CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.

Yacelis Díaz Causil, Luz Cenith Tapia Martínez, Rafael miranda

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA.
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA.
MONTERÍA-CORDOBA
2015

yamadica@hotmail.com

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RESUMEN

Para observar el fundamento y la naturaleza de las separaciones en

cromatografía plana, el análisis cualitativo se realizó empleando el método de
cromatografía de capa fina, el cual muestra que a medida que asciende la fase
móvil constituida por una mezcla de solvente por acción de capilaridad, arrastra
los componentes de una tinta de marcador y lapicero, a través de una capa fina.
En el cual se usaron patrones (acetona, etanol, cloroformo, acetato de etilo) para
encontrar valores estandarizados de Rf e identificar y calcular la concentración
de una muestra problema.

ABSTRACT
To observe the foundation and the nature of the separations in planar
chromatography, qualitative analysis was performed using the method of thin
layer chromatography, which shows that as it ascends the mobile phase
consisting of a mixture of solvent by capillary action, drag the components of a
marker ink and pencil, through a thin layer. Patterns (acetone, ethanol,
chloroform, ethyl acetate) were used in which Rf standardized to find and identify
and calculate the concentration of an assay sample values.

INTRODUCCIÓN método de columna de tswett, en

Cromatografía en capa fina
Aunque la cromatografía en papel ha
sido un valiosísimo factor de
progreso en todos los campos de la
biología y la química, el solo uso de
la celulosa como fase estacionaria le
impone gran limitación técnica, ya
que el papel es insatisfactorio para
todas las separaciones (por ejemplo
sustancias hidrófobas). Por lo tanto
los investigadores buscaron la forma
de emplear los adsorbentes, que tan
útiles habían probado ser en el
una forma laminar conveniente,
análoga a la del papel. Después de
varios intentos, se desarrolló y
adopto mundialmente la
cromatografía en capa fina. En ella
se opera como sigue:
El adsorbente se mezcla con un
aglutinante, a menudo yeso; esta
mezcla se suspende en agua y se
deposita sobre una placa de vidrio o
sobre una superficie plana rígida,
metálica o de un material plástico,
por medio de un dispositivo
embadurnador apropiado. Al
secarse, la suspensión que adherida  La placa fue depositada en un
a la placa de vidrio, bien Beacker el cual contenía el
directamente o por acción del sistema (disolvente).
aglutinante, como una capa
 Se tapó la solución con un vidrio
delegada y rugosa de adsorbente
en un espesor apropiado para la de reloj (figura 1).
separación. La separación depende
de las propiedades adsorbentes de
la capa. Los aspectos técnicos
(aplicación de la muestra, desarrollo
de la placa, localización,
determinaciones cuantitativas etc.,)
de la cromatografía en papel y en
capa fina son muy parecidos.
Además de los adsorbentes
tradicionales, hay técnicas basadas
en el empleo de capas de
cambiadores iónicos, geles de Figura 1.
filtración y sólidos recubiertos de
líquidos. Actualmente se usan estos  Se dejó en reposo hasta el
materiales y sus combinaciones, momento de la elución.
juntos con muchas variedades de
 Después de haber secado la
disolventes, en la separación de todo
tipo de compuestos. Lo anterior hace placa, se sometió a una solución
de la cromatografía en capa fina un de iodo (agente revelador).
método analítico versátil,  Después de la revelación
sensiblemente alto grado y rápido sacamos las placas y se
para separar en forma bien definida marcaron las manchas con lápiz.
compuestos estructuralmente muy
parecidos. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Cromatografía en capa fina;

METODOLOGIA
Para cromatografía en capa fina se
utilizó como disolvente; acetona,
etanol, cloroformo.
 Se midió con una pipeta de
10mL, de acetona, luego se midió
con una pipeta de 10 ml etanol,
10 ml acetato de etilo.
Posteriormente se adicionaron a
un Beacker de 100mL, esto
constituye a la fase Móvil.
 Sembramos las soluciones
patrones (tinta de lapicero) en
una placa con un tubo capilar.
OBSERVACION
La distancia que se tomó desde la
línea de toque con respecto al borde
inferior de la placa fue de 0,5 cm, Y
El intervalo que se estableció para el
recorrido durante la separación fue
de 5.5 cm
Para determinar el RF en las
pruebas se utilizó la siguiente
ecuación
Rf = Distancia recorrida por el Mancha de lapicero en acetato de
compuesto / Distancia recorrida por el etilo:
disolvente
RF: 1.0 mancha de referencia

Eluyente Tiempo de Color de la Distancia RF

separación mancha recorrida
(cm)
Negro 0.3 0.05
Acetona 6:22.68

Fucsia 0.7 0.0.12

Acetato de etilo 8:30.77
Morado 2 0.36

Etanol 21:10.11
Gris 5.5 1

Mancha de lapicero en etanol Mancha de lapicero en acetona:

RF: 0.90 mancha de referencia RF: 0.96 mancha de referencia

Color de la Distancia RF
Color de la Distancia RF mancha recorrida
mancha recorrida (cm)
(cm) Morado 0.18

Morado 2.0 0.36

Negro 0.27

Amarillo 0.34
Rosa 2.4 0.43

fucsia 0.41

Amarillo 4.2 0.76

Amarillo 0.90
débil
En esta práctica constatamos que la polaridad es un factor que demostró que la
tinta de lapicero es mucho más y que los de RF de las sustancias en distintos
eluyentes se observó tal comportamiento. Como se sabe entre más polar sea
el componente más demora en desplazarse o separarse en la placa ya que la
polaridad de la especie absorbente es mayor respecto al eluyente.

Nota: cabe aclarar que no se pudo finalizar con éxito la practica propuesta
debido a falta de equipo por lo tanto solo se trabajó con la muestra de tinta.

CUESTIONARIO

¿qué factores influyen en una diferencia se debe a la polaridad

separación por cromatografía en
capa fina ?
Polaridad
La diferencia de velocidad con la
cual los componentes recorren la
placa se debe por lo general a la
estructura de cada molécula así
como también a los distintos grupos
funcionales que esta tenga. Esta
puesto que las las moléculas más
polares poseen una mayor retención
al absorbente o fase estacionaria y
por ende migraran más lento
mientras que las que son menos
polares saldrán de manera rápida.
Elección del eluyente
La elección del eluyente es muy
relevante pues este es de gran
importancia, ya que si se utilizan
disolventes o eluyentes mas polares
estos arrastraran de manera más
rápida los distintos componentes de
la placa, generando asi una
separación en menos tiempos.
Ausencia de aire
La cromatografía de capa fina debe
llevarse a cabo en un lugar donde la
no existe una corriente de aire con el
fin de evitar problemas de
volatilización u obtener tiempos
muertos mayores que los tiempos de
retención y obtener problemas en los
factores de capacidad de las
distintas muestras
calentarla de 30 a 60 minutos a una
temperatura de (105-110)°c.
Mencionas las características a
tomar en cuenta del absorbente,
soluto y disolvente para una
separación por ccf.
Características del absorbente
 Tamaño de partícula:
volumen de poro, diámetro de
poro, área superficial
 Homogeneidad
 Pureza

Temperatura Características del disolvente

A menor temperatura la sustancia se  El disolvente no debe

absorbe mejor en la fase interaccionar con los
estacionaria. componentes de la placa con
el fin de evitar retardos o
Limpieza de las placas
dificultad en la identificación
Se lavan con cloroformo o metanol de los componentes.
y se dejan secar antes de aplicar.  Presente una buena
solubilidad con los
componentes de la muestra a
separar
¿Cuál es la finalidad de activar los
agentes absorbentes?  debe ser volátil es decir debe
poseer punto de ebullición
La actividad del absorbente influye bajos con el fin de secar las
en el grado de emigración de la placas de manera rápida
sustancia, por lo que activar tal  No debe contener trazas de
capacidad de absorción es de metales(catalizadores)
importancia ya que al generar las  Contener un alto grado de
separaciones del distinto pureza.
componente puede observase el  Polaridad se deben probar
distinto punto activos de la placa cada vez con disolventes
cromatografíca. la manera más menos polares.
eficaz de activar tales absorbente es
dejar secar la placa toda la noche o
 en las reacciones de separaciones e
identificación de los productos
Características del soluto formados.
 Debe encontrase en fase
liquida
 Debe poseer una polaridad REFERENCIAS BIBLIOFRAFICAS
semejante a la especie
[1].SKOOG, WEST, HOLLER,
absorbente
Fundamentos de química analítica,
 Debe interaccionar o
octava edición, editorial THOMSON,
experimentar una series de
2005. Pág. 1014.
fuerzas con las superficies del
absorbente(fuerzas de [2].http://www.uco.es/organiza/depar
vanderwall) tamentos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/11%20CROMATOGRAF%
C3%8DA%20DE%20CAPA%20FIN
CONCLUSIÓN A%20DE%20AAs.pdf

Al realizar esta práctica notamos la [3].xorge Domínguez .cromatografía

importancia que tiene la en papel y capa delgada, instituto
cromatografía de capa fina para tecnológico y de estudio superior de
separar pequeñas cantidades, Monterrey, pág. 11-43.
además es una de las más utilizadas