UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE BIOLOGIA, XALAPA

E. E.: BIOLOGIA CELULAR

Practica #2:

DIVERSIDAD CELULAR: FORMA, TAMAÑO Y NÚMERO

INTEGRANTES:

GARCÍA GRAJALES JESÚS ALBERTO

ROJAS MEZA ROSA ANTONIA

FECHA DE ENTREGA:

20/03/2018
 Objetivos

 El alumno reconocerá la diversidad del organismo humano a nivel celular.

 Al mismo tiempo se habilitara en la medición de los diferentes tipos de células
Utilizando el micrómetro.
 Además aprenderá el uso de la cámara de Neubauer para contar células.

Introducción

La sangre está constituida por un líquido denominado plasma y tres clases de células,
cada una de las cuales desempeña una función específica.

Los glóbulos blancos o leucocitos son la defensa del cuerpo contra las infecciones y las
sustancias extrañas que pudieran entrar en él. Para defender el cuerpo adecuadamente,
es necesario que exista una cantidad suficiente de glóbulos blancos capaces de dar una
respuesta adecuada, llegar a un sitio en el que se necesitan y luego destruir y digerir los
microrganismos y sustancias perjudiciales. Al igual que todas las células sanguíneas, los
glóbulos blancos son producidos en la médula ósea. Se forman a partir de células
precursoras (células madre) que maduran hasta convertirse en uno de los cinco tipos
principales de glóbulos blancos: los neutrófilos, los linfocitos, los monocitos, los
eosinófilos y los basófilos. Una persona produce aproximadamente unos 100.000
millones de glóbulos blancos al día.

Los glóbulos rojos, también llamados hematíes o eritrocitos, se ocupan de transportar el

oxígeno desde los pulmones a los tejidos, y de llevar de vuelta el dióxido de carbono de
los tejidos hacia los pulmones para su expulsión. Los hematíes dan a la sangre su color
rojo característico.

Las plaquetas o trombocitos colaboran en la coagulación de la sangre cuando se produce

la rotura de un vaso sanguíneo.

Todas las células de la sangre son el resultado de la diferenciación y maduración de las

células madre, también denominadas progenitores hematopoyéticos. En el adulto, las
células madre se localizan en la médula ósea, sustancia blanda y esponjosa que se halla
en el interior de los huesos.

En condiciones normales, la producción de células sanguíneas tiene lugar de forma

controlada, a medida que el cuerpo precisa de ellas. La alteración de este equilibrio
origina diversas enfermedades; unas se deben a una insuficiente producción de todas las
células sanguíneas (aplasia medular) o de algún tipo específico de las mismas
(eritroblastopenias, amegacariocitosis, agranulocitosis); otras son causadas por la
producción de células incapaces de realizar las funciones que le son propias y en
cantidades insuficientes (síndromes mielodisplásicos) y, finalmente, otras son debidas a
la producción de células cancerosas en grandes cantidades (leucemias).

Las células tienen diferentes rangos de tamaño, sin embargo‚ ésta medida se conserva
más o constante en un mismo tipo celular y organismo. Esta característica se ha tomado
también como referencia para la clasificación de los distintos tipos celulares. Los
cambios en el tamaño y número de células, también han servido para correlacionar y dar
información en algunas patologías, para varios estudios de la Biología y de otras
ciencias.

Material

.
Equipo:
- Microscopio compuesto de campo claro
- Ocular micrométrico y rejilla micrométrica
- Cámara de Neubauer
Reactivos:
- Solución acuosa de azul de metileno al 1%
- Solución de Wright o Colorante de 15
- Solución isotónica de NaCl (0.85%)
Materiales:
- Porta y cubreobjetos
- Jeringa desechable heparinizada
- Lámpara de alcohol
- Pipeta Pasteur
- Cajas Petri
- Tubos
- Muestras de sangre y semen.
 Procedimiento

A. Preparación de Frotis de Sangre:

1. Agite suavemente el tubo con la sangre. Destape y con ayuda de la pipeta Pasteur
tome una gota de sangre y póngala en el extremo de un portaobjetos limpio.
2. Coloque otro portaobjetos sobre la gota de sangre permitiendo que esta se extienda
por capilaridad a todo lo ancho del extremo del portaobjetos colocado en ángulo.
Extienda suavemente y sin detenerse hacia el otro extremo. El frotis debe quedar
translúcido (monocapa de células).

3. Seque el frotis al aire y fije ligeramente a la flama de la lámpara de alcohol.

4. Fije con alcohol metílico por 1-2 minutos y tiña con colorante de Giemsa. Si utiliza
colorante de Wright no necesita fijar, ya que este contiene alcohol. En ambos casos teñir
durante 15-20 minutos.

5. Lave con agua de la llave para eliminar el exceso de colorante. Deje secar al aire y
observe al microscopio con el objetivo de 40X .

6. Compare la que observa en sus preparaciones al microscopio con la Fig. 1

Figura 1. Leucocitos (izquierda), Eritrocitos y Linfocito (derecha)

B. Frotis de Semen

1. Con una pipeta Pasteur ponga una gota de semen en un portaobjetos limpio, y haga
un frotis semejante al de sangre.
2. Fije suavemente a la flama y después con alcohol, como la muestra de sangre.
3. Tiña con azul de metileno durante 10-15 min. Lave con agua de la llave para eliminar
el exceso de colorante. Deje secar al aire y observe al microscopio con el objetivo de
40X . Compare su preparación con la Fig. 2

Figura 2. Espermatozoides
Medición del diámetro y longitud de las células observadas al microscopio:

Para medir los distintos tipos de células se requiere utilizar dos aditamentos:

a. El micrómetro de objeto (portaobjeto graduado, por ejemplo 5 + 100/100) y

b. El micrómetro reticular para oculares (10:100, diámetro del ocular en mm)
1. Quite un ocular del microscopio, del lado del ojo con el que Ud. acostumbra
observar, y coloque el ocular que tiene la escala micrométrica. Observe con detalle ésta
y gire su ocular para que posteriormente ubique la escala.

2. Coloque el micrómetro de objeto, también conocido como objetivo micrométrico

(que es un portaobjetos con una regla incluida), en la platina. Utilizando el objetivo 10X
enfoque hasta que vea la escala, note que tanto la escala del ocular como la del objetivo
inician en cero y difieren en tamaño y número de divisiones.
3. Haga coincidir los ceros de ambas escalas poniéndolas en paralelo. Ubique otra
división en donde ambas escalas coincidan y cuente cuantas divisiones corresponden a
la escala del ocular y cuantas a las del objetivo. Anótelo.
4. La equivalencia de divisiones de la escala del ocular con respecto a la del objetivo es
de 10 micras, por lo que 10 es una constante.

Cálculos para obtener el coeficiente micrométrico:

1. Divida el número de divisiones del objetivo entre las divisiones del ocular que obtuvo
en el paso 4 de la sección anterior y multiplique por 10. El número que obtenga es el
18 coeficiente micrométrico para el microscopio y para el objetivo que esta utilizando,
eneste caso de 10X. Para obtener el coeficiente micrométrico a 40X, siga los mismos
pasos y haga las mismas operaciones.
2. Una vez que ha obtenido los coeficientes micrométricos, retire de la platina la escala
y coloque en su lugar el frotis de sangre ó el de semen.
3. Con la escala del ocular mida sus células, y anote cuantas divisiones de su escala le
son necesarias para medir el diámetro o longitud, para posteriormente multiplicar por el
coeficiente micrométrico que Ud. obtuvo con el objetivo con el que realiza su
observación actual. La multiplicación del número de divisiones de la escala del ocular
con el coeficiente del objetivo, le dan el tamaño en micras (μm).

a. Mida 25 células de cada una de las preparaciones que realizó y saque el valor medio
de cada tipo celular.

b. ¿A qué grupo de la diversidad celular de sus muestras correspondió el tamaño celular

más pequeño y más grande que determinó?.

Conteo con la Cámara de Neubauer:

Llenado de la cámara: Coloque encima de la cámara un cubreobjetos, esto da una

profundidad constante de 0.1 mm, de tal forma que al llenarla se tendrá un volumen en
la cámara de 0.1 mm3 y en cada uno de los 25 cuadros, un volumen de 0.004 mm3.
Tome en cuenta estos datos, para que entienda la fórmula que se da más adelante para
conocer el número de células por mm3.
Llene con la muestra de sangre una pipeta para eritrocitos hasta la marca de 0.5, limpie
la pipeta y acábela de llenar hasta la marca 101 con solución salina, ha diluido 200
veces su muestra.
Antes de llenar la cámara agite la pipeta, en forma horizontal, deseche tres gotas y con
la cuarta llene la cámara por capilaridad (recuerde que hay que poner el cubre sobre ella
antes de llenar) .

Conteo de Eritrocitos:
1. Deje reposar la cámara llena por cinco minutos en un ambiente húmedo, puede
utilizar una caja de Petri tapada y que tenga adherido un papel humedecido con agua.
Lea 80 cuadritos de la cámara, en una distribución homogénea. Cuenta los glóbulos
rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente para determinar el recuento de
eritrocitos. Anote sus datos Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de
las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza
cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha.
2. Con los datos del número total de células (en los cuatro extremos y al centro) aplique
la siguiente fórmula:

No. de células contadas X dilución X 4000

Número de células = --------------------------------------------------------
No. de cuadros donde se contó (80)

Conteo de Leucocitos:
1. Llene la cámara de Neubauer como se explicó anteriormente y cuente los leucocitos
en los cuatro cuadrados grandes de las esquinas (1 mm de lado).
2. Si llamamos B el número de leucocitos en 4 cuados grades, existen B glóbulos
blancos en

Conteo de Espermatozoides
1. En un tubo de ensaye ponga 0.9 mL de solución salina isotónica.
2. Agite la muestra de semen que ha tomado y con una pipeta tome 0.1 mL y mezcle
con los 0.9 mL de la solución salina.
3. Agite la muestra de semen diluido y tome con una pipeta Pasteur el volumen
necesario para llenar la cámara de Neubauer.
4. Siga los pasos que utilizó para el conteo de eritrocitos.

Resultados

Observación de leucocitos

Identificación de eritrocitos

Identificación de linfocitos

Ientificacion de espermatozoides
Medición del diámetro y longitud de las células observadas al microscopio:

Conteo de Eritrocitos:
No. de células contadas X dilución X 4000
Número de células = --------------------------------------------------------
No. de cuadros donde se contó (80)

1942X 200X 4000

Número de células = -------------------------------------------------------- = 4,201,522
No. de cuadros donde se contó (80)

Conteo de Leucocitos:
 Discusión

ROJAS MEZA ROSA ANTONIA-

Comparando los tañamos entre un leucocito y un eritrocito podemos saber que el

leucocito es más grande que un eritrocito

En cuento a cantidad, el número de leucocitos es mucho mayor que el de los eritrocitos.

En base a la literatura podemos saber que los eritrocitos o glóbulos rojos de la sangre,
son el tipo más común de células sanguíneas, le dan el color rojo característico a la
sangre. Su función principal es transportar oxígeno a las diferentes partes del cuerpo.
Los leucocitos, o glóbulos blancos, constituyen la parte principal del sistema inmune del
cuerpo. El número de leucocitos aumenta cuando el cuerpo está luchando contra una
enfermedad

Conclusión

ROJAS MEZA ROSA ANTONIA-

En esta práctica se utilizaron preparaciones teñidas y la cámara de Neubauer , aprendí

tanto a preparar frotis de sangre y semen, como a usar los métodos de contabilización y
medición de diferentes células .

Aprendi a utilizar correctamente la cámara de Neubauer, ya que cuenta con 9 cuadrantes

grandes y estos a su vez están divididos en 16 cuadrados que se utilizan en el conteo e
leucocito , el cuadrante central está dividido en 25 cuadros y se utiliza para el conteo de
los eritrocitos y espermatozoides
 Figura .- área de conteo d la cámara de Neubauer

Bibliografía

(6/1/2016). Descripción general de la sangre y sus componentes. Healthlibrary

Recuperado de:
http://healthlibrary.uchospitals.edu/Spanish/DiseasesConditions/Pediatric/Blood/90,P05
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