UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

EAP de Farmacia y Bioquímica

Clase 6: “Matriz intracelular y citoesqueleto”

Curso de Biología Celular

Dr. Jaime R. Sánchez Venegas

AÑO LECTIVO 2014-I
 CÉLULA EUCARIOTA
Toda célula eucariota, independiente de la función que realiza
tiene:

1- Membrana plasmática
Membrana
2- Citoplasma plasmática

A- Matriz intracelular o matriz citoplasmática o

endomatriz.

B- Citoesqueleto o esqueleto celular. Citoplasma

Matriz
intracelular

Citoesqueleto
A- MATRIZ INTRACELULAR

Fluido (citosol o hialoplasma) compuesto de

agua, proteínas, carbohidratos, lípidos,
electrolitos, etc.

Puede presentar dos estados físicos:

- Gel  viscoso
- Sol  fluido

Organelas están inmersos en el citosol:

- Con membranas: mt, RE, AG, V, Cl, L, P, N

- Sin membrana: ribosomas.

FUNCIONES DEL CITOSOL:

Regulador del pH intracelular

Sirve para almacenar sustancias

Medio donde se mueven los organelos

Lugar de movimientos de la ciclosis

Lugar donde se realizan reacciones metabólicas de la célula
- Glucogénesis
- Glucogenólisis
- Biosíntesis de aminoácidos
- Modificación postraduccionales de proteínas
- Biosíntesis de ácidos grasos
- Reacciones con ATP y ARNt
B- CITOESQUELETO
“Sistema esquelético”  Formado por 3 estructuras definidas
denominadas como “filamentos citoesqueléticos”:

1- Microtúbulos.
Túbulos largos sin ramificaciones , de ≈ 25 nm ∅, compuestos de
subunidades de tubulina.
Da la posición de las organelas y el transporte intracelular.
2- Microfilamentos.
(filamentos de actina o actina F)

Estructuras sólidas de ≈ 7 nm ∅,
generalmente forma un red
ramificada.
Da forma a la célula y son
necesarios para la locomoción.

3- Filamentos intermedios.

Fibras resistentes semejantes a

cuerdas, de ≈ 10 nm ∅, conformado
por diversas proteínas relacionadas
(como queratina, vimentina,
neurofilamentos).
Da fuerza mecánica y resistencia a la
célula.
DISTRIBUCIÓN DE FILAMENTOS CITOESQUELÉTICOS
EN CÉLULA EPITELIAL

Polímeros helicoidales de la
proteína actina. Se concentran
en la corteza de la célula.

Fibras similares a cuerdas. Un

tipo de FI forma una lámina
nuclear, otros se extienden por
el citoplasma, uniendo células
vecinas.

Cilindros largos y huecos

formados por tubulina. Emergen
de un centrosoma (centro
organizador de MT).
CARACTERÍSTICAS
Filamentos citoesqueléticos

 Conforman una red interactiva insolubles a las extracciones

celulares con detergentes iónicos.

 Están formados por polímeros de subunidades de proteína,

unidas mediante enlaces débiles No covalentes.

 Se ensamblan y desensamblan en forma rápida, lo que

indica que estas estructuras son dinámicas.

 Forma el andamiaje molecular de la célula, dando su forma y

tamaño (morfología celular).

 Regulan los movimientos celulares, la distribución y

movimientos de las organelas y de otras estructuras
citoplasmáticas.
 MOTILIDAD Y MOVIMIENTOS

El citoesqueleto participa:

La contracción de las células musculares.

La elongación de los axones nerviosos.

La formación de caveolas en la superficie celular.

La citocinesis durante la división celular.

También participa en los movimientos que ocurren en el

citoplasma:

La ciclosis

Transporte de vesículas

Movimiento de organelas
El citoesqueleto es un entramado tridimensional de proteínas que
provee soporte interno en las células, organiza las estructuras
internas de la misma e interviene en los fenómenos de transporte,
tráfico y división celular.
 MICROTÚBULOS

Son estructuras tubulares, huecas y conformados por polímeros
de TUBULINA

Presentan polaridad:
- Un extremo mas (+) o de crecimiento rápido
- Un extremo menos (-) o de crecimiento lento.

La TUBULINA es una proteína hetero-dímera formado por dos

subunidades :
- Subunidad Alfa (α-Tubulina)
- Subunidad Beta (β-Tubulina)

Existe una subunidad Gamma en los centrosomas (γ-Tubulina)

Cada TUBULINA esta compuesto por 13 protofilamentos,

alineados en paralelo y tienen la misma polaridad.
ESTRUCTURA DEL MICROTÚBULO

Las moléculas de tubulina forman

un conjunto helicoidal
 ORGANIZACIÓN DE LOS MICROTÚBULOS

Los microtúbulos se organizan a partir del centrosoma o unidad
COMT (Centro Organizador de Microtúbulos).

Los microtúbulos crecen desde los complejos de γ-tubulina del

centrosoma.
MICROTÚBULOS EN EL HUSO MITÓTICO - MITOSIS

Nucleación y anclaje de microtubulos

INESTABILIDAD DINÁMICA DE LOS MICROTÚBULOS
 Se basa en la polimerización y despolimerización de unidades de
tubulina, los que determinan su posición intracelular.

 La polimerización se realiza mediante la unión del GTP a la

subunidad β de la tubulina. Después de la incorporación se
hidroliza en GDP.

 La despolimerización se realiza por la hidrólisis de GTP en GDP.

 Un microtúbulo crece rápidamente cuando:

• La velocidad de la incorporación de subunidades en el extremo del

polímero es mas rápida que la hidrólisis del GTP.
• Esto incrementa la afinidad de tubulinas entre si.

 Perdida del casquete de GTP:

• Permite la relajación de los protofilamentos de los microtúbulos

• Determina la forma curvada de los mismos.
 Polimerización de
unidades de tubulina

En crecimiento

Hidrólisis de GTP a GDP

En retracción
Despolimerización de
unidades de tubulina
 MAPs: PROTEINAS ASOCIADAS A LOS MICROTÚBULOS

 Son proteínas heterogéneas que se unen a los microtúbulos,

dando estabilidad y promoviendo su ensamblaje.

 Tipos de MAPs:

MAPs clásicas  son las primeras proteínas que se

identificaron y casi siempre tienen 2 dominios
- Sitio de unión, que se une a la parte lateral del
microtúbulo
- Cola, que se proyecta como filamento fuera del
microtúbulo.

La unión de los MAPs al microtúlulo se debe a la

desfosforilación del grupo fosfato de residuos de aminoácidos
presentes en las proteínas de los MAPs.
 Cola, que se une con otros
componentes celulares

Sitio de unión, unida con 3 subunidades

de tubulina

Molécula de MAP2 del cerebro unida a la

superficie del microtúbulo

MAPs TAU  están implicadas en el desarrollo neurodegenerativos

letales de la enfermedad del Alzheimer, formando ovillos de
neurofilamentos por exesiva fosforilación de la proteína TAU que
impide unirse a los microtubulos.

OTRAS Proteinas  Son las proteínas motoras como las kinesinas

y dineinas.
 PROTEINAS MOTORAS
 Son proteínas que se desplazan a través del citoesqueleto
microtubular, como si se desplazaran encima de rieles.

 Estas proteínas convierten la energía química almacenada

como ATP en energía mecánica, que se emplea para mover el
cargamento celular.

 Los tipos de cargamentos que estas proteínas transportan

son: Vesículas, mitocondrias, lisosomas, cromosomas, etc.

 La proteínas motoras de los microtúbulos se agrupan en dos

familias:
- kinesinas de 380 kDa
- Dineinas de mas de 1000 kDa
 Proteinas Kinesinas:

 Presenta:
• 2 cadenas pesadas
• 2 cadenas ligeras

• La cabeza se une al microtúbulo

• La cola se une con el cargamento
que transporta

 Desplazamiento  es
con la cabeza de la
molécula, como una
persona que camina.

 Cada paso es un ciclo

químico o catalítico con
hidrólisis de ATP
Proteinas Dineinas:
 Presenta:
• 2 cadenas pesadas
• Varias cadenas intermedias y ligeras

• La cabeza se une al microtúbulo a

través del pedúnculo.
• La cola se une con el cargamento
que transporta

 Desplazamiento  es con la cabeza

de la molécula que simula como una
rueda generadora de fuerza.

Figura de desplazamientos opuestos de

moléculas de Dineinas y Kinecinas
PROTEINAS MOTORAS ASOCIADAS A LOS
MICROTUBULOS

Kinesinas:
Otros MT
Se aleja del centrosoma Organelos

Dineinas:
Tráfico Vesicular
Va hacia el centrosoma Aparato de Golgi
 MODELO DE DESPLAZAMIENTO DE LA PROTEÍNA
MOTORA KINESINA
In vivo

In vitro
En ambos casos se
requiere ATP
ESQUEMA DE TRANSPORTE
INTRACELULAR

 Transporte de agregados
vesiculotubulares (VTC),
vesículas, y organelos
mediados por moléculas de
Kinesina y por Dineina en
una célula cultivada.

 Sobre el microtúbulo:

• Las kinesinas se despalzan

hacia el extremo mas (+).

• Las Dineinas se desplazan

hacia en extremo menos (-).
MOTILIDAD DE ESTRUCTURAS EN EL CITOPLASMA

Las proteínas motoras Intervienen en el transporte vesicular,

organelas y en la separación de cromosomas en la anafase.
 FUNCIONES DE LOS MICROTÚBULOS

 Formación del huso mitótico.

 Transporte intracelular de organelas a través de proteínas motoras.

 Trafico vesicular desde el reticulo endoplasmico al aparato de Golgi.

 Dan estabilidad al Reticulo Endoplasmico y al Aparato de Golgi.

 Organización y distribución de cromosomas en la mitosis.

 Elementos estructurales en cilios y flagelos (y generadores de

movimiento).

 Determinan la forma y polaridad de la célula.

 Organizan los filamentos del citoesqueleto.

 MICROFILAMENTOS

Llamados también: «filamentos de actina» o «actina F».

Son fibras de proteínas de 7 nm de diámetro.

Esta compuesto por unidades de moléculas de Actina.

La Actina unida a Miosina = contracción muscular.

Realiza movimientos celulares, desplazamiento, contracción y

citocinesis.

En presencia de ATP, los monómeros de Actina se polimerizan,

formando un filamento helicoidal flexible.
 Microfilamento o Filamentos de actina

Tiene la forma de una hélice de doble hebra

Estructuras de filamento helicoidal de Actina,

flexibles organizados en una variedad de fibras,
formando mallas de dos y tres dimensiones.

Están dispersados en toda la célula y se

concentran en el cortex, justo debajo de la
membrana del plasma.
 POLIMERIZACIÓN DEL FIBROBLASTO DE ACTINA

La polimerización de actina G requiere ATP.

La hidrólisis del nucleótido ATP permite la despolimerización.

La molécula de ADP es atrapado dentro del filamento de actina
hasta que se disocie y forme monómero.

Fibroblasto: contiene 50% actina G (que forma filamentos) y 50%

monomérica.
Proteínas Motoras unidas a Actina: Miosinas
 Las miosinas  son proteinas motoras de los microfilamentos.

 Conforman una superfamilia de miosinas dividido en dos

grupos:

• Miosinas convencionales (o tipo II) que se identificaron en el

tejido muscular.

• Miosinas no convencionales que según su número de

secuencia de aminoácidos son de 17 tipos: I y III a XVIII.

 La miosina mas conocida es la de tipo II, por participar en la

contracción muscular y que también se encuantran en diversas
células extramusculares.
 Miosina de tipo II
 Presenta:

• Un par de cabezas globulares

que contiene el sitio catalítico.

• Un par de cuellos, cada uno

formado por una sola hélice alfa
continua y dos cadena ligeras.

• Una cola cilíndrica, formada por

dos secciones helicoidales
alargadas de las dos cadenas
pesadas.

 El fragmento S1, (obtenido por tratamiento con proteasa) son

capaces de deslizar los filamentos de actina en una prueba in vitro.
Prueba in vitro del fragmento S1 de la Miosina tipo II

Cabezas de Miosina (fragmento S1) unidas al cubreobjeto cubiertos con

silicon, son capaces de deslizar filamentos de actina.
Miosinas tipo I y II
Miosina I:
Desplaza vesículas a lo largo de la
actina

Miosina tipo II:

• Con estructura típica de cabeza
gobular y cola.

• Forma filamentos al agruparse.

• Hidroliza ATP para desplazarse a

lo largo de la actina.

• Mueve a los filamentos de

actina en la contracción
muscular.
 MIOSINA tipo II: en contracción muscular
RELAJADO

Banda I Zona H Banda I

Banda A

CONTRAIDO
Zona H

Banda I Banda I
Banda A
Deslizamiento de filamentos de actina en la
contracción muscular
 ORGANIZACIÓN DE LOS MICROFILAMENTOS

En las células, los filamentos de actina son entrecruzados por proteínas

de unión a actina formando haces o redes 3D.

Recambio molecular in vivo

 HACES Y REDES DE ACTINA
40 nm
14 nm

Filamina (280 kd)

Fimbrina (68 kd) α-actinina (102 kd)

HACES DE ACTINA: UNIÓN A LA MEMBRANA PLASMÁTICA

"GATEO CELULAR" (cell crawling): Proceso complejo en el que se forman

extensiones de la membrana plasmática mediante polimerización de
microfilamentos en el borde de avance de la célula. Estas extensiones se unen
después al sustrato y el borde posterior se retrae sobre el cuerpo celular.
ESTRUCTURAS QUE CONTIENEN FILAMENTOS DE ACTINA

a.- Microvellosidades
b.- Haces contráctiles en el citoplasma
c.- Lamelipodios: protuberancias en forma de lámina (movimiento)
Filopodios: microespinas digitiforme (movimiento)
d.- Anillo contráctil en la división celular, cariocinesis o clivaje celular
UNIÓN DE MEMBRANAS MICROVELLOSIDADES
 CARACTERÍSTICAS COMUNES A
MICROFILAMENTOS Y MICROTUBULOS

1) Los microfilamentos como los microtúbulos están constituidos

por proteínas globulares con actividad NTPasa (ATPasa y
GTPasa, respectivamente).

2) En ambos casos, ~ 50% de la proteína constituyente se

encuentra en forma soluble y el 50% en forma de filamentos.

3) Forman estructuras MUY DINAMICAS, con un intercambio

rápido de subunidades entre el "pool" soluble y el insoluble
(filamentoso).

4) Tanto los microfilamentos como los microtúbulos son

estructuras "polarizadas” (extremos distintos).
 CILIOS Y FLAGELOS
CILIOS Y FLAGELOS: Son extensiones permamentes de la membrana
plasmática formadas a partir de microtúbulos. Su movimiento resulta del
deslizamiento de microtúbulos adyacentes, impulsado por la acción de
dineínas.

Corte longitudinal de la superficie de un Corte transversal de varios cilios. Se

ciliado. En la base de cada cilio esta el observa los nueve pares de
corpúsculo basal de estructura similar al microtúbulos y los dos microtúbulos
centriolo centrales
ESTRUCTURA DE CILIOS Y FLAGELOS
Axonema
MOVIMIENTO DE CILIOS Y FLAGELOS
 FILAMENTOS INTERMEDIOS

 Son estructuras mas resistentes y están formadas por mas de

50 proteínas fibrosas diferentes y característicos de tipos
celulares.

 Por el tipo de proteínas que lo conforman pueden ser:

- Filamentos de queratina (tonofilamentos)  Célula epitelial.

- Neurofilamentos  En axón y dendritas.
- Filamentos de vimentina  Células mesenquimatosas
(tejido conjuntivo, vasos sanguíneos, linfáticos, etc.)
- Laminas nucleares  En el núcleo celular.

 Proporcionan soporte mecánico a células y tejidos, evitando

ruptura de la membrana.

 No están implicados en el movimiento celular.

 FILAMENTOS INTERMEDIOS

Ensamblado: Se forman a partir de dímeros de 2 polipéptidos que

forman un helicoide enrollado. Estos se agrupan a su vez en tetrámeros
antiparalelos y en protofilamentos. La agrupación de 8 protofilamentos
forma un filamento intermedio de 10 nm, con una estructura similar al
de una cuerda.
 ENSAMBLAJE DE FILAMENTOS INTERMEDIOS

- Heterogéneos
- No se requiere energía para que se ensamblen (autoasociación lateral)
- Sin polaridad
 PARTICIPACIÓN DE FILAMENTOS INTERMEDIOS EN LA
ORGANIZACIÓN INTRACELULAR

Con cierta frecuencia (aunque no siempre) tienen una

distribución coincidente con los microtúbulos.

Forman una red que se extiende desde la zona nuclear hasta la

membrana plasmática.

En células epiteliales, se unen a la membrana en regiones

especializadas de contacto (desmosomas y hemidesmosomas).

Juegan también papeles especializados en células nerviosas y

musculares.

Las láminas nucleares también estan formadas por filamentos

intermedios.
 Malla de filamentos

Los filamentos intermedios mantienen unidas a las células

 PARTICIPAN EN LA LÁMINA NUCLEAR

Participan en la fragmentación de la membrana nuclear en Mitosis

(mecanismo fosforilación-desfosforilación).
PARTICIPAN EN INTERACCIONES CÉLULA-CÉLULA Y CÉLULA-
MATRIZ EXTRACELULAR
 PARTICIPAN EN LA UNIÓN DE DESMOSOMAS

Los desmosomas son uniones célula-célula formadas por proteínas de

adhesión asociadas al citoesqueleto de filamentos intermedios
(intracelular). Mantienen la resistencia mecánica.
PARTICIPAN EN LA UNIÓN DE HEMIDESMOSOMAS

Los hemidesmosomas son uniones que mantienen las células

epiteliales unidas a la membrana basal.
 PARTICIPAN EN UNIONES ESTRECHAS

Las uniones estrechas sellan las cavidades y restringen el paso de sustancias

entremedio de células. Son muy comunes en el epitelio intestinal.
GRACIAS POR SU ATENCIÓN