UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE

CALDAS
FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES
BOGOTÁ, COLOMBIA

INFORME NÚM. 3 BIOQUÍMICA

IDENTIFICACION DE LIPIDOS

Héctor Nicolás Moreno Mejía -20161180076

Daniel Felipe Guevara – 20162180463
Nicolás Naranjo – 20162180135
Hamilton Santos - 20152180213

RESUMEN:

Los lípidos son biomoléculas constituidas mayormente por carbono e hidrogeno,

caracterizadas principalmente por su insolubilidad en agua debido a su naturaleza no polar.
Estas sustancias fueron sometidas a diferentes pruebas que permitieron su identificación y
categorización de manera cualitativas. Se realizaron la prueba de Salkowski y la prueba de
Lieberman-Burchard y se observó además la solubilidad de los lípidos en diferentes
solventes orgánicos (acetona, alcohol, cloroformo, éter) y agua destilada.
PALABRAS CLAVE
Lípidos, solubilidad, colesterol, ácido sulfúrico, cloroformo, acetona

ABSTRACT:
Lipids are biomolecules consisting mainly of carbon and hydrogen, mainly characterized by
their insolubility in water due to their non-polar nature. These substances were subjected to
different tests that allowed their qualitative identification and categorization. The Salkowski
test and the Lieberman-Burchard test were performed and the solubility of the lipids in
different organic solvents (acetone, alcohol, chloroform, ether) and distilled water were also
observed.
KEY WORDS:
Lipids, solubility, cholesterol, sulfuric acid, chloroform, acetone

1. INTRODUCCION:

Los lípidos son moléculas constituidas por Carbono (C), Hidrogeno (H) y en
menor proporción, Oxigeno (O);también pueden tener en su estructura Fosforo (P) y
Nitrógeno (N). Son hidrófobos (insolubles en agua yen otros disolventes polares), sin
embargo, son solubles en solventes apolares comoacetona, éter, benceno, etc.[CITATION
Bad93 \l 9226 ]

La baja solubilidad de los lípidos se debe a que su estructura química

es fundamentalmente hidrocarbonada (alifática, alicíclica o aromática), con gran cantidad
de enlaces C-H y C-C.

Un compuesto anfipático contiene regiones polares y regiones no polares. Cuando una

molécula de dicho compuesto es mezclada con agua, un solvente polar, la región
hidrofílica interactúa favorablemente con el solvente y tiende a disolverse en el agua. Por
otro lado las regiones apolares se disuelven fácilmente en disolventes de polaridad
parecida. [CITATION Nel05 \p 52-53 \l 9226 ].

Los lípidos desempeñan cuatro tipos de funciones biológicas gracias a su variada

química:

 Función de reserva: Son la principal reserva energética del organismo. Un

gramo de grasa produce 9'4 kilocalorías en las reacciones metabólicas de
oxidación, mientras que proteínas y glúcidos sólo producen 4'1 kilocaloría/gr.
 Función estructural: Forman las bicapas lipídicas de las membranas. Recubren
órganos y le dan consistencia, o protegen mecánicamente como el tejido adiposo
de pies y manos.
 Función biocatalizadora: En este papel los lípidos favorecen o facilitan las
reacciones químicas que se producen en los seres vivos. Cumplen esta función las
vitaminas lipídicas, las hormonas esteroideas y las prostaglandinas.
 Función transportadora: El transporte de lípidos desde el intestino hasta su
lugar de destino se realiza mediante su emulsión gracias a los ácidos biliares y a
los proteo lípidos.
[ CITATION Uni18 \l 9226 ]

Los lípidos pueden clasificarse de acuerdo a su estructura química en: lípidos

simples, complejos o compuestos y derivados. Los lípidos simples poseen ácidos
y alcoholes grasos en su estructura que pueden ser separados a través de la
reacción de hidrólisis. En este grupo se encuentran los glicéridos, (mono, di y
triglicéridos); ceras y esteres de esteroides. [ CITATION Har97 \l 9226 ]

Los lípidos complejos son sustancias que a través de la hidrólisis se transforman

en otros compuestos además de alcoholes y ácidos grasos. En este grupo están los
glicerofosfolípidos (fosfoglicéridos o fosfolípidos), gliceroglicolípidos
 (glicolípidos) y los esfingolípidos (esfingomielinas, glicoesfingolípidos y
gangliósidos).

Dentro de los lípidos derivados están incluidos los lípidos obtenidos por hidrólisis
de lípidos complejos y derivados y otros compuestos de estructura variada
(alcoholes grasos, ácidos grasos, vitaminas liposolubles, esteroides e
hidrocarburos(A.C. Barroeta, 1993)

Los compuestos lipídicos que se determinaron en la práctica fueron:

 FOSFOLÍPIDOS:
Son los componentes principales de las membranas biológicas. Su característica
común es que contienen un resto de ácido fosfórico esterificado con el grupo Sn-
C-3 del glicerol. Debido a la presencia del residuo fosfatidato, a pH neutro los
fosfolípidos tienen una carga negativa.
 COLESTEROL:
Es un alcohol que se clasifica como esteroide, grupo que se encuentra formado
por compuestos caracterizados por poseer una estructura molecular formada por
cuatro ciclos que se encuentran condensados.
El colesterol es una molécula de lípido que se encuentra en los tejidos y en el
plasma sanguíneo del cuerpo, tanto de seres vertebrados como invertebrados. Las
concentraciones más altas de esta molécula se encuentran en órganos como el
hígado, cerebro, glándulas adrenales, medula espinal, la piel, etc.

Separación de lípidos
Los lípidos generalmente se encuentran enlazados a proteínas y polisacáridos de los tejidos,
formando complejos con diferentes grados de estabilidad, por lo que para poder romper
estos complejos se requiere el empleo de condiciones de extracción capaces de
desnaturalizar o separar las proteínas o los carbohidratos asociados con ellos. El etanol, por
ejemplo, desnaturaliza proteínas y separa los complejos de lipoproteínas.
Para realizar la extracción total de los lípidos, es común el empleo de metanol al 95%,
etanol al 95% o de mezclas metanol: cloroformo (3:1) o etanol: éter (2:1). Es conveniente
adaptar las condiciones de extracción tanto al tipo de tejido empleado, así como a la
cantidad y naturaleza del lípido deseado.

La separación de los lípidos basada en sus diferencias de solubilidad, son

desafortunadamente casi siempre, parcialmente satisfactoria, debido a que la solubilidad de
los constituyentes de las mezclas de lípidos son bastantes diferentes a las de los lípidos
puros.
(Buitrago, 2017)
2. MATERIALES Y REACTIVOS:

2.1 MATERIALES
 40 mL de Aceite de oliva
 40 mL de aceite de hígado bacalao
 Cerebro
 Huevo
 1 Embudo
 1 Erlenmeyer de 100 mL con tapón de caucho
 1 probeta de 50 mL
 1 gradilla
 8 tubos de ensayo
 1 Beaker de 200 mL
 Pipeta de 1 mL
 Pipeta de 0.5 mL
 Espátula
 Mortero con pistilo
 Agitador
 Mechero
 Mallas de asbesto
 Aro con nuez
 Balanza
 Placa de vidrio de 20 cm x 20 cm o cápsula de porcelana
 Vidrio de reloj
 Papel de filtro
 Bisturí
 Gasa
 Yeso
 Plancha de calentamiento
 2.2 REACTIVOS
 10 mL de Cloroformo
 2 mL de Ácido acético glacial
 2 mL Anhídrido acético
 4 mL de Ácido sulfúrico
 5 mL de Acetona
 0,5 mL Hidróxido de Sodio 40%
 5 mL Alcohol etílico

3. PROCEDIMIENTO:

SOLUBILIDAD DE LIPIDOS
Para evaluar la solubilidad de los lípidos de manera cualitativa se llevó a cabo el siguiente
procedimiento:
Se rotularon 5 tubos de ensayo, cada tubo contenía un solvente orgánico, siendo estos
acetona, alcohol, cloroformo y éter, el último tubo contenía agua destilada. A cada tubo se
le agrego aceite de oliva y se observó si se disolvía o no, se repitió el procedimiento con
aceite de hígado de bacalao observando su solubilidad

AISLAMIENTO DE FOSFOLIPIDOS

Se vertió media yema de huevo en un beaker con 20 mL de alcohol caliente, se mezcló con
un agitador hasta que la mezcla se volvió homogénea, se dejó enfriar la mezcla y se
procedió a filtrarla mediante una gasa en primera instancia para después realizar un
segundo proceso de filtrado mediante un papel filtro.
Se rotularon dos tubos de ensayo, en el primer tubo se agregaron 5 mL de Acetona y se
agregaron gota a gota 0.5 mL de filtrado hasta que se observó turbidez, la aparición de ésta
indico la precipitación de un tipo de fosfolípidos: las lecitinas.
En el segundo tubo se agregaron 3 mL de filtrado y 1 mL de agua destilada, hasta que se
formó una emulsión estable.

AISLAMIENTO DE COLESTEROL

Se pesaron 3 g de cerebro y 10 g de yeso. Se mezclaron en un mortero macerándolos hasta

que se obtuvo una masa, la masa resultante fue depositada en una placa de vidrio y se
sometió a calentamiento colocando la placa sobre una plancha de calentamiento hasta que
la masa se secó completamente, se dejó enfriar la masa y se procedió a realizar un raspado
de la misma para triturarla en un mortero, finalizado el proceso de triturado se dispuso el
polvo en un Erlenmeyer, se agregaron 10 mL de cloroformo, se agito tapando la boca del
Erlenmeyer durante 5 minutos para posteriormente realizar un proceso de filtrado mediante
una gasa.
 Con el filtrado (extracto de colesterol) se realizaron tres pruebas:

 Reacción De Schiff: En un tubo de ensayo se agregaron 1 mL del extracto del

colesterol y 1 mL de ácido sulfúrico concentrado, se observó un color rojo que
evidenciaba la presencia de colesterol.

 Reacción De Salkovsky: En un tubo de ensayo se agregaron 1 mL de extracto de

colesterol y 1 mLde ácido sulfúrico concentrado, se mezcló y dejo en reposo hasta
que se separó en dos capas. La capa superior tomo una coloración roja y la inferior
de rojo amarillento con fluorescencia verde.

 Reacción De Liebermann–Burchard: En un tubo de ensayo se agregaron 2 mL

del extracto de colesterol, se añadieron 0.5 mL de anhídrido acético y 0.1 mL de
ácido sulfúrico. Se mezcló y se obtuvo inicialmente una coloración roja, luego
violeta, azul y por último verde.

4. RESULTADOS:
4.1 Prueba de solubilidad
Aceite de oliva
MUESTRA RESULTADO
Agua destilada Insoluble
Acetona Soluble
Alcohol Insoluble
Cloroformo Soluble
Éter Soluble

Tabla 1. Fuente: Autores

Aceite de hígado de bacalao
MUESTRA RESULTADO
Agua destilada Insoluble
Acetona Soluble
Alcohol Insoluble
Cloroformo Soluble
Éter Soluble
Tabla 2. Fuente: Autores
4.2 Aislamiento de fosfolípidos
Se observaron pequeñas partículas suspendidas en la solución final, lo cual indica la
presencia y precipitación de un tipo de fosfolípidos, las lecitinas, lo cual se puede observar
en la siguiente imagen.
 Imagen 3 Fuente: Autores
4.3 Aislamiento de colesterol
Reacción RESULTADO
Schiff Positivo
Salkvosky Positivo
Lieberman- Medianamente
Burchard positivo

5. ANALISIS DE RESULTADOS

5.1 Prueba de solubilidad:

Los resultados fueron los mismos en cuanto a solubilidad tanto en el aceite de oliva como
en el aceite de bacalao esto se debe a la estructura molecular de los lípidos presentes en
estas sustancias. Según (Jackson, 2003) cuando dos clases de líquidos se mezclan
perfectamente al ponerlos en contacto, es porque las moléculas que integran al otro son
susceptibles a ligarse con las del otro y viceversa. Esto tiene que ver específicamente con la
polaridad de las moléculas, el agua y el alcohol poseen estructuras polares y el aceite tanto
de oliva como de hígado de bacalao tienen estructuras apolares que impiden la mezcla con
estas dos sustancias.

5.2 Aislamiento de fosfolípidos

Se logró extraer lecitina, el cual es un tipo de lípido saponificable, la cual se observa como
partículas de color blanco suspendidas en una solución transparente. Esto se consiguió
gracias a la capacidad del alcohol de romper los enlaces covalentes de lípidos para su
posterior separación a través de un filtro y el uso de acetona para la identificación.

5.3 Aislamiento de colesterol

Según Moreno y Gómez (2004) en la Prueba de Salkvosky si se colocan soluciones
clorofórmicas de colesterol, sobre volúmenes iguales de ácido sulfúrico concentrado y se
mezclan suavemente, aparece un color característico. Los componentes del reactivo se
separan en dos capas, la de cloroformo de color rojo y la de ácido color verde. El color rojo
resulta de la formación de dobles enlaces adicionales o bien a partir de la condensación de 2
moléculas de colesterol para formar bioesteroides. Un resultado similar se obtiene en la
reacción de Schiff.
En cuanto a la reacción de Liebermann –Burchard el colesterol reacciona con anhídrido
acético y ácido sulfúrico concentrado. Se produce una pérdida de agua y una protonización
del colesterol. Se constituyen en medio anhidro polímeros de hidrocarburos no saturados de
intenso color verde azulado. (UNP, 2014)

6. CONCLUSIONES
• La solubilidad de los lípidos depende de si la estructura de la sustancia con la que se
quiere mezclar, es polar o apolar.
• Sustancias como el alcohol permiten romper los enlaces covalentes presentes en algunos
lípidos permitiendo extraer una sustancia de interés
• Los lípidos tienen varias funciones, una las más importantes es la de componente
principal de la membrana celular, y esto debido a sus diversas propiedades como el ser
hidrofóbico

7. BIBLIOGRAFÍA:

- Universidad de Huelva, 2010, http://www.uhu.es/08007/documentos%20de

%20texto/apuntes/2005/pdf/tema_03_lipidos.pdf
- Campbell & Reece, “Biología” 7ª. Edición, España, Ed. Panamericana., 2005.
- Luz Mery Buitrago, 2017, Extracción de Lípidos
- Jackson, 2003, ¿Por qué no se mezcla el aceite con el agua? Tomado de:
http://biblioteca.org.ar/LIBROS/6492.pdf
- UNP, 2014 ,Quimica biologica lípidos, Tomado de:
ttp://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-
content/uploads/2010/08/TP-LIPIDOS.pdf

- A.C. Barroeta. El huevo y sus componentes como alimentofuncional. Departament de

Ciència Animal i delsAliments. UniversitatAutònoma de Barcelona. 1993. Bellaterra,
Barcelona.

- Badui Dergal, S. (1993). Quimica de los alimentos. Alhambra Mexicana, Editorial.

- Harper, H. A., & Murray, R. K. (1997). Bioquímica de Harper.McGRAW-HILL INTERAMERICANA

EDITORES,.

- Nelson, D., & Cox, M. (2005). Lipids. In D. Nelson, & M. Cox, Lehninger Principles of biochemistry
(p. 343). New York: W. H. Freeman and Company.

- Universidad Autonoma de Mexico . (2018, Marzo 5). Bioquimica. Retrieved from Lipidos :
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jaislocr/BIOQUIMICA_I/LIPIDOS.pdf