Plas%cidade

 do  Músculo  
Esquelé%co  –  Mecanismos  
Hipertoficos,  Nutrição  e  Saúde  

Cassiano  Merussi    Neiva,  PhD  

O  Músculo  como  Órgão  Contrác%l  
A  formação  da  célula  muscular  
  

“O SARCÔMERO  É  A  UNIDADE  CONTRÁTIL  BÁSICA  DO  MÚSCULO”.  

CONSTITUIÇÃO HISTOLÓGICA DA FIBRA MUSCULAR
 COMPONENTES  DO  MÚSCULO  

COMPONENTES ELÁSTICOS:

São aqueles que retornam a sua forma original após o relaxamento. Ex:

Miofilamentos e o tecido conjuntivo.

•  COMPONENTES PLÁSTICOS:

•  São aqueles que não retornam à forma original cessada a contração, se não
houver influência externa. Ex:

Mitocôndrias (30-35% volume muscular),

Retículo Sarcoplasmático

Sistema Tubular (5% do volume muscular)

“PELA  MANHÃ,  QUANDO  NOS  ESPREGUIÇAMOS,  HÁ  UMA  DEFORMAÇÃO  DOS  

COMPONENTES  PLÁSTICOS  DOS  MÚSCULOS”.  
FORMA  DOS  MÚSCULOS  
O  ARRANJO  DAS  FIBRAS  EM  UM  MÚSCULO  

FUSIFORME=  bíceps,  reto  abdominal,  sartório.  

UNIPENADOS  =  semimembranoso  

BIPENADOS  =  reto  femoral  

MULTIPENADOS  =  deltóide  
 IV  -­‐  AÇÃO  MUSCULAR  
 
TIPO  DE  AÇÃO    FUNÇÃO    FORÇA  EXTERNA    TRABALHO  
                       OPOSTA            EXTERNO                    
CONCÊNTRICA    Aceleração  Menor      PosiVvo  
EXCÊNTRICA    Desaceleração  Maior      NegaVvo  
ISOMÉTRICA    Fixação    Igual      Nulo  
 
                           RASC  &  BURKE,  1977  
 V  –  CLASSIFICAÇÃO  DOS  MÚSCULOS  

a)  AGONISTA  =    É  o  músculo  responsável  pela  ação  ação  muscular  desejada.    

Ex.  Flexão  do  do  cotovelo  =  bíceps  braquial,  Braquial  e  Braquiorradial    

b)  ANTAGONISTA  =  Tem  efeito  contrário  do  agonista,  freia  o  movimento  no  retorno  a  posição  inicial.  

Ex:  Flexão  do  tronco:    Agonista  =  mm  do  abdômem  Antagonista  =  mm  eretores  da  espinha  

c)  SINERGISTA  =    Músculos  que  exercem  a  mesma  função;  Auxiliam  na  produção  da  ação  desejada  de  um  músculo  
agonista.  

d)  ESTABILIZADOR,  FIXADOR  OU  SUSTENTADOR  =    Estabiliza  uma  arVculação  para  outro  músculo  (agonista)  
realizar  o  movimento.  Referem-­‐se  a  músculos  isometricamente  aVvos  para  manter  o  membro  movendo-­‐se,  
quando  o  músculo  de  referência  se  contrai.  

e)  NEUTRALIZADOR  =  Cria  um  torque  para  opor  uma  ação  indesejada  de  um  outro  músculo;  Impedem  que  outros  
músculos,  senão  os  desejados,  executem  a  ação.  
VI  –  MECÂNICA  DE  CONTRAÇÃO  

“A  ação  responsável  pela  contração  do  músculo  ocorre  dentro  do  sarcômero,  com  as  pontes  cruzadas  
dos  filamentos  de  miosina,  puxam,  soltam  e  reconectam-­‐se  aos  locais  específicos  no  filamento  de  
acVna”.  
 Formação  das  fibras  musculares  

•  Embriogênese  
•  Após  lesão  (reparação)  
•  Remodelação  pelo  exercício  
Formação  das  fibras  musculares  
A  formação  da  célula  Muscular-­‐  Miogénese  
A  formação  da  célula  Muscular-­‐  Miogénese  
A  FORMAÇÃO  DA  CÉLULA  MUSCULAR-­‐  MIOGÊNESE  
A  formação  da  célula  Muscular-­‐  Miogênese  
Plas%cidade  Muscular  Esquelé%ca  
As  Fibras  musculares  
Classificação  das  fibras  musculares  

•  Fisiológica  
•  Baseada  na  ATPase  da  Miosina  
•  Metabólica  
Fibras  musculares  
 Tipos  de  Fibras  

•  Foram  iden%ficadas  9  isoformas  da  MHC  

–  ß/I  (ß  –  cardíaca)  
–  α  (contracção  rápida  expressa  no  músculo  cardíaco)  
–  IIA  
–  IIB  
–  IIX  
–  IIM  (%po  II  mas%gatório)  
–  Extraocular  
–  Neonatal  
–  Embrionica  
 Isoformas das MHC

Tipo I Tipo IIA Tipo IID Tipo IIB

MHCIβ MHCIIa MHCIId

MHCIβ>MHCIIa MHCIβ<MHCIIa MHCIIa>MHCIId MHCIId>MHCIIa MHCIId>MHCIIb

(I/IIA ou IC) (IIA/I ou IIC) (IIAD) (IIDA) (IIDB)
Coloração da Miosina ATPase com pré-incubação a pH=4.3 (A) e 4.6 (B)
 pH 4.3 pH 4.6 pH 10.3

Tipo I

Tipo IIa

Tipo IIb
Art.  12  
Colorações  Histológicas  
Biologia  Molecular  (Western-­‐blot)  
In  situ  hibridiza%on  
Plas%cidade  Muscular  Esquelé%ca  
Regeneração  das  fibras  musculares  
Reparação  das  fibras  musculares  
 Myogenic  Satellite  Cells  
 
A   single,   quiescent   satellite   cell  
(arrowed)  on  the  surface  of  a  freshly  
isolated   myofibre   isolated   from   an  
adult   Myf5   nlacZ/+   mouse.   The  
prepara%on  was  immunostained  for  
b-­‐galactosidase   (red)   which   is  
expressed   by   satellite   cells,   but   not  
by   differen%ated   myonuclei.   DAPI  
staining  (blue)  was  used  to  reveal  all  
o f   t h e   n u c l e i ,   i n c l u d i n g   b -­‐
galactosidase-­‐nega%ve   myonuclei  
within  the  myofibre.  

The  satellite  cell:  a  Vssue-­‐specific  adult  stem  cell  

Mechanism  of  Muscle  Forma%on  
Myogenic  Satellite  Cells  
 
 Myogenic  Satellite  Cells  

Ac%vated   satellite   cells   proliferate   and   their   progeny   either   (i)   differen%ate   to   provide   new   myonuclei   for   growth   or  
repair   or   (ii)   withdraw   from   the   cell   cycle   and   return   to   a   state   of   quiescence.   What   determines   this   fate   choice  
remains  unknown,  but  the  balance  between  differen%a%on  and  self-­‐renewal  is  cri%cal  for  maintaining  an  effec%ve  
stem  cell  compartment.  
 Myogenic  Satellite  Cells  

How  is  satellite  cell  quiescence  maintained  and  ac%va%on  regulated?  

Under  normal  condi%ons,  the  satellite  cell  pool  is  quiescent,  but  becomes  ac%vated  in  response  to  signals  resul%ng  
from   damage.   Although   the   factors   and   pathways   involved   in   the   differen%a%on   of   satellite   cell   progeny   are   well-­‐
characterised,  liple  is  known  about  the  maintenance  and  regula%on  of  the  quiescent  state.  
 DIFERENCIAÇÃO  DAS  CÉLULAS  SATÉLITE  

hpp://www.mdausa.org/publica%ons/Quest/q75resup.html  
Plas%cidade  do  Músculo  Esquelé%co  
Modulação  das  fibras  musculares  
Art.  11  
 Modulação  das  fibras  musculares  

•  Tipo  I  -­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐  Tipo  II  

•  Tipo  II  -­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐-­‐  Tipo  I  

•  Factores   que   influênciam   a   “transformação  

das  fibras”.  
 Modulação  das  fibras  musculares  
•  Várias  Teorias  
–  Transformação  de  rápidas  em  lentas  (1988)  
–  Adaptação  das  fibras  (morte-­‐regeneração)  
•  Acção  das  células  satélite  
 
Outras  teorias…  
 “Transformação”  (induzida  por  esVmulação  Eléctrica)  
Tipo  II  -­‐-­‐-­‐-­‐-­‐  Tipo  I  

•  Aumento  de  tamanho  do  RS  

•  Aumento  da  %  e  volume  das  mitocôndrias  
•  Aumento  da  densidade  de  capilares  (ROG)  
•  Crescimento  da  banda  Z  em  largura  
•  Diminuição  da  Ac%vidade  da  ATPase  
•  Alteração  do  perfil  da  miosina  
•  Diminuição  da  massa  muscular  e  da  área  da  fibra  
•  Banda  Z  do  tamanho  das  fibras  lentas;  diminuição  da  
densidade  dos  tubulos  T    
Teoria  da  modificação  dos  neurónios  motores  
 SKELETAL  MUSCLE  FIBER  TYPE  CHANGE  INDUCED  BY  AEROBIC  EXERCISE.  
PROPOSAL  OF  A  PERIPHERAL  MARKER.    

Paula  Tavares,  Lúcia  Simões*,  Denis  Moreuo,  C.  A.  

Fontes  Ribeiro*  
 
Laboratory  of  Muscle  Physiology,  Faculty  of  Sport  Sciences  and  Physical  Educa%on;  
 *Department  of  Pharmacology  and  Experimental  Therapeu%cs,  Faculty  of  Medicine;  
 University  of  Coimbra.    
ü  Exercise   has   the   ability   to  
change  the  skeletal  muscle  fiber  
type.   In   sports   these   changes  
may   result   from   the   applied  
training,   which   brings   athle%c  
advantage.   However,   the   only  
technique   available   for   fiber  
type   monitoring   is   the   muscle  
biopsy.   In   addi%on   to   the   ethical  
issues,   we   also   believe   that   this  
invasive   method   has   a   low  
accuracy   in   certain   types   of  
muscle  evalua%on.  

52  
 Aims  
ü The  aim  of  this  work  is  to  propose  a  peripheral  marker  
that   can   show   the   skeletal   muscle   fiber   type  
dominance  in  a  subject.    
ü In   order   to   achieve   our   goal   we   looked   for   changes   in   a  
specific   protein   (nitric   oxide   synthase   –   NOS)   which   is  
expressed   in   skeletal   muscle   fibers   and   platelets.  
Platelets   have   the   advantage   of   expressing   both  
isoforms   of   NOS   protein:   the   inducible   (iNOS)   and   the  
cons%tu%ve  (cNOS)  isoforms.    
ü Since   we   wanted   to   observe   the   protein   behaviour   in  
the   whole   muscle,   our   experiments   were   made   in   an  
animal  model.  

5
3  
 Why  NOS  study  in  Skeletal  Muscle  

ü The   NO   is   known   as   a   modulator   of   skeletal  

muscle  func%on    

ü It   is   involved   in   force   development,   oxida%ve  

metabolism   and   in   the   regula%on   of   glucose  
uptake  into  the  muscle  cells  

ü The   NOS   expression   seems   to   be   related   to   a  

defined  fiber  type  –  Not  well  established  -­‐    

5
4  
Methodology:  Exercise  Protocol  

5
5  
 Rat  treadmill  protocol  
Aerobic  exercise  for  8  weeks  
  Male  Wistar  rats  

Week Max Time at Section Treadmill

Velocity Max Vel. Time slop
(cm.s-1) (min) (min) (degrees)

1 15 10 12 0
2 20 12 14 0
3 35 15 20 0
4 50 5 35 0
5 50 10 40 0
6 54 30 50 15
7 54 30 52 15
8 54 30 52 15
56  
 Skeletal  muscle  fiber  analysis  
Western  -­‐  blot  

ü The   histological   analysis   included   a  

hematoxylin-­‐eosine  staining  (to  verify  muscles  
integrity   and/or   exercise-­‐induced   changes)  
and   an   ATPase   staining   to   iden%fy   and  
measure  the  different  fiber  types.    

ü The   expression   of   both   NOS   isoforms,   in  

skeletal  muscle  and  platelets,  was  determined  
by  Western-­‐blot  with  NOS  specific  an%bodies.  

5
7  
 Animals  weight  
400

350

300
Body mass (g)

250

Control
Exercise
200

150

100
0 4 8
Time (weeks)

5
8  
 Training  efficiency  

Resistance  (Vme)   Velocity  

40 100

*
35 Control
* Exercise
80
30 Control
Exercise

Max Velocity (cm.s-1)

25
Time (minutes)

60

20

40
15

10
20
5

0 0

59  
 Histological  Analysis  
Control   A{er  training  

60  
 Histological  Analysis  
Control   A{er  Exercise  

61  
 Fiber  characteriza%on  by  ATP-­‐ase  staining  

Gastrocnemius   Soleus  

62  
 Fiber  Number  

Gastrocnemius  muscle   Soleus  muscle  

120 120
Type I
Type II
Type I
Type II *
100 100

80 80
% of fibre type

% of fibre type
60 60

40 40

20 20

*
0 0
Control Trained Control Trained

63  
iNOS  Expression  in  Skeletal  Muscle  and  Platelets  
100

Soleus
Gastrocnemius
80 Platelets *

*
Relative Density (%)

60

40

20

0
Control Exercise
6
4  
cNOS  Expression  in  Skeletal  Muscle  and  Platelets  

100

Soleus *
Gastrocnemius *
Platelets
80
Relative Density(%)

60

40

20

0
Control Exercise 6
5  
 Results  summary  

Gastrocnemius  Muscle   Soleus  Muscle  

•  >  type  II  fibers   •  >  type  I  fibers  
•  No  changes  in  fiber  type   •  Exercise  increased  type  I  
induced  by  exercise   fibers  
•  No  change  in  iNOS   •  Increase  of  iNOS  
expression   expression  
•  No  change  in  cNOS   •  >  Increase  of  cNOS  
expression   expression    

Platelets NOS expression is correlated with type I fibers

66  
 Conclusions  and  final  remarks  

•  Aerobic   exercise   induced   a   fiber   type  

adapta%on   according   to   the   muscle   fiber  
dominance.  
 
•  The   increase   in   iNOS   and   cNOS   is   correlated  
with  type  I  fibers  increase.  
 
•  Platelets   exhibit   a   similar   behaviour   to   soleus  
muscle  (type  I  fibers  dominance).  
 
•  The   NOS   expression   in   platelets   may   be   an  
important   tool   in   fiber   type   “transforma%on”  
into  skeletal  muscle,  induced  by  exercise.  

67  
 Conclusions  and  final  remarks  

ü The  results  showed  that  aerobic  exercise  changes  the  

muscle   fiber   type.   These   changes   were   more   evident  
in   the   soleus   muscle,   which   is   mainly   composed   by  
type  I  muscle  fibers.    

ü Moreover,   our   results   also   suggest   that   exercise  

induces   muscle   fiber   necrosis,   and   the   consequent  
forma%on  of  new  fibers  through  satellite  cells  division.  
This   s%mula%on   is   induced   by   exercise,   and   allows   the  
replacement  of  the  damaged  fibers.    

68
 
Obrigado
 Pela
 Atenção
 
 EQUIPE
•  Pessoal Técnico
–  Flavio Ismael da Silva Oliveira (Tima)
–  Aparecida Lima (cidinha)
–  Marta do Amaral (martinha do biotério)
•  Estudantes de Graduação – Iniciação
Científica
–  Camila Bissaro
–  Priscila Moulaib
–  Julio Mizuno
–  Patricia Helena dos santos
–  Andressa Monteio Omete
–  Chimenia Cross
–  Saulo de Paula e Silva
–  Bruno Pacheco
–  Marcos Vinícius de Almeida Campus
–  Marcelo Furukawa
–  Idelma Garcia (UEMG)
–  Luana Lopes (UEMG)
–  Edneia da Silva (UEMG)
•  Estudantes de Mestrado
–  Gleuber Henrique
–  Patgricia Alves de Almeida
–  Ana Paula Braganholo
–  Carlos Henrique Vieira Felício
–  Adriane D’Aprille Resende
–  Rafael Quintana
–  Gilson Caixeta
–  Alessandra Patricia da Silva
–  Randal Alberto
–  Matheus Caetano
–  Rodrigo Eufrásio
–  Mirela Gay
–  Luis Feranando Banduk Abraao
–  Roberto Saad
–  Claudia Moraes Maito
–  Claudio Najas
–  Carlos Nanini
–  Ana Paula Cardoso
–  Marcia Regina Pessoa De Andrade
–  Maria da Gloria Martins
–  Célia Regina Bernades Costa (UEMG)
–  Stela Carolline de Oliveira Mello (UEMG)
 EQUIPE

•  Estudantes de Doutorado

Gerusa Terra
Eduardo Chacur
Washington Rodrigues
Flavia Faria
David Oliveira

Tutorados de Pós Doutorado

Dra. Felícia Biguetti

Dr. Daniel dos Santos
 PARCEIROS E COLABORADORES NACIONAIS

•  Prof. Dr. Dalton Muller Pessoa Filho (FC – UNESP)

•  Prof. Dr. Carlos Eduardo Lopes Verardi (FC – UNESP)
•  Prof. Dr. Emmanuel Gomes Ciolac (INCOR – HC FMUSP)
•  Prof. Dr. Kazuo K Nagamine (FAMERP)
•  Profa. Dra. Dorotéia Rossi da Silva Souza (FAMERP)
•  Profa. Dra. Patrícia Curi (FAMERP)
•  Prof. Dr. Ismael Forte Freitas Jr. (FCT – UNESP)
•  Prof. Dr. Pedro Balikian Júnior (FCT – UNESP)
 PARCEIROS E COLABORADORES INTERNACIOANIS
CHARLES UNIVERSITY – PRAHA

Dean  of  FTVS  

Prof.  Ing.  Václav  BUNC,  CSc.  
 

Vice  Dean  of  FTVS  

Ass.  Prof.  Jan  HELLER,  MD  CSc  
Exercise Physiology Laboratory
 PARCEIROS  E  COLABORADORES  INTERNACIOANIS
UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE MADRID
DEPTO. CIENCIAS DEL ESFUERZO Y NUTRICIÓN

F.  Javier  Calderón  Montero  

P.  J.  Benito  Peinado  

Agus‡n  Meléndez  Ortega  

Marcela  González  Gross  

Guadalupe  Garrido  Pastor  

Cassiano  Merussi  Neiva  
AGRADECIMENTOS

Ins%tuto  Nacional  de  

Ciencias  de  la    
Ac%vidad  Fisica  y  
Del  Deporte  

CAPES
MEFE – Laboratório de Metabolismo e
Fisiologia do Esforço
 OBRIGADO

cmn@fc.unesp.br