EDAD : xxxxxx CODIGO :xxxxx
Muestra : Heces
Metodo : Directo
1 era muestra :
Se observan Quistes de Entamoeba histolytica +
2 da muestra :
Se observan Quistes de Entamoeba histolytica ++
3 era muestra :
Se observan Quistes de Entamoeba histolytica ++
FIRMA RESPOSANBLE
FECHA : xx/xx/xxxx
LABORATORIO X
NOMBRE : xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
EDAD : xxxxxx CODIGO :xxxxx
Muestra : Heces
Metodo : Directo
1 era muestra :
No se observaron quistes, trofozoítos, ni huevos de parásitos
2 da muestra :
3 era muestra :
FECHA : xx/xx/xxxx FIRMA RESPOSANBLE
21
22
PRACTICA Nº 1. EXAMEN DIRECTO (Observación de
elementos no parasitarios en las heces)
El método del EXAMEN DIRECTO de las heces, sigue siendo el “Gold standard” para el
diagnóstico de la enfermedades parasitarias, es una técnica simple, rápida y económica.
Se usa principalmente para observar las características morfológicas de los protozoos y
detectar la movilidad de los mismos en su forma de trofozoito. El preparado directo se
realiza con una pequeña cantidad (una gota) de heces entre porta y cubreobjeto; no debe
ser mayor porque resultaría demasiado espesa para el examen, ni menor porque
disminuiría la posibilidad de encontrar parásitos. La observación se realiza utilizando un
objetivo de 10x aumentos y ante un elemento sospechoso se examina con 40x aumentos.
Los trofozoitos y quistes de protozoos, huevos o larvas de helmintos y ooquistes de

Isospora belli pueden ser identificados en el extendidos directo. Los ooquistes de
Cryptosporidium difícilmente son observados, salvo en grandes infecciones, al igual que
las esporas de Microsporidium que son muy pequeñas y de forma semejante a restos de
materia fecal.
Examen General de Heces
- Examen Macroscópico: Donde se observan las características de las heces como:
 Olor y Color
 Consistencia (Líquida, Sólida, Semisólida, Pastosa).
 Aspecto (presencia de mucus, sangre).
 Presencia de nematodos adultos (áscaris, oxiuros), estructuras de tenias,
larvas u otros.
- Examen Microscópico: En general se emplean dos métodos:
Método directo:
 Este método permite observar formas vegetativas de protozoarios

(trofozoitos de amebas) ,ooquistes de coccideas y algunas larvas.
 Es útil en las necropsias, para analizar el contenido intestinal.
 Cuando al agregado se le agrega 1 gota de lugol, se observa los quistes.
Método de enriquecimiento o concentración:
 Sirve para concentrar las formas parasitarias (huevos, larvas) en las heces,
de manera que puedan ser diagnosticadas, aun cuando existan pequeñas
cantidades.
 Se recomiendan para la demostración de quistes, ooquistes, huevos o larvas
 Pueden ser: Cualitativos (métodos de flotación, métodos de sedimentación) o
cuantitativos (Método de Stoll, etc.)
23
Requisitos para la toma de muestras de heces: la recolección y el manejo
adecuado de las muestras fecales son indispensables para la identificación correcta
de los parásitos en el laboratorio, es así que se debe de tomar en cuenta lo siguiente:
- Sirven las heces recién emitidas y evacuadas espontáneamente

- Materia fecal del tamaño de una aceituna.
- Deben recogerse en un recipiente limpio y seco.
- No debe mezclarse con orina.
- En los lactantes se recomienda tomar la muestra de heces directamente del pañal o
estimular la evacuación mediante una sonda rectal.
- Debe transcurrir el menor tiempo posible entre la toma de muestra y el examen
- Debido a la eliminación irregular de los elementos parasitarios, el examen
parasitológico de una sola muestra de heces puede ser insuficiente.
Objetivos
- Análisis y procesamiento correcto de la muestra.
- Diferenciar un parásito de un elemento general de las heces.
- Conocer y diferenciar algunas estructuras parasitarias.
Materiales
 Porta-objetos, 7.5 X 2.5 cm (3 X 2 pulgadas) limpio y seco
 Cubre-objetos, 22 X 22 mm
 Aplicadores de madera-bajalenguas
 Solución salina fisiológica (0.85% cloruro de sodio)
 Solución de Lugol
 Frasco con desinfectante para descartar material (lejia, fenol, etc)
Procedimiento
Con suero fisiológico (SSF): Para observar trofozoitos de protozoos y larvas de

nematodos, todas en movimiento y elementos que aparecen en situaciones
anormales, también es utilizada para ejecutar cuenta de huevos de algunos
helmintos (estimar intensidad de la infección)
1. Con un aplicador de madera, tome una pequeña cantidad de heces y

disuélvala en suero fisiológico sobre una lámina portaobjetos.
2. Cubra la preparación con una laminilla cubreobjetos y observe al

microscopio con objetivo de 10 y 40X.
Con lugol: Para observar la morfología de los parásitos. Colorea en forma

temporal trofozoítos y quistes de protozoos, además de huevos de helmintos e
Inmovilizar larvas
1. Repita el mismo procedimiento anterior usando lugol parasitológico.
2. Examine en un microscopio con objetivo de 10X y 40X.
24
Forma de cargar la muestra de heces
1 2
3 4
Forma de observar la lámina con muestra en el microscopio
C
O
D
I
G
O
SSF LUGOL
Resultados
 Visualizar la presencia o ausencia de parasitos: quistes, trofozoitos, larvas, etc
 Informar otras estructuras, cuando estén presentes, ya que indican alguna
patología: leucocitos, eritrocitos, macrófagos, cristales de Charcot-Leyden.
 Después de la observación , descarte las láminas colocándolas en la mezcla
sulfocrómica o hipoclorito de sodio (lejía 10%)
25
ELEMENTOS NO PARASITARIOS
En un análisis parasitológico los restos o elementos no parasitarios deben diferenciarse de
los parásitos. Hay muchos y diferentes elementos microscópicos de restos alimenticios o
restos no parasitarios, de origen endógeno o exógeno que están presentes en las heces.
Podemos citar varios ejemplos:
-Tejido conjuntivo: las fibras se entrecruzan en una red muy fina.

-Carne: las fibras musculares están unidas por trabéculas. Las fibras de carne
insuficientemente digeridas son de tamaño variable, de forma rectangular, de ángulos
bien marcados, de color marrón con una neta estriación doble, longitudinal y transversal;
las fibras de carne bien digeridas presentan formas más redondeadas, de color marrón
más claro a amarillo pálido y sin estrías.
-Grasas: grasas neutras se ven como gotas muy refringentes y los ácidos grasos con
aspecto de finas agujas a veces agrupadas.
-Elementos vegetales: los gránulos de almidón están agrupados en masas celulósicas.
El grado de digestión del almidón se determina por la coloración que toma con el lugol,
violeta oscura cuando el almidón está intacto, rosa pálido cuando está totalmente
digerido y tonos de marrón para los distintos grados de degradación.
-Celulosa no digerible: los vasos espiralados de legumbres verdes aparecen como
resortes cuando están de perfil y de frente se presentan como elementos redondeados
de doble contorno cuyo interior puede estar lleno o vacío, los pelos vegetales, alargados,
que tienen un polo irregular y el otro agusado, muy refringentes y en el medio un canal
que puede confundirse con el intestino, restos de pólenes y esporas de hongos
con estructuras semejantes a huevos de parásitos de los que hay que distinguir; tejidos
de revestimiento de los vegetales aparecen con formas complejas como son las células
en empalizada, etc.
-Cristales: de oxalato de calcio, de fosfato amónico-magnésico, de Charcot-Leyden o
agujas de brújula.
-Células endógenas: leucocitos, que pueden estar aislados o en grupos
denominados piocitos, hematíes, células epiteliales, células rectales, bacterias, etc.
EXISTEN MUCHÍSIMAS FIGURAS MICROSCÓPICAS DE RESTOS QUE NO
PUEDEN SER IDENTIFICADAS CON PRECISIÓN Y SERÍA UNA TAREA INÚTIL
TRATAR DE RECONOCERLAS. LO MÁS IMPORTANTE ES PODER
DIAGNOSTICAR CORRECTAMENTE LOS DIFERENTES PARÁSITOS QUE
PUEDEN HALLARSE EN EL INTESTINO HUMANO.
26
ELEMENTOS NO PARASITOS EN LAS HECES
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
8. 9. 10. 11. 12. 13. 14.
15. 16. 17. 18. 19. 20.
1. gotas de grasa 11) acido úrico
2. células vegetales en empalizada 12) fosfato calcico neutro
3. pared de célula vegetal 13)leucina
4. hongos – levaduras 14)ácidos grasos
5. pelo vegetal 15)oxalato de calcio
6. grano de polen 16)colesterol
7. fibra de algodón 17) cristales de charcot leyden
0 8. granos de almidón 18) carbonato de calcio
9. estructura vascular vegetal 19) fosfato amonio – magnesio
10. células vegetales 20) cistina
ELEMENTOS DE ORIGEN VEGETAL ELEMENTOS DE ORIGEN MINERAL
27
CUANDO LA MUESTRA ES DIARREICA O LÍQUIDA
Debe tomarse una muestra del fondo del frasco, o centrifugar una porción y
examinar el sedimento. Si la muestra contiene moco, hacer otra preparación
tomando muestra del moco con o sin sangre, ya que aquí podrían encontrarse los
elementos patógenos en mayor cantidad. Ejemplo: larvas de S. stercoralis,
trofozoítos o quistes de G. lamblia, ooquistes de apicomplexa intestinales,
trofozoítos de E. histolytica en caso de disentería, trofozoítos y quistes de
Balantidium coli o huevos de T. tríchiura atrapados en el moco.
Notas
Causas de error o resultados poco satisfactorios:
 Esperar más de una hora antes de buscar trofozoítos de protozoos

 Preparación muy gruesa o muy fina
 Demasiada fibra, arenilla, burbujas
 Demasiada iluminación, poca iluminación
 Solución de Lugol muy fuerte o muy diluida
 No examinar la preparación en forma sistemática
 Preparación reseca
 Informe incompleto
 El no encontrar trofozoítos en una muestra líquida, diarreica o con moco y sangre
que no es fresca, no tiene ningún significado.
Para asegurar un control de calidad:
 Verificar que la solución salina esté limpia, sin contaminación de bacterias,

hongos o protozoos de vida libre.
 Verificar que la solución de Lugol tenga la concentración adecuada.
28
ESQUEMATICE LO QUE OBSERVA EN EL MICROSCOPIO
………………………. ……………………….
Aumento : …………x Aumento : …………x
………………………. ……………………….
29
ESQUEMATICE LO QUE OBSERVA EN EL MICROSCOPIO
………………………. ……………………….
………………………. ……………………….

30
Cuestionario
1. ¿Cuáles son las características de las heces en cantidad, color, olor y número de
evacuaciones diarias?
2. ¿A qué se debe el color y olor de las heces?
3. ¿Cuál es el examen de laboratorio de elección para la búsqueda de huevos, quistes
o larvas en heces?:
4. ¿Cuál es el examen de laboratorio de elección para la búsqueda de trofozoítos en
heces?:
5. ¿Cuáles son las indicaciones para el uso de la cucharilla rectal?:
6. ¿Por qué se recomienda qué en los exámenes coproparasitologicos se estudien
tres muestras seriadas de materia fecal?:
7. ¿Cuál es la función de las sustancias conservadoras como el alcohol polivinílico o el
merthiolate-iodo-formol en los estudios coproparasitologicos?:
8. ¿Qué entiende por examen coproparasitologico cualitativo?:
31
32
PRACTICA Nº 2. OBSERVACION DE AMEBAS - RIZOPODOS
Entamoeba histolytica
Coloque las partes de las siguientes formas parasitarias
Trofozoito Quiste
Tamaño : ……………………………………… Tamaño : ………………………………………

Forma : ……………………………………….. Forma : ………………………………………..
Núcleo : ………………………………………. Núcleo : ……………………………………….
Nucleolo : …………………………………….. Nucleolo : ……………………………………..
Otras características : ………………………… Otras características : …………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
Esquematice las formas parasitarias que observa en el microscopio
Metodo : ……………………………..

33
Entamoeba coli
Trofozoito Quiste
Tamaño : ……………………………………… Tamaño : ………………………………………

Forma : ……………………………………….. Forma : ………………………………………..
Núcleo : ………………………………………. Núcleo : ……………………………………….
Nucleolo : …………………………………….. Nucleolo : ……………………………………..
Otras características : ………………………… Otras características : …………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
Metodo : ……………………………..
Aumento : …………x Aumento : …………

34
Endolimax nana - quiste Iodamoeba butschlii - quiste
Tamaño : ………………………………………
Tamaño : ………………………………….………
Forma : ………………………………………..
Forma : ………………………………………..…..
Núcleo : ……………………………………….
Núcleos : ………………………...……. ….…….
Nucleolo : ……………………………………..
Vacuola : .. ……………….………………………
Otras características : …………………………
Otras caracteristicas : …………….….……………
…………………………………………………
………………………………………….………….
…………………………………………………
……………………………………………….…….
…………………………………………………
……………………………………………….…….
…………………………………………………
Metodo : ……………………………..

35
** Blastocystis hominis(forma vacuolar) **
Coloque las partes de la siguiente forma parasitaria
FORMA VACUOLADA
Tamaño : …………………………….……….……
Forma : …………………………………………....
Núcleos : ……………………………...……. …….
Vacuola : .. ………………: ………………………
Otras características : …………….….……………
………………………………………….…………
……………………………………………….……
……………………………………………….……
Metodo : ……………………………..
36
Cuestionario
1. ¿Qué características son importantes para diferenciar Entamoeba histolytica de
Entamoeba coli?
2. ¿Qué recursos de laboratorio son esenciales para identificar las amebas
comensales?
3. Aun cuando Entamoeba coli, Endolimax nana no son amebas patógenas, ¿en qué
radica la relevancia de su hallazgo?
4. Al observar al microscopio a partir de cuantas formas de blastocystis hominis por
campo se considera como patógeno?
5. Realice un cuadro con las diferencias estructurales entre E. coli e histolytica
6. Esquematice el ciclo biológico de E. histolytica
37
PRACTICA Nº 3. OBSERVACION DE FLAGELADOS
Giardia lamblia
Trofozoito Quiste
Tamaño : ……………………………………… Tamaño : ………………………………………

Forma : ……………………………………….. Forma : ………………………………………..
Núcleo : ………………………………………. Núcleo : ……………………………………….
Flagelos : …………………………………….. Otras características : …………………………
Otras caracteristicas : ………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
Metodo : ……………………………..

38
PROCEDIMIENTO PARA DIAGNOSTICO DE TRICHOMONA vaginalis
Materiales:
 Material Biológico (Secreciones)
 NaCl 0.85 %
 Agua destilada
 Colorante Wright
 Pipeta Pasteur con bulbo
 Cubreobjetos
 Portaobjetos
 Microscopio
Procedimiento:
1.- Se coloca a la paciente en posición ginecológica. 2.-
Introducir con cuidado el espejo vaginal.
3.- Con un hisopo tomar la muestra de secreción vaginal
4.- Depositar la primera toma en un portaobjetos limpio y hacer un extendido.
5.- La segunda toma depositarla en un tubo con solución salina conservando a 37°C.
6.- Una vez seco el extendido se tiñe con el colorante de Wright .
7.- Se observa al microscopio con objetivos de 10X, 40X y 100X agregando a éste
último aceite de inmersión.
8.- Con una pipeta Pasteur se toma una gota del fondo del tubo de ensayo y se
deposita en un portaobjetos y se cubre.
9.- Examinar con objetivos de 10X y 40X.
Coloque las partes a la siguiente forma parasitaria
Trofozoito
Tamaño : ………………………………………
Forma : ………………………………………..
Núcleo : ……………………………………….
Flagelos: ……………………………………..
Otras características : …………………………
…………………………………………………
…………………………………………………
39
Metodo : ……………………………..
Metodo : ……………………………..
40
Cuestionario
1. Mencione dos liquidos o secreciones biológicos útiles para realizar el diagnóstico
de la giardiasis
2. Indica los diferentes tipos de Trichomonas existen y cual es la más común en el

hombre.
3. Indica las diferencias que existen entre la T. vaginalis y Giardia Lambia
4. Realice un esquema o flujograma para diagnóstico de laboratorio de tricomoniasis
5. Esquematice el ciclo biológico de Giardia lamblia
41
PRACTICA Nº 4. OBSERVACION DE HISTOPARASITOS y
HEMOPARASITOS I
TECNICAS Y PROCEDIMIENTOS EN LEISHMANIASIS

a. Frotis directo
El examen directo puede realizarse de dos maneras: haciendo un raspado del borde
interno de la úlcera o haciendo una incisión y raspando el borde activo de la lesión. La
primera metodología tiene la ventaja de ser menos dolorosa, sangrar menos y ser más
fácil, rápida y económica que la segunda. La sensibilidad de ambas metodologías es
comparable. Si existen dos o más lesiones debe escogerse para el examen directo la
que tenga un menor tiempo de evolución.
b.Frotis (raspado) del borde interno de la úlcera
Guantes de cirugía, alcohol, algodón, solución salina, jabón quirúrgico, gasa estéril,
láminas porta-objetos, lancetas u hojas de bisturí, colorante de Giemsa o Wright,
microscopio óptico, aceite de inmersión.
1. Con manos enguantadas realice limpieza del sitio de la lesión utilizando algodón
impregnado en alcohol o solución salina y jabón quirúrgico. Si hay costra
remuévala cuidadosamente.
2. Sobre la cara interna del borde de la úlcera realice un raspado con el borde romo
de una lanceta u hoja de bisturí. Hágalo de manera tal que no sangre mucho.
3. El material así obtenido se extiende en forma suave sobre una lámina
portaobjetos previamente limpiada, desengrasada y debidamente rotulada.
4. Tome otras tres muestras de la misma manera colocando dos muestras por
lámina en dos láminas portaobjetos.
5. Deje secar las muestras a temperatura ambiente. Fije con metanol y deje secar.
6. Tiña las láminas con colorante de Giemsa al 10% en solución amortiguada de
fosfatos pH 7,2 durante 10 minutos, o con colorante de Wright. Para evitar la
formación de precipitados de colorante es aconsejable realizar la tinción con las
láminas invertidas sobre una superficie que tenga el colorante.
7. Observe al microscopio de luz con un aumento de 100 X (objetivo de inmersión),
para buscar los amastigotes que pueden encontrarse intra o extracelularmente.
Para identificar un amastigote como tal debe observarse las formas ovaladas o
redondeadas características y distinguirse claramente el núcleo del cinetoplasto.
c.Incisión y raspado del borde activo de la lesión.
1. Con manos enguantadas realice limpieza del sitio de la lesión utilizando algodón
impregnado en alcohol o solución salina y jabón quirúrgico. Si hay costra remuévala
2. Previa infiltración con una pequeña cantidad de xilocaína (0.1 a 0.2 ml), sobre el
borde activo de la lesión realice una pequeña incisión con la hoja de bisturí de 3 a 6
mm de longitud por 1 a 3 mm de profundidad. La hemostasia se debe lograr
haciendo presión en pinza con los dedos.
42
3. Con gasa estéril, limpie la sangre que emana de la incisión y con la misma gasa
presione el borde de la lesión para hacer hemostasis y evitar el sangrado.
4. Con el borde romo de la hoja del bisturí levante la piel de la parte superior de la
incisión y raspe tejido del interior de la incisión desde la profundidad hacia la
superficie.
5. El material así obtenido se extiende en forma suave sobre una lámina portaobjetos
previamente limpiada, desengrasada y debidamente rotulada.
6. Tome otras tres muestras de la misma manera colocando dos muestras por lámina
en dos láminas portaobjetos.
7. Deje secar, fije, tiña y observe al microscopio en la misma forma que para el frotis
interno del borde interno de la úlcera.
Interpretación:
Se interpreta como positivo cuando se encuentran uno o más amastigotes. Se considera
como negativo cuando no se encuentran amastigotes después de haber recorrido un
mínimo de 100 campos. Si el primer examen es negativo, debe repetirse el procedimiento
en la misma forma señalada. Si dos exámenes directos tomando en cada uno dos láminas
con dos muestras por lámina son negativos, y persiste la sospecha clínica de
leishmaniasis, debe practicarse biopsia
43
Amastigote Promastigote
Tamaño : ……………………………………… Tamaño : ………………………………………

Forma : ……………………………………….. Forma : ………………………………………..
Cinetoplasto : ……………………………….. Flagelo : …………………………………………
Otras caracteristicas : ………………………… Otras características : …………………………
Metodo : ……………………………..
44
TECNICAS Y PROCEDIMIENTOS EN TRYPANOSOMIASIS
a.Examen de sangre en fresco
Materiales
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Microscopio
Procedimiento:
1. Deposite una gota de sangre sobre un portaobjetos
2. Cubra la gota con un cubreobjetos, observe directamente la preparación al
microscopio con el objetivo de 40X con el condensador bajo y con una abertura
reducida del diafragma del condensador.
Los tripanosomas pueden ser reconocidos por su movimiento entre los
hematíes inmóviles
b.Extensión de sangre
Esta técnica resulta especialmente útil para confirmar la identidad de la especie
de tripanosoma detectada con las técnicas precedentes.
Materiales:
 2 portaobjetos
 Cubreobjetos
 Microscopio
 Solución de Giemsa
Procedimiento:
1. Coloque una gota de sangre sobre un
portaobjetos.
2. Con un segundo porta objetos haga el
extendido de sangre como se indica en la figura.
3. Cubrimos el frotis con metanol durante 3
minutos (con esto procedemos a fijar el frotis) .Escurrimos y lo dejamos secar al aire.
4. Diluimos en un tubo de ensayo 0,2 ml de giemsa con 2 ml de solución tampón pH
7,2. Es importante realizar esta dilución en el momento de la tinción, ya que el
colorante precipita y no es válido para otro día.
45
4. Cubrimos el frotis con la dilución de colorante, dejándolo actuar durante 25
minutos. Escurrimos y lavamos con agua del grifo. Posteriormente lavamos con
tampón pH 7,2 hasta eliminar los restos del colorante. Dejamos escurrir y secamos
en posición vertical.
Este método permite identificar las especies de trypanosoma por sus características
morfológicas.
c.Semiextensión de sangre (gota gruesa)
1. Se coloca una gota grande de sangre sobre un portaobjetos y utilizando el borde de
otro portaobjetos, se extiende sobre un área circular de unos 2 cm de
diámetro.
2. Se secará rápidamente abanicando el portaobjetos en el aire y sin fijar
previamente, se tiñe durante 30 minutos con una solución de colorante Giemsa al
4% en agua corriente. Considerando que el tiempo y la dilución de tinción pueden
variar en función del fabricante del colorante y del protocolo concreto que se
utilice, se recomienda empezar siguiendo las indicaciones del fabricante y,
posteriormente, modificar el tiempo de coloración y la concentración de colorante
hasta obtener resultados óptimos.
3. Tras la tinción, el portaobjetos se lava suavemente con agua corriente y se observa
al microscopio, usando para ello el objetivo de inmersión de 100X.Es fácil reconocer
a los tripanosomas por su morfología general.
Resultado frotis y gota gruesa : Informar la presencia o ausencia de formas
trypomastigotes de Trypanosoma cruzi.
d.Centrifugación en tubos de hematocrito

Muchos parásitos inducen en la mayoría de sus hospedadores evoluciones benignas o
subclínicas de la enfermedad. En tales condiciones, la parasitemia es baja y la
Identificación del parásito difícil. Ello hace indispensable la aplicación de técnicas de
concentración de parásitos como la diseñada por Woo
Materiales:
 Capilares heparinizados
 Plastilina
 Microscopio
 Microcentrifuga
46
Procedimiento
1. Llene ¾ partes (aproximadamente 70 μl) de un tubo capilar heparinizado con sangre.
2. Selle uno de los extremos del tubo capilar con plastilina.
3. Coloque el capilar en la centrífuga y centrifugue a 10000 rpm durante 5 minutos
4. Coloque el capilar en microscopio y examine la franja que separa el plasma de la
zona leucocitaria(franja blancuzca), en esta zona se deben encontrar los tripanosomas.
Plasma Zona en la que debe observar. Plastilina
e.Concentración de STROUT
Esta técnica se basa en la concentración de los parásitos en la muestra sanguínea por
centrifugación y examen del sedimento al microscopio en busca de trypomastigotes
móviles de Trypanosoma cruzi. Es una técnica simple y de buena sensibilidad en casos
agudos de enfermedad de Chagas y en el seguimiento de congénitos.
El suero se debe conservar para ser examinado por técnicas inmunológicas.
Equipos y materiales
- Microscopio.
- Centrífuga.
- Jeringa hipodérmicas estéril o sistema de tubos al vacío sin anticoagulante.
- Tubos de ensayo de 13 x 100 mm.
- Tubos de centrífuga.
- Láminas portaobjetos.
- Laminillas cubreobjetos.
- Asas microbiológicas.
Procedimiento
1. Extraer 5-10 mL de sangre venosa en un tubo sin anticoagulante
2. Dejar a temperatura ambiente hasta que se coagule.
3. Separar el suero.
4. Centrifugar este suero a 160g (800 rpm) durante dos minutos para descartar los
glóbulos rojos.
5. Centrifugar nuevamente el sobrenadante a 300-600 g (2000-2500 rpm), durante
diez minutos.
6. Separar el sobrenadante (suero) y conservarlo a 4 ºC para el análisis serológico.
7. Colocar una alícuota del sedimento obtenido en una lámina portaobjetos.
8. Cubrir la muestra con una laminilla y proceder a la lectura.
Lectura
Observar en el microscopio la presencia de trypomastigotes móviles de Trypanosoma
cruzi, con objetivos de 10X ó 40X de aumento.
Es aconsejable observar cuidadosamente varias preparaciones en busca de formas
móviles del parásito.
47
Amastigote Tripomastigote
Tamaño : ……………………………………… Tamaño : ………………………………………

Forma : ……………………………………….. Forma : ………………………………………..
Núcleo : ………………………………………. Núcleo : ……………………………………….
Cinetoplasto : ……………………………….. Flagelo : …………………………………………
Otras caracteristicas : ………………………… Otras características : …………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
Metodo : ……………………………..
48
Cuestionario:
1.- ¿Cómo se manifiesta el mal de chagas en el humano?
2.- ¿Cuál son otros reservorios del tripanosoma cruzi?
3.- ¿Esquematicé el ciclo de vida del tripanosoma cruzi?
4.- ¿En qué forma se encuentra el tripanosoma Cruzi en la sangre humana?
5.- ¿En que forma se encuentra el tripanosoma cruzi en la vinchuca o chinche?
6.- ¿En que consiste el xenodiagnostico explique?
7.- Esquematicé el ciclo de vida de leishmania
8.- ¿En qué forma se encuentra la leishmania en el humano?
5.- ¿En que forma se encuentra la leishmania en el vector?
49
PRACTICA Nº 5. OBSERVACION DE CILIADOS
Balantidium coli
Trofozoito Quiste
Tamaño : ……………………………...…… Tamaño : ……………………………...……

Forma : …………………...………….…….. Forma : …………………...………….……..
Macroúcleo : ………………………………. Macroúcleo : ……………………………….
Micronucleo: ……………………………….. Micronucleo: ………………………………..
Otras caracteristicas : …………………….… Otras caracteristicas : …………………….…
……………………………………………… ………………………………………………
……………………………………………… ………………………………………………
Método : ……………………………..

50
Cuestionario:
1.- ¿Que región del cuerpo humano invade el Balantidium coli?
2.- ¿Cuál es la vía de entrada para el ser humano y cuál es la fase infectante del ciliado?
3.- ¿Cuáles son las manifestaciones clínicas más frecuentes de la Balantidiosis?
4.- Esquematicé el ciclo de vida del Balantidium coli
51
PRACTICA Nº 6. OBSERVACION DE HEMOPARASITOS II –
PLASMODIUM
EXTENSIÓN DE SANGRE ( FROTIS)

Materiales:
 Laminas Portaobjetos
 Microscopio
 Solución de Giemsa
Procedimiento:
1. Coloque una gota de sangre
sobre una lámina
portaobjetos.
2. Tomar una segunda lámina del laminero y colocar sobre la primera en ángulo de
45°, por delante de la gota de sangre pero contactando con ella. Dejar que se
extienda sin que llegue a los bordes e iniciar un movimiento suave y uniforme en
dirección al dedo pulgar izquierdo, con lo cual se obtendrá el extendido.
El extendido debe tener unos 35 milímetros de largo por 20 mm. de ancho
aproximadamente.
3. Inmediatamente de realizado el extendido, agitar al aire, para obtener una rápida
desecación de la sangre y evitar la deformación de los glóbulos rojos. Por este
motivo es necesario obtener el extendido antes que la gota gruesa.
Fijación de extendido
Tiene por finalidad conservar la morfología de los elementos celulares y por lo tanto,
poder realizar el diagnóstico de especie del parásito
1. Colocar sobre el extendido unas gotas de alcohol metílico y dejar actuar por 2
minutos cuando el extendido tiene 24 horas ó más de haber sido tomado y por 30
segundos si es reciente.
2. Quitar el exceso de alcohol metílico, inclinando la lámina en dirección contraria a la
gota gruesa para evitar que se ponga en contacto con ella y la fije.
3. Colocar la lámina en el porta-lámina con la gota gruesa hacia arriba y dejar que se
seque al aire.
52
SEMIEXTENSIÓN DE SANGRE (GOTA GRUESA)
1. Se coloca una gota grande de sangre sobre un portaobjetos y utilizando el borde de
otro portaobjetos, se extiende sobre un área circular de unos 2 cm de
diámetro.
Deshemoglobinización
Tiene por finalidad romper los glóbulos rojos, extraer la hemoglobina y evidenciar los
parásitos maláricos que pueden estar dentro de ellos y que queden adheridos a la
lámina.
1. Colocar en un vaso de precipitado de 50 ml solución buffer pH 7.2 en cantidad
suficiente para cubrir la gota gruesa.
2. Introducir la lámina con la gota gruesa hacia abajo, verticalmente, para que quede
completamente cubierta por el buffer pero sin llegar al extendido.
3. Deshemoglobinizar durante 5 minutos; si la gota gruesa es de reciente recolección,
menos de 24 horas, se omite este proceso. Puede necesitarse más tiempo para
lograr la deshemoglobinización completa, si tiene más de 24 horas de recolección.
4. Sacar la lámina y dejarla secar en el porta-láminas.
53
54
Coloración
Luego de fijado el extendido, y deshemoglobinizada la gota gruesa, se procede a la
coloración con la finalidad de diferenciar las distintas especies de parásitos maláricos y los
demás elementos celulares de acuerdo a la afinidad por el colorante (Giemsa).
El colorante Giemsa debe prepararse en el momento de usarlo, de la siguiente manera:

Colorante Giemsa............................................................... 3 gotas
Buffer pH 7.2....................................................................... 1 ml
Esta solución, debe prepararse en un vaso de precipitado previamente lavado con agua
destilada y seco, de la siguiente manera: con un gotero se toman 20 gotas de buffer pH
7.2 o se mide 1 ml con pipeta (1 ml equivale a 20 gotas) y se colocan en el vaso de
precipitado, se le agregan 3 gotas de colorante Giemsa, que se tomarán con un gotero
totalmente seco.
Agitar suavemente el vaso de precipitado hasta completar la dilución. Si se agita

fuertemente, se puede producir la precipitación del colorante.
Coloración Sucesiva
Primero se colorea la gota gruesa, si está positiva a malaria, se colorea el extendido.
1. Medir con una pipeta graduada 2 ml de buffer pH 7.2 y añadir 6 gotas de

colorante.
2. Agitar suavemente para evitar la precipitación del colorante.
3. Colocar la lámina en la bandeja de coloración y cubrir la gota gruesa y se
deja actuar el colorante por un tiempo de 20 minutos.
4. Terminando el tiempo, lavar con buffer pH 7.2.
5. Dejar secar la lámina en el porta-lámina.
Coloración Simultánea
Se colorea la gota gruesa y extendido al mismo tiempo; se utilizan 5 ml de buffer pH

7.2 para cubrir una lámina.
1.Se prepara la dilución del colorante de la misma forma, dicha anteriormente

(3 gotas de colorante y 1 ml de buffer pH 7.2; para 5 ml se toman 15 gotas de
colorante. Agitar suavemente.
2. Cubrir totalmente el extendido y la gota gruesa, con la solución colorante y
dejar actuar por 20 minutos.
3. Lavar con buffer pH 7.2 estando la lámina en posición horizontal en el
soporte sobre la cubeta, para impedir que se deposite sobre la lámina, una
fina película metálica, que flota sobre la disolución del Giemsa. Después
puede continuarse el lavado con la lámina en posición inclinada, hasta que el
agua del lavado no arrastre color.
4. Dejar secar.
55
OTRA TECNICA DE COLORACION
1. Preparar en un tubo de ensayo una solución con una proporción de 1:9 con
Giemsa y tampón PBS (1ml Giemsa y 9 ml PBS).
2. Sumergir la muestra de forma vertical en la solución preparada durante 10
minutos.
3. Tras la tinción, el portaobjetos se lava suavemente con agua corriente y se
observa al microscopio, usando para ello el objetivo de inmersión de 100X.
Es fácil reconocer a los hemoparasitos por su morfología general.
Examen microscópico de la gota gruesa

El examen de rutina de la gota gruesa requiere observar 100 campos microscópicos
óptimos a un aumento final de 1000 X, con lente de inmersión.
Una lámina puede declararse como negativa, sólo después de observar 100 campos
microscópicos sin haber encontrado parásitos. Si se encuentran parásitos, deben
examinarse también los 100 campos microscópicos; esto asegura detectar la posibilidad
de infección mixta (más de una especie presente en una muestra de sangre).
En lo posible, debe identificarse la(s) especie(s) a la(s) que pertenecen los parásitos.
Procedimiento
1. Verificar el número de la lámina que va examinar en la hoja de registro de datos.
2. Colocar la lámina entre los soportes de la platina mecánica y verificar que esté
sostenida firmemente al momento de mover el carro, de lo contrario se pueden perder
de vista objetos sospechosos antes de que puedan ser ubicados.
3. Examinar la gota gruesa completa con el objetivo de 10X, hasta localizar una zona
conveniente para la búsqueda de los parásitos (que se observen leucocitos
numerosos y bien coloreados).
4. Colocar aceite de inmersión sobre la zona seleccionada de la gota gruesa y girar el
objetivo de 100X hasta ponerlo en posición sobre ella.
5. Bajar el objetivo hasta ponerlo en contacto con el aceite de inmersión.
6. Verificar que la parte seleccionada de la lámina sea óptima (leucocitos de 10 a 20
por campo microscópico).
7. Examinar 100 campos. Desplazar la lámina que contiene la muestra de sangre
siguiendo el patrón mostrado. Recuerde usar el ajuste fino para enfocar, accionando el
tornillo micrométrico hacia delante y atrás, con el fin de observar el mayor número
posible de capas sanguíneas.
8. Anotar el número de parásitos observados y la especie a la que pertenecen (si
le fue posible identificarla).
56
Examen microscópico del extendido de sangre
Este examen requiere mayor tiempo de observación en comparación con la gota gruesa,
debido a que la concentración de los elementos sanguíneos es mucho menor.
Se debe realizar en las siguientes circunstancias:

a. Cuando no es posible examinar la gota gruesa por alguna razón (Ejemplo: por ser
muy pequeña).
b. Cuando no es posible identificar en la gota gruesa la(s) especie(s) de Plasmodium.
El aspecto que debe presentar esta preparación al microscopio debe ser:

a. Fondo limpio y libre de residuos los eritrocitos deben estar teñidos de color rosa
pálido.
b. El núcleo de los leucocitos, de color morado oscuro y gránulos bien definidos.
c. Los gránulos de Schüffner deben verse como un moteado en los eritrocitos que
contienen P. vivax.
d. La cromatina de los plasmodios se tiñe de color rojo grosella intenso y el citoplasma
de azul violáceo o azul cielo.
Procedimiento
1. Colocar la lámina sobre la platina mecánica entre los soportes de esta.

2. Enfocar con el objetivo de 10X el extremo menos denso del frotis, donde los glóbulos
rojos estén dispuestos en una sola capa.
3. Bajar el objetivo de inmersión hasta poner en contacto con el aceite de inmersión.
4. Enfocar y examinar la película de sangre siguiendo el patrón mostrado.
5. Examinar el mayor número de campos microscópicos (300) para determinar si la
muestra de sangre es positiva o negativa para malaria. Si el diagnóstico es dudoso
deberá examinar de 400 a 500 campos microscópicos
57
Determinacion de parasitemia
Método a partir de Gota gruesa: Sistema de cruces recomendado por la Organización

Mundial de la Salud (OMS),
Metodo a partir de Gota gruesa y Extendido fino (frotis) : método semicuantitativo
que permite estimar la parasitemia y que se informa como número de parasitos en 100
leucocitos (gota gruesa) o porcentaje de eritrocitos parasitados (extendido fino). El
cálculo inicial se puede traducir a número de parásitos por microlitro (ul) de sangre,
unidad estandarizada que permite comparaciones.
Sistema de cruces
La estimación de la parasitemia se debe realizar con la observación de 100 campos
microscópicos. En el Cuadro siguiente se describe la densidad parasitaria
correspondiente al sistema de cruces.
Sistema semicuantitativo
Gota Gruesa: Se cuentan leucocitos y parásitos simultáneamente. El conteo se detiene

cuando se llega a 100 leucocitos y se han identificado dos o más parásitos.
Por ejemplo 40 parásitos en 100 leucocitos. Si solamente se identificó un parásito, el
conteo sigue hasta que se identifica un parásito más y se informa como tal, por
ejemplo, "2 parásitos en 320 leucocitos". Si no se identifican más parásitos, el conteo
se detiene en 500 leucocitos y la densidad se informa como "1 parásito en 500
leucocitos".
58
Extendido Fino: Se localiza una porción del extendido en que los campos contengan
cantidades similares de eritrocitos y se cuenta el número de eritrocitos en un campo.
Luego se cuentan simultáneamente eritrocitos parasitados y campos, hasta llegar a un
número de campos equivalentes a 10,000 eritrocitos. Los eritrocitos infectados por más de
un parásito se cuentan como uno.
Por ejemplo, si el área escogida contiene 280 eritrocitos por campo, se deben contar
los parásitos presentes en 36 campos. Si el conteo arroja un resultado de 40 parásitos
en 10,000 eritrocitos, la parasitemia se informa como 0.4%.
Una parasitemia de 1% es una densidad parasitaria elevada.
Densidad parasitaria estimada por microlitro de sangre

Se debe disponer de conteo de eritrocitos y de leucocitos. Si no se cuenta con un
hemograma, se asumen concentraciones constantes de 5,000,000 eritrocitos/ul y
8,000 leucocitos/ul de sangre.
Gota Gruesa: si se contaron 40 parásitos en 100 leucocitos, entonces 40 x
8000/100 = 3,200 parásitos/ul de sangre.
Extendido fino: Si se estimó una parasitemia de 0.4%, entonces 0.4 x
5,000,000/100 = 20,000 parásitos/ul de sangre.
59
Plasmodium vivax
TROFOZOITO
Tamaño : …………………………………………..……
Forma : …………………………………….…………..
Otras caracteristicas : …………………………….……
…………………………………………………….……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
ESQUIZONTE
Tamaño : …………………………………………..……
Forma : ………………………………….….…………..
Esporoquiste.: ……….…………………………….……
Esporozoitos :…………………………………….……
Otras caracteristicas……………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
GAMETOCITO
Tamaño : …………………………………………..……
Forma : …………………………………….…………..
Otras caracteristicas : …………………………….……
…………………………………………………….……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
……………………………………………………..……
60
61
62
Metodo : ……………………………..
63
Cuestionario
1.- Menciona las diferencias que existen en los diferentes tipos de plasmodium.
2.- Dibuja el ciclo vital del plasmodium
3.- ¿En qué etapa de la fiebre se debe obtener la muestra de sangre para el diagnóstico?
4.- Describe el método de diagnóstico de la malaria o paludismo
64
PRACTICA Nº 7. OBSERVACION DE COCCIDEOS
INTESTINALES
Método Acido Resistente Modificado (KINYOUN)
Se realiza para poner en evidencia por medio de una coloración, los ooquistes de
Cryptosporídium spp. excretados por individuos infectados. Ooquistes de otros
apicomplexa como Isospora belli, Cyclospora cayetanensis también pueden colorearse
con este método.
Muestra a examinar
Heces frescas o fijadas en formalina al 10%, por lo general de pacientes con
gastroenteritis, niños inmunonormales entre 0-5 años de edad y pacientes de cualquier
edad que presenten diarrea crónica y deficiencia inmunológica por cualquier razón. En
algunas circunstancias {personas con SIDA), puede utilizarse esputo, bilis, impronta de
biopsia de mucosas.
Reactivos
Carbol-fucsina
 Fucsina básica 4 g
 Etanol al 95% 20 mL
 Fenol (líquido o cristales) 8 g
 Agua destilada 100 mL
Disolver los cristales de fucsina básica en el alcohol etílico, en un matraz de 250 mL de
capacidad, agitar con una varilla de vidrio hasta disolución completa de la fucsina.
Añadir el fenol, seguir mezclando y completar a 100 mL con agua destilada. Guardar
en frasco tapado y rotulado. Solución lista para trabajar.
Alcohol etílico al 50%
 Alcohol etílico puro 50 mL
Mezclar y guardar en frasco tapado y rotulado.
Diferenciador. Solución de alcohol-ácido 3%
 Ácido clorhídrico concentrado 3,00 mL
 Etanol al 95% 97,00 mL
Azul de metileno alcalino
 Azul de metileno en cristales 0.3 g
 Alcohol etílico al 95% 30 mL
Mezclar hasta disolución de los cristales. Para alcalinizar, mezclar con 100 mL de
solución acuosa de hidróxido de potasio (KOH) al 0.01%. Guardar en frasco tapado y
rotulado. Solución lista para utilizar.
Materiales
 Porta-objetos de 7.5 X 2.5 cm (3 X 1 pulgada)
 Aplicadores de madera
 Pipetas Pasteur con perilla
 Metanol puro
65
 Gasa quirúrgica en cuadrados o papel absorbente
 Aceite de inmersión
 Papel para limpiar lentes de microscopio
Procedimiento
Identificar el porta-objetos con la muestra a examinar
Heces formadas o blandas, sin moco: tomar una porción cualquiera de las heces con
un aplicador y hacer un extendido fino en el tercio medio del porta-objetos. Dejar secar
Heces diarreicas con moco: - tomar del moco para hacer el extendido fino.Dejar secar
Heces líquidas: - si hay moco, tomar de éste para hacer un extendido fino. Si no hay,
mezclar las heces con una pipeta Pasteur y tomar una pequeña cantidad para hacer un
extendido fino sobre un portaobjetos. bien sin mezclar, aspirar una porción pequeña del
sedimento y extender. Dejar secar
Heces fijadas en formalina: al 10% mezclar las heces y hacer un extendido fino sobre
un porta-objetos. Dejar secar
1. Fijar con metanol puro 30 segundos. Dejar secar

2. Introducir en carbol fucsina 5 minutos
3. Enjuagar en agua corriente
4. Introducir en alcohol acido durante 8-10 segundos. Este es un paso crítico, por lo
que debe asegurarse del tiempo necesario según sus reactivos
5. Lavar en agua corriente por ambos lados, escurrir sobre gasa
6. Introducir en azul de metileno alcalino 1 minuto Lavar, dejar secar y observar al
microscopio óptico.
7. Para examinar la lámina, algunos autores recomiendan colocar una película muy
fina de aceite sobre la coloración para buscar ooquistes rápidamente con el objetivo
40 X. Una vez que se encuentren cuerpos parecidos a ooquistes teñidos, asegure
el diagnóstico cambiando para el objetivo de inmersión.
Características de la coloración
Los ooquistes de Cryptosporidium se tiñen de rojo brillante, que se destacan sobre un
fondo azul en coloraciones adecuadas. Su tamaño (4-6 μm) y su forma redonda son
uniformes. A menudo se observa una vacuola y un granulo denso dentro del ooquiste,
otras veces no se observa esto. Se diferencian de levaduras porque estas son más
pequeñas, redondas o alargadas, a veces se observa la gemación y se tiñen de azul
oscuro denso o de rosado. Los ooquistes del. Isospora belli miden entre 18-25 μm, tienen
forma de cigarro o de huso, el esporoblasto se colorea de rojo intenso, pero no siempre.
Los ooquistes de C. cayetanensis miden de8-10 μm, son redondos, no se colorean
uniforme ni intensamente, algunos permaneces sin color, su contenido aparece granuloso
o no revela ninguno; en ocasiones la pared del ooquiste se observa arrugada.
Observaciones
La expulsión de ooquistes en pacientes infectados es intermitente, por lo que es necesario
repetir el examen durante algunos días. La cantidad de ooquistes presente puede ser
escasa, por lo que se hace necesario concentrar la muestra y colorear el concentrado (
método de Weber). Heces de cualquier consistencia pueden contener ooquistes, no
solamente las diarreicas o líquidas. Guardar las láminas positivas, debidamente rotuladas,
para referencia y control.
66
Isospora belli
OOQUISTE
Tamaño : ……………………………………..……
Forma : ………………………………….………..
Esporoquistes : ……………………………………
Esporozoitos :……………………………………..
Otras caracteristicas : ……………..........................
……………………………………………………..
…………………………………………………….
…………………………………………………….
…………………………………………………….
…………………………………………………….
Cryptosporidium parvum
OOQUISTE
Tamaño : ……………………………………..……
Forma : ………………………………….………..
Esporozoitos :……………………………………..
Otras características : ……………..........................
……………………………………………………..
…………………………………………………….
…………………………………………………….
……………………………………………………..
……………………………………………………..
…………………………………………………….
…………………………………………………….
…………………………………………………….
67
Metodo : ……………………………..

Cuestionario
68
1. ¿Cuál es la fase de Isospora belli en el ser humano?
2. ¿Cuál es la vía de infección de Isospora belli?
3. ¿Qué técnica se emplea para el diagnóstico de la Isosporiosis?
4. Esquematice ciclo biológico de Isospora Belli
5. ¿Cuál es la fase del Criptosporidium parvum en el ser humano?
6. ¿Cuál es la vía de infección de Criptosporidium parvum?
7. ¿Qué técnica se emplea para el diagnóstico de la Criptosporidium parvum?
8. Esquematice ciclo biológico de Criptosporidium parvum
9. Realice un cuadro de diferencias de las Coccideas intestinales
69
70
PRACTICA Nº 8. OBSERVACION DE ASCARIS LUMBRICOIDES
HUEVO GRAVIDO ( FERTIL ) –

MAMELONADO ( CORTICADO )
Tamaño : …………………………………………..
Forma :……………………………………………..
Cubiertas ( capas ) : …………………………….….
………………………………………………….…..
……………………………………………………...
……………………………………………………..
Otras características : ………………………………
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
HUEVO INGRAVIDO ( INFERTIL ) –

MAMELONADO ( CORTICADO )
Tamaño : …………………………………………..
Forma :……………………………………………..
Cubiertas ( capas ) : …………………………….….
………………………………………………….…..
……………………………………………………...
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
HUEVO LARVADO
Tamaño : …………………………………………..
Forma :……………………………………………..
Cubiertas ( capas ) : …………………………….….
………………………………………………….…..
……………………………………………………...
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
71
Metodo : ……………………………..
Cuestionario
1. Que es el ciclo de Looss ?

2. Dibuje un Ascaris adulto macho y hembra indicando sus partes
3. Esquematice el ciclo biológico de Ascaris lumbricoides
72
PRACTICA Nº 9 : OBSERVACION TRICHURIS TRICHIURA
HUEVO
Tamaño : …………………………………………..
Forma :……………………………………………..
Cubiertas ( capas ) : …………………………….….
………………………………………………….…..
……………………………………………………...
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
……………………………………………………..
Metodo : ……………………………..
Cuestionario
1. Dibuje un Trichuris adulto macho y hembra indicando sus partes

2. Esquematice el ciclo biológico de Trichuris trichiura
73
PRACTICA Nº 10. OBSERVACION DE UNCINARIAS
HUEVO
Tamaño : …………………………………………..………..
Forma :…………………………………………………..…..
Cubierta : ………………….……………..…….….…..…..
………………………………………………….…..…..…..
Otras características : …………………………………..…..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
Metodo : ……………………………..
74
Cuestionario
1. Esquematice ciclo biológico de Ancylostoma duodenale y Necator americanus

2. Realice un cuadro de diferencias entre Ancylostoma duodenale y Necator
americanus
3. Dibuje los huevos y región bucal de gusano adulto de Ancylostoma duodenale y
Necator americanus
75
STRONGYLOIDES STERCORALIS
LARVA RHABDITOIDE
Tamaño : …………………………………………..………..
Forma :…………………………………………………..…..
Cubierta ( capas ) : ………………….………….….…..…..
………………………………………………….…..…..…..
……………………………………………………...…..…..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
Metodo : ……………………………..
76
Cuestionario
4. Esquematice ciclo biológico de Strongyloides stercoralis

5. Esquematice una larva rhabtiotoide y coloque sus partes
6. Esquematice una larva filariforme y coloque sus partes
77
PRACTICA Nº 11. OBSERVACION ENTEROBIUS
VERMICULARIS
MÉTODO DE LA CINTA TRANSPARENTE ADHESIVA (TEST DE GRAHAM)
Recobrar huevos de Taenia sp. o de Enterobius vermicularis de la región anal y perianal

de individuos infectados. Hembras de E. vermicularis migran del ciego e intestino grueso
a la región exterior del ano, adonde depositan huevos casi infectantes, razón por la cual
casi nunca se ven en las heces. Los proglótidos grávidos de Taenia saginata y a veces de
T. solium que se desprenden de la estróbila y fuerzan el esfínter anal, dejan rastros de
huevos en la región perianal mientras tienen movimientos de extensión o retracción. Para
diagnosticar infecciones por E. vermicularis, la cinta transparente adhesiva es el método
indicado; para identificar individuos infectados con Taenia sp. este método, en
combinación con otros métodos y la observación clínica, aumenta la probabilidad de
diagnóstico.
Preparación del paciente

La toma de esta muestra es fácil de realizar aún por personas de poca preparación o
analfabetas, siempre que se provea una explicación clara y sencilla. Para este o cualquier
otro método que se utilice, la muestra debe tomarse antes que el paciente se lave, bañe o
defeque, durante la noche o inmediatamente al levantarse por la mañana o en cualquier
momento (Taenia) antes del examen.
NOTA: En ocasiones se pueden ver los gusanos adultos al separar los glúteos o
sobre las heces a! defecar. Si esto sucede, deberán llevarse al laboratorio para la
confirmación morfológica. Como instrucción a la madre, se le indica de recogerlos
y colocarlos en alcohol o vinagre en un bote limpio y llevarlos al laboratorio.
Materiales
 Porta-objetos de 7.5 X 2.5 cm
 Baja-lenguas o palo de paleta
 Cinta transparente adhesiva de 2 cm de ancho
 Etiquetas
 Xilol
 Pipeta Pasteur y bulbo o perilla de goma
 Frasco con desinfectante para descartar material
Procedimiento
1. Colocar una tira de cinta transparente adhesiva sobre un porta-objetos limpio y
seco, dejando un extremo doblado por debajo de la lámina y en el otro pegar una
etiqueta y escribir la identificación del paciente
2. Al momento de tomar la muestra, pelar la cinta suavemente del porta-objetos,
tomándola por la parte etiquetada.
3. Colocar el porta-objetos sobre un baja-lenguas o palo de paleta y doblar la cinta
sobre un extremo de éste, con la parte adhesiva hacia fuera
4. Con el paciente en decúbito, apartar los glúteos con una mano y apretar la cinta
adhesiva firmemente a un lado y otro de los pliegues perianales
5. Volver a colocar la cinta sobre el porta-objetos y descartar el baja-lenguas
78
6. La muestra puede transportarse o guardarse protegida, hasta el momento del
examen.
7. Para examinar, desprender la cinta transparente hasta la parte expuesta agregar 1-
2 gotas de xilol a la lámina y apretar de nuevo la cinta en su lugar. El xilol
(puede ser tolueno) aclara la preparación, elimina las burbujas de aire y hace más
visibles los huevos. Examinar inmediatamente al microscopio.
Características de los huevos de taenia y de enterobius vermicularis
- Los huevos de Taenia se reconocen por su forma redonda, de igual tamaño (31 a
43 μm), pero se ven café, densos y en unos pocos ejemplares se pueden visualizar
los ganchos de la oncósfera. Utilizar mayor aumento para ver detalles.
- Los huevos de Enterobius vermicularis se observan de cáscara transparente,
alargados u ovoides, con un lado más aplanado; tienen un embrión en su interior y
miden entre 50-60 μm por 20-30 μm.
Resultados (observaciones):
79
HUEVO
Tamaño : …………………………………………..………..
Forma :…………………………………………………..…..
Cubierta : ………………….……………..…….….…..…..
………………………………………………….…..…..…..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
Metodo : ……………………………..
Cuestionario
1. Esquematice el ciclo biológico de Enterobius vermicularis

2. Diferencias entre parasito adulto macho y hembra
80
PRACTICA Nº12 .OBSERVACION DE CESTODES I
TENIA sp
HUEVO
Tamaño : …………………………………………..………..
Forma :…………………………………………………..…..
Cubierta : ………………….……………..…….….…..…..
………………………………………………….…..…..…..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
CISTICERCO
Tamaño : …………………………………………..………..
Forma :…………………………………………………..…..
Cubierta : ………………….……………..…….….…..…..
………………………………………………….…..…..…..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
Proglotide - Tenia ……..….. Proglotide - Tenia ………....
81
ESCOLEX –Tenia ……………..……..
Forma :…………………………………………………..…
Ganchos : ………………………………………….………
Ventosas :………………………………………….………..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
ESCOLEX –Tenia …………………….

Forma :…………………………………………………..…
Ganchos : ………………………………………….………
Ventosas :………………………………………….………..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
Metodo : ……………………………..
82
Cuestionario
1. Esquematice ciclo biológico de Tenia solium

2. Esquematice ciclo biológico de Tenia saginata
3. Realice un cuadro de diferencias de las dos tenias
4. Existe alguna diferencia entre huevos de estas dos tenias? ¿Cuáles son?
83
PRACTICA Nº13. OBSERVACION DE CESTODES II
Hymenolepis nana

HUEVO
Tamaño : …………………………………………..………
Forma :…………………………………………………..…
Cubierta : ………………….……………..…….….…..…..
Otras características : …………………………………..….
……………………………………………………..…...….
……………………………………………………..……….
Escolex Proglotide
Metodo : ……………………………..

84
Cuestionario
1. Esquematice ciclo biológico de Hymenolepis nana

2. Realice un cuadro de diferencias entre Hymenolepis nana y diminuta
85
PRACTICA Nº14 .OBSERVACION DE CESTODES III
Diphyllobothrium sp.
HUEVO
Tamaño : …………………………………………..………..
Forma :…………………………………………………..…..
Cubierta : ………………….……………..…….….…..…..
………………………………………………….…..…..…..
……………………………………………………..…...…..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
……………………………………………………..………..
Metodo : ……………………………..
86
Cuestionario
1. Esquematice ciclo biológico Diphyllobothrium sp.

2. Realice un cuadro de diferencias entre Diphyllobothrium latum y pacificum
87
PRACTICA Nº15 .OBSERVACION DE TREMATODES
Fasciola hepatica
Huevo Adulto
Tamaño : ……………………………………… Tamaño : ………………………………………

Forma : ……………………………………….. Forma : ………………………………………..
Otras caracteristicas : ………………………… Núcleo : ……………………………………….
………………………………………………… Otras características : …………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
………………………………………………… …………………………………………………
Metodo : ……………………………..

1.
88
89
PRACTICA Nº16 . OBSERVACION DE INSECTOS DE
IMPORTANCIA MEDICA
Material necesario
 Insectos
 Lupa binocular.
Objeto de la práctica
Estudio de los insectos: Artrópodos, antenados con el cuerpo dividido en cabeza, tórax y
abdomen, con tres pares de patas.
Se pretende que los alumnos observen y dibujen las características que son comunes a
todos los insectos de interés medico. Además pueden observar las características que
diferencian a los principales órdenes.
Desarrollo de la práctica:
1. Cada alumno aporta un pequeño insecto (mosca, avispa, pulga, etc.), deben
observarlo a la lupa, dibujarlo y clasificarlo.
2. Con las caracteristicas de insectos deben localizar un ejemplo de cada uno de los
siguientes órdenes y clasificarlo asi como describir sus características.
Coloque las partes de los siguientes insectos
Anopheles sp. Características : ……………………..……………

………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
90
Características : ……………………..……………
Musca domestica ………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
Periplaneta americana
………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
Pulex irritans Características : ……………………..……………

………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
91
Sarcoptes scabiei Características : ……………………..……………
………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
Pediculus humanus Características : ……………………..……………

………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
Phthirus pubis Características : ……………………..……………

………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
92
Demodex folliculorum Características : ……………………..……………
………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
Triatoma infestans ………………………………………………….…
………………………………………………….…
…………………………………………….………
…………………………………………….………
………………………………………………….…
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
……………………………………………….……
93
PRACTICA Nº17 .EXAMEN COPROFUNCIONAL
El examen coprológico funcional es un conjunto de pruebas que brindan
información oportuna y de fácil acceso sobre la fisiopatologia digestiva, especialmente
dirigida a patologías relacionadas con: pérdida de peso, diarreas crónicas, desnutrición –
malnutrición, pancreopatias, procesos inflamatorios intestinales, anemia macro -
microcíticas y hemorragias
Las heces tienden a ser blandas y voluminosas cuando se sigue una dieta alta en
vegetales, escasa y seca con comidas en que se ingiere mucha carne. El 75% del
contenido de las heces es agua mientras que el 25% restante es materia fecal. El 30% de
este 25% va a ser de desechos celulares y bacterianos. Entre un 30 y un 50%
dependiendo de la dieta va a ser de residuos de esta, aproximadamente entre un 10 y
15% va a ser grasa y el 5% restante va a estar formado por sustancias inorgánicas,
principalmente fosfatos y carbonatos
El estudio coprofuncional muestras fecales de origen humano, permite obtener datos que
nos sirve para determinar:
1.- La situación del funcionalismo digestivo.

2.- Infecciones intestinales causadas por virus, bacterias y hongos.
3.- Infecciones causadas por parásitos intestinales.
La prueba se realiza en tres fases:

 La fase Macroscópica consiste en reportar las características físicas u
organolepticasde la muestra (forma, consistencia, color, aspecto, presencia de
sangre o moco)
 La fase Química consiste en analizar varios parámetros como el pH, sustancias
reductoras, sangre oculta, grasas, entre otras.
 La fase Microscópica, la muestra es analizada para identificar y cuantificar células
inflamatorias (leucocitos), bacterias, hongos, el tipo de fibras que predominan como
producto del metabolismo del aparato digestivo u otros elementos anormales que
pueden estar presentes en la muestra
ALIMENTACIÓN PREVIA AL ANÁLISIS
Se debe seguir con el régimen habitual de comidas, pero hay que añadir aquellos
elementos que nos pueden suministrar una base para el diagnóstico, como son:
 Carne: Se investiga el tejido conjuntivo y fibras musculares. Debe comerse lo más

cruda posible…..cuidado con este dato
 Patatas: Se investiga la digestión de almidón.
 Grasa: Se tomará en forma de leche, mantequilla o carne. Este plan se sigue
durante 3 días y luego se recoge la muestra de heces.
94
Se le pide al paciente que lleve al laboratorio una muestra de heces (debe ser una
evacuación completa), con una dieta mínimo de tres días sin ingerir carnes rojas
y sus derivados (chorizos, embutidos, etc.), antes de su estudio.
NO COMER: coliflor, pepinos betabel, melón y toronja.
RECOLECCIÓN DE MUESTRA
Recibir la deposición en un recipiente limpio; no es necesaria la esterilidad., evitando que
se contamine con orina. Escoger una porción característica de las heces (con moco o
sangre si hubiese) y colectar con una espátula aproximadamente una muestra equivalente
a 1/4 del frasco (no lo llene). Coloque en cada etiqueta su nombre completo, fecha y hora
de la obtención.
Muestras No Adecuadas
*Muestras con mas de 2 horas de haber sido obtenidas.

*Muestras obtenidas del inodoro.
*Muestras en cantidad insuficiente o excesiva.
*Muestras contaminadas con orina
Las muestras inadecuadas no serán analizadas y se solicitará una nueva muestra.
MATERIALES
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Tubos de ensayo.
- Gradillas
- Pinzas
- Bajalenguas
- Mechero
- Ácido acético al 10%.
- Kit reacción de thevenon
- Reactivo benedict
- Lugol
- Tiras reactivas para medir Ph
- Agua destilada
- Microscopio.
95
PROCEDIMIENTO
EXAMEN MACROSCOPICO ( ORGANOLÉPTICO )

OLOR:Tiene un olor en particular debido a ciertos productos aromáticos originados en
el intestino por la acción de microorganismos de fermentación o de putrefacción que
actúan sobre hidratos de carbono y proteínas. El escatol (3-metil-indol), es químicamente
muy similar al indol y es otro de los constituyentes de las fermentaciones intestinales
que le dan a las heces su olor característico.
a) Fecaloide. normal.
b) Pútrido (olor a amoniaco). Debido a la flora proteolítica aumentada. Provoca
diarreas de putrefacción (heces alcalinas y gases).
c) Agrio penetrante o rancio Debido a la flora sacarolítica aumentada. Provoca
diarreas de fermentación (heces ácidas y gases).
d) Nauseabundo . Debido a la descomposición de tejidos, ocasionada por carcinoma,
úlceras.
COLOR: La coloración parda habitual se deben a urobilina y estercobilina, el color es

según la alimentación.
a) Marrón: Es el color habitual.

b) Verde: Puede ser debido a la ingesta (verduras, medicamentos...) o a la presencia
de biliverdina (rapidez del tránsito intestinal, diarreas infantiles).
c) Rojo: Debido a la ingesta (remolacha) o a la existencia de hemorragias próximas al
ano.
d) Negro: Debido a la ingesta (sangre, morcilla, espinacas), a los medicamentos
e) (carbón, hierro, bismuto) o a hemorragias internas (heces pastosas, melenas).
f) Blanco - grisáceo. : Debido a la ingesta (leche, bario -peptobismol, caolín...) o a la
ausencia de bilis fundamentalmente. (ictericias obstructivas, hepatitis)
g) Amarillo: Debido a la ingesta (régimen lácteo - Lactantes) o a diarreas de
fermentación hidrocarbonada (ingesta de Pan o papas), también pueden indicar
que el paciente sufre una infección conocida como giardiasis. Síndrome de Gilbert.
Esta enfermedad está condicionada por brotes de ictericia y de hiperbilirubinemia y
ocurre cuando hay un exceso de bilirrubina en la sangre.
h) Castaño oscuro “café”: Ingesta de carnes
96
En los seres humanos la primera vez que los bebés vacían su intestino echan
unas deposiciones, espesas y pegajosas que se denominan MECONIO.
El meconio es de color verde oscuro a negro compuesta por células muertas y
secreciones del estómago e hígado, que reviste el intestino del recién nacido. Su
formación comienza en el periodo fetal.
El término meconio, deriva de la palabra griega mekoni, que significa jugo

adormecedor u opio. Desde que Aristóteles observara una relación entre la tinción
por meconio del líquido amniótico y un estado de sueño fetal o la depresión
neonatal, los obstetras se han interesado por el bienestar del feto cuando se
presenta meconio en el líquido amniótico. A veces, las parturientas al romper
aguas, observan la presencia de meconio en el líquido amniótico. Esto es síntoma
de que el bebé tiene dificultades antes del parto.
El meconio se expulsa durante las primeras 24 horas de vida, gracias a la acción
laxante del calostro, pero puede tardar hasta 48 horas en ser expulsado por el
bebé. Después las deposiciones serán más sólidas y de color amarillo. Si el bebé
no realiza sus deposiciones tras ese periodo, debe acudir urgentemente a su
pediatra para su valoración
CONSISTENCIA: Normalmente es pastosa-dura. Puede modificarse en distintas

circunstancias.
 En las diarreas la consistencia es líquida, en cantidad abundante cuando se
deben a patología intestino delgado y escaso y mucosas si proceden del
intestino grueso.
 Las deposiciones semiblandas indican un tránsito rápido por el intestino
delgado o son propias de las afecciones pancreáticas o biliares.
 En el estreñimiento son duras, en forma de grandes bolos en la atonía, y
acintadas en las obstrucciones mecánicas.
 Las deposiciones caprinas son propias de los estados espásticos acentuados.
CONSISTENCIA RELACIONADA CON:

Agua de arroz Cólera
Puré de lentejas Tifoidea
Papilla Insuficiencia gástrica
Pegajosa Esteatorrea origen biliar, pancreático
Pegajosa oscura Melenas
Pastosa espumosa Dispepsia (Indigestion)
Restos gruesos de alimentos Insuficiencia pancreática
97
FORMA: Varía con la consistencia
a) Cilíndrica: Es la normal. La superficie presenta depresiones y relieves,

b) Laminada o en cinta: Debido a papilomas.
c) Bolitas secas y duras: Estreñimiento.
d) Bolitas en masas: Se presenta en la Salmonelosis.
e) Bola maleable del tamaño de un puño: Se presenta en la atonía del recto
(personas ancianas).
MUCUS: Su presencia en las heces es propia de los estados inflamatorios del intestino
principalmente el colon. (enteritis y colitis), pero también se presenta en los estados
espásticos, aún sin Inflamación. La presencia de mucus es indicio de irritación compatible
con la existencia de un parasitismo.
El procedimiento es utilizar un aplicador de madera para buscar la presencia de mucus

en la muestra.
 Mezclado con las heces, aspecto brillante procede del intestino delgado.
 Moco visible proviene del colon.
 Transparente: como catarro alérgico (colon irritable), estrés.
 Opaco con células epiteliales: proceso inflamatorio agudo.
 Mocó sanguinolento: neoplasma, amebas o bactérias.
 Mocó sanguinolento y pus: colitis ulcerosa, carcinoma, desinteria basilar,
diverticulitis aguda o tubérculos intestinales.
La presencia de moco es importante, salvo en los recién nacidos, y siempre deberá
resaltarse en el informe.
Resultados: Se expresa en (+), (++), (+++).
Para distinguir entre tejido conjuntivo y moco se agregan unas gotas de Ácido acético
glacial 1:3, y se observa al microscopio, colocando en un portaobjetos con una
pipeta de pasteur una gota de la dilución y cubriendo con un cubreobjetos; el
tejido conjuntivo se aclara, mientras que el moco se hace más compacto.
98
EXAMEN FÍSICO-QUÍMICO
pH
La apreciación de la reacción de las heces se hace con papeles indicadores de pH.

El valor normal es de 6.9 a 7.2, Varía dependiendo del régimen alimenticio. no es valida
la determinación si el paciente está en tratamiento con antibióticos orales. El pH de
las heces es un dato orientador sobretodo en diarreas infantiles, cuando es ácido es
de origen bacteriano. El pH fecal depende en parte de la fermentación de los azúcares. La
fermentación en el colon de una cantidad normal de carbohidratos y de producción de
ácidos grasos explica un pH normal ligeramente acidificado. Si se sospecha intolerancia a
los disacáridos, se realiza un simple test de screening
Se emplea una tira de papel indicador universal, sobre el cual se aplica una pequeña
cantidad de materia fecal, se espera unos minutos y se compara con la escala de colores.
Se van a modificar según el proceso digestivo.
 pH ácidos indican EDA de tipo BACTERIANO y viral.
 pH alcalinos indican EDA invasivas.
 pH ligeramente alcalinos, se dan en casos de diarreas secretorias sin

ingesta de alimentos, colitis, adenoma velloso, y posiblemente con el uso de
antibióticos.
 Un pH fecal menor de 6.0 es evidencia sugestiva de malabsorción de
azúcares. En niños y en algunos adultos se nota que sus heces tienen un olor dulce
como resultado de ácidos grasos volátiles y la presencia de intolerancia a la lactosa.
 pH fecales bajos también contribuyen a escoriaciones de la piel de la región
perianal, frecuentemente acompañadas de diarrea. La determinación de sustancias
reductoras en la materia fecal es un test más confiable la deficiencia de
disacaridasa.
 Un pH fecal alto puede ser un factor de riesgo de cáncer colo-rectal. La
ingesta de cereales con fibra (75-100g/días x 14 días) demuestra la capacidad de
reducir el pH fecal en 0,4 unidades. Sin embargo, esto significa que un pH alto se
relaciona en segunda instancia con el riesgo de cáncer.
99
SANGRE OCULTA
También se llama este análisis investigación de hemorragias ocultas. Se puede observar

sangre en heces, de color rojo, proveniente de fisuras anales o hemorroides. Esto no se
considera importante. Cuando proviene de hemorragias gástricas, duodenales, cáncer de
colon, etc., la sangre se digiere, tomando las heces un color oscuro, casi negro. Esta
sangre si es importante. Para este análisis es importantísimo que el paciente durante los
2-3 días anteriores a la toma de muestras se someta a un régimen riguroso (“blanco”), sin
carne, pescados, embutidos, lentejas, espinacas, plátanos etc., es decir alimentos ricos en
peroxidasas. Tampoco deberá tomar medicamentos que contengan hierro o hemoglobina,
o que puedan provocar pérdidas sanguíneas como salicilatos o esteroides. La
alimentación permitida consiste en: Huevos, patatas, cebolla, arroz, garbanzos, pan y
leche. La mayoría de las pruebas para detectar hemorragias ocultas en heces se basan en
la determinación de peroxidasas como indicativo del contenido de hemoglobina.
a. THEVENON
PRUEBA EN PAPEL FILTRO
4. Sobre un papel de filtro manchado de heces y unas gotas de acido acetico,
5. Se ponen unas gotas de piramidon ,disolución etanólica y
6. Se agregan unas gotas de agua oxigenada de 10 volúmenes.
7. Si el resultado es (+), como resultado de la presencia de peroxidasa, se
formará un halo de color morado en torno a la mancha
PRUEBA EN TUBO
1. Con una varilla de vidrio se colocan en un tubo de ensayo heces del tamaño
de un maiz
2. Se agregan 2 ml de agua destilada y 2ml de acido acetico al 50 % y 1 ml de
agua oxigenada, adicionando por zona 5 gotas de Agua Oxigenada (3%)
3. La presencia de sangre se pone de manifiesto por un halo de color violeta .
100
b. REACCIÓN DE LA BENCIDINA: Sobre un papel de filtro manchado de heces, se
ponen unas gotas de bencidina y agua oxigenada de 10 volúmenes. Si el resultado
es (+), como resultado de la presencia de peroxidasa, se formará un halo de color
verde-azulado en torno a la mancha.
c. REACCIÓN DE WEBER O DEL GUAYACO: La prueba es igual que la anterior
pero en lugar de poner bencidina se pone guayaco. La reacción es la siguiente:
HEMOGLOBINA + H2O2 Þ H2O + O2
BENCIDINA O2 + o Þ Color Azul-verdoso
d. PRUEBA DEL CROMO RADIOACTIVO: No se basa en la peroxidasa: Tiene más
sensibilidad y especificidad que las anteriores. Se basa en la capacidad del Cr
radioactivo (Cr51) para ser fijado por los hematíes y por el hecho de no ser
reabsorbido en el tracto gastrointestinal. Así pues, es excretado por las heces en
las que puede ser medido por espectrofotometría de rayos.
e. HEMA SCREEN TEST. La prueba se realiza empleando el TEST de Hema Screen,
es una prueba en placa para la detección cualitativa de sangre oculta. El Hema
Screen está compuesto de un papel impregnado de guaiaco encerrado en
una tarjeta, con lo que se permite la aplicación de la muestra en un lado y el
desarrollo e interpretación al reverso.
El Hema Screen, está basado en la oxidación de

los compuestos fenoliticos presentes en el
guanaco con la producción de compuestos
quinonas de color azul. Debido a su similitud
con los grupos proteicos de la peroxidasa, la
porción hematina de la molécula de hemoglobina
puede funcionar en una manera
pseudoenzimática, catalizando la oxidación del
guaiaco.
Nota: La reacción de color ocurrirá después de 30

segundos.
El Hema Sceen incluye un lado para el

monitoreo, el cuál proporciona un sistema de
control de calidad para cada prueba.
Procedimiento
1. Abra la tapa frontal, utilizando un extremo del aplicador, colecte una

pequeña cantidad de muestra. Aplique una capa muy delgada en la
ventana 1.
2. Utilice el otro extremo del aplicador para obtener una segunda muestra a
partir de una porción diferente de la muestra de heces. Aplicar una capa muy
delgada en la ventana 2.
3. Permitir que las muestras se sequen al aire, después cierre la cubierta.
4. Habrá la ventana perforada en la parte trasera de la placa.
101
5. Aplicar dos gotas de revelador Hema Screen en la parte trasera de las
ventanas 1 y 2.
6. lea el resultado después de 30 segundos y antes de 2 minutos.
7. Registre los resultados cualquier traza de color azul, dentro o fuera del
margen de la muestra, indica un resultado positivo para sangre oculta.
POSITIVO : INDICA UN COLOR AZÙL

NEGATIVO : UN COLOR INCOLORO
Fuentes de error
 Falsos positivos: la peroxidasa de frutas y vegetales crudos.

 Falsos negativos: la ingestión de ac. Ascórbico (Vit. C) en altas dosis.
Nota: Los medicamentos orales (como aspirina. Indometacina, reserpina,

fenilbutazona, corticosteroides), y el consumo fuerte de alcohol puede causar irritación o
sangrado del tracto intestinal y deben ser descontinuados por siete días antes y durante el
periodo de la prueba.
Resultados y valores de referencia.
Todos los parámetros del estudio de Coprológico funcional se reportan en cruces

siempre y cuando sea positivo, de acuerdo a la siguiente tabla y criterio del analista.
CRITERIO CRUCES
ABUNDANTE 4
MODERADO 3a2
ESCASO 1
AZUCARES REDUCTORES
a. TEST DE BENEDICT
Las heces deben de ser recientes, no debe dejarse pasar más de una hora desde que
son emitidas hasta que se realiza el examen.
1. Con una varilla de vidrio se colocan en un tubo de ensayo heces del tamaño
de un maiz 1 gramo de heces (pastoso).
2. Se agregan 2 ml de agua destilada se homogeneiza
3. Se agrega 2ml de reactivo de benedict
4. Se somete al calor hasta la ebullición. Moviendo el tubo lentamente.
5. Dejar en reposo y evaluar en cruces.
102
 Azul verdoso: vestigio o trazas.
 Amarillo verdoso: (+).
 Amarillo intenso: (++).
 Naranja ladrillo: (+++).
b. CLINITEST,
103
La determinación de cuerpos reductores (lactosa o glucosa sacarosa, maltosa, etc.) en las
heces. Se recogen las heces líquidas en un pañal de plástico, se hace una mezcla con 2
partes de agua y 1 de heces. Se toman 15 gotas de la mezcla en un tubo al que se añade
un comprimido de clinitest. Cuando finaliza la reacción se compara el color con una escala
contenida en dicho método y se valora la concentración de sustancias reductoras, según
la coloración obtenida. Se considera anormal la presencia de 0,5% (dos cruces) o más.
Si sospechamos diarrea por sacarosa la prueba nos dará negativa, por lo que
debemos hacer otro tipo de prueba separando la fructosa y glucosa.
Nota: Las heces de los niños con intolerancia a los azucares son generalmente
acuosas, y quienes tienen intolerancia a la lactosa, son generalmente ácidas.
GRASAS
a. Metodo de Saathoff - cualitativo

1. Sudan III 2 gramos
2. Alcohol 96° 10 ml.
3. Ácido acético glacial 90 ml.
Se realiza una dilución de la muestra fecal con solución salina, se toma 1.0 ml.
Más una gota de reactivo de Saathoff en un tubo de ensayo,
se agita y se coloca una gota de la suspensión entre portaobjeto y cubreobjeto
y se lee al microscopio, se observan gotas rojas, de 2 a 3 por campo son de
grasas neutras y es normal. Más de 3 gotas por campo son patológicas. Lo cuál
puede deberse a: Transito acelerado, deficiencia enzimática en absorción.
104
b. Reacción de azul de nilo para grasa fecal - cuantitativo
1. Diluir en un tubo de ensayo una porción de muestra con 9 volúmenes de agua.
2. Añadir:
 1 ml. de esta suspensión fecal.
 1 ml. de agua.
 3 gotas de ClH al 10%.
 3 gotas de Oxalato amónico saturado.
3. Calentar a ebullición durante unos segundos. Enfriar.
4. Echar el líquido en un vaso de precipitado.
5. Lavar el tubo de ensayo con 2,5 ml. de solución de CO3Na2 al 20% y añadirlos
al contenido del vasito.
6. Agregar 15 ml. de agua y 1 ml. de solución de Azul de Nilo (0,05% en agua)
dejando resbalar por las paredes.
7. Leer los resultados inmediatamente:
 NEGATIVO: Rosado que vira a gris (aproximadamente < 7 g./día)
 POSITIVO: Azul (aproximadamente > 7 g./día)
Cuando la reacción de azul de Nilo es negativa, la grasa fecal no excede
nunca de 5% en peso. Una reacción claramente positiva corresponde a más
del 5% de grasa.
c. Método de van de kamer - cuantitativo

Se separan los lípidos de las heces mediante tratamiento de estas con una solución
de hidróxido potásico alcohólico y que contenga pequeñas cantidades de alcohol
amílico. De ésta manera se produce la formación de jabones.
Posteriormente se hidrolizan los jabones con ClH y se convierten en ácidos grasos,
extrayéndose estos a continuación con éter de petróleo.
Por último se titulan los ácidos grasos con NaOH 0,1 N
Peso total de heces x Vol. cc. NaOH g. de grasa = Peso de la muestra
PIGMENTOS BILIARES
La presencia de bilirrubina y estercobilinógeno en heces mediante 2 métodos:
a) Prueba del Sublimado: Sensible para Estercobilina. Se hace poniendo en un tubo de

ensayo:
Dilución de heces.................................... 5 ml.
Sublimado (ClHg).................................... 5 ml.
Se agita y se incuba a 37oC durante 1 - 2 horas y se observan los resultados:
ROJO.............................. ESTERCOBILINA o ESTERCOBILINÓGENO
VERDE............................ BILIRRUBINA.
BLANCO......................... Ausencia de Pigmentos.
105
b) Prueba de grigaut: Sensible para bilirrubina. Se hace poniendo en un tubo de ensayo:

ClH concentrado...................................... 5 ml.

Cl3Fe (10%)............................................. 2 gotas. (Tricloruro de monohierro)

Dilución de heces.................................... 5 ml.
Se agita y se calienta ligeramente observando los resultados:

VERDE..................................... BILIRRUBINA.

ROJO........................................ ESTERCOBILINÓGENO.
Las 2 pruebas se hacen simultáneamente, debido a su diferente sensibilidad, y los

resultados se interpretan así:
SUBLIM GRIGA
 ESTERCOBILINOGENO + + Heces normales
 BILIRRUBINA + + Tránsito intestinal acelerado
 ESTERCOBILINÓGENO + - Tránsito intes. medianamente acelerado
 BILIRRUBINA - +- Obstrucción biliar
ENZIMAS PROTEOLÍTICAS
Se intenta comprobar la presencia de Tripsina, Quimiotripsina, etc. Las heces normales

(hasta una dilución 1/100) licuan la gelatina.
La prueba se realiza aplicando una gota de diferentes diluciones (1/5, 1/10, 1/50, 1/100) de
la heces a estudiar de heces sobre una película de gelatina. Se considera un resultado
positivo si la gelatina queda disuelta en ½ hora.
 Positivo hasta una dilución 1/100........................... Digestión normal.
 Positivo hasta una dilución 1/50............................. Digestión media.
 Positivo hasta una dilución 1/10..............................Digestión deficiente.
106
EXAMEN MICROSCOPICO (CITOLOGICO)
Nos aporta datos más fidedignos acerca de los trastornos de la digestión. Para ello habrá
que instaurar la alimentación explicada anteriormente, si no se hace así la significación del
estudio es muy limitada. Para este estudio se hace una suspensión de heces en suero
fisiológico.
1. Se coge una cantidad de heces, del tamaño de una castaña, y se coloca en un
mortero, copa, vaso de precipitado o tubo de ensayo.
2. Se añade agua o suero fisiológico y mezclar con una varilla hasta formar una papilla
homogénea y fina, ni muy fluida ni muy espesa.
3. Se coloca una gota de esta suspensión en un portaobjetos y se pone un
cubreobjetos encima, cuidando que se extienda formando una capa delgada,
homogénea, sin burbujas de aire. No se debe aplastar el cubre. Se observará con el
objetivo de x10 aumentos, obteniendo una visión de conjunto, y luego se enfoca con el
de x40 aumentos.
Cuando se trata de heces líquidas, se debe hacer una mezcla homogénea y se coloca una
gota directamente al portaobjeto.
a) LEUCOCITOS: Se mejora la observación agregando una gota de ácido acético al

10% (o líquido de turk), mas una gota de materia fecal, se realiza una suspensión
en un tubo de ensayo. Su presencia indica infección bacteriana. Si hay más de 10
leucocitos por campo debe realizarse una diferencial de la muestra fecal por medio de
la técnica de Wrigth , y se debe diferenciar entre Polimorfonucleares
(PMN) y Mononucleares (MN). Mayor cantidad de PMN la infección es causada
por bacterias o amebas y en la enfermedad inflamatoria crónica del colon., mayor
cantidad de MN la infección es viral.

107
b) PIOCITOS: Se presenta en pequeñas cantidades en la enteritis y colitis de
cualquier etiología. Pero la presencia brusca de pus abundante es indicio de la
evacuación a la luz intestinal de un absceso próximo.
c) HEMATIES: Es muy raro observarlos ya que se digieren. Los glóbulos rojos tienen
un diámetro de 7,5 μm. Su presencia en las heces puede indicar ulceración a nivel
del tacto intestinal bajo u otro problema hemorrágico o una evacuación muy rápida,
también pueden aparecer en infecciones por parásitos, bacterias, virus, etc.
d) CRISTALES: Indican una excesiva irritabilidad. Presentan el mismo aspecto que en

el sedimento urinario.
 Cristales de Oxalato de Calcio: Normal y aumentada su presencia

en insuficiencia gástrica.
 Cristales de Colesterol: Cálculos vesiculares
 Cristales de Hamatoidina: Agujas amarillas, se presentan en
grupos, aparecen después de hemorragias.
 Cristales de Charcot Leyden: Presentes en amibiasis, diarreas por
Isospora belli, son cristales octaédricos alargados, producidos
por la degradación de eosinófilos.}
108
e) HONGOS – LEVADURAS: Células ovoides de 4 a 6 μm y que pueden encontrarse

en forma de levaduras o hifas.
Son altamente hepatotóxicos y lesionan la mucosa gastrointestinal (agravando el
problema de hiperpermeabilidad). Junto con los hongos, erradican al resto de la
flora.

109
f) CÉLULAS EPITELIALES: Mucosa intestinal. Indican una excesiva irritabilidad.
Las células epiteliales o células escamosas pueden estar presentes en las heces,
más aún si la muestra se obtiene por sigmoidoscopía. El tamaño de estas células
son semejantes al de las amebas, la coloración es verde pálido con apariencia
uniforme no granular cuando se les colorea con Tricomico-Gomori. Normalmente de
las últimas porciones del intestino.
g) PÁRASITOS: Es un análisis de la materia fecal para verificar la presencia de un

parásito o de una infección del intestino causada por organismos similares
a gusanos. Los huevos se refieren a la primera etapa del ciclo de vida del parásito.
Algunos parásitos son organismos unicelulares como la Amebiasis, la Giardia y las
Tricomonas, etc., mientras que otros tienen apariencia de gusanos.
h) FIBRAS
Fibras musculares: Se pueden observar de diferentes formas dependiendo del
grado de digestión:
a) Mal digeridas: Fragmentos rectangulares estriados, amarillos. Las estrías son
transversales y longitudinales. Los bordes del rectángulo son rectos.
b) Parcialmente digeridas:
Trozos más pequeños con los bordes redondeados y las estrías longitudinales.
c) Bien digeridas: Trozos muy pequeños con los bordes redondeados y sin
estrías.
La presencia de fibras musculares mal digeridas se llama CREATORREA. Se
puede deber a una insuficiencia gástrica o pancreática
Fibras vegetales: Se caracterizan por ser de doble pared, contienen clorofila

y poseen un canal central muy marcado (se observan como resortes o espirales).
Aumento : …………x
110
i) LÍPIDOS: Para observarlas mejor usaremos el reactivo Sudam III. Una gota de este
colorante se mezclará con una gota de la suspensión fecal. Los lípidos o grasas se
encuentran en las heces en forma de:
a) Ácidos grasos: Tienen aspecto cristalino, en forma de escamas o agujas finas

rectas o curvadas. Difícilmente se tiñen.
b) Grasa neutra: Aparece como gotitas de color rojo o naranja Si la temperatura
es fría (< 20º C) las gotas se transforman en masas o placas algo amarillentas o
rojas.
El aumento patológico de grasas en heces se llama ESTEATORREA. Si en el
microscopio se observa mas de 60 gotas /campo es seguro esteatorrea
Algunas veces, para observar las grasas se calienta el portaobjetos suavemente a
la llama. De esta forma todas las grasas (ácidos grasos, neutros y jabones) se
transforman en gotitas de color rojo-anaranjado (con Sudam III). En el estudio de
las grasas en heces puede inducirnos a error, los supositorios, los enemas
oleosos y los portaobjetos y cubreobjetos mal desengrasados.
j) ALMIDÓN: Los gránulos de almidón tomarán un u otro dependiendo del grado de

digestión. También podrán estar dentro de células o aislados:
a) No digeridos: Azul oscuro, casi negro.
b) Parcialmente digeridos: Rojo o rosa.
c) Digeridos: Amarillos o color arenilla.
El tejido muscular, al añadir almidón a la preparación toma un color rojo-caoba. La
presencia de almidón no digerido en las heces se llama AMILORREA.
111
k ) TEJIDO CONJUNTIVO: Se observa como fibras o filamentos que se reúnen en

fascículos y se entremezclan entre si. Son incoloros y no poseen estriación. Se
podría confundir con el moco, pero se distinguen porque se transparentan al
añadirle ácido acético al 30 %.
RESULTADO DEL EXAMEN MICROSCOPICO
La presencia de células epiteliales, eritrocitos y demás estructuras microscopicas se

reporta en cruces de la siguiente manera:
 ABUNDANTES (+++)
 MODERADAS (++)
 ESCASAS (+)
Se pueden reportar por campo :
 leucocitos 10-15 por campo,

 hematíes: 5-1 por campo
112
CARACTERÍSTICAS EN LOS DISTINTOS SÍNDROMES DIGESTIVOS
1) Tránsito global ultrarrápido. Diarrea verde. Lienteria y microscópicamente grasas,
fibras musculares y almidón sin digerir. Sublimado verde.
2) Insuficiencia gástrica. Heces pastosas o líquidas ("diarrea gastrógena") si está

descompensada, de color pardo y alcalinas. Tejido conjuntivo, abundante, en fieltros y
fibras arborescentes que constituyen el dato más característico. Fibras musculares en
manojos y a veces trozos groseros de carne. Grumos de almidón y células de patata.
3) Insuficiencia biliar. Heces acólicas arcillosas, blancogrisáceas en la obstrucción total,

con sublimado blanco; hipocoloreadas si es parcial. Esteatorrea con abundantes ácidos
grasos y jabones, y escasa grasa neutra.
4) Insuficiencia pancreática. Deposición voluminosa, maloliente y de color amarillento

brillante, con reacción alcalina habitualmente. Creatorrea, en forma de fibras musculares
sueltas bien conservadas, con estriación, angulosas y nucleadas; no se observa tejido
conectivo, a no ser que coexista una insuficiencia gástrica. Esteatorrea en forma de gotas
de grasa neutra. Amilorrea, menos aparente, representada por granos de almidón.
5) Trastornos de absorción (sprue, celiaquia). Heces muy voluminosas, de aspecto

cremoso y de color ocre o como mantequilla, con superficie brillante y con burbujas.
Esteatorrea a base, sobre todo, de ácidos grasos y jabones. No existe, por lo general,
creatorrea y apenas almidón.
6) Dispepsia de fermentación. Heces pastosas, en torta, amarillentas, espumosas y de

olor rancio, con reacción ácida y abundante fermentación en la prueba de Strasburger.
Abundante almidón sin digerir, flora iodófila y clostridias.
7) Heces de putrefacción (etiología diversa). Color oscuro, aspecto líquido o pastoso,

olor fétido y reacción alcalina.
8) Enteropatías alérgicas. Abundante moco transparente. Cristales de Charcot-Leyden.

Eosinófilos.
9) Enteropatías inflamatorias. Moco opaco en cantidad, con sangre o pus

frecuentemente. Albúmina disuelta. A menudo heces de putrefacción. Células epiteliales
abundantes, y gérmenes.
113
DIAGRAMA COPROLÓGICO FUNCIONAL
Llevar una muestra de excremento debe de ser una

evacuación completa y no haber ingerido carnes rojas
y de vitamina C o ácido acetil como mínimo tres días
antes de tomar la muestra, cuidando que no haya
contaminación con las heces.
Realizar estudio macroscopico: cantidad,

consistencia, forma, color restos alimenticios, fécula,
tejido conjuntivo, moco.
Diluir las heces en solución salina en una caja Petri.
Realizar estudio microscópico: fibras

musculares, vegetales, grasas, células
epiteliales, leucocitos, azucares reductores,
sangre oculta en heces, pH.
Reportar y registrar los resultados
114
MODELO : REPORTE DE EXAMEN COPROLOGICO FUNCIONAL
EXAMEN MACROSCOPICO :
COLOR : MARRON
CONSISTENCIA : PASTOSO
OLOR : FETIDO
MOCO : NEGATIVO
EXAMEN QUÍMICO :
PH : 7.0
THEVENON : POSITIVO 1+
GRASAS ( SUDAN III ) : No hay esteatorrea
SUSTANCIAS REDUCTORAS: Negativo
EXAMEN MICROSCOPICO :
GRANULOS DE ALMIDON : ESCASOS

FLORA YODOFILA : ESCASAS
LEUCOCITOS : 10 – 12 POR CAMPO
HEMATIES : 10 – 12 POR CAMPO
SE OBSERVAN QUISTES DE Entamoeba histolytica
115
EXAMEN COPROLOGICO FUNCIONAL
EXAMEN MACROSCOPICO :
COLOR :
CONSISTENCIA :
OLOR :
MOCO :
EXAMEN QUÍMICO :
PH :
THEVENON :
GRASAS ( SUDAN III ) :
SUSTANCIAS REDUCTORAS:
EXAMEN MICROSCOPICO :
GRANULOS DE ALMIDON :
FLORA YODOFILA :
LEUCOCITOS :
HEMATIES :
116
ANEXOS
METODOS DE CONCENTRACION
La concentración de huevos, larvas y quistes en heces ha llegado a ser un procedimiento
de rutina como parte de un examen completo para la detección de los parásitos
intestinales y se puede realizar como complemento del examen directo.
Los procedimientos de concentración permiten la detección de protozoos y/o helmintos
empleándose dos métodos: de sedimentación y flotación, o una combinación de ambos,
para separar los protozoos y los huevos de helmintos de las heces, utilizando las
diferencias en el peso específico. Se deben emplear cuando la cantidad de muestra fuera
pequeña, en un control de tratamiento o cuando se deba transportar poca cantidad de
muestra a un lugar distante.
117
SEDIMENTACION POR CENTRIFUGACION
MÉTODO DE RITCHIE: Formol – Éter

Examen coproparasitoscópico cualitativo de concentración por sedimentación con
centrifugación. Se utiliza para huevos, quistes y larvas. Elimina bastantes delitrus
orgánicos como el éter. Debido a que se utilizan varios reactivos y tubos cónicos, resulta
poco económico. Las preparaciones quedan muy sucias porque con la sedimentación,
aparte de concentrase formas parasitarias, se concentran otros materiales
Materiales
 Tubos de ensaye cónicos de 15 ml
 Embudo de cristal
 Vaso de precipitados 50 ml
 Gasa cortada en cuadro
 Bajalenguas
 Pipetas Pasteur con bulbo
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Gradilla
 Centrifuga
 Microscopio .
Reactivos
 Solución salina isotónica
 Solución de formaldehído al 10%
 Éter etílico
 Solución de yodo-lugol
Procedimiento
1. Tomar con el batelenguas aproximadamente 1 gr de materia fecal y colocar en el
vaso de precipitados, añadir 10 ml de solución salina y homogeneizar
2. Se filtra la suspensión a través de la gasa doblada en cuatro partes y colocada en el
embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.
3. Centrifugar el filtrado a 2000 rpm por 2 minutos
4. Decantar el líquido sobrenadante y resuspender con el aplicador de madera el
sedimento con solución salina. Centrifugar nuevamente, decantar y resuspender dos
veces más.
5. Al último sedimento se agregan 5 ml de solución de formaldehído al 10%, se mezcla y
se deja reposar durante 10 minutos en la gradilla
6. Se añaden 0.5 ml de éter, se tapan los tubos y se agitan enérgicamente durante 30
segundos.
7. Centrifugar durante 2 minutos a 2000 rpm
8. Después de centrifugar se observan cuatro capas (se hablara de ellas mas adelante)
9. Decantar el sobrenadante
10. Introducir la pipeta Pasteur hasta el sedimento, extraer con cuidado una gota del
sedimento y colocarla en el portaobjetos
11. Añadir una gota de lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos homogeneizar, y
cubrir con el mismo
12. Observar la preparación con al microscopio con objetivos 10x y 40x
118
De la soluc. filtrada
anteriormente vaciamos
Luego agregamos 2/3 partes de formol
a un tubo una pequeña
y 1/3 de éter (en este caso xilol)
cantidad
Mezclar por
inversión
Centrifugar a 3000
rpm x 1 min.
Eter
Tubo, después de la centrifugación
Restos Líp.
disueltos
Formol
Se elimina el
sobrenadante y
se observa el
sedimento al
microscopio
Sedimento
Se observó huevos de
Parásitos
Hymenolepis
119
MÉTODO DE TELEMANN
Se usa para concentración de huevos, quistes y larvas, sobre todo para aquellas muestras
que tienen elevadas concentraciones de grasas neutras y ácidos grasos libres.
En 1908, Telemann describe su método, el cual es modificado por Rivas en 1928, quien
cambio el ácido clorhídrico por ácido acético. En esta sección se describirá el original.
La utilidad es para concentración de huevos, quistes y larvas, sobre todo aquellas
muestras que tienen elevadas concentraciones de grasas neutras y ácidos grasos libres.
Reactivos
· Éter etílico
· Ácido clorhídrico concentrado
· Agua destilada
· Solución de ácido clorhídrico al 15%
Materiales
· Vaso de precipitado
· Tubos cónicos
· Pipeta pasteur
· Portaobjetos
· Cubreobjetos
· Microscopio compuesto
· Centrifuga
· Aplicadores
· Tapón de goma o caucho
· Gasa o algodón
· Gradilla
Procedimiento
1. Se coloca un fragmento de heces del tamaño de un fríjol ( aprox. 1 g)
2. Se le agrega en el vaso de precipitados ácido clorhídrico al 15%, y se
homogeneiza con el aplicador cuidadosamente
3. Se pasa la suspensión por dos capas de gasa o algodón previamente
humedecido.
4. Se añade éter en cantidades iguales y se coloca un tapón de caucho o se tapa
con el pulgar.
5. Se agita vigorosamente y se afloja el tapón o el dedo para disminuir la presión y

se destapa.
6. Se centrífuga a 1500 rpm durante 1´.
120
7. Se saca de la centrifuga y se observan cuatro capas: 1) Éter; 2) Tapón de restos
fecales; 3) Capa de ácido; 4) Sedimento inferior que contiene la forma parasitaria.
8. Se mantiene en el tubo horizontal y con un aplicador de madera y con un
movimiento circular, se despega el tapón de restos fecales.
9. Rápidamente, pero con cuidado se vierten el éter, tapón y capa de asido, de
manera que quede el sedimento en el tubo.
10. Se mantiene el tubo en posición horizontal, para evitar que los restos de extracto
graso y de tapón fecal bajen por las paredes al sedimento.
11. Se introduce un aplicador con hisopo de algodón y se limpian las paredes del
tubo.
12. Con el tubo vertical, se toma parte del sedimento con una pipeta.
13. Se coloca en un portaobjetos y se coloca encima el cubreobjetos.
14. Se examina con el microscopio con los objetivos 10X y 40X.
MÉTODO DE CHARLES - BARTHELEMY

Bueno no hay mucho que decir pero su utilidad es para hacer una buena concentración de
quistes, huevos y larvas. Pero como todo buen método tiene una limitación que es por
resulta antieconómico por los reactivos que utilizan.
Reactivos
· Formaldehídos Q.P.
· Cloruro de sodio
· Ácido cítrico cristalizado
· Agua destilada
· Éter etílico
Soluciones
· Solución salina formolada
· Solución cítrica formulada
· Lugol
Materiales
· Tubos de ensayé
· Portaobjetos
· Cubreobjetos
· Pipeta Pasteur
· Centrifuga
· Cápsula de porcelana
· Tela metálica de malla fina o gasa
· Tapones de caucho
121
Metodo
1. Suspender 1 a 2 g de materia fecal en 10 ml aprox. En la solución salina formulada,
utilizando la cápsula de porcelana para homogenizar.
2. Pasar la suspensión a través de la malla o gasa.
3. Centrifugar a 1,8000 rpm durante 60”
4. Decantar y agregar el sedimento de solución cítrica formulada, hasta llenar unos
dos tercios de tubos.
5. Agitar con fuerza y añadir el éter hasta ½ del borde.
6. Tape el tubo con el tapón de caucho y agite violentamente hasta lograr la
homogenización de las sustancias que contiene.
7. Destapar con cuidado el tubo, para evitar la proyección de la mezcla y centrifugar
durante 30” a 1,800 rpm.
8. Con un aplicador, se rompe el tapón de las heces, gasas y otros restos, agitando
ligeramente con el aplicador.
9. Se vuelve a centrifugar durante 30”
10. Se rompe nuevamente el tapón superior de restos fecales, desprendiéndolo
de las paredes del tubo con cuidado, ayudándose con el aplicador.
11. S decanta de una sola vez, procurando que quede una pequeña cantidad de 2 a
4 gotas liquidas junto con el sedimento.
12. Agrega al sedimento una gota de lugol y agitar el tubo ligeramente para
homogenizar.
13. Con la pipeta, se toma una gota de la suspensión coloreada del fondo del tubo y
se coloca en el porta y se cubre.
14. Se observa en el microscopio con objetivos 10X y 40X.
TÉCNICA DE SEDIMENTACIÓN POR CENTRIFUGACIÓN

1. Emulsionar la muestra de heces en agua ó
S.S.F. 2.Filtrar a través de un colador.
3. Colocar el filtrado en un tubo de centrífuga y centrifugar a 2,000 rpm durante 2
minutos.
4. Eliminar el sobrenadante, agregar agua y volver a centrifugar. Esto puede
repetirse hasta que el líquido sobrenadante sea transparente. Observar el
sedimento al microscopio.
122
CONCENTRACIÓN POR FORMALINA - ACETATO DE ETILO
Esta técnica se basa en concentrar huevos y larvas de helmintos, ooquistes y quistes de

protozoos de las heces. Se recurre a este método cuando el examen directo es negativo,
cuando la excreción de quistes/ooquistes es baja e intermitente o para descartar
infecciones leves en general, sobre todo si otros métodos (sulfato de zinc por Ej.) no han
ofrecido resultados esperados. El método original utilizaba éter, pero esta sustancia se ha
sustituido por acetato de etilo por ser menos inflamable y explosiva que el éter. Algunos
sugieren centrifugar por 10 minutos en vez de dos minutos para recobrar ooquistes de
apicomplexa, pero encontramos que se forma demasiado sedimento que impide realizar el
examen parasitológico.
Puede utilizarse con heces frescas o heces fijadas previamente en formalina o en MIF; los
quistes de protozoos no se deforman; puede demorarse en examinar el sedimento más
que en métodos por flotación; es adecuado tanto para huevos de nemátodos como de
céstodos y tremátodos; produce menos errores técnicos que otras concentraciones.
Desventajas
Los huevos infértiles de Ascarís y en ocasiones quistes de Giardia pueden flotar y
descartarse inadvertidamente con el tapón de detritus; utiliza tubos de ensayo de
vidrio (cuando se usa éter), ya que los tubos de plástico son dañados por éste; no es
adecuado para concentrar trofozoítos de protozoos.
Muestra a examinar
Heces frescas recolectadas en frasco limpio y seco, de boca ancha, identificado

correctamente.
Reactivos
Formalina al 10%
 Formaldehído 10 mL
 Solución salina 0.85% 90 mL (Puede usar agua destilada )
Materiales
-Vasitos de plástico o cartón (30 ml de capacidad)

-Tubos de centrífuga de ensayo 13 X 100 mm
- Marcadores
- Embudos de 5 cm de diámetro
-Gasa quirúrgica en rectángulos de 16 X 16 cm en 2 dobleces
-Parafilm o tapones de hule
-Solución de formalina al 10%
-Acetato de etilo
-Aplicadores con algodón en un extremo
123
-Porta-objetos de 7.5 X 2.5 cm (3 X 1 pulgada) o de 7.5 X 5 cm (3 X 2 pulgadas)
-Cubre-objetos
-Gradilla para tubos
-Pipeta graduada de 5 mL
-Balanza de 2 platos para equilibrar tubos
-Solución de Lugol
-Acetato de etilo
-Frascos con desinfectante para descartar material
Procedimiento
1. Identificar frascos, tubos y láminas con la muestra a examinar.

2. Transferir 1-2 g de heces a un vaso de plástico o cartón y agregar 10 mL de
formalina.
3. Desmenuzar y suspender completamente las heces con ayuda de aplicadores.
4. Descartar aplicadores. Dejar fijar mínimo 30 minutos.
5. Filtrar por 2 dobleces de gasa a un tubo cónico o de ensayo ayudado por embudo.
6. Descartar gasa. Tapar tubos
7. Equilibrar los tubos en balanza de 2 platos junto con los tapones.
8. Centrifugar a 1,500 rpm por 2 minutos; destapar.
9. Descartar el sobrenadante.
10. Agregar más formalina al sedimento, agitando éste con un aplicador, hasta ± la
mitad del tubo.
11. Agregar 2-3 mL de acetato de etilo.
12. Tapar el tubo con parafilm o tapón de hule y agitar vigorosamente 15 segundos.
13.Centrifugara 1,500 rpm por 2 minutos.
14. Al final de la centrifugación se obtienen 4 capas : sedimento, formalina, tapón de
detritus y acetato de etilo. Destapar con cuidado y con un aplicador desprender el
tapón de detritus todo alrededor y decantar el sobrenadante de un solo movimiento.
15. En el fondo quedará el sedimento a estudiar
16. Con un aplicadorcon algodón limpiar las paredes interiores del tubo
17. Transferir el sedimento a un porta-objetos , cubrir con un cubre-objetos y examinar
toda preparación con objetivo 10X. Pasar a mayores magnificaciones cuando sea
necesario.
18. Para colorear quistes, agregar una gota de solución de Lugol.
19.Descartar material utilizado en desinfectante
124
SEDIMENTACIÓN SIMPLE
Los parásitos se concentran por acción de la gravedad, suspendiendo las heces en agua
corriente, agua destilada o solución salina y dejando que sedimenten naturalmente o por
centrifugación. Estos métodos son principalmente útiles para la concentración de quistes,
ooquistes y huevos.
Ventajas: es fácil de realizar, no requiere observación microscópica inmediata y se

puede aplicar a la concentración de la mayoría de los parásitos intestinales.
Desventajas: la observación microscópica puede dificultarse por concentración de

elementos no parasitarios
MÉTODO DE SEDIMENTACIÓN SIMPLE EN COPAS

Este procedimiento de decantación en copas es una técnica conocida desde muchos años
en el cual se utiliza un procedimiento físico para la separación de mezclas. Este método
también es utilizado para el diagnostico de aquellas muestra de heces fecales
sospechosas de contener huevos de Fasciola hepatica; el método ha demostrado ser
bondadoso para otro tipo de huevos de helmintos e incluso para quistes de protozoario.
Las ventajas que tiene, sobre otro, es que hace una concentración de volúmenes
considerablemente grandes de materia fecal.
Reactivos
· Verde de malaquita
· Agua de la llave ó Agua destilada
· Solución de detergente al 5% ( Se pasan 5 g de detergente de cualquier marca y se
disuelve en 1000 ml de agua; el detergente que no se alcance a disolver, se
sedimenta y decanta el sobrenadante o se deja en el frasco donde se guarda la
solución, pues no interfiere en el proceso)
· Solución de verde de malaquita al 1% ( Se disuelve el verde de malaquita en los 100

ml de agua y se guarda la solución en frascos con tapón esmerilado).
Materiales
· Copas crónicas
· Pipeta pasteur
· Portaobjetos
· Cubreobjetos.
· Embudo
· Aplicadores de madera
· Bulbos de caucho
· Gasa
125
Procedimiento
1. En el recipiente donde se llevo la muestra al laboratorio se homogeneiza la muestra
con agua de la llave y se hace pasar a través de la gasa previamente colocada en
un embudo y recibiendo la suspensión en la copa.
2. Se colocan 5 ml de colorante y se agita con un aplicador
3. Se agregan 5 ml de la solución de detergente y se agita nuevamente

4. Se completa el volumen de la copa y se deja reposar durante 15 min.
5. Se decanta el sobrenadante y se agrega mas agua, mezclando con el aplicador y
se deja reposar otros 15 min. Se decanta nuevamente el sobrenadante.
7. Con la pipeta con bulbo, se toma del sedimento la muestra que se coloca en el
portaobjetos y se pone el cubreobjetos.
8. Se observa con el microscopio, usando objetivos de 10X y 40X, cuando sea
necesario.
9. Se hacen tres preparaciones de cada sedimento para asegurar la positividad de la
muestra. Cuando se tiene suficiente practica se puede utilizar la lupa del
microscopio, sobre todo cuando se busca la F. hepatica.
Es un método lento y de poca concentración para los protozoos intestinales. Los
huevos de helmintos sedimentan en el fondo del recipiente en un estado viable y sin
deformación.
Dejar reposar
por 10 min.
Emulsionar la muestra en 10 Filtrar el preparado y

a 20 vol. de agua de caño completar el vol. con agua
Repetir los
Observar pasos anteriores
(x 2 veces más)
Eliminar
sobrenadante
Huevo de
Ascaris
126
TÉCNICA DE SEDIMENTACIÓN ESPONTÁNEA EN TUBO
1. Homogenizar 2.5 g de heces con 10 - 20ml de solución salina fisiológica.
2. Verter la mezcla en un tubo cónico de centrifuga de 50 ml de capacidad filtrándola
a través de gasa.
3. Completar el volumen del tubo con más solución salina y tapar el mismo
herméticamente.
4. Agitar y dejar reposar por 45 minutos, como mínimo.
5. Tomar con una pipeta dos alícuotas: una de la mitad del sedimento y otra del fondo
del tubo, colocarlos en portaobjetos diferentes y a la alícuota del fondo agregarle
gotas de lugol, luego cubrirla con laminilla. Observar al microscopio.
TÉCNICA DE BAERMAN MODIFICADA

1. Emulsionar la muestra de heces en agua corriente.
2. Homogenizar y filtrar la muestra a través de un colador hacia una copa cónica.
Agregar agua corriente hasta completar su capacidad. Dejar en reposo por 24
horas.
3. Eliminar el sobrenadarme.
4. Con una pipeta Pasteur, tomar una parte del sedimento y observar al microscopio
Dejar en
reposo 24
horas
En la coladera agregar la
Homogenizar muestra y verter SSF a 37º
la muestra hasta cubrirla
Observar
Huevo de Eliminar sobrenadante

Ascaris
127
MÉTODO DE LUMBRERAS MODIFICADO
Se utiliza para la búsqueda de huevos de Fasciola hepática en heces o bilis. No se puede
utilizar un método de centrifugación porque los huevos se rompen ni de flotación porque
son muy pesados.
1- Colocar 2 ml de la muestra (heces o bilis) en una copa de Lumbreras o tubo de

centrífuga.
2- Agregar 5 ml de solución detergente al 10% para emulsionar las grasas.
3- Agregar 0,5 ml de alumbre férrico al 1% para favorecer el gradiente de densidad.
4- Homogeneizar suavemente.
5- Dejar en reposo 30 minutos.
6- Sacar con pipeta pasteur una gota del fondo de la copa.
7- Observar con microscopio.
TÉCNICAS DE FLOTACIÓN
Los métodos de flotación fecal se utilizan para separar los parásitos en todos sus estadios
(huevos, ooquistes, quistes, larvas) de otros objetos, basados en sus diferentes
densidades, pues se emplea un medio líquido más pesado que los parásitos permitiendo
que los mismos suban a la superficie y puedan ser recuperados de la película superficial.
La densidad es el peso de un parásito u otro objeto por unidad de volumen, se expresa en
forma de gravedad específica. Para obtener un resultado preciso al realizar una flotación
fecal, es necesario utilizar la solución correcta.
La densidad (gravedad específica) de las diferentes soluciones está determinada por la
cantidad de sal o azúcar que contienen. La densidad de la mayoría de las soluciones está
entre 1.18 y 1.20; y la densidad de la mayoría de los parásitos comunes es menor a 1.18.
Ventajas: el preparado es más límpido, facilitando la observación microscópica.
Desventajas: debe hacerse la observación microscópica en menor tiempo debido a que la
película superficial puede destruirse y los parásitos caer al fondo del tubo, a su vez, los
parásitos de mayor peso que la solución empleada no flotarán.
Existen varios métodos de flotación, el más utilizado es el método de Faust
MÉTODO DE FAUST (sulfato de zinc)

Examen cualitativo de concentración que incluye centrifugación y flotación. Hace que se
concentren los quistes, huevos y larvas. Es eficaz para separar e identificar huevos
pesados como Ascaris lumbricoides, Taenia sp. y Fasciola hepática.cuando las
infecciones son muy leves y no se detectan en preparaciones directas.
Muestra requerida
Heces frescas recolectadas en frasco {vidrio, plástico o cartón) de boca ancha, con
tapadera, limpio, sin contaminantes (agua del inodoro, orina, tierra etc.) debidamente
identificado.
128
Reactivos
Disolver 330 g de cristales de sulfato de zinc en 670 mL de agua destilada.
Para verificar la densidad, verter dentro de un cilindro de 1,000 mL de capacidad e
introducir el hidrómetro, dejándolo flotar libremente, sin tocar las paredes del cilindro.
Debe leerse 1.18. Agregar más agua si está más denso, o más cristales si está menos
denso. Se recomienda verificar la densidad cada vez antes de usar o una vez por
semana. Cuando la muestra de heces fue fijada, usar una solución con densidad 1.20
Materiales
 Hidrómetro (Curtis Matheson Scientific Inc) para medir gravedad especifica, rango
1,000-2,000)
 Solución de sulfato de zinc, densidad 1.18 (para heces frescas)
 Cuadrados de gasa de 16 X 16 cm, en 2 dobleces
 Embudos de 5 cm de diámetro
 Tubos de ensayo, vasos de papel o vasos plásticos pequeños para hacer una
suspensión de heces
 Porta objetos, 7.5 x 2.5 cm (3 X 1 pulgada) ó 7.5 x 5 cm (3 X 2 pulgadas)
 Cubre-objetos 22 X 22 mm, No. 1 ó No. 2
 Solución de Lugol
 Asa bacteriológica de 5-7 mm de diámetro
 Gradilla para tubos
 Solución salina fisiológica
Procedimiento
1. Identificar la muestra con el vaso y el tubo de ensayo a
trabajar.
2. Con un aplicador, tomar 1-1.5 g de heces y hacer una
suspensión en unos pocos ml de agua destilada* en un vaso o
tubo.
3. Filtrar a través de gasa humedecida a un tubo de ensayo.
4. Centrifugar a 1,500-2,000 rpm por 2 minutos. Descartar el
sobrenadante.
5. Agregar 2-3 mL de solución de sulfato de zinc y agitar con un
aplicador hasta suspender totalmente el sedimento. Agregar
más solución de sulfato de zinc hasta 1 cm abajo del borde del
tubo de ensayo, sin dejar de agitar.
6. Centrifugar a 2,000 por 2 minutos. Los tubos deben tener
posición vertical en la centrífuga, no inclinada.
7. Sin sacar el tubo de la centrifuga, remover varias asadas de la
película superficial y
colocarlas sobre un porta-objetos. Esterilizar el asa por flameo.
8. Cubrir con un cubre-objetos. Examinar sistemáticamente la preparación. Para
colorear los quistes, remover con cuidado el cubre-objetos y añadir una gota
pequeña de Lugol.
9. Para identificar los quistes se procede a examinarlos con el objetivo X100, para lo
cual debe colocarse antes una pequeña gota de aceite sobre el cubre-objetos.
10. Puede ejecutarse este método cuando se reciben heces fijadas, para lo cual la
solución de sulfato de zinc debe tener una densidad de 1.20. Para trabajar la
muestra, mezclar bien las heces fijadas, filtrar si necesario y continuar con el
procedimiento como se ha descrito.
129
Causas de error o resultados poco satisfactorios
 En general, si no se sigue el método fielmente -
 Solución de sulfato de zinc de otra gravedad específica
 Esperar mucho tiempo después de preparar la muestra, antes de observarla al
microscopio (más de 20 minutos)
 Deformación de los quistes de protozoos, que dificulta su identificación
 A veces no flotan los huevos infértiles de Ascaris
 No es el método adecuado para huevos de céstodos ni de trematodo.
Nota: “Las larvas se encogen y no se puede reconocer su morfología específica”
Agua
Eliminar
sobrenadante
Filtrado
Centrifugar 2 a
5 min.
Repetir
procedimiento
Centrifugar x 2 a 5
una vez más
min. y luego eliminar
Película
superficial
sobrenadante
Después de eliminar
sobrenadante, agregar el
sulfato de Zinc
de cinz Observar al
microscopio
Sedimento
Huevo de
Hymenolepis
130
MÉTODO DE WILLIS
El método de Willis es cualitativo de concentración por flotación simple. Se usa para la

búsqueda e identificación de formas parasitarias como huevos, quiste o larvas. La
densidad elevada de la salmuera donde se introducen las muestras, hacen que las formas
parasitarias se distorsionen, y se puedan observar fácilmente bajo el microscopio.
Esta técnica requiere solución saturada de sal, la cual se obtiene mezclando 38g de sal de
cocina en 100 ml de agua caliente o calentar la mezcla a fin de homogenizarla.
1. Desmenuzar con la ayuda de una baqueta 1 ó 2 g de heces en un tubo de ensayo o

en un frasco vacío (vial) que contenga aproximadamente 4 mL de solución saturada
de sal.
2. Adicionar la misma solución hasta formar un menisco sobre el borde del tubo o
frasco.
3. Cubrir el menisco del tubo o frasco con una laminilla evitando la formación de
burbujas.
4. Dejar en reposo durante 15 a 20 minutos para que los huevos y quistes de parásitos
floten y se adhieran por viscosidad a la laminilla.
5. Depositar una gota de lugol en una lámina portaobjetos y sobre ella colocar la
laminilla.
6. Observar al microscopio.
Dejar en reposo
x 15 a 20 min.
Del filtrado se adiciona Adicionar hasta forma un

una pequeña porción + la menisco, luego cubrirlo Observar al
sol. sat. de sal con una laminilla microscopio
131
METODO DE SHEATHER
Separar, concentrar y recobrar ooquistes de Isospora belli de las heces
para facilitar el diagnóstico de isosporiasis en el laboratorio. Ooquistes de
Cryptosporidium spp. Y Cyclospora cayetanensis pueden también
concentrarse; sin embargo, para asegurar el diagnóstico de estas dos
especies es preferible además, procesar la muestra por otros métodos
(coloración, concentración por Webery medición de ooquistes).
Importancia del diagnóstico

El hallazgo de Isospora belli ha cobrado importancia desde 1983 en que
se recobró de 3 homosexuales con diarrea crónica, pérdida de peso y una
inmunodeficiencia severa. Aunque se le ha informado en el pasado en
brotes de gastroenteritis en personas inmunonormales, cada vez más se le
relaciona con estados inmuno-deficientes y SIDA.
El hallazgo de Isospora belli requiere informe inmediato al médico. El
Servicio de Parasitología, acostumbra agregar una nota diciendo:
'Investigar causa de posible inmunocompromiso".
Muestra requerida
Heces frescas recolectadas en frasco {vidrio, plástico, cartón) de boca ancha, con
tapadera, limpio y debidamente identificado. Aspirado duodenal.
Heces líquidas
a) Tomar una muestra del fondo del frasco con una pipeta Pasteur; o
b) Mezclar las heces con la pipeta Pasteur y aspirar una cantidad; o
c) Mezclar las heces, verter 2-3 mL en un tubo de ensayo rotulado, centrifugar,
descartar el sobrenadante al frasco con la muestra original de heces o en un
recipiente con desinfectante y continuar trabajando con el sedimento.
Heces con moco
a) Tomar una porción del moco y examinar al microscopio como frote directo; o,
b) Utilizar un mucolítico (10 gotas de KOH al 10%) para disolver el moco y liberar
ooquistes que estuvieran atrapados. Dejar actuar el mucolítico a temperatura
ambiente durante 15 minutos, agitando con un aplicador. Una vez disuelto, agregar
agua destilada, mezclar, centrifugar, decantar y continuar la técnica utilizando el
sedimento.
Reactivos
Solución concentrada fenolada de azúcar
 Azúcar en cristales 500 g
 Fenol en cristales. 6.5 g
Disolver el azúcar en el agua destilada, usando calor sin dejar llegar a ebullición.
Filtrar por gasa. Agregar el fenol y agitar hasta disolución. Guardar en frasco tapado y
rotulado. Para trabajar es más fácil mantener la solución de trabajo en un frasco con
dispensador.
132
Materiales
 Vasitos de plástico para preparar suspensión
 Tubos de ensayo de 13 X 100 mm
 Cubre-objetos 22 X 22 mm, No.1 ó No.2
 Porta-objetos de 3 X 1 pulgadas (7.5 X 2.5 cm) o de 3 X 2 pulgadas (7.5 cm X 5 cm)
 Asa bacteriológica, 5-7 mm de diámetro
 Marcador
 Aplicadores sin algodón
 Gasa quirúrgica
 Solución fenolada de azúcar
 Mechero de gas o lámpara de alcohol
 Embudo de 5 cm de diámetro
 Agua destilada
 Parafilm o tapón de hule para tubos de ensayo
Procedimiento
1. Identificar los tubos de ensayo con la muestra a examinar.
2. Hacer una suspensión de una pequeña porción de las heces (±1 mL ó 1 g) en un
vasito plástico o tubo con la ayuda de un aplicador.
3. Colocar gasa en 2 dobleces dentro del embudo introduciendo éste en otro tubo de
ensayo rotulado y filtrar la suspensión de heces para remover fibras y partículas
grandes. Tapar con parafilm o tapón de hule.
4. Equilibrar el tubo en balanza de 2 platos.
5. Centrifugar a 1,500 rpm por 2 minutos. Destapar. Decantar el sobrenadante.
6. Añadir un poco de solución fenolada azucarada al sedimento y agitar
vigorosamente con un aplicador. Completar con más solución hasta 2 cm bajo el
borde del tubo sin dejar de agitar. Tapar con parafilm o tapón de hule.
7. Equilibrar el tubo en balanza de 2 platos.
8. Centrifugara 1000 rpm durante 10 minutos.
9. Remover el tapón con sumo cuidado para no agitar. Tomar 2-3 asadas de la
superficie del menisco y colocar sobre un porta-objetos. Flamear el asa en el
mechero.
10. Cubrir la preparación con un cubre-objetos y examinar en el microscopio óptico
toda la preparación.
11. Buscar los ooquistes con objetivo 10X a diferentes profundidades; a menudo flotan
y se colocan justo debajo del cubre-objetos.
12. Para confirmar, utilizar mayor magnificación. Puede usar esta preparación para
colorear; basta remover el cubre-objetos, dejar secar y colorear.
13. Descartar el material utilizado en frasco con desinfectante.
Características de la flotación
Los ooquistes de apicomplexa pueden deformarse un poco; pueden tomar un color rosa
pálido en su interior. Habrá que diferenciar de levaduras, Blastocystis hominis, otras
estructuras. Existen otros métodos de flotación en los que se utiliza un detergente (Tween
80) y gradientes discontinuos de solución de azúcar de densidades 1:2 y 1:4 o Percoll
133
134
MÉTODOS CUANTITATIVOS PARA RECUENTO DE HUEVOS Y
LARVAS
Estos metodos tiene con propósito, evaluar la efectividad de tratamiento terapéutico pues
se asume que la producción de huevos estará en relación directa con el número de
hembras fecundas que deponen huevos. Una variable importante es el propósito para
determinar esta intensidad: puede ser clínica, para encuestas, evaluar terapéutica, etc.
Se fundamenta en la estimación de la intensidad de una infección intestinal por Ascarís
lumbricoides, Trichuris trichiura y uncinarias u otros nematodos del humano en forma
práctica, en una cantidad conocida de heces. La intensidad de las infecciones se determina
contando el número de huevos por gramo de heces. Este dato permite clasificar la infección
en leve, moderada o intensa, aspecto muy importante ya que aunque el paciente sea
asintomático, debemos tomar en cuenta que sigue siendo un importante foco de
contaminación para las demás personas en la comunidad.
El conocer la intensidad de la infección también nos ayuda cuando se trabaja con
limitaciones de fondos. En estos casos generalmente no podemos dar tratamiento a toda la
comunidad. Utilizando este parámetro podemos tomar una decisión y dar tratamiento a los
pacientes con mayor riesgo de ser focos de contaminación para la comunidad
135
MÉTODO DE DILUCIÓN DE STOLL
Este método se basa en el estudio de una cantidad conocida de heces, que se diluye en
un volumen determinado. La cantidad de heces es medida por desplazamiento; al final del
proceso se cuentan los huevos en una alícuota de la dilución. El diluyente, hidróxido de
sodio, saponifica la grasa de las heces y ayuda a liberar los huevos de impurezas.
La mayor desventaja es el equipo que requiere y el tiempo de preparación. Impráctico en
encuestas. No se ha estandarizado y ha caído en desuso.
Reactivos
Solución de Hidróxido de sodio
 Hidróxido de sodio 4 g
 Agua destilada 1,000 mL
 Disolver inicialmente el hidróxido de sodio en un volumen pequeño del agua
destilada. Completar después a 1,000 mL. Guardar en frasco tapado y rotulado.
Materiales
 Frasco de Stoll, marcado 2 veces: a 56 mL de volumen y a 60 mL de volumen; en
su defecto, probeta graduada con tapón de hule, que tenga las dos marcas, a 56
mL y a 60 mL.
 Solución de hidróxido de sodio
 Pipetas graduadas a 0.15 mL (dispensador automático para serología)
 Porta-objetos 7.5 X 2.5 cm ó 7.5 X 5 cm
 Cubre-objetos 22 X 40 mm
 Frascos con desinfectante para descartar material
 Perlas de vidrio
 Contador manual
 Marcador
 Frascos con desinfectante para descartar material sucio.
Procedimiento
1. Identificar el frasco de Stoll con la muestra a examinar
2. Añadir hidróxido de sodio hasta la marca 56 mL en el frasco para ello
3. Con cuidado agregar heces hasta subir el nivel del líquido a la marca 60 mL
4. Agregar las perlas de vidrio, tapar y agitar vigorosamente. Si las heces son muy
duras, deberá dejarse 24 horas agitando esporádicamente
5. CUENTA DE HUEVOS DE NEMÁTODOS TRASMITIDOS POR EL SUELO
6. Con la pipeta Stoll remover 0.15 mL del centro de la suspensión inmediatamente
después de agitar y antes que los huevos comiencen a sedimentarse
7. Colocar ésta suspensión sobre un porta-objetos y cubrir con un cubre-objetos
8. Contar todos los huevos presentes en toda la preparación. Multiplicar el resultado
por 100 y reportar No. de huevos/g o No. de huevos/ mi de heces, sin factor de
corrección
9. Para reportar con factor de corrección, debe considerarse la consistencia de las
heces y multiplicar por 2 para heces blandas; por 3 para heces diarreicas. Cuentas
en heces líquidas no son confiables.
136
137
MÉTODO DE KATO (VARIACIÓN KATZ)
El método Kato Katz para el conteo de huevos de helmintos intestinales permite determinar
los niveles y la intensidad de la infestación parasitaria en los individuos muestreados.
Consiste en el examen microscópico de una cantidad fija de material fecal lo que permite un
diagnostico semi cuantitativo basado en el número de huevos en las heces, En una medida
indirecta de la carga parasitaria, generalmente a mayores conteos de huevos mayores
número de hembras adultas presentes.
El método, originalmente introducido por japoneses para hacer encuestas epidemiológicas
de schistosomiasis, ha sido mejorado y modificado varias veces. La variación KATZ
entrega una cantidad conocida de heces, que depende del tamaño del templete utilizado,
con la condición que sean heces formadas. El tamaño del templete varia; para
asegurar resultados comparables, el templete debe estandarizarse en el país a una sola
medida. El que se describe aquí entrega 41.7 mg de heces. Huevos de Taenia sp o de
Hymenolepis nana se informan sin contar. La Organización Mundial de la Salud
considera este método como el de elección y el más adecuado en encuestas, monitoreo
y evaluación de programas de control de nemátodos transmitidos por el suelo y
schistosomiasis.
Ventajas
Las heces no se diluyen, se utiliza materiales baratos y accesibles, puede
transportarse una vez preparado en el campo, puede guardarse varios meses para
verificar resultados, puede estandarizarse para encuestas en diferentes regiones
geográficas por diferentes investigadores.
Desventajas
Tiene varias limitantes: sólo puede utilizar heces frescas; no es adecuada para heces
diarreicas, líquidas o mucoides; no se aplica para la detección de protozoos ni larvas
de nemátodos; huevos frágiles como los de uncinaria y a menudo de Hymenolepis
nana se vuelven irreconocibles en pocas horas; no es indicado para heces que
contengan mucha fibra o grasa.
Reactivos
 Glicerina pura 100 mL
 Verde de malaquita al 3% 1 mL (Solución acuosa)
 Mezclar bien en frasco de boca ancha con tapadera e introducir los cuadrados de
celofán para sumergir en esta solución 24 horas o más antes de usar. (El verde de
malaquita no es indispensable en caso que no se cuente con él).
 Un armazon de 9 mm X 1 mm entrega 50 mg de heces. El factor de multiplicación
para determinar huevos por gramo será de 20.
 Un arm azon de 6 mm de diámetro X 1.5 mm de grosor entrega 41.7 mg de heces.
El factor de multiplicación será de 24.
Materiales
 Cuadrados de celofán que miden 22 X 30 mm. Sumergir durante 24 horas o más en
la solución de glicerina
 Espátulas plásticas de madera o palos de paletas o de helados
138
 Templete de plástico del tamaño seleccionado, en este caso de 6 mm de diámetro x
1.5 mm de grosor
 Cuadrados de 4 cm X lado de tela metálica o nylon de trama 210 o de nitrel de
250/rni
 Papel absorbente
 Papel de periódico
 Pinzas
 Porta-objetos 7.2 x 2.5 cm (3 X 1 pulgada) ó 7.5 x 5 cm (3 X 2 pulgadas)
 Marcador
 Baja-lenguas o palo de paleta o de helados, que es más barato
 Contador manual
Procedimiento
1. Extender el papel periódico o de estraza sobre la mesa de trabajo
2. Identificar el porta-objetos con la muestra a examinar. Colocar sobre éste el
templete de plástico
3. Con el palo de paleta tomar una cantidad de heces y colocarla sobre una superficie
plana (tapadera del frasco, papel periódico)
4. Colocar sobre estas heces un cuadrado de tela metálica, plástica o nylon que hace
las veces de colador
5. Raspar la superficie de la tela con el espátula plástica tomando suficientes heces
coladas para llenar el agujero del templete. Descartar el espátula si es de madera
6. Remover el templete, descartar éste y la tela en desinfectante y cubrir el redondel
de heces con un cuadrado de celofán empapado en glicerina
7. Invertir el porta-objetos con esta preparación sobre una hoja de papel absorbente y
hacer presión con el pulgar hasta extender las heces por todo el cuadrado.
8. Darle vuelta y colocar sobre una superficie protegida de insectos (mosca,
cucaracha) y agua. Esperar que aclare. Esto dependerá de la temperatura y
humedad del ambiente, entre 30 min y 45 min. Si se desea interrumpir el
aclaramiento, invertirla lámina sobre una superficie plana lo necesario hasta
continuar el proceso.
9. Observar al microscopio óptico con objetivo de 10 X. Contar sistemáticamente y en
forma individual todos los huevos de Ascaris, Trichuris, uncinaria en toda la
preparación
10. Multiplicar el resultado por 24 e informar «Numero de huevos/gramo de heces».
Descartar material usado en desinfectante
11. Los huevos de Taenia se confirmarán si se observan los ganchos de la oncósfera
con objetivo X40
139
140
141
METODO DIRECTO en Frote de heces
Este método es una simplificación del método estándar de Beaver en 2 mg de heces en el

que se utiliza una célula foto-eléctrica adaptada y calibrada que mide con precisión 2 mg
de heces en una preparación en solución salina. La simplificación deriva del conocimiento
que las preparaciones directas que se utilizan en la rutina para el examen de heces
contienen entre 1.5 mg y 2.5 mg.
Muestra requerida
Heces frescas, recolectadas en frasco (vidrio, plástico o cartón) limpio, de boca ancha, sin
contaminación de agua, orina, tierra etc.
Preparación de reactivos
 Solución salina fisiológica
 Cloruro de sodio 0.85 g.
Mezclar hasta disolución completa de los cristales. Guardar en frasco rotulado.
Para uso diario mantener en frasco gotero rotulado.
Materiales
 Porta-objetos de 3 X 1 pulgada (7,5 x 2.5 cm) ó 3 X 2 pulgadas {7.5 x 5cm)
 Cubre-objetos de 22 X 22 mm, #1 ó #2
 Solución salina fisiológica (0.85%)
 Marcador
 Contador manual
 Frasco con solución desinfectante para descartar material
Procedimiento
1. Identificar el porta-objetos con la muestra de heces a examinar
2. Colocar 1 - 2 gotas de solución salina en cada extremo del porta-objetos
3. Con un aplicador, tomar una porción de heces y emulsificar en cada una de las
gotas de solución salina
4. Cubrir cada preparación con un cubre-objetos
5. Contar en forma individual los huevos según la especie: de Ascaris, Trichuris y/o
uncinaria presentes en cada preparación. Sacar la media
6. Informar por especie de parásito: No. de huevos/frote de heces o bien No. de
huevos/2 mg de heces
7. Descartar material usado en el frasco con desinfectante.
Causas de error
1. Preparación muy gruesa o muy fina
2. Observación no sistemática de la preparación
3. Huevos no distribuidos al azar en la preparación, o aglomerados por la presencia de
mucho moco
4. Heces líquidas
142
TÉCNICA DE FERREIRA
El método fue descrito por Biagi y Cols. En 1959 y fue puesto en practica por Ferreira y
Abreu. Método cuantitativo es útil para el recuento de huevos y larvas de todos los
parásitos considerados metazoarios y además hace una buena concentración de los
protozoarios: quistes y ooquistes. Debido a la utilización del tamiz y a los lavados
aplicados, se logra una materia fecal fina que facilita su estudio microscópico Esta técnica
se basa en la utilización del formol como preservador y desinfectante y de la diferencia de
densidades con el empleo del sulfato de zinc con una densidad de 1.192, que hará que los
parásitos existentes en las muestra floten. Tiene como limitante que el material a utilizar
no se consigue fácilmente.
Reactivos
*Sulfato de Zinc 35% 500 ml
*Formaldehído 10% 300 ml
*Sol. Salina 0.9% 500 ml
*Lugol 50 ml
Materiales
*Microscopios
*Centrifuga
*Balanza granataria
*Campana de Ferreira
*Frasco de Gerber
*Aplicadores
*Tubos de ensaye de 100 x 25 mm
*Portaobjetos
*Embudo
*Tubos de látex de 15 cm de largo
Técnica o procedimiento
1. Pesar un frasco de ancha junto con un abate lenguas
2. Depositar materia fecal en el frasco ayudándose con el abate lenguas
3. Medir 36 ml de la solución de formaldehído, vaciar en el frasco
4. Homogeneizar la materia fecal con la solución de formol hasta una suspensión.
5. Pasar la mezcla por malla previamente colocada en un embudo y recibir la suspensión
en un tubo colocado en una gradilla.
6. Centrifugar a 2000 rpm. Durante 1 minuto.
7. Decantar el sobrenadante y resuspender el sedimento con sol. Salina.
8. Volver a centrifugar bajo las condiciones anteriores.
9. Decantar nuevamente el sobrenadante y agregar 2 a 3 ml de sulfato de zinc, mezclar
hasta hacer una nueva suspensión.
10. Introducir la campana de Ferreira en el tubo de ensaye.
143
11. Llenar el tubo con más solución para que el menisco suba.
12. Centrifugar a 2000 rpm. Durante 1 min.
13. Sacar el tubo de la centrífuga y con el pulgar y el índice se comprime fuertemente el
trocito de manguera de caucho del extremo anterior de la campana y de un golpe se saca
este del tubo.
14. Lavar el exterior de la campana.
15. Invertir la campana sobre el portaobjetos y poner 2 a 3 gotas de lugol, de tal manera
que arrastren el contenido de la parte estrecha de la campana, que es donde se
encuentran las formas parasitarias.
16. Homogeneizar la suspensión con el ángulo de un cubreobjetos colocar este sobre el
portaobjetos
17. Examinar la preparación con el microscopio seco débil y seco fuerte. Contar todos los
huevos de la totalidad de la preparación
Técnica de Mac. Master Modificado:

- Homogenizar 3g de heces en 42 ml de agua.
- Tamizar y colocar 15 ml del filtrado en un tubo de prueba.
- Dejar sedimentar por 30 minutos o centrifugar a 1,000 r.p.m. durante 1 minuto.
- Eliminar el sobrenadante y reemplazarlo con la solución saturada de cloruro de
sodio.
- Homogenizar y con el gotero tomar una muestra y llenar la cámara de Mac.
Master. Esperar 2 minutos. Observar y contar los huevos ubicados dentro del
recuadro de lectura
Recuento En Cámara De Malassez:

- Esta cámara de recuento se utiliza entre otras para recuento de células
en líquido lumbar o para recuento de nemátodes.
144
TECNICAS ESPECIALES
MÉTODO DE HARADA-MORI
Para estudiar la distribución regional o geográfica de las uncinarias de humanos Necator
americanus y Ancylostoma duodenale; para la diferenciación entre larvas de uncinaria
ybde los «huevos parecidos a los de uncinaria» (Trichostrongylus, Temidens,
Strongyloidesbfulleborni); en la diferenciación entre larvas de uncinaria y otras larvas,
para determinar la viabilidad de los huevos y/o larvas en estudios sobre efectividad anti-
helmíntica, para cultivar estadios de vida libre de Strongyloides, para embrionar huevos
de tremátodos (Paragonimus y Fasciola) y de céstodos (Diphyllobothrium y
Spirometra), para estadios similares en parasitología veterinaria.
Estas preparaciones pueden transportarse del campo al laboratorio, cuidando de no
agitarlos, derramarlos ni permitir que se sequen.
Muestra requerida
Heces frescas, sin refrigerar, recolectadas en frasco (vidrio, plástico o cartón) limpio, de
boca ancha, con tapadera, debidamente identificado, sin contaminación.
Variaciones
Existen 2 variaciones: una en tubo de ensayo y otra en preparación inclinada en caja de
Petri. Se describirá la original en tubo de ensayo y se mencionará lo más importante en la
que utiliza caja de Petri.
Nota: Las larvas recobradas pueden ser infectantes. Aplicar medidas de seguridad:
usar guantes, limpiar inmediatamente cualquier cultivo derramado con una solución
de clorox, Lugol o fenol, descartar material en frascos con desinfectante.
Materiales
 Tubos de ensayo de preferencia cónica, de 15 mL de capacidad, en su defecto,
 tubos de ensayo de 25 X 175 mm
 Tiras de papel filtro (Whatman #2 u otro similar) cortadas 2 mm menos anchas que
el diámetro del tubo y 2 cm más largas, con un extremo más afinado.
 Agua destilada, en una pizeta
145
 Baja-lenguas, palos de paleta o aplicadores de madera
 Gradilla o soporte para tubos
 Guantes
 Lente de aumento o lupa de mano (opcional)
 Pipetas Pasteur
 Bulbo de goma o perilla para pipetas
 Lápiz de grafito
 Cajas de Petri de 5 cm de diámetro
 Porta-objetos de 7.5 x 2.5 cm (3 X 1 pulgada)
 Cubre-objetos 22 X 22 No.1 ó No.2
Procedimiento en tubo de ensayo

1. Con un lápiz de grafito, escribir la identificación de la muestra en el extremo más
delgado de la tira de papel filtro.
2. Con un aplicador o palo de paleta tomar y extender unos 0.5-1.0 g de heces sobre
el tercio medio de la tira; descartar aplicador.
3. Insertar esta tira con la parte escrita dentro del tubo de ensayo. Quedará una
porción extendida fuera del tubo por la que pasarán elementos solubles de las
heces.
4. Con todo cuidado agregar agua destilada hasta que el nivel llegue por debajo del
extendido de heces. Tener cuidado de no mojar las heces.
5. (Aunque no es necesario tapar los tubos, en lugares muy calientes se prefiere
hacerlo para evitar la evaporación rápida del agua).
6. Colocar los tubos así preparados en una gradilla y mantener en lugar seguro a
temperatura ambiente.
7. Revisar diariamente el nivel de agua. Reemplazar aquélla perdida por evaporación,
con mucho cuidado. Para verificar si hay larvas móviles en el sedimento:
8. Colocarse los guantes.
9. Obtener una porción del sedimento con una pipeta Pasteur, colocarlo en la caja de
10.Petri y observar al microscopio estereoscópico.
11. Para estudiar la morfología diferencial, deberá aspirar larvas con la pipeta y colocar
las larvas entre porta y pubre, calentar suavemente o agregar solución de Lugol
para inmovilizarlas; observar al microscopio óptico. Identificar por morfología.
12. Descartar material en frasco con desinfectante. Descartar guantes.
146
Procedimiento en caja de petri
El propósito es el mismo que el método en tubo de ensayo, excepto que aquí puede
utilizar mayor cantidad de heces y puede observar el sedimento directamente al
microscopio, para determinar la presencia de larvas. La identificación específica requiere
observar en detalle la morfología de las larvas. Puede utilizar una caja de Petri de 9 cm, o
una de 14 cm de diámetro, según cuanto material desee obtener y una tira de papel filtro
del tamaño de un porta objetos de 3 X 2 pulgadas u otro soporte conveniente para heces.
La identificación específica requiere observar en detalle la morfología de las larvas.
Procedimiento
1. Extender las heces sobre la tira de papel, la que se coloca sobre el porta-objetos u
soporte.
2. Colocar esta preparación en la caja de Petri soportada en un extremo
poraplicadores por una varilla de vidrio para lograr una inclinación.
3. Agregar agua destilada a la caja de Petri asegurando que el agua ascienda por
capilaridad en la tira de papel con heces.
4. Tapar y dejar a temperatura ambiente por 2-3 días. Asegurar que la preparación no
se seque.
5. Al cabo de 2-3 días, colocarse los guantes.
6. Colocar la preparación en el microscopio estereoscópico y buscar larvas en el agua.
7. Si no se observan, Con una pipeta Pasteur obtener una porción del agua de la caja
y examinar entre porta y cubre en un microscopio óptico buscando larvas. O bien,
verter el líquido en un tubo de ensayo, centrifugar y recobrar las larvas del
sedimento. Identificarlas según características morfológicas específicas.
8. Todo material se descarta en la solución desinfectante.
9. Consultar con los diagramas provistos para identificar larvas.
MÉTODO DE BAERMANN
Recobrar larvas de nemátodos y en algunos casos gusanos adultos, de las heces, suelo,
tejidos, etc. Es el método de elección más eficiente para recobrar larvas de infecciones por
Strongyloides stercoralis.
Existen 2 variaciones: una que utiliza un embudo de vidrio y otra que utiliza un vaso de
sedimentación. El principio del método es exactamente igual en ambos: recobrar larvas
sedimentadas en el fondo del embudo o del vaso. Se considerará aquí el método en vaso
de sedimentación.
Detectar una estrongiloidiasis latente en aquellos pacientes en riesgo a quiénes se les
provoca o desarrollan una inmunodeficiencia; en personas desnutridas, alcohólicas,
quemadas severas, que recibirán radiaciones. Para verificación terapéutica. Se aumenta la
probabilidad de diagnóstico con exámenes repetidos durante varios días o semanas.
Muestra requerida
Heces frescas, recolectadas en frasco (vidrio, plástico, cartón), limpio, de boca ancha, con
tapadera, correctamente identificado. No se deben refrigerar, ya que esto inmoviliza las
larvas y les impide migrar al agua.
147
Materiales
 Vaso de sedimentación de 250 mL de capacidad
 Círculo o cuadrado de papel filtro
 Círculo o cuadrado de gasa quirúrgica en 4 dobleces
 Baja-lenguas o palos de paleta
 Pipetas Pasteur, tallo de 9 cm de largo
 Bulbo de hule para las pipetas
 Agua corriente a 37° C
 Cajas de Petri de 5 cm de diámetro
 Porta-objetos de 7.5 X 5 cm (3 X 2 pulgadas)
 Cubre-objetos de 22 X 22 mm No. 1 o No. 2
Procedimiento
1. Identificar el vaso con la muestra a
examinar.
2. Verter el agua a 37°C dentro del vaso de
sedimentación más o menos hasta 3 cm
antes del borde.
3. Tomar un redondel de papel filtro y con un
baja-lenguas o palo de paleta, extender
unos 5 g de heces frescas en capa delgada
sobre éste, descartar baja-lenguas.
4. Cubrir esta preparación con la gasa.
5. Colocar esta preparación con la gasa hacia
abajo, dentro del vaso, procurando que
las heces queden sumergidas en el agua
6. Esperar una hora. Las larvas migrarán de las
heces al agua y caerán al fondo del
vaso.
7. Después de la hora, preparar la caja de Petri
identificándola. Colocar el bulbo de
hule en la pipeta Pasteur. Con un aplicador
de madera apartar suavemente la gasa,
apretar el bulbo entre índice y pulgar e introducir la pipeta hasta el fondo del vaso.
8. Absorber sedimento del fondo sin removerlo.
9. Colocar este sedimento en la caja de Petri. Esta operación puede repetirse 2-4
veces.
10. Examinar bajo microscopio estereoscópico, buscando larvas en el fondo de la caja.
11.Para identificarlas específicamente, aspirar algunas con la pipeta Pasteur,
colocarlas sobre un porta-objetos, cubrir con un cubre-objetos y buscarlas con
objetivo 10X primero. Si están muy móviles, calentar suavemente la preparación o
agregar por capilaridad una gota de solución de Lugol. Para determinar los detalles
morfológicos, utilizar objetivo de 40X.
12.Reconocer las características: Cápsula bucal corta, primordio genital grande.
13.Descartar material en frasco con desinfectante.
148
MIGRACIÓN DE LARVAS EN AGAR
Aumentar la sensibilidad de detección por métodos no agresivos una infección por

Strongyloides stercoralis. Incidentalmente podrían recobrarse larvas de Necator
americanus y Ancylostoma duodenale si la infección está presente.
Detectar una estrongíloidiasis latente en aquellos pacientes a riesgo a quienes se provoca
o desarrollan una inmunodeficiencia; en personas desnutridas, alcohólicas, quemadas
severas, cirróticos, que reciben radiación, estudios epidemiológicos.
Ventajas
Sensibilidad de diagnóstico aumentada, adecuado en casos problema o para
diagnosticar la infección en niños en quienes no puedan realizarse exámenes más
agresivos (aspirado duodenal, bíopsia).
Desventajas
Necesidad de más equipo de laboratorio, más tiempo para preparar el método, mayor
tiempo de espera antes de ofrecer un resultado, menor cantidad de heces de donde se
podrían extraer las larvas, necesidad de personal de laboratorio muy calificado, trabajo
laborioso, impropio en lugares con una rutina voluminosa y pocos empleados poco
calificados, material potencialmente infectante.
Muestra requerida
Heces frescas, recolectadas en frasco (vidrio, plástico, cartón) limpio, de boca ancha, con
tapadera, correctamente identificado. No se debe refrigerar la muestra, ya que esto
inmoviliza las larvas.
Materiales
 Cajas de Petri de vidrio o plástico, tamaño estándar (10 cm de diámetro)
 Cajas de Petri de 5 cm de diámetro Agar simple Extracto de res
 Peptona
 Cloruro de sodio
 Erler-Meyer de capacidad según la cantidad de medio a preparar
 Mechero de gas
 Bolsas plásticas
 Baja-lenguas de madera o palos chatos de paleta o aplicadores de madera
 Formalina al 10% en una pizeta
 Porta objetos de 7.5 X 5.0 cm (3 X 2 pulgadas)
 Cubre-objetos de 22 X 22 mm
 Pipetas Pasteur tallo corto
 Bulbo de goma o perilla
 Incubadora (opcional) a 37°C
 Microscopio estereoscópico
 Microscopio óptico
 Guantes desechables
 Tubos de centrífuga de 13 X 100 mm
 Centrífuga
 Cuaderno para anotar y lápiz
 Frascos con desinfectante para descartar material
149
Preparación del medio (suficiente para 10 placas):
 Agar 1.5 g
 Peptona 1.0 g
 Extracto de res 0.5 g
 Cloruro de sodio 0.5 g
Agregar 100 mL de agua destilada. Llevar a baño María hasta completa disolución de las
sustancias. Esterilizaren autoclave a 121°C, 21 libras de presión, durante 15 minutos.
Verter en capa fina (10 mL/caja de Petri), dejar endurecer toda la noche y guardar en
bolsa plástica sellada a 4o C. Antes de usar cada placa, dejar un rato a temperatura
ambiente.
Preparación del campo de trabajo

 Tener a mano y listo: Microscopio estereoscópico Pipetas Pasteur y bulbo o perilla
Cajas de Petri de 5 cm de diámetro Formalina al 10% en una pizeta Tubos de
ensayo de 13 X 100 mm, previamente rotulados
 Solución desinfectante: clorox, solución yodada, etc
 Cuaderno para anotar y lápiz
Nota: Material potencialmente infectante. Utilizar guantes durante todo momento de la
observación de las muestras. La literatura japonesa ofrece otras ideas, pero en
nuestra experiencia el uso de guantes y el tener solución desinfectante a mano es
adecuado. Limpiar con desinfectante inmediatamente cualquier líquido derramado. 5e
necesita determinar circunstancias de bioseguridad en la adecuación del método para
estudios epidemiológicos.
Procedimiento
1. Identificar la placa de agar con la muestra de heces a examinar.
2. Con la ayuda de baja-lenguas, palo de paleta o aplicadores de madera, colocar 1 g
3. de heces en el centro de la placa. Si las heces están duras o formadas, ablandar
con unas gotas de agua destilada estéril. Tratar de que las heces queden
extendidas lo más posible y en contacto con el medio de agar.
4. Tapar la placa.
5. Incubar a 37°C. Pueden asimismo dejarse en un lugar protegido a temperatura
ambiente, pero el tiempo de observación se prolonga.
6. Incubar 24 horas.
7. Antes de sacar las placas de la incubadora, ponerse los guantes. Sacar las placas y
llevar a la mesa de trabajo.
8. Colocar una placa en el microscopio estereoscópico y sin destapar buscar caminos
de larvas y/o larvas en la superficie del medio. Si se forma agua de condensación
en la tapadera, limpiar ésta con papel absorbente y descartar en desinfectante.
9. Volver a tapar y continuar.
10. Si no se observan caminos ni larvas, dejar en incubación otras 24 h. Al cabo de ese
tiempo, volver a examinar en microscopio estereoscópico.
11. Anotar resultados. Verter formalina al 10% sobre la superficie del agar, sin verterla
sobre las heces.
12. Inclinar la placa y con una pipeta Pasteur aspirar la formalina y colocar en un tubo
de ensayo previamente identificado.
13. Centrifugar a 1,500 rpm durante 2 minutos.
14.Decantar o extraer cuidadosamente el sobrenadante.
150
15. Recobrar el sedimento con otra pipeta y colocaren un porta-objetos, cubrir y
observar al microscopio óptico.
16. Identificar larvas presentes por morfología específica bajo objetivo 40 X: cápsula
bucal corta y primordio genital grande para larvas rabdiformes; esófago largo y
punta de la cola en forma de M para larvas filariformes de S. stercoralis.
17. En ocasiones se han observado larvas dentro del medio. Enfocar bien al buscar
para no perderlas en caso que no se encuentren en la superficie.
18. No basta con observar la presencia de surcos. Es necesario recobrar las larvas y
diferenciarlas.
151
PROCEDIMIENTO PARA FIJAR HELMINTOS
Procedimiento para fijar tremátodos
Para no dañar la morfología de los metazoarios, éstos se manipularán extremando
cuidados, y antes de fijarlos hay que someterlos a una fase de relajación:
a) Para relajarlos los trematodos se colocan en agua destilada durante 5 a 10 minutos
(no dejar más de 20 minutos debido a que las estructuras internas se destruyen por
la lisis osmótica). La incubación de los tremátodos adultos en agua también
favorecen la salida de huevo, lo cual es benéfico debido a que se observarán
mejor las estructuras internas.
b) El espécimen se coloca entre dos portaobjetos en posición dorsoventral y se
presionan con cuidado sin macerarlo.
c) Por un extremo de los portaobjetos se seca el exceso de agua con una gasa; por el
otro extremo se añade el fijador (AFA :Alcohol, formaldehído, ácido acético) y
se deja reposar 10 minutos.
d) Los trematodos se separan de los portaobjetos y se colocan en el fijador (AFA)
durante 48 horas
e) Se transfieren a un recipiente con etanol al 70%; en estas condiciones, los
trematodos se pueden almacenar en forma permanente o quedan listos para la
tinción.
Procedimiento para fijar cestodos
Los cestodos, igual que los tremátodos, primero se relajan.
a) Se colocan en agua destilada o solución isotónica a 37°C durante 5 a 30 minutos
(más tiempo ocasionará lisis osmótica de varios órganos internos). Otra opción es
utilizar etanol al 5.0% a temperatura ambiente.
b) Si el parásito es de un tamaño medio, se coloca entre dos portaobjetos en posición
dorsoventral y se presionan con cuidado sin macerarlo.
c) Por un extremo de los portaobjetos se seca el exceso de agua con una gasa; por el
otro extremo se añade el fijador (AFA) y se deja reposar 30 minutos.
d) El ejemplar se retira y se coloca en un recipiente con el fijador (AFA) durante 24
horas.
e) Los cestodos se transfieren a un recipiente con etanol al 70%.
Procedimientos para fijar nemátodos.
Para hacer una buena observación de las estructuras internas de los nematodos, éstos
necesitan tinciones. Basta con un procedimiento adecuado para aclararlos y fijarlos.
a) Debido a que el fijador puede contraer la estructura de los nematodos vivos, éstos
se colocan durante 30 segundos en ácido acético glacial frío y después en etanol al
70%.
b) Los nematos pueden almacenarse de manera permanente en etanol alo 70% con
5% de glicerol (que suaviza y aclara). Si se desean preparaciones fijas, entonces se
usa el glicerogel.
152
METODOS DE COLORACIÓN PARA HELMINTOS
Coloración Carmín clorhídrico
Coloración de estructuras internas de especímenes adultos o segmentos de éste. Se usa

de preferencia para el estudio de céstodes y tremátodes, ya que los nemátodes suelen
deformarse con el montaje. La muestra debe ser lo más fresca posible.
Materiales
- Pinza de punta fina.
- Cytoseal o bálsamo de Canadá.
- Alcohol 70%, 85%, 95% y absoluto.
- Creosota de la Haya o xilol.
- Colorante Carmín (Anexo C).
- Acido clorhídrico.
- Agua destilada.
- Pabilo.
- Placas petri conteniendo colorante, decolorante, alcoholes de 70%, 85%, 95% y
absoluto.
Procedimiento.
1. Los proglótidos de céstodes y los adultos de tremátodes son lavados y aplanados,
colocándolos entre dos láminas, sujetándolos con pabilo o usando pesas
sumergiéndolos en formol al 10%.
2. En caso de estar fijados en formol 10%, se lavan con agua corriente durante 10 a
30 minutos y luego se realiza el aplanamiento del vermex o gusano.
3. Colocar el gusano en alcohol 70% durante 10 a 20 minutos.
4. Pasar por el colorante Carmín durante 5 a 10 minutos.
5. Pasar por alcohol ácido controlando la coloración al estereoscopio.
6. Deshidratar el espécimen pasando por alcohol 85%, 95% y absoluto, durante 10
minutos en cada uno.
7. Pasar por la creosota o xilol, controlando al estereoscopio o microscopio la
coloración apropiada.
8. Secar el exceso de creosota con papel filtro y realizar el montaje con bálsamo de
Canadá.
Observación.
La observación y estudio de la morfología del ejemplar se realiza macroscópicamente e
incluso sólo usando el estereomicroscopio
153
Coloración de Bonilla, Naar y Beloy
Utilidad.
Las larvas de los nemátodes absorben el colorante, permitiendo diferenciar sus
estructuras internas.
Materiales
- Alcohol 25%, 30%, 70%, 85% y 95%.
- Solución rojo de Congo (Anexo C).
- Solución de salicilato de metilo (Anexo C).
- Láminas excavadas.
- Bálsamo de Canadá o cytoseal.
- Pipeta Pasteur.
- Placas Petri 60 x 90 mm conteniendo los alcoholes.
Procedimiento
1. Preparar un set de placas Petri 60 x 90 mm conteniendo los reactivos
correspondientes y colocar las larvas en alcohol 25% - 30% con unas gotas de
solución de rojo de Congo por 20 a 30 minutos.
2. Controlar por la observación microscópica el color de las larvas.
3. Deshidratar la muestra, pasándola por alcohol 70%, 85%, 95% y absoluto, de 20 a
30 minutos en cada uno.
4. Colocar en solución de salicilato de metilo durante 3 minutos.
5. Colocar los especímenes en cytoseal, bálsamo de Canadá o Permount y observar
al microscopio.
Lectura
Los especímenes y sus estructuras internas se tiñen de color rojo.
Coloración hematoxilina férrica de Delafield
Utilidad
Se usa en casos de céstodes y tremátodes. Permiten colorear estructuras internas de
especímenes adultas o fragmentadas del mismo.
Materiales
- Alcohol de 25%, 30%, 70%, 85% y 95%.
- Hematoxilina férrica.
- Bálsamo de Canadá o cytoseal.
- Pipeta Pasteur.
- Placas Petri 150 x 100 mm conteniendo los alcoholes.
154
Procedimiento
1. Preparar un set de placas Petri 60 x 90 mm o 100 x 150 mm conteniendo los
reactivos correspondientes, dependiendo de los especímenes a colorear.
2. Los tremátodes y céstodes fijados con formol 10% se lavan en agua corriente.
3. Diluir el colorante stock de 8 a 10 gotas en agua destilada y colocar los
especímenes (35 mL por placa) por 12 horas.
4. Lavar con agua corriente y pasar por agua (segundos), dependiendo del
espécimen.
5. Pasar por alcohol 50%, 30% y 10% por 10 minutos en cada uno y pasar por agua
corriente el tiempo necesario para sacar el exceso de colorante.
6. Deshidratar en alcohol 10%, 30%, 50%, 70%, 85%, 95% y 100% cada uno, por 10
minutos.
7. Pasar dos veces por xilol, montar con bálsamo de Canadá y observar al
microscopio.
Lectura
La observación de los especímenes se realiza en forma microscópica o con el uso del
microscopio estereoscopio.
MÉTODO DE LA TINTA CHINA
Identificar específicamente proglótidos de Taenia expulsados por individuos infectados. No

se puede enfatizar suficiente la importancia de identificar infecciones por T. solium, por el
peligro que representa para el individuo, su familia y la comunidad la diseminación de los
huevos de este parásito y el riesgo de adquirir una císticercosis, tanto humana como
animal. Aunque cualquier expulsión de proglótidos debe considerarse como si fueran de T.
solium mientras no se identifique la especie, es necesario identificar, registrar y tratar los
casos verdaderos.
Muestra requerida
Proglótidos grávidos sin fijar, colocados en un frasco tapado e identificado con el nombre,
edad, sexo y procedencia del individuo. Pueden mantenerse en refrigeración por un fin de
semana, pero deben llevarse al laboratorio lo más pronto posible.
Ventajas
Se ofrece un diagnóstico rápido; pueden guardarse sellados e identificados para
demostración y referencia.
Desventajas
Material infectante al humano cuando es T. solium; requiere manipulación
cuidadosa, puede contaminar fácilmente el área del laboratorio. Puede no inyectarse
bien el proglótido, o éste puede estar semimacerado y no revelar claramente el
número de ramas uterinas necesarias para diagnóstico.
Alternativa: Los proglótidos lavados y limpios sin fijar, se pueden aclarar en alcohol al
70% y glicerina o bien con Lactofenol. El resultado demora mientras los proglótidos se
aclaran. Para la diferenciación entre especies, puede decirse que si las ramas uterinas son
muchas es Taenia saginata y si son pocas es T. solium.
155
Materiales
 Jeringa y aguja de tuberculina
 Tinta china
 Papel absorbente
 Agua destilada
 Aplicadores
 Caja de petri
 Porta-objetos de 7.5 x 5 cm {3 x 2 pulgadas)
 Cinta adhesiva opaca
 Frasco con desinfectante o agua hirviendo
Procedimiento
1. Si el o los proglótidos están sucios con heces, colocarlos con ayuda de aplicadores
en una caja de Petri y lavar por agitación suave con agua destilada.
2. Colocar un proglótido sobre 3-4 dobleces de papel absorbente y secarlo por ambos
lados.
3. Aspirar algunas gotas de tinta china en la jeringa de tuberculina.
4. Inyectar el proglótido afianzado sobre el pape! absorbente, introduciendo la aguja
en la rama uterina central del proglótido como si fuera inyección subcutánea.
5. Secar con otro papel el exceso de tinta y humedad y colocar el proglótido entre 2
porta-objetos.
6. Ejercer presión para apretar el proglótido al mismo tiempo que otra persona sella
alrededor de la preparación con cinta adhesiva.
7. Contar las ramas uterinas coloreadas con la tinta china con una lente de aumento.
8. Número de ramas para 7. solium: 5, 7, 9 ó 13. Número de ramas para 7. saginata:
más de 15.
9. Cuando hay duda en situaciones de cuenta intermedia solicitar más proglótidos sin
10.fijar o el parásito que se expulsará con tratamiento específico, recolectado
directamente en una bolsa plástica o en un frasco grande limpio y seco.
11.Cuando los proglótidos se reciben fijados, se colorean con carmín, que es una
coloración permanente.
12.Descartar todo material utilizado en frasco con desinfectante o en agua hirviendo.
13.Desinfectar la mesa de trabajo. Lavarse bien las manos.
156
COLORACIONES ESPECIALES PARA PROTOZOARIOS
La detección y la correcta identificación de la

mayoría de los protozoos intestinales dependen del
examen de estos extendidos observados con un
aumento de 100x. La utilización de extendidos
permanentes no solamente nos proporciona un
archivo durable de los protozoos, sino que pueden
ser utilizados, cuando la identificación es dificultosa,
para consultar con especialistas.
El método más clásico es la hematoxilina férrica de
Heidenhain, pero la generalidad de los laboratorios
seleccionan técnicas más breves como la
coloración Tricrómica.
Es importante mencionar que la mayoría de las
dificultades en las coloraciones de trofozoitos y
quistes se deben a una fijación inadecuada, al uso
de preparados muy densos o por heces muy viejas.
COLORACIÓN CON HEMATOXILINA FÉRRICA DE HEIDENHAIN

Método clásico para colorear e identificar estadios de protozoos comunes en heces del
humano, sobretodo cuando sólo hay trofozoítos y las infecciones son mixtas. Las
descripciones en los libros sobre la morfología y características de cada estadio y de cada
especie están basadas en organismos coloreados por este método.
Ventajas y desventajas
Es un método caro porque exige reactivos de primera clase, sobre todo el fijador y los
deshidratantes (alcohol, xileno); requiere un tiempo de preparación y coloración de las
muestras (mínimo 2 horas) y exige un personal de laboratorio con conocimiento sólido
sobre principios celulares y morfología diferencial de los organismos. Sin embargo, para la
especiación de protozoos es la más adecuada, la preparación puede guardarse para
control, referencia, confirmación por terceras personas y material de estudio.
NOTA: Desde la década anterior, con la redescripción de las especies de Entamoeba
histolytica y de Entamoeba dispar, la identificación por morfología de Entamoeba
histolytica no es aceptada. Se prefiere utilizar métodos inmunológicos o de biología
molecular. Podría hacerse una excepción en presencia de trofozoítos hematófagos
recobrados de casos clínicos agudos (disentérica o amebiasis extraintestinal). Por otra
parte, esta coloración en manos adiestradas ofrece la diferenciación más confiable de
otras especies de protozoos patógenos y no patógenos del humano.
Hay 3 momentos claves en la ejecución de este método:

1. Fijación
2. Diferenciación
3. Deshidratación
157
Al final los resultados dependerán de que se haya hecho una pronta y correcta recolección
y fijación de la muestra. No se debe perder tiempo examinando una muestra mal fijada y
peor teñida.
Para una discusión más completa y acertada sobre el tema, consultar las referencias
citadas. Para una coloración rápida (8-10 minutos) consultar la referencia de Flournoy y
colaboradores.
Muestra requerida
Evitar purgantes de aceite mineral o la administración de medios radiológicos de contraste
por lo menos 2 semanas antes de tomar la muestra. Cualquier terapia con antibióticos
reduce la posibilidad de encontrar organismos.
Heces recolectadas en un frasco (vidrio, plástico, cartón) limpio, seco, con tapadera, sin
contaminación (agua, tierra, orina).
Cuando haya moco y sangre, recoger de esta parte. Evitar colocar la muestra a
temperaturas extremas. Deben ser fijadas al momento de evacuarlas o llevarlas al
laboratorio en los próximos 30-60 minutos.
Reactivos
Shaudinn modificado
Solución saturada acuosa de cloruro de mercurio 62.5 mL
Alcohol etílico al 95% 31.2 ml
Ácido acético glacial 5.0 ml
Glicerol 1.5 ml
Mezclar la solución saturada de cloruro de mercurio con el alcohol etílico. Puede
guardarse en frasco rotulado. El ácido acético y el glicerol sólo se mezclan al momento
de usar el fijador. Fijar una muestra de heces en este fijador en relación de 10:1 (10 mi
de fijador para 1 g ó 1 mi de heces). Las heces deben estar totalmente suspendidas en
el fijador, para lo cual se utiliza un aplicador.
Albúmina de Mayen
Mezclar una clara de huevo en partes iguales con glicerol.
Guardar en frasco tapado, rotulado, en el refrigerador. Para preparar las láminas,
agregar en partes iguales al sedimento del centrifugado de heces.
Alcohol yodado. Solución madre:
Agregar suficientes cristales de lodo a un volumen X de alcohol al 70% en un frasco
oscuro con buen tapón. Se obtendrá una solución oscura. Rotular y guardar.
Para trabajar, agregar un poco de esta solución a un volumen X de alcohol al 70%,
hasta obtener una solución color té o color coñac (ámbar).
Mordiente:
Cristales de sulfato férrico amónico
(Fe2(SO4)3 (NH4)2 SO4 + 24H2O) 2 g.
Agua destilada 100 mL.
Mezclar, preparar fresco cada día. No puede guardarse.
Colorante de hematoxilina. Solución madre.
Cristales de hematoxilina 10 g
Alcohol etílico de 95% 100 mL
Mezclar y dejar madurar varias semanas (entre 5-6) en un frasco con tapón de
algodón, a la luz, a temperatura ambiente. Para trabajar: agregar 0.5 mL de esta
solución a 95 mL
158
de agua destilada.
Ácido Pícrico:
Ácido pícrico en cristales 2 g
Agua destilada 100 mL
Mezclar y agitar, dejar reposar varios días en un frasco rotulado, agitando de vez en
cuando. Si todos los cristales se disuelven, añadir más cristales de ácido pícrico.
Utilizar
del líquido sobrenadante para diferenciar, tomando ¡a cantidad necesaria con una
pipeta.
Alcohol al 70%
Materiales
 Porta-objetos 7.5 X 2.5 cm. ( 3 X 2 pulgadas)
 Cubre-objetos 22 X 30 mm ó 22 X 22 mm No.1
 Tubos de ensayo para centrifugar ( 1 3 X 1 000 mm}
 Viales para fijar las heces
 Gasa quirúrgica
 Lápiz de diamante para rotular porta objetos
 Embudos de 5 cm de diámetro
 Aplicadores
 Albúmina de Mayer
 Fijador Schaudinn modificado
 Alcohol yodado
 Mordente
 Colorante de hematoxilina
 Solución de diferenciación
 Alcohol etílico al 70%, 80%, al 95%
 Alcohol absoluto
 Xileno o tolueno
 Permount
 Frascos con desinfectante para descartar material.
Procedimiento
1. Fijar una muestra de heces o de moco con sangre recién obtenida en el fijador en
relación 10:1 (10 mL de fijador para 1 g ó 1 mL de heces). Las heces deben estar
totalmente suspendidas en el fijador, para lo cual se mezcla con un aplicador.
2. Antes de proceder con la coloración la muestra debe permanecer 6 horas como
3. mínimo en el fijador. El examinar láminas mal fijadas y peor teñidas es una pérdida
de tiempo.
4. Identificar tubos y láminas con la muestra a procesar.
5. Agitar el frasco conteniendo la muestra fijada y verter 1 mL a un tubo de centrífuga.
6. Si hubiere partículas muy gruesas, en este momento puede filtrarse por un embudo
con gasa en 2 dobleces. Descartar la gasa y poner el embudo en solución
desinfectante.
7. Llenar el tubo con agua destilada y centrifugar 2 min. a 2,000 rpm.
8. Descartar el sobrenadante. Este paso puede repetirse otra vez para eliminar fijador
en exceso. Agregar al sedimento un volumen igual de albúmina de Mayer, mezclar
159
y extender finamente 1-2 gotas de esto sobre un porta-objetos rotulado. También
puede colocar sobre el porta-objetos 1-2 gotas de sedimento de heces, agregar 1-2
gotas de albúmina de Mayer, mezclar y extender finamente. Permitir que la
preparación se seque unos minutos, dependiendo de la temperatura ambiente. Si
no lo seca suficiente, el extendido se desprende; si lo deja secar demasiado, los
protozoos se deforman.
Introducir en las siguientes soluciones por el tiempo indicado:
1. Alcohol 50% 5 min
2. Alcohol 70% yodado 2- 5 min
3. Alcohol 70% 2-5 min
4. Alcohol 50% 3-5 min
5. Lavar en agua corriente 3-10 min
6. Solución mordente sulfato férrico amónico 10 min
7. Lavar en agua corriente 3 min
8. Hematoxilina acuosa 10 min
9. Lavar en agua corriente 2 min
10. Ácido pícrico saturado 10-15 min
11. Lavar en agua corriente 15-30 min
12. Deshidratar por una batería de alcohole en incremento 70%, 95%, y 2
cambios en 100% 2 min en c/uXilol 2 min
13. Colocar 1-2 gotas de permount, cubrir con cubre-objetos, dejar secar y
observar con objetivo de inmersión.
Problemas y su corrección
 Para mantener las soluciones lo más limpias posibles, escurrir la lámina tocando
brevemente un papel absorbente o una gasa con el extremo inferior de la misma
antes de pasar a otra solución.
 Presencia de numerosos cristales amarillos u oscuros indica que el alcohol yodado
no removió los cristales y que requiere más tiempo en dicha solución.
 Evitar la evaporación de los alcoholes manteniendo los frascos bien tapados.
 Si el xilol se pone lechoso al introducir una lámina, esto indica que la lámina todavía
contiene agua. Los pasos anteriores no han deshidratado correctamente.
 Debe cambiar por lo menos el alcohol del paso anterior y el xilol y secar bien los
frascos coplin antes de verter el nuevo.
 El extendido no debe dejarse secar en ningún momento durante la coloración.
 Los extendidos pueden permanecer toda la noche en cualquier cambio de alcohol
al 70% o xilol. Para los otros cambios mantener el tiempo indicado.
160
TINCIÓN TRICRÓMICA DE GOMORI-WHEATLEY
Al principio la tinción de Gomori se utilizó en tejidos y Wheatley la uso en parásitos. Este
método es más rápido que el de hematoxilina férrica. Es útil para diferenciar protozoarios
intestinales en donde se pueden ver algunos detalles del citoplasma y el núcleo. La
tinción se puede hacer en frotis de muestra previamente preservadas en PVA o en frotis
con muestras frescas y fijas con Schaudinn.
Esta técnica combina un colorante plasmático (Cromotropo 2R) y un colorante de fibras
conectivas (verde luz/azul de anilina) en una solución de ácido fosfotúngstico y ácido
acético glacial. El ácido fosfotúngstico favorece la coloración roja de citoplasmas.
Colorante de Gomori:
 2R cromotropo 0.6 g
 SF verde claro 0.3 g
 Ácido fosfotúngstico 0.7 g
 Ácido acético glacial 1 ml
 Agua destilada 100 ml
Agregar 1 ml de ácido acético glacial a los componentes secos. Dejar reposar de 15 a

30 minutos y luego agregar 100 ml de agua destilada
Procedimiento
1. La preparación de las laminillas y la fijación se realizan de manera similar al descrito
en la tinción de hematoxilina.
2. Para eliminar el exceso de cloruro de mercurio del fijador de Schaudinn, las
laminillas se colocan el alcohol 70%-yodo durante un minuto
3. Se lavan dos veces con etanol al 70%, durante minutos.
4. Las laminillas se colocan en solución concentrada durante 5 a 10 minutos
5. Se transfieren a etanol al 90% con un 1% de ácido acético (10-15 segundos)
6. Se sumergen dos veces en etanol absoluto.
7. Se ponen en etanol absoluto durante 30 segundos
8. Se meten en xileno durante un minuto.
9. Las preparaciones se cubren con resina o bálsamo de Canadá, se les coloca un
cubre objeto de numero 1 y se dejan secar.
161
Resultados
Los protozoarios adquieren diferentes tonalidades. El fondo se ve sobre todo rojo o verde,
en tanto que los protozoarios toman un color más neutro, casi siempre gris o verde pálido.
Los cuerpos cromatoides y eritrocitos toman tanto el color rojo como el colorante verde
con lo que se genera un fuerte contraste con el citoplasma. Por lo regular los elementos
nucleares se tiñen de un color más oscuro.
Cuestionario
1. ¿Por qué es necesario usar colorantes para teñir a los protozoarios parásitos?
2. ¿Cuál es la diferencia entre tinciones efímeras y tinciones permanentes? ¿En qué
circunstancias se recomienda se cada una de ellas?
3. ¿Por qué es necesario fijar las estructuras parasitarias?
4. ¿Cuál es la solución fijadora que se utiliza con mayor frecuencia para las
preparaciones permanentes del frotis de heces
162
REACCIÓN INFLAMATORIA Y DIFERENCIACIÓN CELULAR
Los procesos inflamatorios se caracterizan por el reclutamiento y activación de “células

inflamatorias”, constituidas por leucocitos, macrófagos y linfocitos que se desplazan
atraídas por citoquinas pro-inflamatorias y se concentran en sitios donde existe injuria
tisular. Diversos agentes de naturaleza física, química o biológica pueden provocar
alteraciones en algunas de las estructuras hepáticas desencadenando señales de
peligro que son captadas por el sistema inmunológico y hematológico. Las citoquinas
pro-inflamatorias son sintetizadas y secretadas por casi todos los tipos de células.
En la práctica, las enfermedades parasitarias son muy útiles por permitir la

observación, de manera muy gráfica, de todas las variantes del proceso inflamatorio y
aun de sus secuelas.
Hay algunos hechos curiosos en patología parasitológica. Usualmente en la inflamación
se busca la presencia de exudado, con determinado tipo de células predominantes; sin
embargo, en la hepatitis o encefalitis palúdica, se sabe que no hay reacción leucocitaria
en el tejido: solo se observa al componente alternativo y algunos trastornos
circulatorios, como el edema.
Es muy fácil demostrar en muchos casos, como en la amebiasis hepática o en la
toxoplasmosis encefálica, que es el parásito, como ente extraño, el que desencadena
el proceso inflamatorio; pero hay situaciones, como sucede a veces en la miocarditis
chagásica y en la toxoplásmica, especialmente en las formas crónicas, en que cerca de
una colonia de parásitos no se aprecia reacción inflamatorio; en cambio, ésta puede ser
importante lejos del sitio en que el parásito está, lo que hace suponer que está, lo que
hace suponer que hay sustancias antigénicas, producidas por el parásito, que provocan
reacción a distancia.
Objetivos
- El propósito de la práctica es que el estudiante establezca la diferencia en el
laboratorio entre la infección intestinal que ocasiona diarrea infamatoria y la no
inflamatoria.
- Esta diferencia puede establecerse determinando la presencia de Leucocitos en
materia fecal. Los Leucocitos se encuentran asociados a moco y su presencia
indica una diarrea tipo inflamatoria lo cual sugiere bacteriana o parasitaria
Materiales
- Muestra fecal
- Laminas portaobjetos y cubreobjetos
- Colorante azul de metileno
- Colorante Wright
- Aceite de Cedro
- Microscopio
GUIA DE PRACTICAS DE PARASITOLOGIA
Procedimiento 1.
- Colocar una pequeña porción de materia fecal sobre una lámina portaobjeto,
agregarle una gata de azul de metileno, cubrirla con una laminilla y observar al
microscopio en busca de leucocitos.
- Para un estudio cuantitativo contar 200 células con objetivo de 40x. La
interpretación es la siguiente:
o Positivo + : menos de 10 leucocitos /campo.
o Positivo ++ : de 10 a 30 leucocitos/campo.
o Positiva +++: más de 30 leucocitos/campo
Procedimiento 2.
- Hacer una extensión de materia fecal sobre una lámina portaobjeto dejar secar y
colorear con wrigth.
- Observar al microscopio y observar los leucocitos coloreados.
- Realizar un conteo de 200 leucocitos, diferenciando los mononucleares y
polimorfonucleares y expresarlo en porcentaje (%).
FORMA DE REPORTE:
Reportar el porcentaje de leucocitos encontrados con el predominio del que tenga
mayor porcentaje. Polimorfonucleares por ciento.Mononucleares por ciento.
Interpretación:
 Predominio de polimorfonucleares se asume que existe un proceso infeccioso de

origen bacteriano.
 Predominio de Mononucleares se asume que el proceso infeccioso es de origen
viral.
MODELO: REPORTE DE EXAMEN - REACCION INFLAMATORIA
REACCION INFLAMATORIA : POSITIVO
LEUCOCITOS : 25 - 30 POR CAMPO
DIFERENCIACIÓN : POLIMORFONUCLEARES : 80 %
MONONUCLEARES : 20 %
164
Mg. Freddy Orihuela Villar
MANUAL DE PRACTICAS DE PARASITOLOGIA
CONTROL DE CALIDAD INTERNO EN PARASITOLOGÍA CLÍNICA
FASES DEL
PROCESO DE
LABORATORIO
PRE ANALITICA ANALITICA POS ANALITICA

Es la que insume mayor corresponde a la realización
tiempo, solicitud,obtención, del procedimiento
almacenamiento, transporte, diagnóstico. Incluye Cálculos, interpretación de
recepción y la que está validación de las técnicas, resultados, validación,
sujeta a mayor porcentaje calibración de emisión del informe.
de errores. equipos, ejecución de
controles de calidad, etc.
El diagnóstico parasitológico es fundamentalmente morfométrico y la identificación de

los parásitos de modo fiable y exacto, requiere:
i) utilizar muestras satisfactorias;

ii) preparar y conservar adecuadamente los reactivos;
iii) realizar cuidadosamente los procedimientos técnicos seleccionados;
iv) examinar meticulosamente las preparaciones realizadas.
No obstante, existen procedimientos diagnósticos alternativos, no excluyentes,

complementarios de los procedimientos convencionales, y en algunos casos
imprescindibles para el diagnóstico, que deben ser controlados por el laboratorio y por
lo tanto sujetos a los controles internos de calidad, como son los cultivos específicos,
los estudios serológicos y las técnicas de diagnósticos moleculares.
Estas recomendaciones tienen como finalidad describir como se debe efectuar el
control de calidad interno de las técnicas de laboratorio relacionadas con el diagnóstico
de las parasitosis humanas. Estos procedimientos se aplicarán a los diferentes ensayos
que se realicen en los laboratorios de Microbiología, encaminados al diagnóstico de las
parasitosis humanas.
En los laboratorios debe existir un supervisor del control de calidad y el personal debe
rellenar los registros de control de calidad en los formularios preparados para tal efecto.
El supervisor de calidad debe:
i) revisar mensualmente los datos generados por el control interno de calidad;
ii) lasificar los registros para facilitar su inspección;
iii) conservar los registros durante un periodo mínimo de dos años.
Los análisis deben ser realizados por personal TECNOLOGO calificado con
experiencia en Parasitología, además de supervisar el proceso diagnóstico. Dadas las
peculiaridades de la Parasitología Clínica, sería aconsejable que el personal tuviese
una formación adicional específica en esta materia.
165
Las características del laboratorio requeridas para realizar el diagnóstico de las

parasitosis humanas son similares a las de cualquier laboratorio del área de
Microbiología. Debe disponer de programas de seguridad, de limpieza y de eliminación
de residuos, que pueden ser los generales del laboratorio, y de los equipos necesarios
(microscopios, lupas, centrífugas, refrigeradores, congeladores, incubadores, pH-
metros, etc) para realizar los procedimientos diagnósticos. Así como, del
correspondiente Manual de Procedimientos de Diagnóstico Parasitológico, que debe de
recoger los procedimientos y los correspondientes algoritmos diagnósticos.
Requerimientos para un adecuado control de calidad interno

Dado que a diferencia de las otras áreas de la especialidad no existen cepas de
control, de todas las especies parásitas que afectan al hombre, el laboratorio:
• Debe disponer de una colección propia de muestras fecales conservadas, con los
parásitos prevalentes en su área geográfica, adecuadamente identificadas.
• Debe disponer de fuentes documentales propias (libros, atlas) y de acceso online,
para poder efectuar las consultas pertinentes.
• Debe conservar las preparaciones positivas teñidas con tinciones permanentes.
• Debería disponer de concentrados fecales de parasitosis exóticas en su medio. Así
como, de preparaciones permanentes de los principales hemoparásitos,
especialmente de las diferentes especies plasmodios que afectan al hombre, y de
las tinciones diferenciales utilizadas en los exámenes coproparasitológicos.
• El material de referencia (colección de especimenes de helmintos, huevos, larvas y
quistes de protozoos preservados en formol; tinciones fecales con ooquistes, quistes
y trofozoítos de protozoos y tinciones sanguíneas positivas; atlas; manuales y libros
de referencia) debe ser clasificado y almacenado de forma adecuada, de modo de
que su consulta con fines diagnósticos, de entrenamiento y adiestramiento, sea fácil.
Recomendaciones para el control de calidad de la fase pre-analítica

La adecuada programación de la fase pre-analítica es de capital importancia para el
buen funcionamiento de los laboratorios clínicos, por ello consideramos que el
laboratorio:
• Debería disponer de una “solicitud propia de análisis” en la que, además de los
datos demográficos del paciente y del estudio solicitado, debería de estar recogida la
información clínica y terapéutica necesarias para la adecuada implementación de la
fase analítica, que en el caso del diagnóstico parasitológico debería de incluir, entre
otros:
* Tipo de proceso y tiempo de evolución
* Datos biológicos concomitantes (esosinofilia, anemia, etc)
* Estancia en otros lugares y otros datos epidemiológicos de interés
• Debe facilitar la información necesaria para la adecuada obtención, conservación y
transporte de las muestras. En el caso de los exámenes coproparasitológicos el
laboratorio debe facilitar contenedores con conservantes que permitan la realización de
tinciones diferenciales .
Recomendaciones para el control de calidad en la fase analítica
Control del equipamiento: El personal del laboratorio debe controlar el equipamiento

del mismo.
 CENTRIFUGA.se comprobara que la velocidad es correcta, calibrándose una
vez al año. Se verificara la eficacia de la calibración procesando una muestra
positiva (por ejemplo con quistes de guardia) por el método de concentración y
166
comprobando que el número de quistes es al menos cinco veces mayor que el

examen en fresco.
 REFRIGERADORA, CONGELADOR, ESTUFAS. Se controlara la temperatura a
diario, anotando los resultados en una hoja de control, se limpiaran
mensualmente por dentro y por fuera
 MICROSCOPIO. Se limpiara tras cada uso y de forma más exhaustiva al
terminar la jornada laboral, utilizando papel lente o servilletas de papel, nunca
tela. Se revisara y limpiara semestralmente por un técnico especializado y se
calibrara una vez al año.
Control de los reactivos: La adecuada preparación y conservación de los reactivos es
de capital importancia en el control interno de la fase analítica, por lo cual:
• En los correspondientes Procedimientos de Diagnóstico Parasitológico debe

figurar la composición, preparación, conservación y vida media de los reactivos.
• Todos los reactivos deben estar adecuadamente identificados y en la
correspondiente etiqueta deben figurar las fechas de preparación y de caducidad.
• El personal del laboratorio debe comprobar la fecha de caducidad de los
reactivos antes de su utilización, y proceder en su caso a su sustitución.
• Cada vez que se proceda a la sustitución de un reactivo, o se introduzca uno
nuevo, debe realizarse el correspondiente control de eficacia.
167
DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO DE ENFERMEDADES

PARASITARIAS
Desde principios de este siglo, cuando Landsteiner inició la era de la inmunología hasta
nuestros días, se han realizado muchos hallazgos que comprometen al huésped en la
reacción antígeno-anticuerpo y al modo de realizar la investigación de dicho proceso.
Actualmente la inmunología interviene en la mayoría de las disciplinas médicas y la
parasitología no es la excepción a esta afirmación, además desde hace cincuenta
años las pruebas inmunológicas se utilizan en esta área.
En la actualidad el diagnóstico inmunológico de las enfermedades parasitarias tiene

ciertas limitaciones para su aplicación en la mayoría de los laboratorios clínicos
asistenciales o en los centros de docencia, sin embargo estas pruebas se realizan con
cierta frecuencia en los laboratorios de referencia nacionales seccionales o en
unidades docentes con recursos económicos amplios.
El uso clínico de las pruebas de inmunodiagnóstico parasitológico está restringido a

pocas entidades nosológicas en nuestro medio, debido a los escasos recursos
económicos que tienen nuestras Instituciones, al hecho de existir otros análisis menos
costosos y más dicientes de una infección actual y quizá lo más importante, es el
comportamiento biológico del parásito, el cual es diferente al de la bacteria y el virus,
por lo tanto su papel como antígeno tiene otras! características.
De lo anterior se puede deducir que la utilización de estas pruebas en el diagnóstico
debe limitarse a aquellos casos en los cuales los resultados conlleven una información
sobre el estado de infecciosidad del agente.
Los otros empleos de estas pruebas, están destinados a obtener datos
seroepidemiológicos que impliquen una anterior exposición al parásito, por ende tiene
alto valor en el estudio de la prevalencia de las enfermedades parasitarias.
Las pruebas más importantes en el diagnóstico inmunológico de enfermedades

parasitarias son las siguientes:
 Precipitación: Esta reacción se realiza cuando un antígeno soluble

reacciona con su anticuerpo y forma un precipitado.
 Aglutinación: Es una prueba en donde el antígeno celular o particulado

se halla en suspensión, este antígeno aglutina con su anticuerpo específico.
 FIoculacion: Esta prueba es una variante de la precipitación pero la

reacción se manifiesta por formación de grumos.
 Hemaglutinación indirecta: Con algunos antígenos parasitarios se

sensibilizan glóbulos rojos, como resultado estos glóbulos rojos sensibilizados
son aglutinados por anticuerpos específicos.
 Fijación de complemento: Se realiza cuando un antígeno se pone en

contacto con un anticuerpo específico en presencia de complemento.
 Doble difusión: Consiste en poner en una serie de pozos los posibles

anticuerpos contra un antígeno determinado. Al difundiisen antígeno y
anticuerpo, forman al encontrarse específicamente una banda de precipitado.
168
 Contrainmunoelectroforesis: Llamada también electroinmuno-difusión,

la cual consiste en hacer reaccionar antígeno y anticuerpo en un gel sometido a
campo eléctrico.
 Inmunoelectroforesis: Esta prueba es una combinación de métodos

fisioquímicos e inmunoquímicos, el material a investigar (antígeno) inicialmente
es sometido a una separación por electroforesis y posteriormente se enfrenta al
antígeno fraccionado con el suero (anticuerpo) a examinar, de tal manera que
los antígenos y anticuerpos se difunden en un medio apropiado (gel) el uno
hacia el otro para evidenciar la formación de bandas de precipitación al
encontrarse.
 Anticuerpos fluorescentes (Método indirecto): En el cual un suero

desconocido (anticuerpo) se pone en contacto con antígenos conocidos, luego
se añade antigamaglobulina marcada con fluoresceina y posteriormente se
observa en microscopio de fluorescencia. Esta prueba ha sido modificada para
obtener un antígeno soluble adherido a una base de acetato de celulosa y su
lectura se realiza en un fluorómetro.
 Análisis Inmunoenzimático: Es una prueba creada en esta década,

consiste en ligar a un tubo o placa de poliestireno el antígen el cual se pone en
contacto con suero (anticuerpo), posteriormente se nace contactar esta unión
(antígeno-anticuerpo) con antiglobulina marcada con enzima y luego esta
enzima se hace reaccionar sobre un substráete dando una reacción de color.
 Intradermorreacción: Es una prueba consistente en la aplicación

intradérmica de un antígeno determinado y la posterior reacción celular por la
presencia de anticuerpos específicos.
169
Selección
La selección de la prueba depende de las características de cada una de ellas en

relación al estado de la enfermedad y al parásito que la produce, sinembargo, cada
laboratorio debe estar familiarizado con un grupo de técnicas cuyo uso esté
estandarizado y cumplan los objetivos para lo cual son empleadas y que sean de
utilidad para el médico.
Caracteristicas Una prueba inmunológica tiene las siguientes características:
Especificidad: La especificidad de una prueba está dada por la relación de

individuos no infectados que den prueba positiva, de tal manera que hay dos tipos
de especificidad: alta y baja.
Alta especificidad significa que en presencia de individuos no infectados la

posibilidad de que la prueba sea positiva (detecte anticuerpos) es mínima.
La baja especificidad se refiere a que en presencia de los mismos individuos no

infectados se puede hallar positiva la prueba en muchos individuos.
Sensibilidad: La sensibilidad es la relación entre los individuos infectados que den

una prueba positiva (detectar anticuerpos), generalmente se expresa como las otras
características en porcentaje, así un 95% de sensibilidad quiere decir que la prueba
es altamente sensible y que de cada 100 individuos infectados 95 dan la prueba
positiva y 5% de sensibilidad significa que la prueba tiene baja sensibilidad y por lo
tanto de cada 100 individuos infectados, 5 dan la prueba positiva.
Reactividad La reactividad se relaciona con la cantidad de anticuerpos infectados,

así una prueba de alta reactividad es aquella que detecta una mínima cantidad de
anticuerpos y al contrario, una prueba de baja reactividad es la que detecta el nivel
de anticuerpos cuando estos han llegado a cifras o diluciones altas.
Por lo tanto la elección de la prueba es aquella que cumple con una alta
especificidad y sensibilidad y se acompaña de una baja reactividad, lo que elimina
en lo posible la determinación de anticuerpos cruzados o residuales de una infección
previa.
En general se considera la calidad de la reactividad para las siguientes pruebas, así:
Alta Reactividad: Hemaglutinación / Intradermorreacción
Baja Reactividad: Fijación de complemento / Inmunoelectroforesis / Doble difusión

/Contrainmunoelectroforesis
Aplicacion
Aunque existen aproximadamente 24 entidades en donde es posible aplicar el

inmunodiagnóstico, solo se utiliza en 18 enfermedades a nivel asistencial en los
laboratorios clínicos y en nuestro medio la existencia y utilización de tales pruebas se
reducen a no más de seis entidades.
170
PROTOZOARIOS
AMEBIASIS
Aunque la amibiasis en nuestro medio es frecuente, su diagnóstico se realiza por las
técnicas parasitoscópicas corrientes, sin embargo hay que considerar que si la
amibiasis es invasiva las pruebas serológicas son de mayor valor que cuando la amiba
está limitada a luz intestinal; entre estas dos presentaciones existen lesiones
intermedias en las cuales es inflamatoria o ulcerativa y la utilización de las pruebas no
sigue una norma general.
Las pruebas más usadas para la amibiasis son:
Contrainmunoelectroforesis: Cuya positividad alcanza el 92% en personas con

amibiasis invasiva y 7% en portadoras asintomáticos.
Hemaglutinación indirecta: El título se considera positivo cuando alcanza valores

de 1:128, pero en Colombia este título debe ser considerado como bajo, ya que
esta prueba es de alta reactividad, sin embargo es una prueba muy específica, ya
que solo es positiva en 1.2% de los pacientes sin evidencia de amibiasis. La prueba
más específica pero de más bala reactividad que la Contrainmunoelectroforesis es
la inmunodifusión.
Actualmente se usa con cierta frecuencia una prueba a base de latex sensibilizado
con antigeno, esta prueba tiene importantes restricciones por lo tanto su uso es
muy limitado tanto por las reacciones cruzadas como por el mismo
comportamiento biológico de la amiba.
Una prueba moderna es la utilización de análisis inmunoenzimático la cual tiene

mayor sensibilidad que la fluorescencia. Sinembargo deben esperarse otros
estudios para completar la información sobre el uso clínico de la prueba. También
se ha descrito su utilidad para ei diagnóstico de enfermedad de Chagas, malaria y
triquinosis.
Hay consenso general de que la presencia de anticuerpos no refleja una infección

activa y que su papel como protectores es dudoso.
TOXOPLASMOSIS
Con los nuevos descubrimientos desde 1969, sobre el ciclo vital del toxoplasma y la
implicación de felinos que como el gato entraron activamente en el ciclo evolutivo del
toxoplasma y dada la importancia que este hecho reviste dentro de la epidemiología y
la clínica, cada vez se recurre más al diagnóstico inmunológico de toxoplasma para
completar el estudio epidemiológico o clínico, para aplicar el tratamiento y
posteriormente para un control adecuado de los posibles riesgos para el paciente o su
descendencia.
La tradicional prueba del colorante denominada de Sabin y Feldman, la cual es muy

sensible y especifica, ha sido reemplazada en la actualidad por otras pruebas menos
peligrosas para el personal del laboratorio y de iguales características.
Esta prueba se vuelve positiva en un período de dos semanas a partir de la infección
171
aguda y quizá la positividad perdura a través de la vida del individuo.
La inmunofluorescencia es una de las pruebas que ha reemplazado satisfactoriamente

a la prueba del colorante y está indicada en casos de toxoplasmosis aguda congénita
porque puede determinar la IgM. Así, cuando un niño nace con defectos congénitos se
hace la prueba al momento de nacimiento, si ésta da un resultado positivo se presentan
dos alternativas: o que el niño tiene toxoplasmosis congénita activa o que los
anticuerpos pasaron a través de una grieta placentaria, por ello se debe hacer una
nueva prueba 3 o 4 semanas después y si ésta es positiva indica que hay una
toxoplasmosis activa. Un resultado negativo indica que los anticuerpos pasaron a
través de la placenta mecánicamente.
Un título de 1:64 o superior tiene importancia clínica según algunos autores pero la
mayoría acepta sólo como indicador de infección activa una cifra igual o superior a
1:128.
La fijación del complemento: Es la prueba que más tarda en dar resultados

positivos y más tempranamente se vuelve negativa. Asi, cuando un suero es
negativo por este método y presenta un título de 1:64 a 1:256 con las otras
pruebas, quiere decir que se trata de una infección reciente o de anticuerpos
residuales de una infección pasada.
La Hemaglutinación indirecta: Es similar en sus resultados a la del colorante y

se usa sobre todo en estudios epidemiológicos. Como da positiva más
tardíamente que la de Sabin y Feldman tiene el problema de no poder determinar
anticuerpos en la fase aguda de la enfermedad.
En la interpretación de la prueba se deben tener en cuenta los siguientes títulos:
1:64. Refleja experiencia toxoplasmósica pasada, incluso de años atrás o

una muy reciente exposición al parásito.
1:256 Reciente exposición, debe observarse evolución del paciente.
1:1024 Es una cifra significativa y nos indica probable toxoplasmosis.
La inmunidad conferida por el toxoplasma es muy sólida, si se adquiere la

enfermedad durante los dos primeros trimestres del embarazo es muy posible
que tenga un hijo con toxoplasmosis congénita, pero un segundo hijo ya no
presentará la enfermedad debido a la inmunidad conferida a la madre.
ENFERMEDAD DE CHAGAS
Aunque recientemente en nuestro medio no se ha cuantificado la magnitud de este

problema, hay zonas del país como los Llanos orientales en donde se presentan estos
casos y los individuos que emigran a diversas partes del país introducen el problema
diagnóstico.
Las pruebas más utilizadas en el diagnóstico de este padecimiento son la
hemaglutinación indirecta, la fijación de complemento y la inmunofluorescencia. Con la
utilización de las tres técnicas en forma simultánea se obtiene una mayor sensibilidad y
especificidad. En un período de 4-24 meses el 81% de los pacientes que han sido
172
sometidos a tratamiento, la prueba positiva retorna negativa.
Se considera como títulos positivos las siguientes cifras:
Hemoglutinación indirecta 1:128

Fluorescencia indirecta 1:64
Fijación de complemento 1:8
Recientemente se ha adaptado la AGLUTINACION DIRECTA, la cual es una prueba

muy sensible a sueros de pacientes con infección aguda porque en estos casos se
eleva la IgM, la cual es detectada por este método, al contrario de lo que sucede en los
casos crónicos donde hay más IgG, la cual es determinada por la prueba de
hemaglutinación. La fijación de complemento determina las dos inmunoglobulinas.
Para la prueba de aglutinación directa se usa un antígeno preparado con

epimastigotes (critidia) de T. Cruzi fijados y tripsinizados, habiéndose encontrado que
la prueba es muy sensible y relativamente muy específica en relación a las reacciones
cruzadas con leishmaniasis, se considera que un título de 1:512 o más alto es
específico para la enfermedad de chagas, los sueros con títulos de 1:128 y 1:256 son
dudosos y deben ser analizados por otras pruebas como la fijación de complemento y
la inmunofluorescencia.
Los títulos altos de anticuerpos no parecen limitar la infección en el hombre,

sinembargo se ha descrito inmunidad para cepas virulentas obtenidas con infecciones
previas de cepas poco virulentas.
LEISHMANIASIS
Las pruebas serológicas para diagnósticos de la leishmaniasis son utilizadas según el

tipo de leshmanias que ataca al individuo y por ende según la forma clínica que
presenta en el paciente, aunque en la actualidad una clasificación exclusivamente
clínica de la enfermedad es más difícil y ofrece dificultades de determinación etiológica.
.
El tercer tipo de leshmania es la L.trópica, la cual produce la leishmaniasis cutánea; en
este tipo hay divergencias en cuanto a si presentación en Colombia. Recientemente se
han realizado clasificaciones de los diferentes tipos de leishmaniasis las cuales
incluyen varios subtipos, que presentan una patología especial en una área
determinada.
Se utilizan pruebas como la fijación de complemento, la hemaglutinación indirecta y la
fluorescencia indirecta, cada una de es tas pruebas tiene una muy buena aplicación en
el diagnóstico de la leishmaniasis visceral causada por L.donovani.
La hemaglutinación indirecta se ha aplicado a pacientes con leishmaniasis cutánea y se

efectúa con antígenos de las tres leishmanias, sinembargo su sensibilidad es baja.
La inmunofluorescencia se realiza con un anígeno en la forma de amastigote y los

resultados para la leishmaniasis cutánea son buenos, los títulos decrecen con la
quimioterapia. Una variante es utilizar el promastigote como antígeno y aunque los
resultados son satisfactorios es una prueba muy compleja de realizar.
Recientemente se ha utilizado la prueba de aglutinación, empleando las formas de

promastigote de las tres especies de leishmaniasis; la prueba es más sensible que la
173
Inmunofluorescencia para la leishmaniasis americana.
Los títulos de aglutinación directa que se consideran positivos para cada uno de
los tipos de leishmanias son:
1. L.braziliensis 1:32
2. L.donovani 1:64
3. L.trópicalis 1:128
MALARIA
La inmunología parece brindar una esperanza y apoyo esencial al problema de la
malaria, tanto para su prevención como para su diagnóstico seroepidemiológico.
Dos pruebas han sido utilizadas para el diagnóstico de la malaria, una de ellas, la
fluorescencia indirecta, tiene una sensibilidad del 95%. Sin embargo se deben usar los
antígenos homólogos debido al comportamiento del Plasmodium. Se sabe que títulos
de 1:16 para esta técnica son considerados como positivos. Otro método es la
hemaglutinación indirecta, la cual emplea antígenos de P. cynomolgy el título
considerado positivo para esta prueba es superior o igual a 1:16.
HELMINTIASIS
CISTICERCOSIS
La cisticercosis es tanto un problema en medicina humana como veterinaria, ya sea
por las lesiones que en sí causa la trasmisibilidad accidental a que se está expuesto o
a las pérdidas económicas.
Varias pruebas son usadas para el diagnóstico de la lesión: la fijación de complemento,

la hemaglutinación indirecta, la doble difusión y la contrainmunoelectroforesis.
La mayoría de ellas carecen de sensibilidad y especificidad comprensible por la

complejidad morfológica del estado larvatorio.
Quizá la prueba que mejor correlación ofrece entre el estado clínico del paciente y los
resultados del laboratorio es la contrainmunoelectroforesis.
TOXOCARIASIS
Las pruebas para toxocariasis han tenido una sensibilidad que no sobrepasa el 70% y
además su especificidad es baja.
Las pruebas más utilizadas son la hemaglutinación indirecta y floculación con

bentonita.
Otros Helmintos
Para otras helmintiasis como son las esquistomiasis, equinococosis, triquinosis,

paragominiasis o ascariasis existen pruebas immunológicas para su diagnóstico, pero
o estas enfermedades no se presentan hasta el momento en Colombia o como en el
caso de 1a ascariasis que aunque se presenta en Colombia, estas ayudas diagnósticas
174
son menos útiles que los métodos tradicionales.
INTRADERMORREACCION
Capítulo aparte son las pruebas intradérmicas que se utilizar en clínica para
diagnóstico o evolución epidemilógica de alguna de las enfermedades ya mencionadas
y para otras patologías, las cuales tienen el carácter experimental.
En las siguientes enfermedades las pruebas intradérmicas han sido evaluadas y tienen
alguna aplicación:
Leishmaniasis
Toxoplasmosis
Clonorchiasis
Equinococosis
Paragonomiasis
Esquistosomiasis
Triquinosis.
En forma experimental se han desarrollado pruebas por las siguientes entidades:
Amibiasis
Ancylostomiasis
Ascariasis
Toxocariasis
Filariasis
Fascioliasis
En nuestro medio la utilización de las pruebas intradérmicas son de muy poco interés,
no solo por las condiciones epidemiológicas del país, sino por su utilidad en
comparación con otras pruebas y otros análisis de práctica común.
175
176
177
CUADRO COMPARATIVOS
178
PARASITOSIS MAS COMUNES
179
180
181
DIAGNOSTICO SEGÚN LAS CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DE

PARASITOS
TECNICAS DE DIAGNOSTICO DE CHAGAS
182
183
184
EXAMEN DE BIOPSIAS DEL TUBO DIGESTIVO

Las biopsias que son útiles para la búsqueda de parásitos son las obtenidas del antro
pilórico, duodeno y recto mediante endoscopías.
Los parásitos diagnosticados frecuentemente en biopsias del antro-pilórico y del
duodeno son Strongyloides stercoralis y Giardia lamblia, menos frecuente es la
observación de coccidias intestinales como Cryptosporidium y Cyclospora.
Las biopsias de ulceraciones del intestino grueso muestran Entamoeba histolytica o
Balantidium coli.
Las piezas operatorias que son objeto de examen histológico pueden demostrar la
presencia de parásitos intestinales, por ejemplo: Enterobius vermicularis adultos en la
luz del apéndice o Ascaris lumbricoides en una obstrucción mecánica de intestino, vías
biliares o conducto pancreático.
Recomendaciones
 La búsqueda de parásitos intestinales en cortes histológicos obtenidos por
biopsia o necropsia no requiere, en general, de técnicas de coloración
especiales.
 La coloración de hematoxilina-eosina es útil, aunque generalmente no es posible
reconocer la morfología del parásito, pues el corte microscópico afecta su
integridad.
 Las piezas anatómicas pueden conservarse en formol al 10% para ser usadas
como piezas de museo o muestras de referencia.
185
PREPARACION DE REACTIVOS
Ac. acético 5%
Se disuelven 5 ml de acido acético en 100 ml de agua destilada y se guarda en frascos
con tapón hermético no metálico.
Acido acético 36%

Se disuelven 36 ml de acido acético en 100 ml de agua destilada y se guarda en
frascos con tapón hermético no metálico.
Ac. fénico 75%

Se disuelven 5 ml de acido fénico en 100 ml de agua destilada y se guarda en frascos
Acido tricloroacético 5%
Se disuelven 5 ml de acido tricloacetico e se llevan a 100 ml de agua destilada y se
guarda en frascos con tapón hermético no metálico.
Alcohol ácido
Ácido clorhídrico (HCl) 3.0 ml
Etanol (95%9 97.0 ml
Primero se vierte el etanol y se le agrega después el HCl; la reacción provoca
calor.
Alcohol, formaldehído, ácido acético (AFA)

Reactivos
Etanol (95%) 30.0ml
Formaldehído 10.0 ml
Agua destilada 50 ml
Ácido acético glacial 10.0ml
La mezcla de etanol, formaldehído y agua destilada dura varios meses. Cuando
se agrega el ácido acético dura un mes.
Azul de metileno alcalino de Loêffler

Solución A
Azul de metileno 0.3g
Etanol (95%) 30.0 ml
Solución B
Hidróxido de potasio (0.10% peso) 100ml
186
Buffer fosfato (PBS) 0.01 M pH 7.2
Na2HP0412 H20 ...................................................... 2,60 g

Na Na2P04 H20 ....................................................... 0,38 g
NaCl....................................................................... 8,38 g
Completar el agua a ..................................... 1000,00 mL
Carbolfucsina
Solución A
Fucsina básica 0.3g
Etanol (95%) 10.0 ml
Solución B
Fenol (cristales fundidos) 5.0g
Agua destilada 95.0ml
Se mezclan las dos soluciones y antes de su uso se dejan reposar una semana
Cloruro de sodio 2%
Se pesan 20 g NaCl, se disuelven en agua destilada y se completa el volumen a 1000
ml en matraz volumétrico
Cloruro férrico 3%
Se disuelven 3 ml de cloruro férrico en 100 ml agua destilada y se guarda en frascos
Colorante de wright
Reactivos:
Colorante de wright en polvo
Alcohol metílico absoluto, libre de acetona.
Procedimiento:
Se pesan 0.60 grs. de colorante de wright y se disuelven en 360 ml de alcohol
Fijador de Shaudinn
Alcohol etílico 95%......................................1 parte
Solución saturada cloruro mercurio( disolver 9 gramos de cloruro de mercurio en
205 ml de agua destilada)…………….…..2 partes.
Antes de usar agregue 5 ml de acido acético glacial a 100 ml de la solución
fijadora.
Formaldehído 10%
Se disuelven 10 ml de formaldehído en 90 ml de agua destilada y se guarda en frascos
Formaldehído 40%
Se disuelven 40 ml de formaldehído en 60 ml de agua destilada y se guarda en frascos
187
HCl 5%
Se disuelven 5 ml de acido clorhídrico en 100 ml de agua destilada y se guarda en
frascos con tapón hermético no metálico.
Hematoxilina férrica
Solución concentrada A
Hematoxilina 10.0 g
Etanol absoluto 1000.0ml
Solución concentrada B
Sulfato ferroso de amonio 10.0g
Sulfato férrico de amonio 10.0g
Ácido clorhídrico 10.0 ml
Agua destilada 1000.0 ml
Soluciones se almacenan a temperatura ambiente y su vida media es 6 meses.
Solución de trabajo
Solución concentrada A 15ml
Solución concentrada B 15ml
La solución de trabajo tiene vida media de 7 día
Hidróxido de sodio NaOH 3%

Se pesan 3 g de hidróxido de sodio lo más rápido posible para evitar la hidratación y la
alteración del peso, se lleva 100 ml de agua destilada, se agita para homogenizar la
solución. Se guarda en un FRASCO CON TAPON DE CAUCHO. NO SE DEBE
UTILIZAR FRASCO CON TAPON ESMERILADO, pues los hidróxidos de sodio
disuelven el vidrio y se sellan los frascos.
Hidróxido de sodio - NaOH 10%

Se pesan 10 g de hidróxido de sodio lo más rápido posible para evitar la hidratación y
la alteración del peso, se agregan 100 ml de agua destilada, se agita para homogenizar
la solución. Se guarda en un FRASCO CON TAPON DE CAUCHO. NO SE DEBE
UTILIZAR FRASCO CON TAPON ESMERILADO, pues los hidróxidos de sodio
disuelven el vidrio y se sellan los frascos.
Lugol parasitológico
Solución madre
Se disuelven 10 g de yoduro de potasio en 100 ml de agua destilada y en seguida se
agregan 5 g de yodo cristaloide, se agita constantemente para que se disuelva la
mayor cantidad posible, se guarda en frasco ámbar. No importa que quede exceso
de yodo en el fondo; esto se hace para que la solución permanezca con la
concentración deseada durante mucho tiempo e inclusive se puede reintegrar el
volumen con adición de agua destilada.
Solución de trabajo de lugol. Se mezclan volumen a volumen solución madre de
lugol y agua destilada. Se sugiere evitar los frascos goteros con bulbo de caucho
porque el lugol los destruye rápidamente, es mejor utilizar frascos goteros especiales
con tapón esmerilado
188
Merthiolate-yodo-formaldehído (MIF)
Solución concentrada:
Tintura de merthiolate 200.0ml
Formaldehído USP 25.0 ml
Glicerina 5.0 ml
Agua destilada 250.0 ml
Solución de yodo (lugol):
Yoduro de potasio 10.0g
Yodo cristaloide 5.0g
Agua destilada 100.0ml
Solución de trabajo:
Solución concentrada 2.35 ml
Solución de yodo 0.15 ml
La solución de trabajo se prepara en el momento en que se va a preservar la
muestra. En un recipiente se mezcla la muestra de matera fecal con la solución de
trabajo, pero conservando una relación de 1:3-5 (muestra: MIF).
PVA (alcohol polivinilico)
PVA 10 g
Alcohol etílico 62,5 ml
Cloruro de mercurio,acuoso saturado 125 ml
Cloruro de Mercurio 110 g
Agua destilada 1000 ml
Ácido acético glacial 10 ml
Glicerina 3 ml
Preparación
1 - Mezclar los ingredientes líquidos.
2- Agregar el PVA (no agitar)
3- Cubrir el erlenmeyer con papel aluminio, dejarlo toda la noche en

contacto.
4- Al día siguiente calentar hasta 75º C. Luego agitar hasta obtener una
solución homogénea ligeramente lechosa (30 segundos)
189
Reactivo de Benedict: solución de 17.3 g de sulfato de cobre cristalizado, 173 g de

citrato de sodio o potasio, 200 g de carbonato de sodio en 1.000 ml de agua destilada.
SAF
Acetato de sodio 1,5 g

Ácido acético glacial 2 ml
Formaldehído al 40% 4 ml
Agua destilada 92,5 ml
Soluciones alcohólicas a partir de alcohol de 95%.

El alcohol del comercio viene a una concentración de 95%; como resulta
demasiado caro el uso de alcohol absoluto para hacer soluciones alcohólicas de
concentraciones variables, se puede partir de 95%, si se toma en consideración la
siguiente regla. Es necesario recordar que el alcohol tiene qué ser puro de caña,
pues el desnaturalizado, por contener sustancias que lo hacen tener mal sabor, hay
interferencia en los procesos de tinción.
Alcohol 70%: Se mezclan 70 volúmenes de alcohol de 95% y 30 volúmenes de
agua destilada.
Solución buffer de fosfatos

Reactivos:
Fosfato monopotásico
Fosfato disódico
Procedimiento:
Se pesan 0.49 grs. de fosfato monopotásico y 1.14 de fosfato di sódico, se
mezclan y se disuelven hasta completar un volumen de 1000 ml en un matraz
volumétrico.
Solución de trabajo Giemsa
Reactivos:
Colorante de Giemsa en polvo
Glicerina QP.
Alcohol metílico
Solución buffer de fosfato
Procedimiento:
Primero se va a realizar la solución madre de giemsa. Se pesan 3.8 grs. de
giemsa en polvo, se coloca en un mortero de 500 ml, se agregan 250 ml de
glicerina, mientras que con el pistilo se mezcla con mucho cuidado hasta que
190
PRACTICAS DE PARASITOLOGIA
homogeneice y no haya grumos. Se agregan 250 ml de alcohol metílico absoluto

libre de acetona. Se dejan 100 ml de alcohol sin incorporar
La mezcla se vacía en un frasco oscuro, con el resto del alcohol se enjuaga el
mortero y el pistilo de tal manera que no queden restos del colorante.
Después de haber realizado la solución madre de giemsa, se mezcla volumen a
volumen con la solución buffer de fosfato.
Solución de piramidón 3%
Se disuelven 3 ml de piramidon en 100 ml destilada y se guarda en frascos con tapón
hermético no metálico.
Sol. Salina 0.9%

Se pesan 9 g NaCl, se disuelven en agua destilada y se completa el volumen a 1000 ml
en matraz volumétrico.
Solución de verde de malaquita y glicerina

Se mezclan 1 ml de solución de verde de malaquita, 100 ml de glicerina pura y 100 ml
de agua, se homogenizan y se guarda la solución, que es estable durante mucho
tiempo, en un frasco ámbar de boca ancha y tapa de baquelita. Se recomienda cortar
los cuadros de celofán y mantenerlos dentro del frasco con la solución de trabajo y así,
siempre tendremos el material listo
Solución 0.1 N de hidróxido de sodio

Se pesan 4 g de hidróxido de sodio lo más rápido posible para evitar la hidratación y la
alteración del peso, se coloca en un matraz volumétrico de un litro. Se agregan unos
100 a 200 ml de agua y se disuelve. Se afora el matraz a la marca y se agita para
homogenizar la solución. Se guarda en un FRASCO CON TAPON DE GAUCHO. NO
SE DEBE UTILIZAR FRASCO CON TAPON ESMERILADO, pues los hidróxidos de
potasio y sodio disuelven el vidrio y se sellan los frascos.
Sulfato de zinc 33%

Sulfato de zinc…………… 33 grs.
Agua destilada…………….aforar a 100 ml.
 Disolver el sulfato de zinc en el agua destilada en un matraz de vidrio
adecuado utilizando un agitador magnético.
 Ajustar a la gravedad específica (δ) a 1.18 por la adición de sulfato de zinc o
agua destilada, según sea el caso.
 En el caso de muestras frescas formalinadas usar sulfato de zinc con
gravedad especifica (δ) de 1.20.
 Aforar y guardar el frasco de vidrio con tapón de rosca.
 Marcar el nombre del reactivo, la concentración y la fecha de caducidad de
doce meses posterior a la fecha de elaboración.
 Almacenar a 4 ºC.
 Checar la gravedad especifica ante de usar.
Verde de malaquita 3%
Se disuelven 3 g de verde de malaquita en 100 ml de agua y se guarda en frasco
ámbar con tapón esmerilado.
Xilol 25%
Se disuelven 25 ml de xilol en 100 ml de agua destilada y se guarda en frascos con
tapón hermético no metálico.
191
GLOSARIO DE TÉRMINOS
AGENTE ETIOLOGICO: Factor o elemento de naturaleza viva o inerte, que inicia o
perpetúa un proceso morboso.
AGENTE INFECCIOSO: Organismo (bacteriano, rickettsioso, viral, micótico,
protozoario o helmíntico) capaz de producir una infección o una enfermedad infecciosa.
ANTROPOFILIA: Apetencia selectiva de ciertos artrópodos por la sangre humana. (Ej.:
Pediculus capitis).
ARACNIDO: Artrópodo con 4 pares de patas.
ARTROPODOS: Invertebrado con patas articuladas y esqueleto quitinoso.
AXOSTILO: Estructura rígida de posición axial que constituye el sostén de algunos
protozoos flagelados.
BIOTOPO: Lugar o área donde vive una especie. Está caracterizado por factores del
suelo, climáticos y biológicos.
BOTRIUM: Surco longitudinal que sirveun como elemento de fijación en el escólex de
cestodos seudofilideos. Plural: botria.
CALCIFICACION METASTASICA: Calcificación patológica que se produce en tejido
necrosado.
CICLO EVOLUTIVO: Etapas secuenciales del desarrollo de un parásito. Si existen
fases sexuales, comprende desde el cigoto hasta la generación de gametos, o desde el
huevo hasta el estado adulto.
CICLO DE TRANSMISION: Etapas por las cuales pasa un parásito desde el huésped
infectado hasta un huésped susceptible.
COLONIA: Grupo de organismos unicelulares que viven en asociación, a menudo
derivado de una sola célula.
COMENSALISMO: Relación simbiótica en la cual una especie, el comensal, vive a
expensas de otra especie, el hospedero, sin ocasionarle ningún daño.
CONTAMINACION: Presencia de agentes infecciosos en objetos (ropa, instrumentos,

juguetes), sustancias inanimadas (agua, leche, alimentos) o en la superficie de
organismos vivos.
CTENIDIO: Peine característico de la cabeza y porción anterior del tórax en las pulgas.
CONTACTO: Individuo (humano o animal) que ha estado en asociación con un
individuo infectado, teniendo la oportunidad de adquirir la infección.
CONTAGIO: Transferencia directa del agente infeccioso desde la fuente de infección al

nuevo huésped.
CONTROL: Conjunto de medidas para reducir la prevalencia o incidencia de una
enfermedad o infección.
DEPOSICION: Evacuación intestinal.
192
DEYECCION: Descarga o deposición de materias excrementicias, especialmente

fecales.
DIARREA: Eliminación de deposiciones con mayor contenido de agua que lo normal
(contenido normal de agua: 85%).
DISENTERIA: Evacuación frecuente de deposiciones, generalmente en escasa
cantidad las cuales contienen sangre y mucosidades. Por lo general traduce
inflamación del colon y se acompaña de dolor abdominal, pujo y tenesmo.
ECTOPARASITO: Parásito que vive en la superficie externa del hospedero.
EMBRIOFORO: Cubierta que rodea a la oncósfera de los platelmintos.
ENDOPARASITO: Parásito que vive en el interior del hospedero.
ENFERMEDAD: Conjunto de fenómenos que se producen en un organismo a

consecuencia de la acción de una causa patógena, reaccionando contra ella.
ESCOLEX: Organo de fijación o "cabeza" de un cestode.
ESTROBILA: Conjunto de proglótidas de un cestode.
EXUVIA: Muda resultante de las ecdisis.
ECOLOGIA: Estudio de las relaciones recíprocas entre los organismos y las regiones
donde viven.
EMBRIOFORO: Membrana (s) que envuelve (n) al estado embrionario de los cestodes
(oncosféra), cuyo conjunto constituye el huevo.
ENCUESTA: Conjunto de acciones destinadas a lograr una información sobre un

objetivo determinado.
ENCUESTA EPIDEMIOLOGICA: Conjunto de métodos usados para obtener datos que
sirvan para caracterizar un fenómeno en una comunidad. Orienta y permite obtener
información sobre la prevalencia de casos clínicos, portadores, contactos y
susceptibles, o bien, sobre el factor o factores causales o vinculables al proceso que se
investiga.
ENDEMIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad humana determinada
dentro de un área geográfica.
ENZOOTIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad animal determinada

dentro de un área geográfica.
EPIDEMIA: Producción, en una comunidad o región, de casos similares en un
determinado período, en número claramente superior a la frecuencia habitual y
derivados de una fuente común o por diseminación.
EPIZOOTIA: Lo mismo que epidemia, pero referido a animales.
INESPECIFICIDAD. Porcentaje de casos en que la reacción resulta falsamente

positiva.
ESPOROGONIA: Fase de reproducción sexuada de los esporozoítos.
ESPOROZOO: Protozoo parásito que se reproduce por esporogonia.
193
ESPOROZOITO: Elemento resultante de la esporogonia de los esporozoos.

ESQUIZOGONIA: Ciclo de reproducción asexuada de los esporozoos.
ESQUIZONTE: Elemento resultante del ciclo esquizogónico.
ESTROBILA: Conjunto total de proglótidas que constituyen el cuerpo de un cestode.

EXCRETAS: Productos de desperdicios líquidos y sólidos procedentes de seres
humanos y de animales.
FOMITE: Objeto (agua, aire, toalla, etc.) que contiene elementos infectantes y
pasivamente puede ser vehículo mecánico en su transmisión indirecta.
FORMA INFECTANTE: Fase del parásito capaz de infectar el huésped.
FRECUENCIA: Número de veces que se ha verificado o registrado un suceso o una
característica determinada en una población.
FUENTE DE INFECCION: Persona, animal, vegetal o sustancia desde la cual el agente
infeccioso pasa al huésped.
GAMETOGONIA: proceso de reproducción sexuada de los esporozoos.
GEOHELMINTIASIS: Infecciones trasmitidas por helmintos que requieren del suelo y
ciertas condiciones ambientales favorables para llegar a ser infectantes.
HABITAT: Lugar donde en forma natural vive un ser biológico.
HECES: Materias fecales.

HELMINTO: Nombre genérico de los vermes parásitos y que abarca acantocéfalos,
nematodos, cestodos y trematodos.
HUESPED: Persona o animal que alberga a un agente o comensal. También suelen
utilizarse los términos hospedador, hospedero y mesonero.
HUESPED DEFINITIVO: Hospedero en el cual el parásito alcanza su madurez sexual.
HUESPED INTERMEDIARIO: Hospedero en el cual el parásito desarrolla parte de su
ciclo evolutivo, sin alcanzar su madurez sexual.
ICTIOFAGO: Animal que se alimenta de peces.
IMAGO: Artrópodo adulto. Se usa especialmente en el caso de insectos.

INFECCION: Entrada y desarrollo o multiplicación de un agente infeccioso en el
organismo de una persona o animal.
INFESTACION: Alojamiento, desarrollo y reproducción de artrópodos en la superficie
del cuerpo, pelos, ropas objetos e incluso ambientes. Se emplea también en el caso de
roedores.
INSECTO: Artrópodo con 3 pares de patas.

INCIDENCIA: Número de casos nuevos de una enfermedad que se presentan durante
un período determinado, en relación con la población donde ocurren. Generalmente se
expresa en forma de tasa.
194
INSECTICIDA: Sustancia química, natural o sintética, utilizada en el exterminio de

artrópodos. Se puede aplicar en forma de polvo, líquido, pulverizado, o aerosol.
LARVA: Forma inmadura en el ciclo evolutivo de helmintos y artrópodos.
LIENTERIA: Diarrea que contiene alimentos sin digerir.
LETALIDAD: Relación entre el número de casos mortales y el número total de casos de

una determinada enfermedad.
LETRINA: Instalación para la recepción de excretas humanas.
MECANISMO DE TRANSMISION: Las circunstancias mediante las cuales el parásito
pasa de un huésped a otro.
MEROZOITO: Célula resultante del proceso de esquizogonia o división múltiple que

presentan algunos protozoos.
METAZOO: Animal Pluricelular.
MORBILIDAD: Relación entre el número de afectados de una enfermedad determinada
y la población total de una zona.
MORTALIDAD: Relación entre el número de muertos por todas las causas y la

población total de una zona.
MUDA: (ECDISIS): Vaina o tegumento que envuelve a artrópodos y a algunos gusanos
(nematodos) y que en las etapas juveniles, de crecimiento, se desprende dando lugar a
una nueva envoltura que puede desprenderse a su vez o ser definitiva.
MUTUALISMO: Tipo de simbiosis en la cual se benefician recíprocamente hospedero y
simbionte.
MYASIS: Parasitación de órganos o tejidos humanos o animales por larvas de mosca.
NEMATELMINTO: Son gusanos de sección redonda (algunos son parásitos).
NINFA: Estadios juveniles tanto de insectos con metamorfosis incompleta como de

ácaros y garrapatas.
ONCOSFERA: Larva con seis ganchitos que emerge de los huevos de los eucestodos.
También se llama hexacanto.
OOQUISTE: Forma quística que contiene el cigoto resultante de la esporogonia en los
Apicomplexa y los cuales pueden estar cubiertos por una envoltura translúcida
(Isospora) o estar desnudos (Plasmodium).
OOTECA: Receptáculo elaborado por las hembras de algunos artrópodos en cuyo
interior depositan sus huevos (Ej.: cucarachas y arañas).
OPERCULO: Cubierta o tapa de los huevos de algunos platelmintos e insectos.
PARASITO: Ser que vive a expensas de otro de distinta especie llamado huésped y al
cual puede producir daño de magnitud variable.
PARASITO ACCIDENTAL: Parásito que se encuentra en un huésped no habitual.
195
PARASITO FACULTATIVO: Es aquel que desarrolla algunos protozoarios y hongos

que viven sobre materias orgánicas en descomposición, pero en ocasiones parasitan
sobre heridas, ulceraciones, etc.
PARASITO OBLIGADO: Es aquel que necesariamente en alguna etapa o
permanentemente ejerce su acción parasitaria.
PARASITO PERIODICO: Parásito que cumple parte de su ciclo en el ambiente y en el
huésped.
PARASITO PERMANENTE: Parásito que vive toda su existencia en o sobre su

hospedero.
PARASITO TEMPORAL: Parásito que intermitentemente depende de un hospedero
para subsistir y luego lo abandona.
PERIODO PREPATENTE: Etapa de la infección parasitaria comprendida desde el
momento de la infección hasta la aparición de la sintomatología o la presencia del
parásito.
PLATELMINTO: Gusano de sección plana, todos son parásitos (excepción planarias).
PORTADOR (INFECTADO ASINTOMATICO): Individuo que alberga un agente
infeccioso específico, sin presentar manifestaciones de enfermedad y que puede ser
fuente de infección para otros individuos.
PROGLOTIDA: Segmento de la estróbila de los cestodos, la cual contiene los órganos
reproductores masculinos y femeninos.
PROTISTA: Agente biológico con caracteres del reino vegetal y animal (hongos,
bacterias y virus).
PROTOZOO: Animal unicelular.
PERIODO DE INCUBACION: Intérvalo que transcurre entre la infección de un sujeto
susceptible (persona o animal) y el momento que presenta las primeras
manifestaciones de la respectiva enfermedad.
PESTICIDAS: Sustancias químicas que se usan para combatir distintas plagas (Ej.:
insecticidas, rodenticidas, moluscocidas, herbicidas).
PREDADOR: Ser que ataca y destruye animales o plantas para obtener alimento;
habitualmente organismos más pequeños y más débiles que constituyen su presa.
PREVALENCIA: Número de casos de una infección o enfermedad que existe en un
grupo específico de población en un momento determinado.
PREVENCION: Medidas para proteger al hombre o animales contra una enfermedad.

Pueden ser independientes de las destinadas al control.
PROFILAXIS: Conjunto de medidas que sirven para prevenir o atenuar enfermedades o
dolencias, o sus complicaciones o secuelas.
PUPA: Etapa en la metamorfosis de los dípteros, caracterizada por la existencia de un
pupario en cuyo interior se producen importantes cambios que culminan con la
formación del imago o insecto adulto.
196
QUISTE: Forma inmóvil de resistencia y de multiplicación, envuelta por una doble

membrana formada por los protozoos.
RESERVORIO (DE AGENTES INFECCIOSOS): Hombre, animal, planta, suelo o
materia orgánica inanimada, en los cuales el agente infeccioso vive y se multiplica, y de
los que depende principalmente para su subsistencia, de manera que pueda ser
transmitido a un huésped susceptible.
RESISTENCIA: Conjunto de mecanismos que algunas especies tienen para
defenderse de la invasión o multiplicación de agentes patógenos, o contra los efectos
nocivos que pueden causar los productos tóxicos, ya sea producidos por éstos o de
otra procedencia. (Ejs.: resistencia del hombre a algunos microorganismos; resistencia
de algunos microorganismos a antibióticos y quimioterápicos; resistencia de algunos
artrópodos a insecticidas).
SANEAMIENTO: Aplicación de procedimientos especiales para procurar que los
factores del medio resulten impropios para mantener o vehiculizar agentes o causas de
enfermedades.
SANEAMIENTO AMBIENTAL BASICO: Adecuado suministro de agua potable,
disposición de excretas y eliminación de basura.
SENSIBILIDAD (DE UNA REACCION INMUNODIAGNOSTICA): Porcentaje de
resultados positivos encontrados en individuos afectados por una determinada
infección.
SEROLOGIA (REACCION): Reacción inmunodiagnóstica de laboratorio que se practica
en el suero de un sujeto sospechoso con el objeto de detectar anticuerpos y/o
antígenos producidos frente a una determinada infección.
SIMBIOSIS: Condición en la cual dos seres vivos de diversas especies, habitualmente
(pero no necesariamente) viven juntos, con beneficio para uno o para ambos.
SUSCEPTIBLE: Persona o animal que carece de resistencia contra un agente
patógeno y que en consecuencia puede contraer la enfermedad si se expone a la
infección por dicho agente.
TROFOZOITO: Forma vegetativa activa y que se alimenta, entre los protozoos.
VECTOR: organismo animal, generalmente artrópodo, que puede transportar
activamente un agente desde la fuente infectante hasta un susceptible.
VECTOR MECANICO: Es el vector que lleva en el exterior de su cuerpo o en interior
agentes patógenos.
VIA DE INFECCION: Sitio (s) a través de los cuales se introduce el agente etiológico en
el organismo del huésped.
XENO: Huésped.
ZOONOSIS: Infección que se transmite en forma natural entre el hombre y animales
vertebrados y viceversa
197
ALGORITMOS DIAGNOSTICOS
198
199
200
201
ALGORITMO DIAGNOSTICO TRYPANOSOMIASIS
202
DIAGNOSTICO TRYPANOSOMIASIS CONGENITA
203
204
205
PUZZLE – PARASITOLOGIA
m n a b e o m a t n e v s
o m u i d o m s a l p i t
a a t r i a t o m a l v r
m x r s r r d i a a a a o
s j i a g a h c r u m x n
a s c a r i s o c z b q g
l l h n q g c l v i l u y
p e u a r r t i l m i i l
o v r n e c a t o r a s o
x o i t e n i a y e v t l
o t s i n i m o h c s e d
 entamoeba  necator
 plasmodium  triatoma
 quiste  coli
 cruzi  strongyloides
 huevo  chagas
 nana  giardia
 toxoplasma  ascaris
 hominis  vivax
 tenia  lamblia
 trichuris  stercoralis
206
EXAMEN PRACTICO:………………………….
COLOQUE EL NOMBRE DE LA ESTRUCTURA(s) PARASITARIA(s) QUE
OBSERVA EN EL MICROSCOPIO ( CAMPO O PUNTERO ) Y/O METODO O
COLORACION UTILIZADA (SEGÚN INDIQUE EL DOCENTE)
1. ……………………………………………………………………………………………
2. ……………………………………………………………………………………………
3. ……………………………………………………………………………………………
4. ……………………………………………………………………………………………
5. ……………………………………………………………………………………………
6. ……………………………………………………………………………………………
7. ……………………………………………………………………………………………
8. ……………………………………………………………………………………………
9. ……………………………………………………………………………………………
10. ……………………………………………………………………………………………
NOMBRE ALUMNO : ……………………………………………………………………..
FECHA : …………………………… NOTA :
………………………………
207
ATLAS PARASITOS
208
209
210
211
212
213
214
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17. Organización Mundial de la Salud. Métodos básicos de laboratorio en
parasitología. Ginebra: OMS; 1991.
18. Organización Mundial de la Salud. Medios auxiliares para el diagnóstico de las

parasitosis intestinales. Ginebra: OMS; 1995.
19. Pierce G. Health Issues of International Travelers. Infectous Disease Clinics of

North America 1992 Vol 6 número 2. Philadelphia. Saunders Company
Philadelphia.
20. Rose N. R., Friedman, H.: Manual of clinical Inmunology, American Society for
Microbiology, Washington, 1986.
21. Shore L, Lawrence R. Diagnostic Parasitology. Manual of clinical laboratory. C.V
Mosby Co.; 1975.
22. Tiersen D. and col. Clinical and Economic Practice of Quality, Control Clinics in
LaboratoryMedicine. December 1986. Saunders Company. Philadelphia.
23. Zaman, v. 1982. Atlas de Parasitología Clínica. Ed. Panamericana, México,
216

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Universidad Peruana los Andes

Facultad de Ciencias de la Salud

Profesor: MG: Freddy Orihuela Villar

Ejemplo de reporte de Examen parasitológico 20

1. El alumno deberá llegar puntual en su horario de clase.

3. El alumno debe de asistir al laboratorio con su Manual de Practicas

5. El alumno debe contar con su material necesario para la práctica de laboratorio

7. Durante la práctica de laboratorio el alumno debe usar guantes y mascarilla.

8. Queda estrictamente prohibido comer, beber, llevarse cosas a la boca y fumar en el

Las variables agente, huésped y ambiente (tríada ecológica) son fundamentales

Las técnicas para diagnosticar PARASITOS se pueden dividirse:

I. TECNICAS DIRECTAS permiten observan al parásito ya sea como

Diagnóstico de hemoparasitos e histoparasitos

 PCR Trypanosoma cruzi. Se basa en la

El Pneumocystis carinii actualmente se diagnostica por el examen de muestras de lavados

CLASE ORDEN EJEMPLOS

Crustáceos Copepodo Cyclops

En determinados casos las heces deben necesariamente remitirse sin

a. Muestra en formol al 10%: se recogen durante 7 u 8 días. Se realiza el

GUSANOS Y OTROS PARÁSITOS MACROSCÓPICOS

- Biopsia: con un sacabocados (biopsy punch), estéril de 3-4 mm de diámetro se

- Aspirado de la lesión: con una jeringuilla de 1 ml, se puede inocular un pequeño

MUESTRAS PARA PRUEBAS DE PCR

“Esta información facilitará un mejor diagnóstico clínico”

Informar que no se observaron quistes, trofozoítos, ni huevos de parásitos.

FECHA : xx/xx/xxxx FIRMA RESPOSANBLE

Los trofozoitos y quistes de protozoos, huevos o larvas de helmintos y ooquistes de

- Examen Microscópico: En general se emplean dos métodos:

 Este método permite observar formas vegetativas de protozoarios

Método de enriquecimiento o concentración:

- Sirven las heces recién emitidas y evacuadas espontáneamente

Con suero fisiológico (SSF): Para observar trofozoitos de protozoos y larvas de

1. Con un aplicador de madera, tome una pequeña cantidad de heces y

2. Cubra la preparación con una laminilla cubreobjetos y observe al

Con lugol: Para observar la morfología de los parásitos. Colorea en forma

1. Repita el mismo procedimiento anterior usando lugol parasitológico.

2. Examine en un microscopio con objetivo de 10X y 40X.

Forma de observar la lámina con muestra en el microscopio

-Tejido conjuntivo: las fibras se entrecruzan en una red muy fina.

EXISTEN MUCHÍSIMAS FIGURAS MICROSCÓPICAS DE RESTOS QUE NO

PUEDEN SER IDENTIFICADAS CON PRECISIÓN Y SERÍA UNA TAREA INÚTIL

TRATAR DE RECONOCERLAS. LO MÁS IMPORTANTE ES PODER

DIAGNOSTICAR CORRECTAMENTE LOS DIFERENTES PARÁSITOS QUE

PUEDEN HALLARSE EN EL INTESTINO HUMANO.

8. 9. 10. 11. 12. 13. 14.

15. 16. 17. 18. 19. 20.

1. gotas de grasa 11) acido úrico

2. células vegetales en empalizada 12) fosfato calcico neutro

3. pared de célula vegetal 13)leucina

4. hongos – levaduras 14)ácidos grasos

5. pelo vegetal 15)oxalato de calcio

6. grano de polen 16)colesterol

7. fibra de algodón 17) cristales de charcot leyden

0 8. granos de almidón 18) carbonato de calcio

9. estructura vascular vegetal 19) fosfato amonio – magnesio

10. células vegetales 20) cistina

ELEMENTOS DE ORIGEN VEGETAL ELEMENTOS DE ORIGEN MINERAL

Causas de error o resultados poco satisfactorios:

 Esperar más de una hora antes de buscar trofozoítos de protozoos

Para asegurar un control de calidad:

 Verificar que la solución salina esté limpia, sin contaminación de bacterias,