FACULTAD DE INGENIERIA

ARQUITECTURA Y URBANISMO

TEMA:
 La cromatografía

INTEGRANTES:
 Cristian Anthony Guevara Tafur
 Kevin jahir Lumbre Liza
 Brayan Antony Toro Tarrillo
 Ranzel Céspedes
 Jhon Jorlin Huamán Delgado
 Patricia Velásquez Diaz
 Anghy Cubas Fernández
 Cayatopa Muller Marthos

ASIGNATURA:
 Química General

PROFESOR:


AÑO ACADEMICO:
 2018

SECCION-AULA:
 (c) 405

PIMENTEL, ABRIL DE 2018

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 ÍNDICE

Tabla de contenido

CARATULA 1
INDICE 2
INTRODUCCIÓN ............................................ Error! Bookmark not defined.
DEFINICIÓN 4
OBJETIVOS 5
EJEMPLOS 6
APLICACIONES 7
VENTAJAS Y DESVENTAJAS 8
INSTRUMENTAL 9
REFERENCIAS 10

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INTRODUCCIÓN

La cromatografía es una herramienta fundamental para separar las sustancias

químicas a través de cada una de sus fases que en este estudio se
determinaran. Pero para alcanzar lo antes mencionado es necesario pasar por
unas etapas y procesos de clasificación como lo son: la cromatografía plana,
volátil y de gases que se profundizaran en este trabajo de investigación. Las
fases para obtener una cromatografía correcta son móviles y no móviles cuyo
estado nos llevaran a una separación correcta. Cuyo estudio eficaz y con el
conocimiento de cada uno de los enunciados teóricos se podrán llegar a
determinar la cromatografía siguiendo cada uno de los procesos
fundamentales que se estudiarán a continuación.

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DEFINICIÓN.

La cromatografía es un tipo de técnica aplicada para la separación de varios

elementos que conjugan a una mezcla, esta división se fundamenta en las
características físicas y químicas que posea cada elementos, haciendo énfasis
en la capacidad de interacción de cada componente de la mezcla o de la solución
con una sustancia.

A grandes rasgos la cromatografía se logra por medio de la utilización de dos

fases: una fase móvil, el cual es una solución que está compuesta por distintos
elementos; y una fase estacionaria, esta se caracteriza por ser un material
solido que permanecerá sin cambios antes o después de la implementación de
la técnica, la mezcla a estudiar permanecerá con el compuesto que posea más
afinidad bien sea el que se encuentra en fase solida o en fase móvil, de esta

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forma se apreciara las características generales de cada compuesto estudiado.
(Publicado: octubre 19, 2015)

La cromatografía es un método de análisis químico basado en la separación por

métodos de absorción de los componentes de una mezcla fue descubierto en
1909, por el botánico M. Tswestt, que utilizo los principios de la absorción
selectiva para separar los pigmentos fuertemente coloreados de las hojas de las
plantas. El nombre se sigue empleando, aunque aplicado también a substancias
incoloras.
El método se fundamenta en poner en contacto dos fases o componentes
mutuamente inmiscibles, que no reaccionen químicamente, una de las f es móvil
y la otra estacionaria. La fase estacionaria, un líquido un sólido o un gel, está
contenida en una probeta de largo cuello (llamada colector), formando una
columna. La fase móvil consiste en una disolución de material que se desea
analizar en un disolvente apropiado que no se absorba a la fase estacionaria. A
medida que la fase móvil pasa a través de la fase estacionaria, se va produciendo
una absorción selectiva: aquellos componentes de la fase móvil que muestren
mayor afinidad de absorción con la fase estacionaria quedarán retenidos en las
capas superiores de la columna, y aquellos que muestren menor afinidad se
absorberán más tarde, más abajo en la columna. El resultado es una columna
graduada o cromatograma en donde cada especie química se ha absorbido en
una capa concreta. Estas capas reciben el nombre de platos.

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OBJETIVOS

 Separar distintos movimientos y componentes de una mezcla, en la que

permite identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.

 Conocer la cromatografía como técnica de separación de mezclas de

sustancias, sus características y los factores que en ella intervienen.

 Estudiar la incidencia del coeficiente de reparto entre la fase móvil y la

fase estacionaria.

 Analizar la influencia del solvente en la separación cromatografía.

 Observar las diferentes características de la placa en la cromatografía

 Conocer los fundamentos teórico - prácticos de la técnica.

 Analizar la función de cada elemento que conforma la cromatografía.

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EJEMPLOS DE UTILIZACION DE HPLC

 Detección y cuantificación de cafeína y teobromina que son alcaloides

muy importantes en el café, té y el cacao especialmente por su acción
estimulante. El Contenido de estos compuestos se utilizan para evaluar
su calidad. (detección UV)

 Determinación de azucares. La analítica carbohidratos no resulta fácil

pues presenta acumulación de grupos funcionales iguales, los hidroxilos,
y además posee gran número de asteroisómeros. Tras una dilución los
azucares se separan cromatograficamente por medio del HPLC en una
fase amínica (detección IR).

 Determinación cuantiaba de polisacáridos como el almidón, las dextrinas,

los dextranos, el glucógeno, la inulina, la celulosa, las Emicelulosas, las
pectinas, así como las sustancias mucilaginosas de algas marinas y las
gomas vegetales.

 Detección del ciclamato en jugos de frutas.

 Separación de esteres de ácidos grasosos por fase inversa y con

argentisacion de columnas (silicato de Al con Ag)

 Separación de triglicéridos por la longitud de la cadena y el grado de

insaturación por fase inversa y detector de dispersión luminosa, para el
estudio de aceites y grasas adulteradas.

 Determinación del contenido de vit A y sus precursores (Y β caroteno) en

margarina y aceite de hígado por fase inversa.

 Determinación del contenido vit D en leche de polvo y cereales por fase

normal.
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APLICACIONES

La HPLC permite muy buenas separaciones he identificaciones de sustancias o

grupos de sustancias en un tiempo corto, tanto cualitativa como
cuantitativamente. Como condición, es impresendible que nuestra sea soluble
en un disolvente, hacer la fase móvil un líquido.

Es especialmente adecuada para compuestos poco volátiles, termolábiles he

iónicos. Algunas aplicaciones incluyen sustancias tan diversas como
aminoácidos, proteínas, acido nucleicos, hidrocarburos, carbohidratos,
fármacos, terpenos, plaguicidas, antibióticos, esteroides, especies
organometalicos y una gran variedad de sustancias inorgánicas.

La cromatografía líquida de alta presión a pesar de ser una técnica relativamente nueva,
se cuenta que describe numerosas aplicaciones en la literatura química. En la mayoría
de los casos, éstas consisten en determinaciones de sustancias cuyo análisis por otra
técnica cromatográfica resulta muy difícil. Estos resultados comprenden:

 Compuestos iónicos, como aminoácidos, sales inorgánicas, ácidos orgánicos,

etc.
 Compuestos de alto peso molecular, como polímeros, hidrocarburos
polinucleares, productos naturales, etc.
 Compuestos termolábiles y no volátiles, como vitaminas, pesticidas, esteroides,
plastificantes, drogas y un producto muy grande de otros productos
farmacéuticos.

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En los problemas relacionados con la contaminación ambiental, la HPLC se utiliza para
la contaminación de algunos pesticidas (insecticidas, larvicidas, hervicidas, etc.).
También es posible la determinación de hidrocarburos aromáticos polinucleares que son
contaminantes atmosféricos muy importantes
En cromatografía líquida el análisis de compuestos vitamínicos es posible en corto
tiempo.
El bioquímico con frecuencia en un campo de investigación es el que plantea el
problema de analizar compuestos volátiles y de alto peso molécula. Por ejemplo, se han
efectuado determinaciones de constituyentes de ácidos nucleicos (nucleótidos,
nucleósidos) por cromatografía de intercambio iónico.
En el campo bioquímico la determinación de esteroides en cromatografía líquida ha
sido el de detección, ya que sólo el detector de luz ultravioleta es lo bastante sensible
para poner de manifiesto estos compuestos a bajas concentraciones, pero no todos los
esteroides absorben en la región ultravioleta. Esto ha dado lugar a la formación de
compuestos derivados de los esteroides que absorben en el ultravioleta a fin de hacer
posible el análisis.
El análisis de medicamentos es también una aplicación muy interesante, la
determinación de los componentes activos de una tableta analgésica. También el
análisis de barbitúricos, anticonceptivos, etc.
En caso de que el compuesto analizar sean de alto peso molecular, se usa
cromatografía de permeación o de exclusión. Es posible combinar dos o más técnicas
cromatográficas para efectuar

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Ventajas y desventajas de la cromatografía líquida de alta
presión

Ventajas Desventajas
-Velocidad de análisis -Instrumentación costosa
-Alta resolución -Difícil análisis cualitativo
-Resultados cuantitativos -No existe detector universal
-Buena sensibilidad y sensible
-Automatización -Elevado costo de operación
-Amplio espectro de aplicaciones -Experiencia indispensable

Con esta técnica es usual obtener separaciones en minutos e inclusive en

algunos casos en segundos. Por lo tanto se requieren columnas de alta eficacia
y sistemas de bombeo de alta presión, ya que separaciones rápidas requieren
flujos rápidos de fase móvil y esto a su ves requiere presiones elevadas.
Su alta resolución permite obtener y separar mezclas muy complejas; como
algunos fluidos biológicos como la orina humana. Las muestras naturales son
difíciles de manejar, pero con CII y programación de fase inmóvil la resolución
es notable.
Los métodos de HPLC proporcionan muy buena información de tipo
cualitativo, efectuando análisis con precisión del 1%.
Los detectores proporcionan buena sensibilidad y según el tipo de muestra
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suelen medir hasta los 10 ng (nanogramos), otros mas especializados
pueden detectar cantidades muy pequeñas.
Entre las ventajas de esta técnica, la más importante es la diversidad de sus
aplicaciones tantos a compuestos orgánicos como inorgánicos, etc.
Las únicas muestras no susceptibles de poderse analizar con facilidad son
las gaseosas.
Mediante los instrumentos cromatográficos, la identificación de cada señal de la
muestra a análisis se realiza comparando los tiempos de retención con valores

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previamente determinados y la cuantificación se obtiene mediante las áreas
integradas de las señales de acuerdo con el método analítico seleccionado.
Teniendo en cuenta sus limitaciones, el instrumental es costoso y representa
inversión para los laboratorios. Otra limitación es la necesidad de que el
personal que utiliza estos métodos tenga experiencia para poder obtener
provecho, lo cual requiere de 6 a 12 meses de experiencias para llegar a ser
operador eficiente.
La HPLC no es un buen método de identificación, en general la cromatografía
es básicamente una técnica de separación de gran resolución, pero que no nos
identifica el compuesto que da la señal obtenida en el cromatograma.

Instrumental

La HPLC utiliza un instrumental con ventajas significativas:

En este método se usan columnas de diámetros muy reducido, rellenas de materiales

especiales pulverulentos, cuyas partículas tienen un tamaño entre 30-40  m y con
frecuencia hasta de 5 ó 6  m , con una distribución de  2  m . Este tipo de columna
es muy eficaz, pero ofrece una gran resistencia al flujo de la fase móvil, o sea una gran
caída de presión. Por lo que se emplean sistemas de bombeo de alta presión que
hagan fluir la fase móvil a velocidad a través de la columna. La cantidad de fase
estacionaria dentro de la columna es pequeña, por lo tanto la muestra debe ser
pequeña en 1 y 10 mg.
Si la presión de entrada a la columna no es muy elevada, la muestra se introduce en
la cámara de inyección mediante una jeringa de alta presión, a presiones más
elevadas se utilizan las válvulas de inyección. La columna a pesar de su repetido uso,
presenta un escaso deterioro, auque en algunos casos es necesario regenerarla.

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 Un detector colocado a la salida de la columna, proporciona un registro continuo de
la composición del líquido que sale, lo que permite obtener un cromatograma y que se
utiliza para identificar y cuantificar los componentes de la muestra.

La gran variabilidad de los métodos cromatográficos se debe a las diferentes

condiciones que pueden utilizarse para separar los componentes de una sustancia.
Todas estas técnicas tienen en común la existencia de una fase estacionaria a través
de la cual fluye una fase móvil, así como la presencia de un mecanismo de inyección
de la muestra y un mecanismo de detección de los diferentes componentes separados

tipo fase estacionaria fase móvil

líquido- sólido inerte como

sólido gel de sílice o disolventes
alúmina

intercambio
soluciones
iónico resina cambiadora
acuosas

líquido- líquido adsorbido

líquido en un soporte líquido
sólido

película de líquido
gas-líquido
adsorbida sobre gas
un soporte sólido

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REFERENCIAS

 http://alereimondo.no-ip.org/Electrophoresis/3

 http://blog.utp.edu.co/docienciaedwin/files/2014/09

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