UNIDAD I

ESTERILIZACIÓN
ESTERILIZACIÓN

 La Esterilización se define como la destrucción

completa o eliminación total de los
microorganismos patógenos y saprófitos que se
encuentran en el interior o en la superficie de
objetos y sustancias
ESTERILIZACIÓN

 La Esterilidad es la ausencia de crecimiento

microbiano en un medio adecuado.
ESTERILIZACIÓN
 La eliminación de los microorganismos puede
efectuarse mediante procesos físicos, mecánicos
o químicos.

 Los métodos físicos y mecánicos se incluyen en el

término
ESTERILIZACIÓN
 Los métodos químicos en el concepto de
DESINFECCIÓN.
 ESTERILIZACIÓN
 El método escogido para esterilizar un producto depende
fundamentalmente de su naturaleza y estabilidad frente al
calor u otros agentes esterilizantes.
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
CLASIFICACION DE LOS
METODOS DE ESTERILIZACION
 METODOS FISICOS

 METODOS QUIMICOS

 METODOS MECANICOS
METODOS FISICOS:

 Se basan en la aplicación de agentes físicos

naturales como por ejemplo; temperatura , calor ,
luz , radiación UV, radiación ionizante, etc.
 Tipos
 CALOR SECO
 CALOR HÚMEDO
 RADIACIONES
TIPOS METODOS FISICOS
 CALOR SECO

- Es producir un aumento de las reacciones de oxidación de los

microorganismos.
1-A LA LLAMA
*Es muy eficaz cuando el material a esterilizar es indestructible
*Se usa para esterilizar :
-Asa de platino que se calienta al rojo blanco espátulas, pinzas,
-- -Pipetas
-Bocas de tubo o matraces
*Se emplea la llama del mechero Bunsen por un tiempo de
exposición de 10 segundos ( también se denomina “ flameado “
)
*Este procedimiento se utiliza para destruir animales muertos de
enfermedades contagiosas, ropa, vendas y objetos altamente
contaminados.
CALOR SECO

2-POR AIRE CALIENTE

 El aire caliente confinado a temperatura de 160 a
180°C mantenido durante 1 hora, destruye con
seguridad todas las bacterias y sus esporas.
 Para su aplicación se recurre al uso del horno de aire
caliente, siendo el más usado el Horno Pasteur
 El Horno Pasteur se utiliza para esterilizar material de
vidrio ( tubos, placas Petri, matraces, etc. ) , de
porcelana, de acero y otros materiales inalterables
a esa temperatura.
 Nunca se emplea para esterilizar material plástico ni
medios de cultivo.
METODOS FISICOS
 CALOR HUMEDO

- El mecanismo de esterilización del calor húmedo es

producir la coagulación de las proteínas del
protoplasma bacteriano y de los ácidos nucleicos ,
destruyendo las membranas celulares. Se considera
un método más efectivo que el calor seco por su
mayor poder de penetración.
CALOR HUMEDO
1-POR AGUA EN EBULLICIÓN

 El agua en ebullición ( 100°C ) es suficiente para

matar formar vegetativas de bacterias, pero no
sus esporas.
 Se utiliza para esterilizar jeringas, agujas, pinzas,
etc. que se sumergen en una baño con agua a
ebullición por aproximadamente 10 a 20 minutos.
CALOR HUMEDO
2-POR VAPOR FLUENTE
 Se utiliza para la esterilización de instrumentos de
cirugía, equipos de lechería, equipos de la
industria de alimentos, etc.
 Se alcanza una temperatura de
aproximadamente 100°C si se mantiene sin
presión y a nivel del mar.
 Una exposición por 15 minutos es suficiente para
destruir la forma vegetativa de las bacterias, pero
no sus esporas.
 CALOR HUMEDO

• Por vapor de agua a presión

-Las esporas de algunas bacterias pueden resistir los 100°C
- La esterilidad completa sólo se alcanza con el uso de calor
húmedo a temperaturas más altas, en la forma de vapor
saturado bajo presión.
-En el laboratorio el vapor a presión se utiliza para esterilizar
medios de cultivo, artículos de plástico o polipropileno y
soluciones, para los cuales no se puede utilizar calor seco.
-Los equipos empleados para la esterilización se denominan
Autoclaves.
 METODOS FISICOS

 RADIACIONES
- La radiación es absorbida por el ADN de los microorganismos,
produciendo mutaciones letales o modificaciones químicas
del ADN de manera de interferir con su multiplicación.
- También inducen la formación de sustancias químicas como
oxhidrílos y átomos de hidrogeno, altamente reactivos con los
procesos celulares vitales.
- La radiación ultravioleta actúa directamente sobre el ADN,
por producción de peróxidos orgánicos en los líquidos que
contienen oxígeno y compuestos orgánicos.
RADIACIONES
1-LUZ SOLAR
 La luz solar tiene una propiedad bactericida muy
eficaz, especialmente entre longitudes de onda
de 2.100 a 3.000 Angstroms. Las bacterias
esporógenas son más resistentes que las
asporógenas. Lo mismo sucede con las bacterias
fluorescentes que convierten las ondas cortas (
germicidas ) en ondas largas de menor actividad

 No es de mucha utilidad su acción esterilizante en

el laboratorio
RADIACIONES
2-RADIACIÓN ULTRAVIOLETA
 Los rayos UV tienen escaso poder de penetración,
lo que hace que ejerzan su acción
principalmente sobre la superficie del material
expuesto a la irradiación, lo que explica su baja
utilidad en el laboratorio
 Generalmente se utilizan lámparas que emiten luz
con longitud de onda entre 2.650 y 2.750
Angstroms en la esterilización de aire, de
ambientes y superficies de trabajo y campo
quirúrgico
 Debe mantenerse un registro de las horas de
esterilización de cada tubo, ya que tienen una
vida útil limitada que debe ser controlada.
RADIACIONES
3-RADIACIONES IONIZANTES

 Se utilizan preferentemente rayos gama, que son

radiaciones de alta energía emitidas por un
isótopo radioactivo de Cobalto 60 o Cesio 137

 Dado su alto poder de penetración y la no

generación de calor, se emplean en la
esterilización de material termosensible como el
plástico ( tubos, placas, jeringas y bolsas
desechables ), hilos de sutura, etc.
MÉTODOS MECÁNICOS

 Las sustancias que no se pueden esterilizar por

métodos físicos ni químicos, se pueden esterilizar
por un método mecánico como es la filtración

 Se basa en procesos físico-químicos observados

entre los cuerpos microbianos o elementos en
suspensión y una sustancia semiporosa

 Se consigue separar y retener los

microorganismos de los líquidos que los contienen
FILTRACION
FILTRACION
1-Filtros Seitz
 Son discos de asbesto de diferentes diámetros y
diferente porosidad. Estos discos se montan en
un aparato metálico donde se coloca el líquido
a filtrar.
 Los discos se desechan después de un uso. Los
filtros y sus soportes se deben esterilizar en
autoclave.
FILTRACION
2-Filtros de vidrio poroso

 Se fabrican en base a vidrio finamente

pulverizado y comprimido.
FILTRACION
3- Filtros de membrana
 Son discos de ésteres de celulosa ( acetato o
triacetato ) con 12 porosidades distintas, según su
uso.
 Los discos de poros con 0.22 um de diámetro son
esterilizantes ( para las bacterias ).
MÉTODOS QUÍMICOS
 Los antisépticos y desinfectantes son sustancias
químicas ampliamente utilizadas.

 De acuerdo a su acción se pueden clasificar en:

 Bactericidas (destruyen las bacterias)
 Bacteriostáticos (inhiben el desarrollo
bacteriano, pero éste se reanuda cuando se
retira el agente, tiene una acción reversible)

 La actividad germicida de los desinfectantes

depende de: las condiciones de uso,
concentración, tiempo, temperatura, pH,
cantidad y calidad de la materia orgánica
presente, características de la superficie, tipo y
concentración de microorganismos, entre otros.
MÉTODOS QUÍMICOS
Los más frecuentemente usados en el laboratorio son
los siguientes:
 ALCOHOLES
 El alcohol etílico es no tóxico, incoloro e
inodoro.
 Es útil contra las formas vegetativas pero
ineficaz contra las esporas.
 Actúa por desnaturalización de las proteínas.
 La concentración óptima es al 70% ( 4
volúmenes de alcohol 95° + 1 volumen de agua
destilada ).
 El alcohol isopropílico es más bactericida que el
etanol y ha tendido a desplazar al primero ya
que esta libre de las restricciones legales de la
ley de alcoholes.
 Se usa como antiséptico y desinfectante.
MÉTODOS QUÍMICOS
 CLORO
-El Hipoclorito de Sodio comercial viene en una
concentración del 10%
-Para su uso en el laboratorio se debe diluir al 1 %
-Es un desinfectante de acción bactericida por
oxidación de los grupos sulfhidrilos libres
MÉTODOS QUÍMICOS
 YODO:
-Tiene una acción bactericida sobre formas
vegetativas y esporas sobre hongos y algunos virus
-Actúan directamente por proceso de yoduración y
oxidación, interfiriendo los procesos de óxido
reducción y fosforilación bacterianos
-Se utiliza como tintura ( solución alcohólica al 2% o
3% ) , Lugol ( solución acuosa al 5% ) o para
aumentar la acción bactericida del alcohol etílico (
alcohol yodado al 2% )
MÉTODOS QUÍMICOS
 YODOFOROS
-Es una asociación de yodo con polímeros ( polivinil pirrolidina )
generalmente al 10% que permite una liberación lenta de yodo (
1% )
-Tiene acción bactericida y se utiliza como antiséptico y
desinfectante.
 FENOL
-Al 0.2% tiene una acción bacteriostática
-Al 1% es letal para la mayoría de las bacterias
-Al 1.5% es fungicida
-Se usa en soluciones acuosas, es de bajo costo tiene un gran
poder de penetración aún en la piel intacta
MÉTODOS QUÍMICOS

 AGENTES ALQUILANTES
-Sustituyen átomos lábiles de hidrógeno con
radicales alquilo
-Un ejemplo es el Oxido de etileno que se usa para
esterilizar materiales plásticos
*Tiene una gran penetración, muy activo
contra esporas y virus.
*Es extremadamente tóxico y forma mezclas
explosivas con el aire.
MÉTODOS QUÍMICOS

 IONES DE METALES PESADOS

-Sales de mercurio ( Timerosal, Mercurio cromo ),
plata ( Nitrato de plata ), Zinc ( Sulfato de zinc ) y
cobre ( Sulfato de cobre ) en concentraciones altas
desnaturalizan las proteínas
-Actúan combinándose a los grupos sulfhidrilos.
-Se inactivan fácilmente en presencia de materia
orgánica y no actúan sobre las esporas
MÉTODOS QUÍMICOS
 DETERGENTES
-Son sustancias tensioactivas que disminuyen la
tensión superficial, modificando la barrera osmótica
y permeabilidad de la membrana celular, de
manera que la célula no puede mantener su
integridad.
-Pueden ser sustancias no iónicas ( sin efecto
antimicrobiana ), aniónicas ( bactericidas ) y
catiónicas ( amonios cuaternarios ).
MÉTODOS QUÍMICOS
 FORMALDEHIDO
-Puede utilizarse en solución ( Formalina ) o al estado
gaseoso como gas Formol para desinfectar
ambientes de trabajo ( aire ).
-Al mezclar Permanganato de potasio ( 1 parte ) con
Formalina ( 2 partes ), se libera gas formol que es
altamente bactericida y viricida.