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Fundamentos
Periodo de preparacón
Los espínes nucleares se encuentran en un estado
pseudo-estacionario.
Evolución.
Se introduce un tiempo en la secuencia de pulsos que
variará en intervalos finitos.
Mezclado.
Modulación de los espines nucleares de acuerdo al
párametro a observar.
Adquisición.
Periodo normal de adquisición.
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Ejemplo de un experimento en
2D.
13C Considerese un
90 x sistema de dos núcleos
AX, como el CHCl3.
t1 t2
Evolución de la señal
como función del
1H segundo tiempo.
Ecuación que gobierna
la altura:
cos( Jt1)
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Factor fundamental en la RMN
en 2D.
Inclusión de un tiempo
variable
en la secuencia de pulsos.
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Representación de Experimentos
en 2D.
Diagrama de Diagrama en
contornos. 3 dimensiones.
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Representación de Experimentos
en 2D.
Representación en 3D.
No es práctica.
Consume memoria.
Tarda mucho en graficarse.
Existen los diagramas de contorno.
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Interpretación de Espectros en
2D
Diagrama de contornos
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Adquisición
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Como procesamos
Definir el número de puntos en ambas
dimensiones (zero filling).
Apodizar ésta dimensión de acuerdo al resultado
del espectro.
Transformar la dimensión de adquisición.
Ajustar la fase en la primera dimensión.
Apodizar la siguiente dimensión.
Transformar la dimensión indirecta.
Ajustar la fase con el espectro completamente
procesado.
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Limitaciones del procesamiento
Experimento en una dimensión:
Aproximadamente 8192 puntos, equivalen a 32,768
bytes o 32 Kbytes
Experimento en dos dimensiones:
1024 X 1024 X 4 = 4,1941,304 bytes
o 4.2 Mbytes.
Si se incrementa la resolución al doble, la
memoria necesario se incrementa cuatro veces:
16.8 Mbytes y el tiempo del procesamiento
aumenta también en un factor de 4.
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Experimentos en modo absoluto
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Experimentos en modo fase
sensible
Requiere ajustar la fase en ambas dimensiones.
Procesamiento complejo.
Necesario adquirir parte real e imaginaria en la
dimensión indirecta.
Apodizarlos en ambas dimensiones.
Ejemplos: Noesy, Tocsy y HSQC.
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Clasificación de los
Experimentos en 2D
Homonucleares.
COSY COrrelated SpectroscopY.
NOESY NOE SpectroscopY.
TOCSY Total Correlated SpectroscopY.
DQF-COSY Double Quantum Filetered COSY.
Heteronucleares.
Detección Directa.
HETCOR HETeronuclear CORrelated spectroscopy.
FLOCK.
Detección Indirecta.
HSQC Heteronuclear Simple Quantum Coherence.
HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence.
HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence.
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COSY
Correlación de
núlceos de la
misma
especie
protón-protón o
flúor-flúor.
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Forma de las señales en los experimentos COSY
fase sensible. a) y c) líneas de absorción; b) y d)
líneas de dispersión.
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TOCSY
Correlación de núlceos
de un mismo sistema
de espín.
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NOESY
Correlación
de núlceos a
través del
espacio.
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Detección heteronuclear
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Detección heteronuclear
Directa
Ventajas:
El núcleo menos sensible, por lo general
tiene la ventana espectral mayor. La
determinación directa permite una mayor
resolución en esta dimensión en menor
tiempo.
Los “probes” eran construidos para observar
carbono o al núcleo menos sensible.
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HETCOR
Correlación de
núlceos
heteronucleares
por su
desplazamiento
químico.
DETECCIÓN
DIRECTA.
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FLOCK
Correlación de
núlceos
heteronucleares
a dos y a tres
enlaces de
distancia.
DETECCIÓN
DIRECTA.
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Detección heteronuclear
Indirecta
Ventajas:
Se observa protón que es el núcleo más sensible.
La sensibilidad se incrementa al doble.
Pese a:
Menor digitalización en el núcleo X.
Eliminación de la señal de H-12C.
Cambio de “probes”.
Electrónica más fina.
Mejor experimento.
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HMQC
Correlación de
núlceos
heteronucleares
por su
desplazamiento
químico a un
enlace de
distancia.
DETECCIÓN
INDIRECTA.
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HSQC
Correlación
heteronuclear a
un enlace de
distancia.
DETECCIÓN
INDIRECTA.
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HMBC
Correlación
heteronuclear
a dos y tres
enlaces de
distancia.
DETECCIÓN
INDIRECTA.
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