UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA

DE MEXICO

FACULTAD DE QUÍMICA

LABORATORIO DE EQUILIBRIO Y CINETICA

PRACTICA 6

Conocimiento de técnicas analíticas

parte 1: “Fundamentos de
espectrofotometría”
EQUIPO: 4

Grupo

INTEGRANTES DEL EQUIPO:

Alejandra Gonzalez

Ruiz Morales Dlsia Samntha

PROFESOR:

2 de Abril del 2013

OBJETIVO GENERAL:

Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la

determinación de concentraciones en soluciones.

OBJETIVOS PARTICULARES:

Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las

variables involucradas en la ley de Lambert – Beer – Bourger.

Seleccionar la longitud de onda apropiada para las

mediciones de absorbancia.

Construir una curva patrón de soluciones de yodo (serie

tipo).

Introducción:
Una Curva patrón es un marco de referencia que se construye de cantidades
conocidas de una
sustancia (por ejemplo la albúmina sérica bovina) que se utiliza para
determinar
la cantidad de proteínas presente en una muestra incógnita.

La ley de Lambert-Beer-Bourger establece una relación lineal entre la

absorbancia y la concentración, donde:

A = -log T
A = log ( I / I0 ) = (ε x b) x c
ABSORBANCIA = (ε x b) x c

ε.- es la constante de proporcionalidad llamada coeficiente de absorción molar,

absortividad molar o coeficiente de extinción (M-1 cm-1). Es la característica de
una sustancia que nos dice cuánta luz absorbe a una longitud de onda
determinada.
b.- es el paso óptico, anchura de la celda que contiene la muestra (cm).
c.- es la concentración de la especie de la cual estamos midiendo la
absorbancia (M).

PROBLEMA:
A partir del espectro de absorción de una solución acuosa de yoduro de potasio
seleccionar la longitud de onda apropiada para determinar el coeficiente de
absortividad molar de soluciones acuosas de yoduro de potasio por medio de
una curva patrón.

Metodología:
1. Se requiere conocer el funcionamiento adecuado del espectrofotómetro
para posteriormente encenderlo y es necesario esperar 15 minutos para
que el aparto funcione adecuadamente.
2. Después se procede a calibrar el instrumento introduciendo una celda en
blanco en el espectrofotómetro hasta que la absorbancia se muestre en
ceros.
3. Seleccionar con la perilla (absorbancia) la longitud de onda más pequeña
(320nm) y realizar las mediciones necesarias hasta alcanzar una
longitud de onda de 700nm.
4. Entre cada medición de sustancia de yoduro de potasio deberá
introducirse otra celda utilizando como blanco agua destilada.

Calibración de espectofoómetro

Encender Oprimir tecla "MODE"

Seleccionar longitud
espectofotómetro y y seleccionar longitud
de onda
esperar 15 min. de onda

Introducir celda con

el blanco (agua) en la
Introducir celda con Retirar celda con el port- celda y oprimir
solución propuesta blanco
tecla para que se
ponga en ceros

Tomar lectura y
repetir procedimiento
desde figura 3 con
incrementos
regulares de longitud
de onda
Curva patrón

Prepara soluciones
Seleccionar longitud
según con los Introducir celda en
de onda (470nm en
voúmenes indicados blanco
nuestro caso)
en la tabla 2

Registrar lectura y Cuando esté en

repetir desde figura ceros, retirar celda
3 con solución con el blanco y Oprimir tecla 
distinta según la colocar celda con
tabla 2. solución propuesta.

Toxicología:
KI:
Veneno Clase CH: 4 - Materiales y productos no completamente inofensivos
Por contacto con piel: Puede causar irritaciones.
Sobre ojos: Puede causar irritaciones.
Por inhalación: Irritante de las vías respiratorias superiores. Como efecto
crónico, se produce depresión del sistema nervioso central
Por ingestión: Grandes dosis pueden producir una irritación gastrointestinal.
Como efecto crónico, se produce depresión del sistema nervioso central
No combustible.
Medios de extinción: uso de extintores de Polvo Químico Seco y Anhídrido
Carbónico.
Información Adicional
Reactivo para preparación de soluciones de yodo en yodometría, papel de
yodo-almidon. Reactivo en espectroscopia IR

Agua: sin riesgos a la salud

Resultados:

RESULTADOS

Tabla 1. Absorbancia de la solución de I2 a diferentes longitudes de onda.

Absorbanc
Evento λ (nm)
ia
1 380 1.322
2 390 0.895
3 400 0.576
 4 410 0.398
5 420 0.298
6 430 0.231
7 440 0.180
8 450 0.136
9 460 0.100
10 470 0.072
11 480 0.049
12 490 0.034
13 500 0.026

Figura 1. Gráfica Absorbancia vs. Λ (Espectro de la solución de yodo)

Espectro de absorción
1.400
1.200
1.000
0.800
Absorbancia 0.600
0.400
0.200
0.000
360 380 400 420 440 460 480 500

λ (nm)

 Algoritmo de cálculo.
Determinar la concentración del I2 en las mezclas.

C1 V 1=C 2 V 2

C 1V 1
C2 =
V2

( 0.002 M )( 3 mL )
C2 = =0.0012 M
5 mL

Tabla 2. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I 2.

λ=450 nm
I2 (0.002 M)/ Absorba
Mezcla H2O/(mL) I2 mol/L
(mL) ncia
 1 3 2 0.0012 0.816
2 2.5 2.5 0.0010 0.576
3 2 3 0.0008 0.463
4 1.5 3.5 0.0006 0.395
5 1 4 0.0004 0.258

Figura 2. Absorbancia vs. Concentración (Curva patrón)

CURVA PATRÓN
1

0.8
f(x) = 648.5x - 0.02
0.6 R² = 0.95
Absorbancia 0.4

0.2

0
0.0002 0.0004 0.0006 0.0008 0.0010 0.0012 0.0014

[I2]/ (mol/L)

A=εbc

y=mx+B
y = 648.5x - 0.0172
m= εb = 648.5 M-1

b= 1 cm

−1
m 648.5 M
ε= = =648 . 5 M −1 cm−1
b 1 cm

ANÁLISIS DE RESULTADOS

1. ¿A qué longitud de onda se localiza el máximo de absorbancia de la

solución de yodo 2x10-4 M?
A 380 nm se observa la máxima absorbancia para la solución de I 2.

2. ¿Qué longitud de onda empleaste para construir la curva patrón y por

qué?
450 nm, por que en la figura 1 podemos ver que la absorbancia tiene
valores que difieren muy poco, y por lo tanto decimos que es constante.

3. ¿Qué representa la pendiente de la gráfica de la curva patrón?

 m= εb
Es el coeficiente de absorción molar por el paso óptico, sus unidades son
M-1.

4. ¿Qué relación presenta la absorbancia con la concentración en la curva

patrón?
Es una relación directamente proporcional, es decir, a medida que
aumenta la concentración la absorbancia también aumenta.

Conclusiones
Se pudo calcular el valor del coeficiente de absorción del yodo en solución
−1
teniendo un valor de 648.5 M cm-1, siendo este el valor de la pendeinte
multiplicado por la longitud de la celda (1cm). Con el experimento podemos
concluir que una solución con mayor absorbancia tiene una mayor
concentración molar que una con menor absorbancia y esto lo podemos
deducir con la ayuda de un espectofotómetro y una celda con el blanco de
referencia.

Fue la primera vez que se utilizó un espectrofotómetro. Se aprendió que con

éste instrumento se pueden obtener varios datos aunque nosotros solo lo
utilizamos para resultados de Absorbancia. Esta longitud de onda obtenida en
el paso anterior fue utilizada para observar la relación entre la absorbancia y la
concentración de una disolución (en este caso la de KI) y fue aquí que se
comprobó mediante datos experimentales la definición de absorbancia, la cual
nos dice que es directamente proporcional a la concentración, es decir, se
obtendrá una línea recta.

BIBLIOGRAFÍA

• Atkins. “Química Física” 6a edición. Ediciones Omega, S. A. Barcelona

1999

• Levine, Ira. “Fisicoquímica”. Volumen I. 5ª edición. Mc Graw Hill.

España. 2004.