Análisis de compuestos traza en 

muestras ambientales
 Contaminación Ambiental

Presencia de compuestos químicos específicos, 
Presencia de compuestos químicos específicos,
naturales o antropogénicos, que provocan efectos 
nocivos sobre la salud o los ecosistemas
nocivos sobre la salud o los ecosistemas

Químicos
 Biológicos
 Sanitarios
 Legislativos, etc...
 Análisis Ambiental
Origen (Caracterización de fuentes)
Transporte y distribución
P
Procesos de degradación biótica o/y abiótica 
d d d ió bióti / bióti
(¿nuevos contaminantes tóxicos?)
Destino final (bioacumulación, etc)
Destino final (bioacumulación, etc)
Efectos 
Límites legales

Identificación y Análisis de compuestos
químicos en el medio ambiente 
 Límites exigidos por la normativa
Límites exigidos por la normativa
No Título Compuestos orgánicos Límites (ug/L) ppb
75/440/EEC Aguas superficiales Cyfluthrin 0.001
Hidrocarburos 50-1000
Permerthrin 0.01
Plaguicidas 1-5.0
Fenoles 1-100
Hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs) 0.2-1.0
80/778/EEC Agua para consumo humano Plaguicidas individuales 0.1
Plaguicidas totales 0.5
Benzo 3 4 pireno
Benzo-3,4-pireno 0 01
0.01
Tetracloruro de carbono 3.0
Tricloroetano 30.0
Tetracloroetano 10.0
Trihalometanos 100.0
Fenoles 0.5
PAH
PAHs 02
0.2
76/659/EEC Aguas con peces Cyfluthrin 0.001
Flucofuron 1.0
PCSDs i PAD 0.05
Permethrin 0.01
Sulcofuron 25.0
76/464/EEC Substancias peligrosas Lista 1 Tetracloruro de carbono 12.0
Cloroformo 12.0
DDT 0.01
Endrin 0.005
Aldrin 0.01
Dieldrin 0.01
Isodrin 0.005
Hexaclorobenceno 0.03
Hexaclorobutadieno 0.01
Lindano 0.11
Pentaclorofenol 2.0
1 2-dicloroetano
1,2-dicloroetano 10 0
10.0
Percloroetileno 10.0
Triclorobenceno 0.1
Tricloroetileno 10.0
 Determinación de compuestos orgánicos traza
Determinación de compuestos orgánicos traza

 Hidrocarburos alifáticos
 Hidrocarburos aromáticos
 Aldehidos
 Alcoholes y fenoles
 Anilinas y benzidinas
y
 VOCs (Disolventes clorados)
 SOCs (PCBs, dioxinas)
 Plaguicidas apolares y polares
 Ftalatos i adipatos
 Tensioactivos
 ...y muchos más
 Análisis Ambiental

 Matrices complejas
Matrices complejas
 Selectividad
l i id d
 Compuestos con un 
gran intervalo de
gran intervalo de 
 Universalidad propiedades fisico‐
químicas
químicas.
 Sensibilidad  Analitos a nivel de traza 
( b
(ppb, ppt)
t)
Análisis específicos vs multiresiduos
ál íf l d

• Determinación de un solo  • Determinación del máximo 
compuesto o grupo de
compuesto o grupo de  número de contaminantes 
número de contaminantes
compuestos en una matriz  con propiedades físico‐
p
ambiental específica químicas diferentes
q
– Metabolitos
– Contaminación global
EPA Priority Pollutants – ......
Protocols
 Análisis Ambiental
Toma de muestra

Tratamiento previo
% Tiempo de análisis
Extracción
Toma muestra
6% 7%
6-20 %
Tratam muestra
Tratam.
Purificación
P ifi ió
(Clean-up) 68 % Análisis

Tratam. datos

Análisis Instrumental
GC
HPLC
GC-MS; HPLC-MS

Cuantificación
Compartimentos medioambientales
Análisis Ambiental
Toma de muestra

Tratamiento previo

Extracción

Purificación
(Clean-up)

Análisis Instrumental
GC
HPLC
GC-MS; HPLC-MS

Cuantificación
 Análisis Ambiental

Toma de muestra

Tratamiento previo

Sedimentos, suelos Agua Aire Organismos

Eliminación agua Particulado Particulado Eliminación agua

Eliminación agua Eliminación agua

Digestión ácida o alcalina

Eliminación material grueso
Tamizado (>250 µm, 63 µm)
Homogeneizar

Homogeneizar Eliminación agua
Liofilización
Secado en horno (35‐40
Secado en horno (35 40 oC)
Tratamiento con desecantes
Pre‐extracción con disolventes 
orgánicos miscibles en agua
orgánicos miscibles en agua
 Análisis Ambiental
Toma de muestra
Contaminantes orgánicos
Tratamiento previo
Disolución
i l ió con disolventes
di l orgánicos
á i
(hexano, diclorometano, tolueno, acetona,…)
Extracción

Matrices acuosas Matrices sólidas

Extracción con fluidos

Líquido-Líquido Extracción sólido-líquido
supercríticos (SFE)
Extracción en fase sólida

Extracción sólido-líquido

Ultrasonidos Sohxlet Extracción asistida por microondas Extracción con disolventes acelerada
(MAE) (ASE)
 Matrices acuosas. Extracción líquido‐líquido

 Se extrae el total de componentes 
(
(particulado+disuelto)
i l d di l )
 Consumo de grandes cantidades de disolvente
– Problema medioambiental
– Problema de blancos
– Paso de eliminación del disolvente pérdidas
 Protocolos largos
g
 Extracción en fase sólida (SPE)
 Paso a través de un adsorbente de sílica modificada químicamente 
(cadenas hidrocarbonadas C8 y C18, polímeros, inmunoadsorbentes)
 Se extraen solo los componentes disueltos (filtrar previamente)
p ( p )
 Muy versátil
 Rápida y sencilla (automatización)
 Relativamente barata
Relativamente barata
 Bajo consumo de disolventes
 A considerar :
o Volumen de ruptura
o Capacidad
o Limpieza
 Adsorbentes en SPE

 Identificar y cuantificar múltiples familias de 
contaminantes con un intervalo amplio de propiedades
contaminantes con un intervalo amplio de propiedades 
físico‐quimicas y estructuras químicas
Fases sólidas de alquilsilica o poliméricas
Fases sólidas de alquilsilica o poliméricas
 Identificar y cuantificar un número limitado de 
compuestos de una misma clase química
compuestos de una misma clase química
Molecularly imprinted polymers (MIPs)
Fases sólidas de immunoafinidad
Fases sólidas de immunoafinidad
 Otras técnicas de extracción de matrices 
Ot té i d t ió d ti
líquidas
• Microextracción en fase sólida (SPME)
– Uso
Uso de una fibra recubierta de un polímero adsorbente 
de una fibra recubierta de un polímero adsorbente
que se pone en contacto con la muestra acuosa, 
posteriormente se puede introducir directamente en el 
sistema cromatográfico
sistema cromatográfico
• Extracción con barra agitadora adsorbente.
– Semejante
Semejante a la anterior pero el material adsorbente 
a la anterior pero el material adsorbente
recubre una barra agitadora donde se adsorben los 
compuestos de interés. Posteriormente se realiza la 
desorción directamente en el cromatógrafo
desorción directamente en el cromatógrafo.
• Sistemas con membranas semipermeables 
(
(SPMDs))
 Métodos de extracción de matrices sólidas

Convencionales Novedosos

Extracción SFE ASE MAE

Soxhlet Ultrasonidos
líquida

Disminuir la cantidad de disolvente

Extracciones más rápidas
Mejorar
j la cuantificación (mayores
( y recuperaciones,
p ,
más reproducibilidad, límite de detección menores)
Automatización Manipulación de las propiedades
Selectividad ((menor importancia)
p ) físicas del agente
g extractante ((P,, T))
Aplicación de sorbentes selectivos
 Extracción en Soxhlet
Extracción en Soxhlet

R f i
Refrigerante
t

Muestra
(Cartucho de
Celulosa)
1-200 gr

100-200 ml disolvente

Calor
 Diagrama de fases

Intervalo de operación de P y T del 
agente extractante para las diferentes 
g p SFE
técnicas de extracción sólido‐líquido
Pc
ASE, accelerated solvent extraction
MAE Microwave assisted extraction
MAE, Microwave assisted extraction ASE
SFE, supercritical fluid extraction MAE
Pc, presión crítica Soxhlet
Tc temperatura crítica
Tc, temperatura crítica
Sonicación Tc
 Fluidos Supercríticos
•DIFUSIVIDAD ALTA
•VISCOSIDAD BAJA GAS
•TENSIÓN SUPERFICIAL NULA

•TRANSFERENCIA DE MASA RAPIDA

•BUENA PENETRACION EN MATERIALES POCO POROSOS
•BUENA SOLUBILIZACIÓN COMPUESTOS DE INTERES

•ALTO PODER SOLVATANTE LIQUIDO

D
Densidad
id d alta
lt y variable
i bl f(P
f(P,T)
T) Extracciones
E t i
Selectivas

CO2 (Tc=
(Tc 3131.11 oC,
C Pc=
Pc 72.9
72 9 atm.)
atm )
Analitos polares Modificadores
 Técnicas de extracción de compuestos 
orgánicos en matrices sólidas
Soxhlet Sonicación SFE MAE ASE

Tiempo
p     
Disolventes      
Costes     
Automatización     
Dificultad de      
optimización
Robustez     
Análisis Ambiental
Toma de muestra

Tratamiento previo

Extracción

Purificación
(Clean-up)

Análisis Instrumental
GC
HPLC
GC-MS; HPLC-MS

Cuantificación
 Análisis Ambiental

Toma de muestra

Tratamiento previo
Interferencias más importantes:

• Lípidos
Extracción
• Azufre
• Carotenoides
Purificación • Pigmentos...
(Clean-up)

Cromatografia de adsorción en columna

Ataque ácido o básico

Extracción en fase sólida (SPE)

 Clean up del extracto

 Cromatografía de columna líquido‐sólido
Fase móvil apolar
Polaridad creciente Fase estacionaria polar

– Adsorbentes más comunes:
• Sílice (uso general)
• Alúmina 
• Florisil (Clean‐up de plaguicidas organoclorados)
• Poliestireno, poliacrilamida
,p
• Geles para GPC (Por ej.: Sephadex LH‐20, Bio‐Beads SX) 
(Clean‐up de muestras con alto contenido lipídico)
• Inmunoadsorbentes
 Eliminación de azufre

 Reacción con mercurio
 Sulfuro de mercurio
 Reacción con cobre
 Sulfuro de cobre
 Reacción con sulfito de sodio en hidróxido de 
Reacción con sulfito de sodio en hidróxido de
tetrabutilamonio
 Concentración del analito

 Evaporación del disolvente a presión reducida (rotavapor)
 Kuderna‐Danish
K d D ih
 Corriente de nitrógeno
 Análisis Ambiental
Análisis Ambiental
Toma de muestra

Tratamiento p
previo

Extracción

Purificación
(Clean-up)

Análisis Intrumental
GC
HPLC
GC-MS; HPLC-MS
 Sistemas de Cromatografía
Volatilidad

Cromatografía
de gases (GC)

Cromatografía
g f
Líquida (HPLC)

Baja Polaridad Alta

(Solubilidad en agua)
 Cromatografía de gases

1-2 µl Registrador
Gas portador Integrador
Ordenador
Inyector
yecto
250-300 oC
Detector
Horno +
columna
 C
Cromatografía de gases
t fí d
Los analitos se evaporan a temperatura alta (250 300oC), y se hacen 
Los analitos se evaporan a temperatura alta (250‐300 C) y se hacen
pasar  por una columna cromatográfica. Separación isoterma o por 
gradiente de temperatura.
 Fase móvil gas inerte: He, H (gas portador, carrier)
 Columnas capilares de sílice fundida (0,25 mm d.i. x 25‐50 m; espesor 
de capa 0.25 µm)
 Normalmente con la fase líquida (WCOT) 
 Fases más utilizadas: silicones 
 OV‐1: Metilsilicones
OV 1: Metilsilicones
 OV‐17:metilfenilsilicones
 OV‐210: trifluoropropilsilicones
 Detectores universales (FID) y selectivos: ECD, FPD, NPD.
 Fases estacionarias
Polidimetilsiloxano

Polietilenglicol
 Cromatografía de gases. Detectores
 Detector Universal
 Detector de ionización de llama (FID)
o Universal
o Destructivo
y
o Estable y lineal
 Detectores Selectivos
 Detector de captura de electrones.
o Para compuestos con grupos electronegativos (halogenados,..)
o No destructivo
o Rango lineal estrecho
g
 Detector de nitrógeno‐fósforo
o Para compuestos con N y P
o Destructivo
o Moderadamente lineal
 Detector fotométrico de llama.
o Compuestos con S y Sn (diferentes filtros)
C t S S (dif t filt )
o Destructivo
o No lineal
 Detector de Ionización de Flama (FID)
Consiste en una llama de
hidrógeno‐aire por la que pasa
el efluente de la columna.
El paso del efluente de la
columna por esta llama ioniza
las moléculas orgánicas.
Los iones producidos se recogen
en un electrodo de polarización
negativa y dan lugar a una señal
eléctrica.
eléctrica
El FID es muy sensible y es el
detector más ampliamente
utilizado su desventaja es que
utilizado,
destruye la muestra.

Empleado para hidrocarburos, poco

sensible a compuestos muy oxidados
 Detector de Nitrógeno Fósforo, NPD

Detector FID con una pastilla de metal alcalino (Rubidio o

Cesio)

También conocido como detector de ionización de flama

alcalino, detector de ionización (TID), detector termoiónico
de flama (FTD) o detector específico termoiónico (TSD).

Al calentar el material alcalino en la zona de la llama se

detectan selectivamente y con gran sensibilidad los
compuestos orgánicos que contienen fósforo y nitrógeno.
 Detector de Captura de electrones (ECD)
Detector de Captura de electrones (ECD)
Utiliza un emisor beta radioactivo
para ionizar parte del gas portador y
para producir una corriente de
electrones entre un par de
electrodos.
Cuando las moléculas orgánicas que
contienen grupos funcionales
electronegativos, tales como
halógenos, fósforo y grupos nitro,
pasan por el detector, capturan
algunos de los electrones y reducen la
corriente medida entre los electrodos.
Rango lineal limitado, sensible y no
destructivo
Empleado frecuentemente para
compuestos halogenados
 Características Detectores
Detector Límite de  Rango lineal Comentarios Tratamiento
d
detección g
ó soluto
l

FID 10‐12 106‐107 Detector  Destructivo

universall
ECD 10‐14 102‐103 Detector  No destructivo
Selectivo
FPD 10‐13 102 Detector  Destructivo
Selectivo S,P

NPD 10‐8‐10‐14 105‐107 Detector  Destructivo

Selectivo N,P
 HPLC. Cromatografía líquida de alta resolución
• Generalmente en fase inversa: fase estacionaria de C8‐C18; 
fase móvil acuosa con acetonitrilo, metanol o etanol.
Útil para substancias:
– Ú
• alto peso molecular
• baja volatilidad
• lábiles, degradaciones térmicas
• polares   Si son muy polares: cromatografía de 
par iónico o en fase normal (aminopropil, fases 
móviles con disolventes orgánicos)
ó il di l t á i )
 HPLC. Detectores

Detector de ultravioleta
Detector de ultravioleta‐visible
visible
Detector de fluorescencia
Detector de batería de diodos (Diode‐array)
Baja selectividad
Baja sensibilidad
 Espectrometría de Masas
Espectrometría de Masas
 Identificación inequívoca de 
 Selectividad
sustancias en matrices 
complejas (CG CL )
complejas (CG,CL...)
 Análisis de sustancias con 
propiedades fisico‐químicas 
p p q
distintas (átomos a   Universalidad
ld d
biopolímeros)
 Análisis cuantitativos 
áli i i i
(límites de detección ppb,   Sensibilidad
ppt) 
pp )
 Espectrómetro de Masas

ió ~ 10-66-10-88 Torr
Presión
Introducción
muestra + 100 %

+
+ + + + + + + +
+ + M/Z

Fuente de iones Analizador Detector de iones

(Ionización) (Separación) (Detección)
 Acoplamiento GC/LC‐MS
Acoplamiento GC/LC‐MS
100
Separación
p
cromatográfica
%

Ionización
0 2 00
2.00 4 00
4.00 6 00
6.00 8 00
8.00 10 00 12.00
10.00 12 00 14.00
14 00 16.00
16 00 18rt00
18.00
t (min)

218
100

Análisis
%
220
espectral
162

164
83
84 154 222
98 123 165
177 216 223 256 284288
0
100 150 200 250 300
masa/carga
 HAP. Análisis por CG‐EM (SIM)
TIC (SIM) +

tR ((min))
Rango lineal :250-10.000
:250 10 000 ng/ml (ppb)
LDD (S/N =3) : 2,5 - 10,5 pg
 Sistemas de Introducción

GASES CROMATOGRAFIA GASES CAPILAR

CROMATOGRAFIA GASES CAPILAR

Conexión directa

LÍQUIDOS LC, EC Interfases especiales DLI

PB
MEMBRANA
CF‐FAB
TSP
SÓLIDOS SONDA DIRECTA APcI
ESP (ionspray)
 Interfases CL‐EM
INTRODUCEN MUESTRA
 Haz
Haz de partículas (Particle 
de partículas (Particle
beam  PB)
 Cinta móvil (moving belt)
( g )  Bombardeo con átomos
INTRODUCEN E IONIZAN
 Introducción
Introducción directa (DLI)
directa (DLI)
 Termospray (TSP)
 
Bombardeo con átomos
rápidos a flujo continuo (CF‐
FAB)
 Ionización a presión 
atmosférica (API)
 Electrospray (ESP)
 Ionspray
 Ionización química a
presión atmosférica
(APcI)
 Sistemas de Introducción
Peso Mol.
Electrospray
Ionspray

CF-FAB
Particle APCI
CG/EM Beam
Termospray
Baja Polaridad Alta
(Solubilidad en agua)
 CL‐EM. Aplicaciones descritas en la literatura

300

250
MBL
200
N º P u b lic a c io n e s

TSP
150 PB
100 ESP
50 APcI

0
79-80
79 80 81
81-82
82 83
83-84
84 85
85-86
86 87
87-88
88 89
89-90
90 91
91-92
92 93
93-94
94 95
95-96
96 97
97-98
98

Años

W.M.A. Niessen, en: D. Barceló (Ed.), Applications of LC-MS in Environmental

Chemistry. J. Chromatography Lib. Vol 59, Elsevier Sc. Amsterdam, Holanda (1996).
 Métodos de ionización

Ionización por Impacto Electrónico (IE)
I i ió Q í i
Ionización Química
 Ionización Química Positiva
 Ionización Química Negativa
Ionización Química Negativa
 Ionización Negativa por Captura de Electrones
Ionización/Desorción de Campo
Ionización/Desorción por Plasma
Ionización por Bombardeo de Atomos Rápidos (FAB)
Ionización Multifotónica
Ionización Laser Asistida por Matriz (MALDI)
I i ió
Ionización por Plasma de Acoplamiento Inductivo (ICP)
Pl d A l i t I d ti (ICP)
 Métodos de ionización en EM
 Impacto de electrones (70 eV).
o Mucha energía, muchas fragmentaciones
o Universal
 Ionización química negativa y positiva
o Técnicas de ionización suaves, poca fragmentación (ión 
molecular)
o Selectivas, compuestos electronegativos o 
electropositivos
o Método de ionización en HPLC‐EM
El cuadrupolo
p consiste de cuatro cilindros metálicos p paralelos
entre los que se forma un campo magnético, los iones con cierta
relación (m/z) pasan a través del cuadrupolo, el resto son
eliminados El sistema trabaja en condiciones de alto vacío para el
eliminados.
transporte de los iones a través del analizador (10‐9 torr).
 Avances recientes en las técnicas de 
Avances recientes en las técnicas de
separación y detección
Cromatografía de gases
Desarrollo de nuevas fases estacionarias (separaciones 
quirales), contaminantes enantiómeros con diferente 
t i id d (b t i l d t i )
toxicidad (beta‐ciclodextrinas)
Cromatografía de gases rápida

Cromatografía de gases bidimensional
fí d bidi i l
Sistemas de inyección de grandes volúmenes (100‐200 
ul)
l)
Cromatografía de gases bidimensional (GC x GC)
Cromatografía de gases bidimensional (GC x GC)
Los componentes de una mezcla se separan mediante el uso 
de dos columnas cromatográficas de diferente selectividad.
 Avances recientes en las técnicas de 
A i t l té i d
separación y detección
Cromatografía de líquidos
Desarrollo de nuevas fases estacionarias.
Fases estacionarias con partículas de tamaño < 2um (sistemas 
d Ult P f
de Ultra Performance Liquid
Li id Chromatography
Ch t h –UPLC‐)
UPLC )
Incremento de aplicaciones de “microbore LC”
(columnas de diámetro interno de 1 mm en
(columnas de diámetro interno de 1 mm en 
comparación con las columnas convencionales de 2‐4 
mm)
Mayor eficacia de separación
Mayor sensibilidad
Menor consumo de disolventes
Costes de análisis más bajos
 Avances recientes en las técnicas de 
separación y detección
E
Espectrometría de masas
t tí d

 Incremento del uso de la espectrometría de 
masas con analizador de tiempo de vuelo (Time‐
of‐Flight, TOF‐MS).
f li h O S)
 Espectrometría de masas multidimensional 
(MS/MS MSn)
(MS/MS, MS
 Espectrometría de masas de relación isotópica, 
d 13C/12C, 
sobre todo 
b C 18O/16 y 15N/14N.
N
 TOF MS
TOF‐MS
 Convencionales (cuadrupolo, magnético y trampa de iones):
Convencionales (cuadrupolo, magnético y trampa de iones): usan 
usan
un campo eléctrico o magnético para separar los iones con 
diferente m/z, velocidad de adquisición hasta 10 espectros/s
 TOF mide el tiempo que un ión necesita para 
TOF mide el tiempo que un ión necesita para “viajar”
viajar  a través de 
a través de
una región libre, los iones generados en la fuente se aceleran 
hacia el tubo de vuelo. Los tiempos de vuelo son del orden de los 
microsegundos, obteniéndose entre 100‐500
microsegundos, obteniéndose entre 100 500 espectros/s.
espectros/s.
 Mayor resolución que los espectrómetros convencionales 
(cuadrupolos, trampa de iones < 1.000) aprox 5000, aunque menor 
q
que los espectrómetros magnéticos de alta resolución (>10.000)
p g
 Proporciona el espectro de masas total de los compuestos al 
contrario de los magnéticos que trabajan en un rango de masas 
estrecho.
 Velocidad de adquisición muy alta, mayor sensibilidad (técnica 
apropiada para GC x GC). 
ANÁLISIS DE COMPUESTOS ORGÁNICOS VOLÁTILES (VOCs)

 Headspace (espacio de cabeza)

Técnicas  Purge
g and Trapp (Purga
g y Trampa)
p
principales
 Desorción con CS2
 Microextracción en fase sólida
 Extracción térmica directa

Purga y  Purga del cartucho

Trampa  Captación del aire
 Primera desorción:desorción térmica de los cartuchos
 Refocalización de los analitos en una trampa criogénica
 Segunda desorción: desorción térmica de la trampa y
transferencia -inyección de los analitos a la columna
cromatográfica
 Separación, identificación y cuantificación de los analitos
 DESORCIÓN TÉRMICA

Primera desorción: desorción térmica de los compuestos retenidos en el

adsorbente del cartucho a una T de 300ºC durante 5 minutos y
refocalizados hacia una trampa criogénica que contiene Tenax TA a T de
-30ºC
Segunda
g desorción: desorción térmica de los compuestos
p retenidos
en el adsorbente de la trampa a una T de 300ºC y transferidos a la
columna cromatográfica
Análisis de COVs en aire.
Análisis de VOCs en agua y matrices sólidas

• Headspace (espacio de cabeza).

– Estático
– Dinámico
Gas inerte Trampa CG
Espacio de cabeza

Muestra
Microextracción en fase sólida (SPME)
 Aplicaciones de SPME
400
350
300
250
200
150
100
50
0
1990-95 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002
Análisis Ambiental
Toma de muestra

Tratamiento previo

Extracción

Purificación
(Clean-up)

Análisis Instrumental
GC
HPLC
GC-MS; HPLC-MS

Cuantificación
 Cuantificación
• Calibración con patrones externos e internos 
(identificación por tiempo de retención)
(identificación por tiempo de retención)
• Blancos del procedimiento
• Determinación de
– sensibilidad Validación del método
– límite de detección
– i t
intervalo de linealidad
l d li lid d
– precisión
– exactitud
– robustez 
– interferencias del método
• Confirmación por GC‐MS o HPLC‐MS
C fi ió GC MS HPLC MS
% Errores generados en el
análisis de la muestra

Calibrado
Columnas
8% 9%
7%
11%
Operador
6% Tratam. muestra
6%
Contaminación
Inyeccion
4% 19% Integración
30% Cromatografía
Instrumentación
 Errores
 Equivocaciones (error en la pesada, mal etiquetado, error de 
Equivocaciones (error en la pesada mal etiquetado error de
transcripción, intercambio de muestras)
 Ocasionales
 Pueden afectar a una muestra o a todas
Pueden afectar a una muestra o a todas
 De tipo cualitativo o/y cuantitativo
 Controlables a través de los programas de control de calidad.
 Pueden o no ser medibles 
Pueden o no ser medibles
 Errores sistemáticos
 De tipo cuantitativo
 No medibles
N dibl
 Errores “al azar”
 Controlables a través de los programas de las muestras de 
control de calidad.
t ld lid d
 A mayor número de muestras y replicados menor error.
Control de calidad Falsos positivos :
 Objetivo Interferencias de la muestra o
contaminación externa
 Comprobar: Falsos negativos: Se concluye que un
 eficiencia de la extracción
eficiencia de la extracción contaminante no aparece cuando en
 pérdidas en las etapas de clean up realidad si está en cantidades
 pureza de los blancos detectables:
 S
Separación  cromatográfica
ió áfi B j recuperaciones
Bajas i
 Procedimiento Interferencias que enmascaran
 Añadir  un “surrogate”, compuesto similar a nuestro analito, pero no presente en 
la muestra.
 Como mínimo una muestra de la serie por duplicado
 Muestra certificada o repetida
 “Muestra ciega”
 Blancos
 Calibrado del aparato con 4 puntos mínimo y comprobación periódica
p p y p p
 Criterios de calidad:
 Recuperación entre 50‐130%
 Diferencia entre los dos duplicados <25%
Diferencia entre los dos duplicados <25%
 Blanco no tendría que dar niveles detectables del analito límite de 
cuantificación.