MARCO TEÓRICO

La glucosa es un azúcar que es utilizada como fuente de energía para el organismo, esta se
incrementa en la sangre al ingerir alimentos diferentes al agua, lo que se consume desaparece de la
sangre mediante el empleo de una hormona reguladora producida por el páncreas conocida como
insulina, cuando ocurre lo contrario se secreta otra hormona llamada glucagón que permite
mantener los niveles de glucosa en sangre. El análisis de la glucosa permite medir la concentración
de esta presente en la sangre para la prevención o diagnóstico de enfermedades.

La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y

biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o
transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene
una cantidad conocida de la misma sustancia. La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e
infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia
química. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante
no puede producir ningún efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que éstas
absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a
nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas. La base de la espectrofotometría se centra
en dos leyes principalmente: Ley de Beer y ley de Lambert

Las radiaciones electromagnéticas pueden definirse como aquellos procesos en los que se emite
energía bajo la forma de ondas o partículas materiales y pueden propagarse tanto a través de un
medio material como en el vacío. Se diferencian unas de otras en el valor de su frecuencia. Cuanto
mayor es la frecuencia de una radiación, mayor es su energía.
Las radiaciones de alta frecuencia (superior a 1017 Hz) son ionizantes y cuando interaccionan con
la materia producen la ionización de los átomos de la misma, es decir, origina partículas con carga
(iones). Las radiaciones no ionizantes, de menor energía, no son capaces de ionizar la materia.

Espectro electromagnético es la distribución energética del conjunto de las ondas

electromagnéticas. Referido a un objeto se denomina espectro electromagnético o simplemente
espectro a la radiación electromagnética que emite (espectro de emisión) o absorbe (espectro de
absorción) una sustancia.

Clases de espectrometría

-Espectrometría de absorción se refiere a una variedad de técnicas que emplean la interacción de

la radiación electromagnética con la materia. En la espectrometría de absorción, se compara la
intensidad de un haz de luz medida antes y después de la interacción con una muestra

-Espectrometría UV-visible se refiere a técnicas donde se mide cuánta luz de una longitud de onda
particular (color) es absorbida por una muestra.
Se usa ampliamente en cálculos cualitativos, cuantitativos y estructurales. Por ejemplo, el ADN
absorbe luz en el rango ultravioleta (por eso la luz del sol es peligrosa), y por tanto la cantidad de
ADN en una muestra puede ser determinarse midiendo la absorbancia de la luz ultravioleta.

-Espectrometría de fluorescencia es un tipo de espectroscopia electromagnética que analiza la

fluorescencia de una muestra. Se trata de utilizar un haz de luz, por lo general luz ultravioleta, que
excita los electrones de las moléculas de ciertos compuestos y provoca que emitan luz de una menor
energía, generalmente luz visible (aunque no necesariamente).
Se utiliza en análisis bioquímicos, médicos, químicos y de investigación de compuestos orgánicos.
También se ha utilizado para diferenciar los tumores malignos de piel de los benignos. La
fluorescencia también puede utilizarse para reorientar los fotones.

- Espectrometría de rayos X es un conjunto de técnicas espectroscópicas para la determinación de

la estructura electrónica de materiales mediante el uso de excitación por rayos X

-Espectrometría de absorción atómica es una técnica para determinar la concentración de un

elemento metálico determinado en una muestra. Puede utilizarse para analizar la concentración de
más de 62 metales diferentes en una solución.

-Espectrometría de emisión es una técnica espectroscópica que analiza las longitudes de onda de
los fotones emitidos por los átomos o moléculas durante su transición desde un estado excitado a un
estado de inferior energía.

-Espectrometría de infrarrojos es un tipo de espectrometría de absorción que utiliza la región

infrarroja del espectro electromagnético.
Este se basa en el hecho de que los enlaces químicos de las sustancias tienen frecuencias de
vibración específicas, que corresponden a los niveles de energía de la molécula. Estas frecuencias
dependen de la forma de la superficie de energía potencial de la molécula, la geometría molecular,
las masas atómicas y, posiblemente, el acoplamiento vibracional.
Se utiliza ampliamente tanto en la industria como en la investigación científica, porque es una
técnica rápida y fiable para medidas, control de calidad y análisis dinámicos. Los instrumentos
actuales son pequeños y pueden ser transportados, incluso para tomar medidas de campo. Con los
avances en tecnología de filtrado computacional y la manipulación de los resultados, se pueden
medir con precisión las muestras en una solución (el agua produce una banda larga de absorbancia
en el rango de interés, lo que daría un espectro ilegible sin dicho tratamiento computacional).
Algunas máquinas incluso dicen automáticamente qué sustancia está siendo analizada a través de
miles de espectros de referencia almacenados en la memoria.

-Espectrometría infrarroja por transformada de Fourier es una técnica de análisis para obtener
el espectro infrarrojo con mayor rapidez.

-Espectrometría de resonancia magnética nuclear es una técnica que explota las propiedades
magnéticas de ciertos núcleos.

-Espectrometría de correlación es uno de los diversos tipos de espectrometría de resonancia

magnética nuclear (RMN) bidimensional.

-Espectrometría Raman es una técnica espectroscópica utilizada en física de la materia

condensada y también en química para el estudio de los modos vibracionales, rotacionales y otros
de baja frecuencia en un sistema.
La espectrometría Raman se utiliza comúnmente en química, ya que la información vibracional es
muy específica para los enlaces químicos de las moléculas. Por lo tanto, proporciona una huella
dactilar de la molécula que puede ser identificada. La región de huella digital de las moléculas
orgánicas está en el rango de 500-2000 cm -1. Otra forma de uso de la técnica es el estudio de
cambios en las uniones químicas, por ejemplo cuando un sustrato se añade a una enzima.
Los analizadores de gases Raman tienen muchas aplicaciones prácticas. Por ejemplo, se usan en
medicina para el seguimiento en tiempo real de las mezclas de gases respiratorios y la anestesia
durante la cirugía.
En física del estado sólido, la espectrometría Raman espontánea se utiliza para, entre otras cosas,
caracterizar los materiales, medir la temperatura, y encontrar la orientación cristalográfica de una
muestra. Al igual que ocurre con moléculas individuales, un material sólido tiene modos de fonón
característicos que pueden ayudar a identificarlo. Además, la espectrometría Raman se puede
utilizar para observar otras excitaciones de

Transmitancia se define como la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en determinada

cantidad de tiempo.

Absorbancia Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido, una parte de esta luz es
absorbida por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor cantidad de luz
absorbida, mayor será la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz será transmitida por dicho
cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la transmitancia son dos aspectos del mismo fenómeno.

Espectrofotómetro es un instrumento utilizado para determinar a qué longitud de onda la muestra

absorbe la luz y la intensidad de la absorción. Aunque varían en el diseño, todos los
espectrofotómetros consisten de una fuente de luz, un selector de longitud de onda, un contenedor
transparente en el cual se deposita la muestra, un detector de luz y el medidor

Componentes del espectrofotómetro:

-Cubetas de espectrofotometría: En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz
ultravioleta; en segundo plano, de plástico, para colorimetría (es decir, empleando luz visible).
-Fuente de luz: ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad,
direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas
son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y lámpara de
deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos.
-Monocromador: aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde
el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El
colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra
con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda
de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de
salida.
-Compartimiento de Muestra: Es donde tiene lugar la interacción, R.E.M con la materia (debe
producirse donde no haya absorción ni dispersisón de las longitudes de onda). Es importante
destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, en
base a sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la molécula de fundamental-excitado.
-Detector: es quien detecta una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio.
Hay de dos tipos:
a) los que responden a fotones
b) los que responden al calor
-Registrador: Convierte el fenómeno físico, en números proporcionales al analito en cuestión.

Ley de Beer declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentración en
la solución.
Ley de Lambert En la Ley de Lambert se dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto
depende de la distancia recorrida por la luz.

Espectro de absorción es la medida de la cantidad de luz absorbida por un compuesto en función

de la longitud de onda de la luz. En general, e irradia una muestra con una fuente de luz y se mide la
cantidad de luz transmitida a varias longitudes de onda, utilizando un detector y registrando el
fenómeno en un gráfico. Al contrario que en los ensayos químicos, la mayoría de las técnicas
espectroscópicas no son destructivas, es decir, no destruyen las muestras durante el análisis; se
pueden realizar diferentes tipos de espectros sin pérdida o perdiendo muy poco de muestra.